玉米幼胚高效再生系统的建立

建立了玉米幼胚高效再生系统.经研究发现,苏玉1号、农大3138、农大108的幼胚培养在含有2,4-D(2 5 mg/L)的IM培养基上后,大多数幼胚能愈伤化并增大,形成基部相连、上部分开的微芽结构;微芽结构在转移到BM培养基上后,形成小植株;进一步转移到RM培养基上,它们长根并形成完整植株.玉米幼胚高效再生植株与下列因素有关玉米基因型、幼胚大小、幼胚长芽至分化时间、6-BA、IBA、Gelrite.不同品种玉米再生能力有显著差异,幼胚大小在1～2mm之间再生能力强,幼胚长芽至分化时间4～6 d最好.激素6-BA浓度在0.5～0.6 mg/L之间有利于微芽形成小植株,IBA浓度在0.6～1 0 mg/L促进生根.Gelrite可代替琼脂粉用于玉米生根.     

珍稀濒危植物蒙古扁桃的组织培养及植株再生

对珍稀濒危植物蒙古扁桃进行组织培养获得再生植株。实验结果表明,在MS培养基上蒙古扁桃幼苗茎尖,茎切段和叶片等外植体均可以脱分化形成愈伤组织,并进一步分化形成再生植株。器官的脱分化与再分化决定于培养基中的激素种类及其浓度。诱导愈伤组织形成的最适培养基为MS＋6－BA0.8mg/L NAA0.1mg/L,芽分化诱导最适培养基为MS＋6－BA0.8mg/L,诱导生根的最适培养基是MS＋IBA0.5mg/L。     

从麻疯树上胚轴外植体再生植株

以麻疯树上胚轴为实验材料在MS添加IBA和BA的培养基上进行离体培养实验.结果表明,在IBA O.1 mg/L与BA 0.2～0.7 mg/L组合的条件下,不定芽从上胚轴外植体的表面直接被诱导分化,其中以在MS IBA 0.1 mg/L BA 0.5 mg/L上的诱导率最高.从愈伤组织来源的植株再生需要IBA 0.5 mg/L与BA 0.1 mg/L、IBA 0.5 mg/L与BA0.2mg/L以及IBA1.0mg/L与BA0.5mg/L的激素组合,其分化的最佳培养基是MS IBA1.0 mg/L BA0.5 mg/L.生长健壮的不定芽和再生植株能在无激素的MS基本培养基上生根.发育良好的再生苗可成功地转移到温室栽培而没有可见的变异.     

罗布麻子叶和下胚轴再生植株的培养

本文报道了用罗布麻（Apocynum venetam)幼苗的子叶和下胚轴切段诱导出愈伤组织和再生植株。结果表明,愈伤组织的诱导在附加0.5mg/L6－BA和0.1-1mg/L NAA的MS培养基上为最好。在附加0.5mg/L NAA的MS培养基上培养愈伤组织能促进芽的分化,当NAA浓度增加到1mg/L时则能抑制芽的分化。随后在附加0.4mg/L IBA的MS培养基上诱导生根,获得完整再生植株。     

不同基因型玉米愈伤组织诱导与植株再生研究

以5个玉米品系幼胚为外植体,研究了基因型、2,4-D浓度以及胚龄对愈伤组织诱导的影响;6-BA对愈伤组织分化的影响;以及IBA对再生芽生根的影响。结果表明：除。31外,其他基因型的外植体在相同条件下均可诱导出愈伤组织,但是不同基因型间存在显著差异;2,4-D浓度和胚龄显著影响愈伤组织的诱导,且2,4-D浓度为2．0mg／L,胚龄在11—13d之间时,玉米愈伤组织诱导率较高且质量较好。将愈伤组织转入分化培养基后,6-BA促进了愈伤组织的再分化;在生根培养基中,IBA促进了再生芽生根,经过炼苗后移栽获得再生植株。     

激素对洋桔梗植株再生的影响及生根培养的研究

以MS为基本培养基 ,附加不同浓度的 6 BA、KT、NAA和IBA诱导洋桔梗叶片外植体的再生植株。结果表明 :MS +6 BA 0 .5～ 1 .0mg/L(单位下同 ) +NAA 0 .2和MS +6 BA 0 .5～ 1 .0 +IBA 0 .2培养基都能诱导外植体产生愈伤组织 ,但 6 BA的浓度必须小于 1 .0mg/L ,否则会导致组织的严重玻璃化 ;MS +KT 1 .0～2 .0 +NAA 0 .2或MS +KT 1 .0～ 2 .0 +IBA 0 .2培养基也能诱导外植体产生愈伤组织 ,愈伤组织出现的时间较早且质地较好 ,适合分化。继代培养时 ,MS培养基中仅加 6 BA 0 .5mg/L或KT 0 .5mg/L ,即能获得较高的分化率。生根培养研究中 ,培养液为 1 /2MS+5 0g/L糖 +IBA 2mg/L的前处理 ,生根效果较好 ,生根率接近基质生根培养的生根率。     

霞草原生质体培养和植株再生

用霞草胚性悬浮细胞分离原生质体,以含0.2%琼脂糖的KM 8p培养基薄层漂浮培养,原生质体培养密度6×10~3-1×10~4/ml。培养3天再生细胞开始分裂,7天统计分裂频率最高达25.4%,10天形成小细胞团,并加降低渗透压的稀释培养基,每周一次。20—25天形成肉眼可见的小愈伤组织,植板率达3.5%。原生质体衍生的愈伤组织在增殖培养时加入0.3%-0.4%活性炭有利于生长及分化。在含6-BA 3.5 mg/L,IBA 0.8 mg/L的培养基上,再生芽的分化频率可达85%。再生芽在添加NAA 0.5 mg/L,6-BA 0.05 mg/L的1/2 MS生根培养基中2周内形成具根的再生小植株。     

枸杞原生质体培养及高效成株体系的建立

由枸杞髓部组织诱导出胚性愈伤组织,并由此愈伤组织建立起稳定的细胞悬浮系,从悬浮细胞游离的原生质体在改良KM培养基（1．5mg/L 6-BA,0.5mg/L NAA和0．5mg/L2,4-D)中进行液体浅层培养,3－4d后出现第一次分裂,第7d统计分裂频率为50．3％,15d左右可形成细胞团,3－4周后形成肉眼可见的愈伤组织,愈伤组织植板率为1．25％,将细胞团转移到液体分化培养基（MS＋6－BA 1．5mg/L 2,4-D 0.2mg/L)8-10d可形成大量胚状体,及时将胚性愈伤组织块转移到固体分化培养基上（MS 6-BA 0.2mg/L)可形成大量绿芽,分化率54．17％。绿芽在生根培养基（MS＋NAA 0．2mg/L)可形成完整植株,移栽后成活良好。     

中国木薯栽培种通过器官发生再生植株研究

本文研究了中国木薯栽培种四种外植体通过器官发生再生植株的条件。结果表明:在MS附加0.05mg/L TIBA,1mg/L BA的培养基上“NZ 188”初步的萌发胚状体“切头”后切口处可直接产生丛芽,出芽率为43%。“SC201”胚状体子叶块在MS附加0.5 mg/L NAA,0.5mg/L BA的培养基上可直接出芽,出芽率为42%,在MS附加0.5mg/L IBA,1.5mg/L BA培养基上·出芽率为31%,AgNO_3和ABA单独使用或配合使用均不利于芽的再生。“NZ188”胚状体下胚轴在MS附加0.5mg/LNAA,0.5mg/L BA的培养基上形成的愈伤组织转入MS附加1mg/L NAA,2mg/L BA的培养基上,3周后大多数愈伤组织有绿点出现、仅4.4%外植体分化出芽。“HZ188”无菌苗茎段接种在MS附加0.05mg/L TIBA,2mg/LBA的固体培养基上,2周后形成大量愈伤组织,4周后仅见一块愈伤组织分化出芽。     

甜菜叶柄高效直接再生体系的建立

通过预试验,从4中不同基因型甜菜中选取KWS-9103作为试验材料,建立其叶柄高效直接再生体系。通过种植无菌苗、预培养、诱导分化培养,获得了再生植株,建立了甜菜快速繁殖体系。结果表明,甜菜种子经过消毒处理后培养,取幼苗在MS附加6-BA 0.5 mg/L和NAA 0.05 mg/L的培养基中预培养,再取叶柄作为外植体转入诱导培养基MS附加6-BA0.5 mg/L和NAA0.05 mg/L中诱导不定芽,不定芽诱导率为50%以上。在MS附加IBA2.0 mg/L生根培养基中生根,诱导生根率在90?以上,移栽成活率高达95%。     

罗布麻愈伤组织诱导及植株再生

以罗布麻(Apocynum venetum L.)当年的成熟种子和5周龄的幼苗叶片为外植体,研究了不同激素组合、暗培养对愈伤组织及植株再生的影响.结果表明,幼苗作外植体诱导愈伤的最佳培养基为添加1.0 mg/L 6-BA 0.2 mg/L IBA的MS培养基;继代培养中1.0 mg/L 6-BA与0.2 mg/L IBA组合愈伤致密而生长迅速,长时间培养硬化的愈伤组织可用添加0.5 mg/L 6-BA和0.1 mg/L IBA培养基和初期暗培养获得大量质地疏松、增殖迅速的愈伤组织;再生苗诱导以0.5 mg/L 6-BA 0.2 mg/L IBA组合为佳;1/2MS附加NAA 0.6 mg/L为适宜的生根培养基,初步建立了罗布麻离体再生体系.     

基因枪转化小麦幼胚的再生培养与转基因植株的获得

以小麦幼胚为受体,用基因枪法对Trx-S反义基因 目的基因 和Bar基因 标记基因 进行了共转化,以轰击后的小麦幼胚为实验材料,对幼胚培养的基本培养基、分化和生根培养基进行了筛选优化.结果表明:4种基本培养基中,L3培养基的成愈率最高,且增殖速度快;MS培养基次之.以L3为基本培养基,分化培养基中添加NAA1mg·L-1和ZT2mg·L-1配比对愈伤组织诱导分化的效果最好,分化率达到50%以上.1/2MS培养基中添加IAA0.8mg·L-1的生根效果好,且移栽成活率高.以优化的培养方案对来自7个小麦品种的幼胚进行转化与再生培养,多数品种的出愈率都达到90%以上,分化率在40%以上,并在5个品种上获得再生植株,经检测证实在4个品种上获得转基因再生植株.     

丽格海棠胚性愈伤组织诱导与植株再生

以丽格海棠幼嫩叶柄为外植体,采用培养基④(MS培养基,4.0 mg/L 2,4-D,0.5 mg/L6-BA)为胚性愈伤组织诱导培养基,诱导率达86%;以培养基③(MS培养基,3.0 mg/L 2,4-D,0.2 mg/L 6-BA)为胚性愈伤组织增殖培养基进行扩增;胚状体分化培养基为培养基⑥(MS培养基,2.0 mg/L 6-BA,0.2 mg/L NAA,0.2 mg/L IBA),分化率达100%;对幼根发育不良的胚性植株,在培养基⑩(MS培养基,0.1 mg/L IAA)上进行生根培养,生根率100%,平均根数3~5条,带侧根,长约2~3 cm。试管苗在森林土:蛭石:河沙=1:1:1的基质中生长良好,成活率100%。培养基中均附加3%蔗糖、0.6%琼脂,pH值为5.8~6.0。     

玉米优良自交系成熟胚再生体系的建立

选用生产上广泛应用的10个玉米优良自交系,用幼胚通过组织培养研究其再生特性,结果表明:玉米自交系基因型间的培养能力有较大的差异,自交系178的再生率高达78%。在此基础上以其中的178玉米优良自交系为材料,研究了影响玉米成熟胚再生的各种因素,结果表明:高浓度的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)(4.0 mg/L)是诱导愈伤组织必须的;在继代培养基中添加适量的2,4-D(2.0 mg/L)、6-苄基嘌呤(6-BA)(0.2 mg/L)和硝酸银(10 mg/L)显著增加胚性愈伤组织的形成;在分化培养基中添加0.5 mg/L 6-BA有利于提高愈伤组织的分化频率。该再生体系的建立,为以成熟胚为受体系统的遗传转化体系的建立奠定了基础。     

不同激素对花生离体分化的影响

对TDZ和2,4-D等激素在花生成熟胚外植体分化中的影响进行了研究.结果表明,花生成熟胚3～5 d龄实生苗的幼叶和胚轴在低浓度TDZ的诱导下,可分化产生高频不定芽和少量体细胞胚,转到无激素MS培养基或MS BA 0.5 mg/L NAA 0.4 mg/L的培养基后形成丛生苗.丛生苗分离后转入含1/2 MS(大量元素) IBA 0.4 mg/L的培养基中诱导生根,可形成完整的再生植株.幼叶分化率高于胚轴,但胚轴分化成苗速度快.无菌水浸泡16～24 h的胚轴在5～ 30 mg/L 2,4-D的诱导下,分化产生低频不定芽;而胚叶则产生高频体细胞胚,但畸形较严重.     

茎用芥菜细胞质雄性不育系子叶原生质体培养和高效植株再生

利用茎用芥工细胞质雄性不育系原生质体培养获得了再生植株,并研究了影响原生质体培养的因素。结果表明,子叶是茎用芥菜原生质体培养最佳的外植体,10d苗龄的子叶原生质体在改良MS培养基上培养3d后发生第1次细胞分裂,6d后发生第2次分裂,3周后形成细胞团,5周后形成肉眼可见的小愈伤,培养基中减少NAA或2,4－D都会降低愈伤组织的再生能力,在含一定浓度的NAA（0．25mg/L)和2,4－D（0．25mg/L)培养基上诱导的愈伤组织地致密且有光泽,芽的分化能力高;在MS＋BA 1mg/L NAA0.2mg/L的培养基上芽分化频率高达近29％,再生芽1／2MS＋NAA0．1mg/L培养基上生根,形成完整植株。     

鱼腥草体细胞胚胎发生和植株再生

目的:利用鱼腥草的叶片和叶柄为材料,进行体细胞胚胎诱导及植株再生研究。方法:运用正交设计试验,考察在改良的MS固体培养基上添加不同种类、不同浓度的植物生长物质组合及其配比对鱼腥草愈伤组织诱导、体细胞胚胎发生及植株再生的影响。结果:鱼腥草无菌苗叶片在含有2,4-D 1.0 mg/L 6-BA 0.5 mg/L的改良MS培养基上能诱导出胚性愈伤组织;胚性愈伤组织在含有6-BA 1.0 mg/L的改良的MS培养基上诱导体细胞胚的发生;叶柄在含有6-BA 1.0 mg/L改良MS培养基上直接产生体细胞胚。体细胞胚在改良的MS NAA0.1 mg/L 6-BA 1.0 mg/L的培养基上能够快速繁殖,形成大量不定芽,在不加任何激素的MS培养基上就可以萌发出不定根,发育为成完整植株,在MS IBA 1.0 mg/L的固体培养基上能够形成大量的根。结论:建立了鱼腥草体细胞胚胎发生及植株再生的体系。     

山茱英的组织培养与植株再生

目的：建立山茱萸的组织培养及植株再生体系。方法：分别以山茱萸的叶片、花柄和花托为材料,进行山茱萸不同外植体的离体培养研究,筛选最佳培养基组成。结果：适宜山茱萸叶片愈伤组织诱导的培养基组合为1／2MS,附加BA2．0mg/L、IBA0,5—1．0mg／L;适宜山茱萸花柄、花托愈伤组织诱导的培养基组合为1／2MS,附加BA1．0mg／L、2,4-D0．5mg／L;在1／2MS附加BA2．0mg／L、IBA0．05mg／L的培养基上,可诱导不定芽的产生;1／2MS附加IBA2．0mg／L的培养基有利于山茱萸试管苗生根。讨论：山茱萸的花托是进行组织培养的最适外植体,白色或翠绿色、结构致密的愈伤组织较易分化产生不定芽。     

花生幼叶为外植体的植株再生系统的建立

本文报道利用花生成熟胚幼叶为外植体获得高频植株再生的方法,为花生转基因提供有效的受体系统。通过诱导培养基TDZ、BA、NAA的浓度以及种子萌发时间、继代培养基种类五个因素不同水平的正交试验,筛选出了分化高频发生的最佳组合为：MS培养基中应含有TDZ 1.0 μmol/L、BA 0.4 μmol/L、NAA 5.0 μmol/L,种子萌发4 d,继代培养基为MS0。本研究表明,五因素中诱导培养基TDZ浓度为诱导花生幼叶分化的主要影响因素,其次为继代培养基、种子萌发时间,而诱导培养基中BA和NAA的浓度作用较小。试管苗生根后移栽田间,可正常开花结果。     

红叶石楠离体植株再生频率的影响因素研究

以红叶石楠带芽茎段及叶片为外植体,分析激素和培养条件等因子对愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明,MS+0.10mg/L 2,4-D+0.50mg/L NAA+0.50mg/L 6-BA+0.50mg/L KT为最佳愈伤组织诱导培养基,暗培养的愈伤组织诱导率高于光培养,其愈伤组织诱导率可达100%(带芽茎段)和98%(叶片)。MS+0.50mg/L IBA+2.00mg/L 6-BA+2.00mg/L KT为最佳分化增殖培养基,分化率91%以上,增殖倍数6.8以上,均达到最高。1/2MS+0.50mg/L IBA+0.01mg/L NAA为最佳生根培养基,生根率92%,生根量4.4根/株,均达到最高。