多用途植物—葫芦巴

植物学特征葫芦巴(Trigonella focnum-graecum L.)又名芦巴子,苦豆、香豆、香草,属豆科(Leguminosae)葫芦巴属。原产于欧州南部及亚洲。我国东北、河南、河北、新     

从葫芦巴种子中提取薯蓣皂甙元方法的研究

为探明葫芦巴种子中药用活性成分薯蓣皂甙元提取的最佳方法,设置了不同的酸解液浓度及酸解时间以了解葫芦巴粉酸解的适宜条件;并在酸化工艺前将脱脂的葫芦巴粉进行自然发酵或接种曲霉发酵以提高薯蓣皂甙元的提取率。结果表明葫芦巴粉酸解液最佳浓度为15%的硫酸溶液,最适宜的酸解时间为6 h。在酸化工艺前增加发酵工艺,可以显著提高有效成份薯蓣皂甙元的提取率,接霉菌发酵比直接酸化提高62%,自然发酵比直接酸化提高48%。     

葫芦巴籽深加工工艺的研究

葫芦巴籽由种皮、胚乳和胚组成。采用物理方法将胚乳层中的多糖剥离纯化,残渣分别用溶剂提取葫芦巴油、用含有活性物水溶液提取薯芋皂甙,最后得到蛋白粉。同时对提取物进行分析检测,结果显示我们提出的深加工工艺具有产业化前景。     

两种影响因子对葫芦巴发根转化率的影响

葫芦巴（Trigonella foenum-graecum L.）是薯蓣皂素源植物之一,本文以来源于中国山西省的一年生草本植物葫芦巴为实验材料,研究发根农杆菌菌液浓度与超声波辅助处理两个因素对葫芦巴发根转化率的影响。结果显示,随着菌液浓度升高,发根数和发根转化率均逐渐升高,中浓度与低浓度菌液相比,发根数量和转化率分别升高了2.58和3.90倍;利用高浓度菌液侵染获得的发根数量和发根转化率最高,分别是低浓度菌液的7.33和4.32倍。在超声波处理实验中,超声（工作频率40 KHz,超声功率180 W）处理30 s与经未超声处理的对照组相比,发根数量及转化率略有下降;当超声处理60 s时,发根转化率明显上升,为对照组的2.48倍。葫芦巴发根体系的建立可为生产薯蓣皂素以及解析薯蓣皂素合成路径提供一个关键的技术平台。     

阶梯生物催化协同超声提取葫芦巴中薯蓣皂苷的工艺研究

研究响应面法优化阶梯生物催化协同超声提取葫芦巴中薯蓣皂苷的工艺。以葫芦巴中薯蓣皂苷提取量为考察指标,通过单因素试验及响应面试验设计,探讨依次加入纤维素酶和果胶酶复合酶制剂、糖化酶的使用量、酶解温度、pH值、酶解时间对薯蓣皂苷提取量的影响,优化阶梯生物催化协同超声提取葫芦巴中薯蓣皂苷的工艺条件。结果显示,薯蓣皂苷在最佳提取条件下的提取量为23.04 mg/g,比直接超声提取增加了33.88%,表明阶梯生物催化协同超声法是一种高效、简便的从葫芦巴中提取薯蓣皂苷的方法。     

葫芦巴环阿屯醇合酶基因的分离及其对薯蓣皂素合成的影响

以薯蓣皂素合成植物葫芦巴(Trigonella foenum-graecum L.)为材料,从中分离了环阿屯醇合酶基因Tf CAS,并对其序列特征、基因的表达及其对葫芦巴薯蓣皂素生物合成的影响进行了分析。结果显示,该基因全长2271 bp,共编码756个氨基酸;其氨基酸序列与蒺藜苜蓿(Medicago truncatula Gaertn.)、豌豆(Pisum sativum L.)及百脉根(Lotus japonicus L.)环阿屯醇合酶氨基酸序列的同源性分别为94%、91%和89%。利用酵母表达系统对Tf CAS蛋白的生物化学功能进行了验证,结果表明该蛋白能够催化环阿屯醇的合成。进一步利用葫芦巴发根遗传转化体系在葫芦巴中过量表达Tf CAS基因,发现该基因的过量表达大幅提高了Tf CAS的表达,且促进了葫芦巴中β-谷甾醇和薯蓣皂素的生物合成,但与对照相比差异不显著。研究结果表明Tf CAS基因参与了葫芦巴薯蓣皂素的生物合成,但其并非为该合成途径中的限速酶。     

用微孔板分光光度法测定薯蓣皂苷元的含量

为了对植物样品中薯蓣皂苷元的含量进行高通量快速测定,本研究采用高压酸解制备薯蓣皂苷元,以高氯酸为显色剂,用微孔板分光光度法测定样品中薯蓣皂苷元的含量。合适的分析条件为:反应温度为30℃、高氯酸用量为200μL、振荡时间2 min后静置10 min,在410 nm处测定光吸收值。该方法的线性范围为每孔薯蓣皂苷元2～10μg(R=0.9988),平均回收率为99.9%,精密度的RSD为1.65%。该方法操作简单、准确稳定,可实现大批量样品中薯蓣皂苷元的快速检测。     

黑灵芝中三萜及其皂苷类化合物总量的光度测定

采用正交试验法优化了香草醛高氯酸法测定黑灵芝三萜及其皂苷类化合物总量的显色条件,建立了测定黑灵芝中三萜及其皂苷类化合物总量的分光光度法,检测波长为550 nm,回归方程为:A=0.0093C-0.0032(μg),R2=0.9986(n=6),齐墩果酸对照品在0～128.4μg范围内呈良好线性关系,RSD为4.09%,对样品进行加标实验,平均回收率为103.9%.用于黑灵芝中三萜及其皂苷类成分的溶剂回流提取、超声提取的测定,结果证明这种方法是可靠的,可供灵芝质量控制.     

超声提取-分光光度法测定浙江雪胆中总皂苷含量

超声波提取浙江雪胆总皂苷,运用分光光度法对浙江雪胆中总皂苷的含量进行测定。正交设计优选比色条件,以齐墩果酸-28-O--αL-鼠李吡喃糖基(1→4)--βD-葡萄吡喃糖基(1→6)--βD-葡萄吡喃糖甙(cussonodide B)为标准品,利用香草醛-醋酸显色体系,在550 nm处检测。浓度在3.43~17.17μg/mL范围内呈良好的线性关系,其回归方程为A=0.03350*C(μg/mL)-0.06595,相关系数R=0.9995,浙江雪胆中总皂苷的含量为0.34%,加样回收率99.29%,RSD=0.99%。本方法简便、快速、准确、可靠。     

太白银莲花皂苷B对胶质瘤细胞生长抑制的研究

目的:太白银莲花皂苷B(Anemone taipaiensis saponin B)是第一次从太白银莲花中经过系统化学分析和分离鉴定的皂苷之一,所以它的生物学效应目前仍然不清楚。在本研究中,我们首次体外研究太白银莲花皂苷B对胶质瘤细胞系的生物学效应,观察它对胶质瘤细胞增殖的的抑制作用。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定太白银莲花皂苷B对胶质瘤细胞生长曲线的影响,Hoechst 33342细胞核染色后荧光显微镜观察,采用光学显微镜观察细胞的形态学变化。结果:MTT实验结果显示太白银莲花皂苷B对胶质瘤细胞U87MG和U251MG有强烈的生长抑制作用,且具有剂量依赖性,应用SPSS18.0统计软件得出太白银莲花皂苷B对U87MG细胞72 h的抑制浓度为IC25=5.2μmol/L,IC50=6.7μmol/L and IC75=8.7μmol/L,U251细胞的抑制浓度为IC25=6.2μmol/L,IC50=7.9μmol/L and IC75=10.5μmol/L。Hoechst 33342细胞核染色荧光显微镜观察以及光学显微镜下细胞形态观察显示出典型的凋亡细胞形态学特征,经过皂苷B处理后,细胞皱缩成圆球形,细胞核碎裂或者致密浓染,向核膜边缘聚集,染色质浓缩为半月状、车轮状或者马蹄状,凋亡小体出现。这些特征在24 h时更明显。结论:体外实验初步显示,太白银莲花皂苷B对U87MG和U251MG细胞具有明显的增殖抑制作用,并具有促凋亡作用。     

薄层层析-比色法测定降糖安胶囊中胡芦巴皂苷B的含量

建立薄层层析-比色法测定降糖安胶囊中胡芦巴皂苷B含量的方法。采用硅胶H薄层板,氯仿：甲醇：醋酸：水(25：12：2：2)为展开剂,在碘蒸气中定位,用高氯酸显色,325nm波长处检测,点样量在35ug～385ug范围内呈现良好的线性关系,其回归方程为A=285．6C-1．313,相关系数r=0．9991,平均回收率为96．23％,RSD=1．75％。本法准确,适用于该药的质量控制。     

Recent advances in the study of Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus replication and pathogenesis

It has now been over twenty years since a novel herpesviral genome was identified in Kaposi's sarcoma biopsies. Since then, the cumulative research effort by molecular biologists, virologists, clinicians, and epidemiologists alike has led to the extensive characterization of this tumor virus, Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus(KSHV; also known as human herpesvirus 8(HHV-8)), and its associated diseases. Here we review the current knowledge of KSHV biology and pathogenesis, with a particular emphasis on new and exciting advances in the field of epigenetics. We also discuss the development and practicality of various cell culture and animal model systems to study KSHV replication and pathogenesis.     

The structure, reproduction and taxonomy of Vidalia and Osmundaria (Rhodophyta, Rhodomelaceae)

Comprises species occurring mostly in subtidal habitats in tropical, subtropical and warm-temperate areas of the world. An analysis of the type species, V. spiralis (Sonder) Lamouroux ex J. Agardh, a species from Australia, establishes basic characters for distinguishing species in the genus. These characters are (1) branching patterns of thalli, (2) flat blades that may be spiralled on their axis, (3) width of the blade, (4) primary or secondary derivation of sterile and fertile branchlets and (5) position of sterile and fertile branchlets on the thalli. Application of the latter two characters provides an important basic method for separation of species into three major groups. Osmundaria , a genus known only in southern Australia, was studied in relation to Vidalia , and its separation from the Vidalia assemblage is not accepted. Species of Vidalia therefore are transferred to the older genus name, Osmundaria. Two new species, Osmundaria papenfussii and Osmundaria oliveae are described from Natal. Confusion in the usage of the epithet, Vidalia fimbriala Brown ex Turner has been clarified, and Vidalia gregaria Falkenberg, described as an epiphyte on Osmundaria pro/ifera Lamouroux, is revealed to be young branches of the host, Osmundaria prolifera.     

New or rare chromosome counts in Artemisia L. (Asteraceae, Anthemideae) and related genera from Kazakhstan

Fifteen chromosome counts of six Artemisia taxa and one species of each of the genera Brachanthemum, Hippolytia, Kaschgaria, Lepidolopsis and Turaniphytum are reported from Kazakhstan. Three of them are new reports, two are not consistent with previous counts and the remainder are confirmations of very scarce (one to four) earlier records. All the populations studied have the same basic chromosome number, x = 9, with ploidy levels ranging from 2x to 6x. Some correlations between ploidy level, morphological characters and distribution are noted.     

肝癌中HBV和HCV基因和抗原的分布及意义

采用原位分子杂交方法检测HCV RNA及HBV X基因;采用免疫组织化学方法研究HCV核心抗原,非结构区C33c抗原及HBxAg在肝细胞肝癌中的定位及分布.结果表明(1)HCV RNA、HBV X基因在肝细胞肝癌组织检出率分别为40%(55/136)和82%(112/136).HCV RNA定位于癌细胞的胞浆内,阳性细胞呈散在、灶状及弥漫分布三种形式;HBV X基因在肝癌细胞中的分布呈胞浆型、核型及核浆型,阳性细胞也呈上述三种分布形式;(2)HCV C33c抗原、核心抗原在肝细胞肝癌中的阳性率为81%(133/164)及86%(141/164).C33c抗原定位于癌细胞及肝细胞的胞浆内;核心抗原既定位于癌细胞核中,又可定位于胞浆中.C33c抗原阳性细胞以灶状分布为主;而核心抗原阳性细