免疫印迹法检测牛海绵状脑病和羊瘙痒病

用大肠杆菌表达的牛朊病毒正常成熟蛋白 (BoPrPC)免疫新西兰白兔 ,获得了与朊病毒蛋白 (PrP)反应的抗体T1。根据致病型朊病毒 (PrP^SC)能抵抗蛋白酶消化的特性 ,用蛋白酶K消化脑组织提取物 ,以抗体T1进行免疫印迹反应 ,结果表明从接种羊瘙痒病朊病毒 2 6 3K的金黄地鼠脑组织提取物内检测到抗蛋白酶K消化的致病型PrPSC ,而正常金黄地鼠脑组织中没有抗蛋白酶消化的蛋白。以我国正常牛羊为材料 ,制备其脑组织提取物 ,用上述方法和抗体T1进行检测 ,结果没有发现抗蛋白酶K的任何蛋白存在 ,说明没有牛海绵状脑病和羊瘙痒病存在。用 1A8抗体也获得了同样的结果。这些结果表明可以用自制的抗血清检疫牛海绵状脑病和羊瘙痒病 ,防止其传入我国     

患羊痒疫及牛海绵状脑病感染羊脑中PrPd的不同免疫反应性

本实验应用多种抗PrP^d的单克隆抗体来研究分别感染羊痒疫或牛海绵状脑病(BSE)病原的羊脑中PrP^d蛋白沉积类型的差异。     

传染性海绵状脑病的诊断进展和存在的问题

传染性海绵状脑病是由朊病毒引起的人和多种哺乳动物以神经退行性变化为主要特征的一种慢性致死性传染病。引起这类疾病的病原因子是一种编码宿主蛋白的PrPC转变为异常的PrPSC沉积在大脑,导致传染性海绵状脑病的发生。本文从临床症状识别、组织病理学诊断、致病性朊蛋白检测、生物学测定以及毒株鉴定等几个方面作一回顾和总结,为揭示朊病毒疾病致病机理和诊断研究提供借鉴。     

自身免疫病的分子遗传学

自身免疫病影响着大约5％的人口,这类疾病的特点是患者体内存在大量的针对自身抗原的自身抗体,这些自身抗体通过不同的模式引起机体的损伤。一些严重的自身免疫病如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮可引起致残和死亡。总之,自身免疫病的发病率和致残率呈现出一个全球性的健康问题。由于这种健康问题巨大的严重性和广泛性,引起了全球性的自身免疫病病因学的研究热潮。多代家系和大量双胞胎的流行病学调查清晰的显示自身免疫病遗传因素的存在。至少有20多个疾病易感基因被认为与环境因素相互作用引起自身免疫病的发生和发展。基于这种遗传研究热潮,多个遗传研究小组采用基因组范围的易感基因的扫描工作,在人类和鼠模型中鉴定出多个遗传易感位点,这些位点可能含有自身免疫病的致病基因。本文就人类和鼠模型中定位的易感基因位点作一综述。     

日美联手利用基因工程培育对疯牛病具有免疫力的牛

Ag Biotech Reporter 2004年21卷7期7页报道：日本排名第二的啤酒公司——Kirin啤酒公司,将与美国的一家公司合作,利用基因工程培育出不携带可引起脑消耗病的普里昂蛋白或传染性蛋白,对疯牛病（牛海绵状脑病,BSE）具有免疫力的牛,进而利用这些牛来生产用于治疗丙型肝炎、肺炎和风湿病的药物。     

日本麒麟啤酒和美国Hematech公司等成功培育出朊蛋白基因敲除牛

日本麒麟啤酒、美国国家动物疾病研究所和美国Hematech公司等多家单位的研究小组，成功地培育出朊蛋白基因敲除牛，并已证实，朊蛋白基因敲除牛出生后经过20个月仍然健康。敲除导致牛海绵状脑病的朊蛋白基因的牛培育成功，可望增加多克隆抗体等蛋白质药品和用于蛋白质药品生产中的牛胎仔血清的安全性。     

达尔文进化论的挑战分子进化的中性学说

十九世纪中叶以前,弥漫在科学界上空的是特创论和物种不变论,首先打破这种阴霾空气的伟人当推英国生物学家达尔文。达尔文经过历时四载的航海考察,于1859年发表了创世之作《物种起源》,其核心进化论对科学界影响之巨大,被革命导师恩格斯将其与能量守恒定律和细胞学说一起,赞誉为十九世纪自然科学的三大发现。进化论在经过一个多世纪的风风雨雨之后,除被不断的补充、修正与完善之外,也遇到过强有力的挑战。本文在对达尔文主义和新达尔文主义作简短回顾的基础上,着重介绍非达尔文主义——分子进化的中性学说的形成、特点及对学术界的影响。     

羊瘙痒病263K毒株感染的仓鼠脑中PrP分子形式多样性的动态测定

正常细胞的朊蛋白(PrPC)代谢和构象的改变是引发动物和人类可传播性海绵状脑病(transmissiblespongiformencephalopathies,TSEs)的根本原因。将羊瘙痒病(scrapie)仓鼠适应株263K颅内接种仓鼠,在接种后的第20、40、50、60、70、80天,通过Westernblot动态检测仓鼠脑中PrP存在的形式。结果在接种后第40天,在感染动物脑组织中即检测到PrPSc分子,比临床症状出现的时间早(平均潜伏期为66 7±1 1天),且无糖基化形式的PrP分子所占百分比在接种后期增加明显。除了标准分子量大小(30kD～35kD)的PrP分子外,在感染动物脑中存在着高分子量和低分子量形式的PrP分子。定量分析显示,随着接种潜伏期的延长,不同形式PrP分子的含量也在增加,其中低分子量形式的PrP分子与临床症状的出现密切相关。蛋白去糖基化实验表明,在感染动物脑组织中,除了标准分子量大小的PrP蛋白外,还存在一条更小分子量的PrP条带,而正常动物脑组织仅存在标准大小的PrP分子。低分子量形式的PrP分子具有与全长PrP分子相类似的糖基化模式。结果提示,scrapie263K感染的仓鼠脑组织中存在不同分子形式的PrPSc,其PrP分子的代谢可能不同于正常动物。     

Th细胞亚群自身免疫病的发病及治疗中作用的实验研究进展

本文回顾了Ｔｈ细胞亚群的功能、交互调节、影响其分化的因素以及Ｔｈ细胞亚群自身免疫病发病中的可能作用;概括了通过调节Ｔｈ细胞亚群来治疗自身免疫病的方法,包括：上调ＣＤ１ｄ治疗、给予相关细胞因子治疗、佐剂治疗、用抗细胞因了、细胞因了受体、ＣＤ４０配体和Ｂ７分子的单克隆抗体治疗以及ＣＴＬＡ和ＣＴＬＡＩｇ治疗。这些方法为自身免疫病的治疗提供了新的思路。     

Bovine spongiform encephalopathy: epidemiological factors associated with the emergence of an important new animal pathogen in Great Britain

Bovine spongiform encephalopathy was first recognized in Great Britain in 1986. Subsequent studies indicated that this novel disease was a transmissible spongiform encephalpathy associated with a scrapie-like agent. Epidemiological studies indicated that the vehicle of infection for cattle was ruminant derived protein included in commercial feedstuffs and that the probable origin of infection was sheep scrapie. Further exposure from this food-borne source was prevented in July 1988 by legislation. The effects of this intervention became apparent first in 1991 and have been substantiated subsequently. In the period before the legislative action it is apparent that the epidemic was enhanced by the recycling of subclinically infected cattle tissues, exposure commencing from this source in 1984/85 following the initial effective exposure in 1981/82. The effects of this recycling, together with a discussion of the resultant working hypotheses, are described.     

Pharmacogenomic profiling of an oxidative stress-mediated spongiform encephalopathy

The majority of cellular superoxide is generated in the mitochondria as a by-product of normal oxidative metabolism. In the mitochondria, superoxide is detoxified by manganese superoxide dismutase (SOD2). Mice lacking SOD2 demonstrate a multifaceted neonatal lethal phenotype, including a spongiform encephalopathy that is preventable through antioxidant treatment. The molecular events behind the observed pathology in the cortex of these mice are unknown. We hypothesized that the lack of SOD2 would result in significant changes in cortical gene expression and that therapeutically beneficial antioxidant treatment would normalize the expression of some genes, providing insight into the mechanism by which mitochondrial oxidative stress results in neurodegeneration. We report the identification of gene expression profiles associated with this paradigm, which characterize the degree of response to the pharmacologic intervention. We have identified specific pathways targeted by endogenous oxidative stress, including glutathione metabolism, iron metabolism, and cell-survival pathways centering on the kinase AKT. The normalization of expression of some of these pathways by antioxidant treatment suggests approaches to treating disease in which endogenous oxidative stress plays a role.