大肠杆菌O157：H7毒素的研究进展

大肠杆菌Ｏ１５７：Ｈ７是肠出血性大肠杆菌（ＥＨＥＣ）的主要病原血清型,它可通过特殊的粘附因子粘附靶器官,产生类志贺毒素Ⅰ,Ⅱ（ＳＬＴ－Ⅰ,Ⅱ）和肠溶血清（ｈｌｙ）等发挥作用,可引起肠出血性腹泻、溶血性尿素综合征（ＨＵＳ）、血栓形成性血小板减少性紫癜（ＴＴＰ）等疾病。     

环境对产毒性大肠杆菌定居因子表达的调控

探讨几种一半因素对产毒性大肠杆菌（ＥＴＥＣ０两种主要害居因子ＣＦＡⅠ和ＣＦＡⅡ表达的影响。结果表明细菌的生长期以及细胞外渗透压、ＰＨ、气体组成的不同均可不同程度地影响ＣＦＡⅠ和ＣＦＡⅡ的表达,其中渗透压对两种定居因子的影响有所不同。研究结果提示ＥＴＥＣ的ＣＦＡⅠ和ＣＦＡⅡ的表达与环境适应有关。     

人源产肠毒素大肠杆菌疫苗的研发进展

腹泻是全球范围内引起5岁以下幼童死亡的第二大病因,而产肠毒素大肠杆菌(ETEC)是引起腹泻的最常见病原菌,其产生的细菌定植因子(CFs)和肠毒素是关键的毒力因子。CFs介导细菌黏附宿主小肠上皮细胞并完成定植,产生热敏肠毒素(LT)和热稳定肠毒素(ST)破坏宿主上皮细胞内的体液平衡,使体液和电介质过量分泌从而导致腹泻。预防ETEC腹泻的首选方法是使用能激发宿主产生抗黏附素免疫力和抗肠毒素免疫力的疫苗,阻断ETEC黏附和定植并中和肠毒素。目前一种名为Dukoral~的霍乱疫苗因能刺激机体产生抗热敏毒素免疫,已经被一些国家批准用于短期保护和预防旅行者腹泻。新型试验性ETEC候选疫苗正在研发中,旨在提供保护期长、反应谱广的抗ETEC感染免疫保护力。本文针对疫苗研发的关键问题和研究现状作一综述,并对未来的研究作出展望。     

猪流行性腹泻病毒分子生物学特征

猪流行性腹泻 (ｐｏｒｃｉｎｅｅｐｉｄｅｍｉｃｄｉａｒｒｈｅａ ,ＰＥＤ)是以水泻、呕吐和脱水为特征的一种急性病毒性腹泻。猪流行性腹泻现已成为世界范围内的猪病之一。猪流行性腹泻病毒 (Ｐｏｒｃｉｎｅｅｐｉｄｅｍｉｃｄｉａｒｒｈｅａｖｉｒｕｓ ,ＰＥＤＶ)是ＰＥＤ的致病因子 ,是导致类似猪传染性胃肠炎 (ｐｏｒｃｉｎｅｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｂｌｅｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｉｔｉｓ ,ＴＧＥ)临床症状的真正病原。迄今为止已发现ＰＥＤＶ与ＴＧＥＶ[1] 、ＰＥＤＶ与ＰＣＶ混合感染猪[2 ] 。已有用蛋黄ＩｇＹ预防ＰＥＤ效果的报道[3] …     

毒原性大肠杆菌

<正>前言 毒原性大肠杆菌(ETEC)为引起霍乱样水性腹泻的肠道病原菌,是发展中国家儿童腹泻的主要致病菌。去流行地区的旅行者也多为此而烦脑。在机场检疫所申报的腹泻症的20—30%为ETEC所致。由与海外航渡无关的集体食物中毒和散发性腹泻症中也能分离出本菌。其分离率由散发事例中水样腹泻的百分数推算。除人之外,也是牛、猪和羊等家畜的重要下痢病原菌。 然而,该ETEC用通常的生化学和生物学试验与常住大肠杆菌不能区别。只能通过毒素的产生性     

从痢疾样患者检出迅速发酵乳糖的侵袭性大肠杆菌

本文报告1984—1985年在怀化市对腹泻患者作病原监测中,从13例临床类似痢疾样腹泻患者粪便中检出能迅速发酵乳糖的侵袭性大肠杆菌,血清学分型为。O_288C:K₇₃,(B):H—。该菌经Sereny试验证实,毒力很强,能致豚鼠眼角结膜炎。该菌株的发现,提示我们在检测侵袭性大肠杆菌时应注重迅速发酵乳糖的菌株。     

一株能表达987P和F41两种粘附毒的猪源性大肠杆菌的研究

通过直接凝集试验,免疫荧光试验．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹,对一株猪源性大肠杆菌的粘附素进行了研究,结果表明,该菌株是一株同时表达９８７Ｐ和Ｆ４１两种粘附素抗原的猪源性大肠杆菌。     

大肠杆菌rpoH基因的克隆,表达及其产物的纯化

本文用ＰＣＲ方法获得大肠杆菌热休克蛋白转录因子σ３２的编码基因ｒｐｏＨ,并克隆在含有ｔａｃ启动子的表达载体ｐＵＨＥ中,经ＩＰＴＧ诱导,在大肠杆菌中表达了Ｃ端融合有６个寡聚组氨酸的σ３２。表达产物经金属螯合层析一步纯化,达到ＳＤＳ－ＰＡＧＥ银染一条带纯度,氨基酸组成分析及Ｎ端序列分析结果与文献报道一致。３５Ｓ细胞内参入实验表明：即使在较低的温度下,表达产物σ３２（Ｈｉｓ）６也能导致热休克蛋白如ＧｒｏＥｌ、ＤｎａＫ、Ｈｔｐ的大量合成．     

产肠毒素大肠杆菌肠毒素LT,ST融合的研究进展

产肠毒素大肠杆菌（ＥＴＥＣ）肠毒素ＬＴ与ＳＴ融合是ＥＴＥＣ多价疫苗候选株研制的一项重要工作,ＬＴ与ＳＴ的化学偶联研究已证明融合后可使小分子的ＳＴ获得免疫原性成为完全抗原,而基因融合对构建多价疫苗则是更重要的手段。本文着重介绍了近年来对ＬＴ与ＳＴ基因融合的研究,特别是一些影响基因融合效果因素的基础性研究。这些都为候选株的研制提供了研究手段和依据,并对广泛的基因融合研究具有理论意义。     

抗肠毒素原性大肠艾希氏菌腹泻口服菌苗的发展

<正>肠毒素原性大肠杆菌(ETEG)引起的腹泻是一个重要的卫生问题,特别是在发展中国家以及到这些地区的旅游者。医院和临床基础研究证明,发展中国家急性腹泻病例10～50%为ETEC所致,平均约20%为5岁以下儿童,较老的年龄组也稍高。而且,从工业化国家到发展中国家旅游的人当中的急性腹泻病例已经证明至少有1/3-1/2病原是ETEC。 ETEC引起的病情程度由无脱水现象的轻皮腹泻至霍乱样疾病不等。在发展中国家,5岁以内的儿童之中每年都有许多断续遭受1-3次ETEC引起的腹泻。虽然大多数ETEC感染症状相当轻微,但在发展中国家儿童中ETEC腹泻每年在10亿人次     

肠聚集性大肠杆菌质粒的研究

本文介绍了肠聚集大肠杆菌（ＥＡｇｇＥＣ）质粒的同源性与质粒ＤＮＡ探针,质粒对粘附等特性的介导以及质粒ＤＮＡ的基因结构等的研究现状。     

11个新的大肠杆菌O抗原群

本文报告在1963—1978年间从腹泻婴幼儿粪便及马属动物粪便中分离的11个与O1一O164标准株不同的新0抗原群,暂定为OX1一OX4,OX11一OX13。 其中OX15、OX2可能和婴幼儿腹泻有关。另外9个O抗原群菌株在检定的4,000余株不同来源的大肠杆菌中,约占1％左右。     

双歧杆菌及肠致病性大肠杆菌粘附的细胞膜通透性研究

采用乳酸脱氢酶释放法比较研究双歧杆菌１０２７株及肠致生大肠杆菌（ＥＰＥＣ）对体外肠上皮细胞Ｌｏｖｏ细胞株粘附的细胞膜通透性,探讨它们对肠上皮细胞的不同生物学交谈２。结果表明,双歧杆菌粘附Ｌｏｖｏ细胞后,宿主细胞释放ＬＤＨ远较ＥＰＥＣ粘附的效果低,提示双歧杆菌粘附对主细胞膜通生影响不大,而ＥＥＣ则可损伤宿主细胞膜而增加其通性。因此,双歧杆菌作为生理性细菌可与肠上皮细胞和谐共生,这与ＥＰＥＣ的粘附损伤     

金黄色葡萄球菌spa基因在大肠杆菌中受多启动子调控

利用重组ＤＮＡ技术在大肠杆菌中克隆并表达了金黄色葡萄球菌Ａ蛋白ＳｐＡ。在Ｅ。ｃｏｌｉ ＲＲ１中ＳｐＡ的表达量随培养温度的升高而增加,４２℃的表达量是２３℃的６倍,但该在热休克应答缺陷的Ｅ．ｃｏｌｉ ＣＡＧ５９７及ＣＡＧ６２７中却消失。当删除ｓｐａ基因上游的一段序列后,仍有ＳｐＡ表达,但其表达量的热休克效应在Ｅ．ｃｏｌｉＲＲ１中也消失。这表明被删除的序列后,仍有ＳｐＡ表达,但其表达量的热休克效应在Ｅ     

环境对产毒性大肠杆菌肠毒素表达的影响

通过体外试验,探讨一些与人体肠道微环境有关因素的变化对ＥＴＥＣ主要毒力因子肠毒素产生的影响。研究结果表明,细菌培养基的ｐＨ、渗透浓度、气体组成及温度的不同均可影响ＥＴＥＣ肠毒素的产生,而且ＬＴ与ＳＴ对有关环境因素的反应有所不同,一些与肠道环境有关环境条件的变化可影响ＥＴＥＣ肠毒素的表达,提示机体肠道微环境的变化可能与ＥＴＥＣ的致病有关。     

有机盐对基因启动子的σ因子选择性的影响

用σ￣（７０）或σ￣（３８）和核心酶（Ｅ）组成的大肠杆菌ＲＮＡ聚合酶全酶（Ｅσ）对四种启动子进行了体外转录。结果表明：ｌａｃＵＶ５,ｒｐｌＪ主要被Ｅσ￣（７０）识别,ｋａｔＥ主要被Ｅσ￣（３８）识别,ｆｉｃ在低盐浓度时被Ｅσ￣（７０）识别,在高浓度盐时被Ｅσ￣（３８）识别;Ｅσ￣（３８）转录特异性启动子所需酶量大于Ｅσ￣（７０）转录特异性启动子的酶量;在含有分别对σ￣（７０）或σ￣（３８）亲和性大的混和启动子的体外转录中,启动子之间不存在干扰和竞争,转录水平与启动子浓度成正相关。     

大肠杆菌O121侵袭性菌株的发现与研究

本文报告从一急性腹泻患儿的脓血便中分离的具有侵袭性的大肠杆菌。该菌株发酵葡萄糖,产酸产气,不发酵乳糖,β-半乳糖苷酶试验阳性,在醋酸钠培养基上生长,赖氨酸脱羧酶阴性,无动力,能引起豚鼠角膜结膜炎,侵入上皮细胞,具有140Md的质粒带,经血清学试验证实其血清型为O121:H-,是国内外首次报道的新的侵袭性大肠杆菌血清型。     

致病性大肠杆菌和蜡样芽胞杆菌的分离鉴定

【背景】猪只消化道疾病是养猪业上一大重要疾病,给养猪业带来一定的经济损失。大肠杆菌是引起猪腹泻的一种常见病原菌,可以引起不同日龄的猪腹泻,但主要以幼龄猪为主。【目的】旨在分离鉴定引起四川省眉山市一规模化养猪场病猪大规模腹泻的病原菌。【方法】采用常规细菌分离方法结合16S rRNA基因序列的分析方法从发病猪肝脏、胃以及污染的饲料分离鉴定细菌,并对分离株进行小鼠致病性试验、16S rRNA基因遗传进化树分析、毒力基因的检测、药物敏感试验。【结果】从腹泻猪肝脏中分离到一株致病性大肠杆菌,胃中分离到一株蜡样芽胞杆菌,并且追溯到传染源是该猪场饲料。通过检测这两株菌相应的毒力基因发现大肠杆菌不属于肠外致病性型,蜡样芽胞杆菌检测到了nheA、nheB、nheC、bceT、entFM 5种毒力基因;药敏试验表明常规的氨基糖苷类和头孢类抗生素对大肠杆菌抑菌效果较好,红霉素、氟苯尼考、头孢氨苄、头孢哌酮对蜡样芽胞杆菌抑菌效果较好,而蜡样芽胞杆菌对青霉素、阿莫西林等常规药物不敏感。【结论】饲料存在大肠杆菌和蜡样芽胞杆菌的混合污染。     

大肠杆菌脂多糖核心型及其检测方法

大肠杆菌脂多糖核心型根据其化学结构的不同分为５种，即Ｅ．ｃｏｌｉ Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４和Ｋ１２。用传统化学分析法检测大肠杆菌脂多糖核心型，极为复杂，此法只适用于实验室研究。为此，我们建立了Ｅ．ｃｏｌｉ脂多糖核心型血清学检测法，并对致病性大肠杆菌和正常人类粪便中分离的大肠杆菌脂多糖核心型进行了检测。     

人表皮生长因子(EGF)与单核-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)融合蛋白在大肠杆菌中的表达

应用基因工程技术,将ＥＧＦ、ＧＭ－ＣＳＦ基因克隆到ｐＧＥＭ－３Ｚｆ（＋）载体的ＥｃｏＲＩ,ＢａｍＨＩ位点上,再将重组融合基因亚克隆到表达载体ｐＢＶ２２０的ＥｃｏＲＩ,ＢａｍＨＩ位点上,在大肠杆菌ＤＨ５α中进行表达,ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ表明ＥＧＦ－ＧＭ－ＣＳＦ融合蛋白获得表达,并且具有ＥＧＦ、ＧＭ－ＣＳＦ的免疫学活性．这为进一步研究该融合蛋白的功能和肿瘤治疗提供一种新的基因产品．