黑曲霉AF-98固体发酵产纤维素酶的产酶条件研究

通过单因子及正交试验,对黑曲霉AF-98固体发酵产纤维素酶的产酶条件进行了探讨。其优化的产酶条件为:甘蔗渣3g,麸皮2g,加含尿素为0.15%的Mandels营养液25mL(加水比1:5),调初始pH5.0,28℃发酵72h。在此优化条件下,纤维素酶活力可达7.56u/g干曲。     

毛头鬼伞富铬深层发酵条件的优化

在筛选出最佳发酵培养基的基础上,对毛头鬼伞富铬深层发酵培养条件进行了优化。以有机铬产量为主要指标,筛选出的最佳发酵培养条件为:CrCl3·6H2O的添加量为200mg/L,培养基初始为自然pH,接种量为8%~10%,装液量为80mL/250mL三角瓶,转速100r/min,26℃恒温培养5d,有机铬的产量达1597·88μg/100mL发酵液,铬富集率达9·09%。     

中国鬼伞类真菌的分类

鬼伞类真菌涉及蘑菇科的鬼伞属Coprinus以及小脆柄菇科的小鬼伞属Coprinellus、拟鬼伞属Coprinopsis、近地伞属Parasola、刺毛鬼伞属Tulosesus和心孢鬼伞属Narcissea。基于标本研究和文献记载,确认我国该类真菌57种：小鬼伞属9种,刺毛鬼伞属10种,心孢鬼伞属3种,拟鬼伞属25种,近地伞属8种,鬼伞属2种。本文记载1个新组合——速亡型心孢鬼伞Narcissea ephemeroides,中国新记录种11个：黄鳞小鬼伞Coprinellus ellisii、甜味小鬼伞Coprinellus saccharinus、锐突拟鬼伞Coprinopsis acuminata、非洲雪白拟鬼伞Coprinopsis afronivea、美丽拟鬼伞Coprinopsis bellula、钟孢拟鬼伞Coprinopsis mitraespora、麻醉拟鬼伞Coprinopsis narcotica、厚壁拟鬼伞Coprinopsis pachyderma、近雪白拟鬼伞Coprinopsis pseudonivea、施罗特近地伞Parasola schroeteri和刺毛近地伞Parasola setulosa。编制了中国鬼伞类真菌分种检索表,对新组合和中国新记录种进行形态学描述,并提供线条图。结合ITS和LSU序列片段,采用了最大似然法和贝叶斯分析法建立系统发育树,反映各类群之间的系统演化关系。     

毛头鬼伞富铬深层发酵条件的优化*

在筛选出最佳发酵培养基的基础上,对毛头鬼伞富铬深层发酵培养条件进行了优化。以有机铬产量为主要指标,筛选出的最佳发酵培养条件为:CrCl₃·6H₂O的添加量为200mg/L,培养基初始为自然pH,接种量为8%~10%,装液量为80mL/250mL三角瓶,转速100r/min,26℃恒温培养5d,有机铬的产量达1597.88μg/100mL发酵液,铬富集率达9.09%。     

毛头鬼伞CC-8810深层培养工艺的研究

为了提高发酵终了时毛头鬼伞(Coprinus comatus Fr.)CC-8810的菌丝浓度以获取高等真菌多糖,对CC-8810的深层培养工艺进行了研究。确定了最适发酵条件为:4%葡萄糖、3%黄豆饼粉、0.5%酵母浸出粉、3%麸皮、0.1%KH_2PO_4、0.05%MgSO_4·7H_2O,pH5.5—6,温度28℃,摇床转速140—160 r/min,摇瓶种子培养4天接种。当发酵液pH降至5.0—4.9、残糖量在1.2%以下,5—6天可终止发酵。发酵罐中放大试验表明,最终菌丝体浓度达4     

毛头鬼伞的生物活性作用

毛头鬼伞具有高蛋白、低脂肪等优良特性。毛头鬼伞中含有20种氨基酸,其中人体必需的8种氨基酸全部具备;毛头鬼伞还含有钾、钠、钙、镁、磷等元素和铁、铜、锰、锌、钼、钴等微量元素。目前,毛头鬼伞已被定为符合联合国粮农组织(FAO)和世界卫生组织(WHO)要求的,集天然、营养、保健三种功能为一体的16种珍稀食用菌之一。迄今为止,有关毛头鬼伞生物活性作用的研究还开展得很不充分,国内有少量相关报道,国外对此研究甚少。本文对毛头鬼伞的生物学作用研究现状进行综述,为临床治疗肿瘤、糖尿病、感染性疾病等提供参考。     

57株毛头鬼伞遗传多样性分析

运用SRAP、RAPD、ISSR3种分子标记技术对来源不同地区的57株毛头鬼伞Coprinus comatus进行了遗传多样性分析,通过3种分子标记进行聚类分析,当相异系数D为0.48时,可以把57株毛头鬼伞分为4类:Ⅰ类包括Co0001;Ⅱ类包括Co0003;Ⅲ类包括Co0005;Ⅳ类包括其余54个菌种。供试的57个菌株间的相异系数范围从0–0.72,具有一定的遗传多态性。但其中有许多菌株两者之间的相异系数为0,说明毛头鬼伞菌种存在着比较严重的同种异名现象。     

毛头鬼伞中一条新28S rRNA的发现及其同源性分析

本研究从担子菌毛头鬼伞(Coprinus comatus)菌丝中分离获得一条新的28S rRNA序列,序列长度为906bp(GenBank accession No.GU568178)。该序列是我们前期在从毛头鬼伞中克隆一种烟草花叶病毒(TMV)的抗性蛋白基因y3时意外获得的一条非目的条带。将此获得的序列通过NCBI的BLAST,以及与其同源序列进行Clustal w和MEGA聚类分析,证实该序列是28S rRNA,同时还发现毛头鬼伞的系统进化关系比较离散。此外,在这一新28S rRNA与TMV的抗性蛋白基因y3之间发现有两个同源区段有可能是PCR扩增y3基因时出现非目的条带的原因。在这两个同源区段中,其一区段与克隆y3基因时所用的PCR引物之一有较高的相似性,另一区段也是一般PCR引物的类似物。本研究中新28S rRNA序列的获得是PCR扩增中出现非目的条带的新例,该序列的发现及聚类分析的结果有助于真菌基因组学研究及真菌生物分子分类系统的建立。     

金针菇FV908菌株液体培养工艺

通过单因子试验统计分析,优化筛选了适于金针菇(Flammulina velatipes)FV908的适宜培养基和摇瓶培养条件,结果表明,其适宜的液体培养基组成为5.0%玉米粉,2.0%麸皮,0.1%KHOP4,0.05%MgSO4*7H2O,10μgVB1/100ml,50μgVB2/100ml;适宜的摇瓶培养条件为培养基的起始pH6.0～7.0,500ml摇瓶装量为150ml,接种量为10%,培养温度25℃,摇床转速为120r/min,菌丝干收率4.1g/100ml.     

矿质元素对毛头鬼伞菌丝体生长的影响

研究了4种矿质元素对栽培食用菌毛头鬼伞菌丝体生长的影响。4种矿质单元素添加试验结果表明,能使毛头鬼伞菌丝体旺盛生长的最佳浓度分别是CaCl20.1 mmol/L、MgSO48 mmol/L、KCl 1.22 mmol/L、NaH2PO413 mmol/L。4种元素协同作用试验结果表明,单元素浓度的最佳生长量与混合施用时的最佳生长量一致。以毛头鬼伞的主要栽培料之一的棉子壳估算,原料中的4种矿质元素浓度均偏低,必须补充矿质元素才能满足毛头鬼伞菌丝体的旺盛生长。     

环腺苷酸在灰盖鬼伞子实体发育中的效用研究

通过测试ｃＡＭＰ,子实体浸提液对灰盖鬼伞（Ｃｏｐｒｉｎｕｓ　ｃｉｎｅｒｅｕｓ）双核体菌丝的子实体诱导测试研究及通过用腺苷分别抑制ｃＡＭＰ在子实体发育各阶段的合成,对ｃＡＭＰ在灰盖克伞子实体发育中的影响进行了研究。结果表明：ｃＡＭＰ及子实体浸提液对灰盖鬼伞双核体菌丝的子实体形成并无诱导信号作用,阻止ｃＡＭＰ的合成延缓了子实体原基的发生,菌盖的形成,担孢子梗的形成,也延缓了质配和担孢子的发生,但菌柄的延长,子实体的成熟,担孢子的着色与释放则不受ｃＡＭＰ合成受阻的影响。     

醇沉条件和干燥方式对毛头鬼伞子实体多糖品质的影响

为改善毛头鬼伞子实体多糖的性状,以粗多糖得率、多糖含量、吸潮性及色素含量为指标,对乙醇沉淀制备多糖的参数进行了优化。结果表明:子实体经提取后浓缩至浓缩比为1∶2,即m(物料干质量/g)∶V(提取液/m L)=1∶2时以60%乙醇沉淀,再以60%乙醇洗涤1次,经冷冻干燥所得粗多糖产品多糖含量较高、色浅,且吸潮性降低,性状得到明显改善。     

西藏野生食用菌卵状鬼伞的人工驯化研究

在西藏拉萨进行了卵状鬼伞（Coprinus ovatus)俗称嘎夏蘑菇的生长温度、培养基酸碱度、培养料成分、栽培方法比较试验和中试。根据各项数据和当地资源情况,确定以青稞桔杆和牛粪为主要原料,pH值为6．5－7．5,每年5－11年间在当地用熟料分两个阶段栽培嘎夏蘑菇,并筛选了高产优质菌株。该野生品种人工驯化成功,可在西藏地区推广生产。     

纯黄白鬼伞菌丝体和子实体的培养研究

纯黄白鬼伞是四川省的一个新记录种。此菌有毒 ,是一种非常美丽的观赏菌类。其菌丝无锁状联合 ,能形成大量的菌核 ,这在伞菌目中是十分罕见的。报道了纯黄白鬼伞的子实体、菌丝体的形态特性、生理特点和栽培技术。这是一种中高温性蕈菌。适宜子实体生长发育的培养料为草粉、牛粪粉、麸皮和食用菌出菇后的废科 ,瓶栽、盆栽、袋栽、床栽均可 ,不需要覆土即可出菇 ,子实体绝对生物学效率为 5%～ 7 5%。     

灵芝液体发酵条件的优化研究

通过单因素和正交试验,优化灵芝5760深层培养的营养需求与环境条件对灵芝菌丝体生物量及次生代谢产物发酵液多糖的作用。结果表明,适宜灵芝液体菌种培养和液体发酵的培养基配方为麦麸粉5%,黄豆饼粉3%,KH2PO40.10%,MgSO40.09%;适宜的环境条件为初始pH5.5,装液量32%,生物量最大时为第8～9d;适宜接种的种龄为6d,接种量为10%;发酵周期6d,搅拌转速150r/min,消沫剂添加量可为0.20%。从硒对灵芝5760菌丝体生长及深层发酵生物量的影响,灵芝5760富硒培养适宜浓度为100μg/mL;从加硒时间对生物量的作用,在菌龄适宜时期加入即第1d。     

白灵菇液体发酵条件研究初报

通过对白灵菇液体摇瓶发酵的研究 ,确定了适宜白灵菇液体培养的条件为 :装液量为 15 0ml(5 0 0ml)、接种量为 10 %、pH值为 5 .0～ 6 .0、CMC浓度为 0 .4 % ;并通过发酵罐培养 ,研究其发酵过程中的pH值、溶氧值 (DO)的变化。     

蜡质芽孢杆菌AR156发酵培养基及发酵条件的优化

对前期筛选得到的在田间试验中防治根结线虫效果较好的蜡质芽孢杆菌(Bacillus cereus)AR156,通过单因素筛选及正交试验的方法进行了发酵培养基优化,得到的最佳配比为:麦芽糖0.25%,玉米粉0.5%,黄豆粉0.5%,胰蛋白胨0.5%,CaCl2·2H2O0.05%,MnSO4·H2O0.05%,K2HPO40.1%。同时对实验室摇瓶条件下液体发酵的主要影响因子温度、转速、初始pH值等进行实验探讨,确定了最佳培养条件:初始pH值7.0,装液量200mL/L,接种量5%,发酵温度28℃,转速200r/min,发酵时间48h。优化后芽孢产量为1.03×109CFU/mL,芽孢生成率在97%以上,明显高于初始发酵培养基发酵结果。     

纤维素酶液体深层发酵条件的研究

选用青霉菌（Pemicillumsp）用于纤维素酶液体深层发酵条件和生产工艺的研究。研究了纤维素酶二级和三级液体培养的条件。确定了种子液和发酵液的配方、产酶活力FPA167单位／毫升、β-葡聚糖酶活力20万单位／毫升。为纤维素酶三级液体深层发酵的工业生产提供了工艺路线和参数。     

幽门螺杆菌液体培养工艺的研究

Hp的液体培养尤其是大规模培养仍存在许多问题,通过单因子试验统计分析。优化筛选了适于幽门螺杆菌的液体培养基和摇瓶培养条件。结果表明,在适宜的摇瓶培养条件下,Hp能够在添加β-环糊精（β-Cyclodextrin,β-CD）的布氏肉汤中很好地生长,菌体收获量达到0.6g/mL。