外源一氧化氮供体硝普钠对红树植物桐花树气孔运动的调控效应

探索一种用材简单、操作方便、真实性强的观察红树植物桐花树叶片气孔的制片技术,并利用该技术研究不同浓度、不同处理时间的一氧化氮（NO）供体硝普钠（sodium nitroprusside,SNP）对桐花树气孔开闭的影响,探讨了NO调控的气孔运动与外源Ca^2＋的关系以及NO与H202在调节气孔运动过程中的关系。结果表明：在搅碎法、指甲油印迹法、牛皮胶印迹法三种观察气孔方法中,牛皮胶印迹法是观察气孔开度变化的最佳方法。NO能够诱导桐花树气孔快速关闭,且表现出明显的时间效应与浓度效应。NO导致的气孔关闭与Ca^2＋的参与有密切关系,NO与H,q存在明显的协同效应,可以促进气孔关闭。     

观察植物气孔结构的简易方法

观察植物叶表面气孔结构通常采用蚕豆或天竺葵的叶片 ,撕取其下表皮制成临时装片 ,在显微镜下观察。但这种方法对有些植物来说并不能取得很好的效果。另外一种常用的方法是印迹法 ,即在植物叶的表面涂抹牛皮胶液、火棉胶液或醋酸纤维素胶液 ,胶体风干后就凝成薄膜 ,此膜就印有表皮组织各细胞的界迹边痕及气孔结构。优点是胶膜干燥速度快 ,缺点是不适合于教学 ,因这 3种胶包装大 ,费用高 ,且在中小城市及农村不易购买。我们将这一方法作了改进 ,用指甲油、乒乓球制液代替牛皮胶等。此法既具备了印迹法的优点又能就地取材 ,价格低廉。具体做法…     

一种用透明胶带粘取叶片表皮观察气孔的方法

用普通塑料透明胶带粘取叶片下表皮观察植物的气孔,比印迹法和撕取下表皮观察气孔的方法具有操作简单、速度快、真实性强的优点,尤其适宜于试管苗等幼嫩材料的气孔变化动态和形态学指标的研究.此法可以防止因保卫细胞失水而导致气孔开张度的变化,能真实地观察植物不同阶段和时期气孔的变化动态.     

凹凸不平的植物叶片表皮制片方法的观察比较

以麦冬和土麦冬为实验材料,采用指甲油印迹法、次氯酸钠离析法、三氧化铬离析法和常规扫描电镜制样法对叶片表皮进行制样,光学显微镜和电子显微镜现察比较不同制样方法的效果.结果表明,指甲油印迹法对凹凸不平的叶片表皮观察效果较差;次氯酸钠离析法可以获得叶片表皮细胞形态的特征,但对凹凸明显的气孔器轮廓无法获得理想的结果;常规扫描电镜可观察叶片表皮的细微形态,但对角质层较厚的叶片,叶片表皮细胞轮廓很难区分;三氧化铬离析法获得的角质层,是一种理想的观察角质层较厚的叶片表皮微形态的方法,可以清晰显示叶片表皮微形态.     

组织透明法观察葡萄叶片生长过程中气孔与叶脉形态结构特征变化

本文以‘摩尔多瓦’葡萄叶片为试验材料,采用组织透明法观察了葡萄叶片生长过程中叶片表皮细胞、气孔和叶脉形态结构的变化,测定与气孔和叶脉功能相关的生理指标变化,比较了组织透明法、指甲油法和撕取法在观察葡萄叶片气孔上的实验效果。结果表明:组织透明法能够清晰观察到葡萄叶片生长过程中叶片表皮细胞、气孔和叶脉形态结构的变化。相对于指甲油法、撕取法,组织透明法操作简单,且能保持组织完整性,提升观察叶片细胞结构的实验效果。从叶片生长过程中气孔形态结构变化规律来看,葡萄嫩叶齿尖存在大量的大气孔,而叶片中部只观察到中央大气孔和正在发育的气孔保卫细胞母细胞。随着叶片生长,叶片气孔保卫细胞母细胞逐渐发育形成成熟气孔,叶片末端叶脉也是随叶片生长而生长,叶脉密度逐渐增加,提高了树体往叶片供水的效率。从与气孔和叶脉功能相关的各项生理指标变化来看,气孔导度随着气孔逐渐形成和成熟而逐渐升高,但叶片含水量和水势下降,有利于拉升水分和养分从根系往地上树体各器官运输,满足整个植株生长发育的需要。     

单子叶植物叶片气孔观察方法改良的研究

通过对传统的植物叶片气孔观察方法的改良,建立了一种观察单子叶植物气孔的有效方法。该方法不仅能够分清上下表皮、准确定位,而且简单易行,具有很高的可靠性和稳定性。实验中采用该法可以准确地获得植物叶片的气孔参数,为植物学及生态学的相关研究提供方法上的参考依据。     

单子叶植物叶片气孔观察方法改良的研究

通过对传统的植物叶片气孔观察方法的改良,建立了一种观察单子叶植物气孔的有效方法。该方法不仅能够分清上下表皮、准确定位,而且简单易行,具有很高的可靠性和稳定性。实验中采用该法可以准确地获得植物叶片的气孔参数,为植物学及生态学的相关研究提供方法上的参考依据。     

“观察叶片的下表皮”实验的扩展

“观察叶片的下表皮”是九年制义务教育教材初中《生物》第一册（上）实验七：“观察叶片的结构”实验的一部分。我在学生用显微镜观察了叶片下表皮、启发他们讨论了气孔的结构后,在补充介绍气孔开闭的原理基础上,指导学生做了气孔关闭的实验。其方法步骤是：从盖玻片的一侧满人3O％蔗糖溶液,在盖被片的另一侧用吸水纸吸引,这样重复几次,盖玻片下面的叶片下表皮就浸入到浓蔗糖溶液中了。这时候,因保卫细胞逐渐失水,故用显微镜观察,就可以看到气孔逐渐变小直至关闭。通过这一步实验,对于学生理解教材中“气孔的开闭,由保卫细胞控…     

介绍一种模印气孔的方法

介绍一种模印气孔的方法如果需要观察气孔或计算单位叶面积的气孔数目，而植物叶子的表皮又不容易撕取，这时就可采用以下方法：先用纱布把叶子擦干净，后用新毛笔酸取火棉胶少许，均匀地涂于叶的表皮。预先准备好一载玻片，上面滴上一滴清水。火棉胶干后便自动脱离叶子，...     

兰州市主要绿化植物气孔性状特征

气孔是植物叶片与外界环境进行水汽交换的门户, 利用气孔特征反映植物对环境变化的响应与适应有助于了解干旱区绿化植物的适应策略。于2019年7月通过气孔印迹法对兰州市40种主要绿化植物气孔性状进行观察与测定。采用标准化主轴估计和系统独立比较分析建立气孔性状间的相关关系; 通过计算Blomgerg’sK值以检验系统发育信号; 利用聚类分析和主成分分析对气孔性状特征进行功能群划分。结果表明: (1)在所研究的植物中, 气孔性状特征在个体间差异显著, 植物生长型(乔木、小乔木、灌木和草本)会显著影响气孔长度、宽度、开度和密度, 叶习性(落叶和常绿)仅对气孔开度有显著影响; (2)气孔长度与宽度、气孔开度与面积间均为显著的异速生长关系, 气孔密度与面积和开度间为负异速生长关系; (3)系统发育会对气孔性状的相关关系产生显著影响, 虽然气孔性状的系统发育保守性不强(K < 1), 但气孔开度和气孔开张比具有显著的系统发育信号; 4)依据气孔性状特征可以将绿化植物划分为: 低密度-大面积、高密度-小面积和中等密度-适中面积共3种功能群。结合系统发育和异速生长理论能更好地解释气孔性状变异及适应策略。     

"钾离子对气孔开度的影响"实验的改进

张志良和瞿伟菁（2002）著《植物生理实验指导》中“钾离子对气孔开度的影响”实验,用于观察钾离子在气孔开张中的作用,可加深学生对“气孔运动——钾离子积累学说”的理解。这一实验容易操作,效果比较明显,但也存在一些不足,主要表现在：     

一种改良型的免疫印迹法

目的：蛋白免疫印迹法是现代生物实验过程中运用最为广泛的实验技术,常规的免疫印迹法在应用过程中存在很多弊端,如浪费抗体等,因此非常有必要探索出一种新型的免疫印迹法,本文旨在探索一种能够节约抗体的免疫印迹实验方法。方法：将8只SD大鼠随机分常规组和改进组两组,每组4只,活取视网膜组织,进行组织匀浆、蛋白定量,取不同蛋白总量的匀浆变性液进行β-Tubulin的免疫印迹实验,比较两组之间β-Tubulin的蛋白表达量之间是否存在显著性差异,实验需重复三次。结果：不同总量蛋白的免疫印迹显示两组之间β-Tubulin的表达量并无显著性差异。但是,相比常规方法,改进法使用的抗体量更少,条带更容易检测得到。结论：改进后的免疫印迹法能有效的节约抗体,操作方便,实用性强。     

一种改良型的免疫印迹法

目的:蛋白免疫印迹法是现代生物实验过程中运用最为广泛的实验技术,常规的免疫印迹法在应用过程中存在很多弊端,如浪费抗体等,因此非常有必要探索出一种新型的免疫印迹法,本文旨在探索一种能够节约抗体的免疫印迹实验方法。方法:将8只SD大鼠随机分常规组和改进组两组,每组4只,活取视网膜组织,进行组织匀浆、蛋白定量,取不同蛋白总量的匀浆变性液进行β-Tubulin的免疫印迹实验,比较两组之间β-Tubulin的蛋白表达量之间是否存在显著性差异,实验需重复三次。结果:不同总量蛋白的免疫印迹显示两组之间β-Tubulin的表达量并无显著性差异。但是,相比常规方法,改进法使用的抗体量更少,条带更容易检测得到。结论:改进后的免疫印迹法能有效的节约抗体,操作方便,实用性强。     

阿月浑子与中国黄连木叶形态结构特征研究

采用指甲油印迹法、石蜡切片观察、电镜观察的方法对阿月浑子与中国黄连木叶片解剖结构、气孔分布与形态特征进行观测分析。结果显示,阿月浑子叶上表皮气孔分布密度为132～P168个/cm2,且气孔多出现在主脉附近,下表皮气孔数从基部到叶尖逐渐减少,密度为112～P357个/cm2;中国黄连木上表皮气孔极少,仅出现在主脉处,下表皮气孔分布状况与阿月浑子相近,密度为164～P377个/cm2;两树种均分布有巨型气孔和气孔群、表皮细胞角质层发达、少量非腺毛主要分布在叶缘,其次在主脉处,叶面有蜡质分布,而且阿月浑子的蜡质明显比中国黄连木多;阿月浑子有4～P5层栅栏组织细胞,几乎没有海绵组织,中国黄连木叶肉具1层栅栏组织,多层海绵组织;阿月浑子主叶脉6～P8个维管束环状排列,在韧皮部中有6～P8个内分泌道,中国黄连木主叶脉3个维管束扇形排列,在韧皮部中有1～P3个内分泌道。对2树种叶形态结构特征与抗旱性的关系进行分析结果表明,阿月浑子具有旱生植物叶片结构特点,其水分利用方式属耗水型,对我国北方气候表现出一定的适应性。     

优化胶粘贴法建立裸鼠胃癌原位种植模型

目的通过对两种胶粘贴法建立的胃癌原位种植动物模型的比较研究,为探讨胃癌的发病机制和实验治疗提供理想的动物模型。方法用OB胶和FS生物蛋白胶法分别建立胃癌原位种植动物模型,观察和比较两种方法所建立的模型肿瘤生长状况、转移情况和形态学变化。结果FS生物蛋白胶组未出现肿瘤大片坏死,腹水形成率为85.7%,幽门梗阻发生率为57.1%;而OB胶组肿瘤大片坏死发生率为100%,腹水形成率为14.3%,未出现幽门梗阻。FS生物蛋白胶组有三例出现了肺和脑转移。结论FS生物蛋白胶法建立的裸鼠胃癌原位种植动物模型能更好的模拟人胃癌患者的临床过程,为研究人胃癌转移机制和实验治疗提供理想的动物模型。     

琼脂糖印迹法: 观察植物表皮细胞的一种简易方法

本文介绍一种获得完整植物器官表皮细胞大小和数目的简易方法: 琼脂糖印迹法。该方法根据琼脂糖凝固时具有可塑性的原理, 通过对材料固定、包埋、切胶和显微观察等步骤从而获得材料表皮细胞的轮廓。该方法具有简单迅速、图像清晰、观测结果准确且应用广泛等优点, 可使统计植物发育过程中细胞数目及大小的工作变得简单易行。     

琼脂糖印迹法：观察植物表皮细胞的一种简易方法

本文介绍一种获得完整植物器官表皮细胞大小和数目的简易方法：琼脂糖印迹法。该方法根据琼脂糖凝固时具有可塑性的原理,通过对材料固定、包埋、切胶和显微观察等步骤从而获得材料表皮细胞的轮廓。该方法具有简单迅速、图像清晰、观测结果准确且应用广泛等优点,可使统计植物发育过程中细胞数目及大小的工作变得简单易行。     

分子生物学技术讲座（三）——真核细胞mRNA的提取,纯化,分析及cDNA文库的构建

哺乳动物平均每个细胞含有10-5μgRNA,理论上认为每克细胞可分离出5～10mgRNA。其中rRNA为80％～85％,tRNA占10％～16％,而mRNA仅占1％～5％,并且rnRNA分子种类繁多,分子量大小不均一,但绝大多数mRNA分子均在3’端存在ZO～250个多聚腺着酸P0ly（A）,所以利用其此特性,用寡聚（dT）亲和层析柱,很容易从总的RNA中纯化mR－NA分子。mRNA的分析通常采用甲醛变性胶电泳法和其它变性胶电泳法进行,或进一步用Northern印迹法和放射性探针杂交反应进行分析。N0rthern印迹法是指将RNA变性电泳后,转移至固相支持物上的过程。…     

盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离血清蛋白实验的几点改进

对盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离血清蛋白实验提出了几点改进,以满足本科生实验的要求。实验主要比较和分析了两种封胶方法（原胶布封胶与改进的琼脂糖封胶）和两种染色方法（原考马斯亮蓝染色法与改进的考马斯亮蓝染色法）对凝胶分离血清蛋白实验的影响。结果显示,改进的盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳法是一种灵敏、快速、简便、安全、分辨率高的实验方法。结论：改进的盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离血清蛋白实验非常适合本科生实验。     

用于本科教学的间接免疫荧光法观察玉簪保卫细胞微管骨架

细胞骨架的观察是生命科学类专业本科生一个很重要的实验。目前,在细胞生物学实验教学中常用考马斯亮蓝染色法观察植物细胞骨架,但存在诸多不足。该研究选取洋葱、大叶黄杨、玉簪三种植物材料,利用间接免疫荧光法对微管进行观察比较。结果表明,三种植物中,玉簪作为一种常见的绿化观赏花卉植物,取材方便、撕片容易,其气孔保卫细胞微管骨架免疫荧光图像显示清晰,在低温处理后也可观察到微管解聚现象。因此,玉簪可作为本科生实验教学中利用免疫荧光法观察微管骨架的一种易得、观察效果好的实验材料。