MicroRNA对T细胞发育调控作用的研究

Micro RNA(mi RNA)是一类非编码小分子RNA,长约21~25个核苷酸,可以靶向结合特定的信使RNA(m RNA),能够在转录后水平上调节m RNA的翻译进而调控基因的表达。mi RNA的调控功能涉及多种生物学过程,与免疫疾病密切相关。近年来发现,mi RNA可以通过靶向免疫系统中的关键转导信号分子,从而在多个环节上参与免疫细胞的产生、发育以及增殖过程。该文对mi RNA与T细胞的发育关系进行简要概述。     

microRNA与结核病诊断的研究进展

microRNA(miRNA)是一类存在于真核细胞中的非编码小RNA,可以调控基因转录后表达。人体中30%以上的基因都受miRNA的调控,同时miRNA还可作为不同生理和病理状态的分子标记。尽管已经在各种生物中预测并证实了数百种miRNA,但miRNA及其靶基因的明确作用机制和功能尚不完全明了。许多研究表明,miRNA与肺部疾病感染的发生、发展及转化有着密切的关联。miRNA在肺部疾病的正负调节功能为细菌性肺部疾病的诊断和治疗提供了新方向。我们简述了miRNA在潜伏性肺结核病和活动性肺结核病诊断领域的研究进展。     

常见肝炎病毒感染性疾病相关miRNA功能研究进展

病毒感染引发的疾病一直威胁着人类健康。Mi RNA是真核生物表达的一类重要的小分子RNA,可特异性的调节基因与蛋白的表达。mi RNA的研究为病毒性疾病的发生发展提供了新思路,为目前热点研究领域。随着mi RNA的研究深入,一些病毒感染中相关mi RNA的功能也被相继报道,如有些mi RNA具有抑制病毒感染宿主细胞的功能,有些mi RNA则可促进病毒在宿主细胞中的复制,有些mi RNA却参与病毒相关疾病的发生,还有些mi RNA则可作为病毒感染性疾病的特异性生物标志物。本文主要以两种常见肝炎病毒:HBV、HCV为例来系统阐述mi RNA在病毒感染中的相关功能。     

固有免疫细胞及其模式识别受体与表观遗传学调控研究进展

固有免疫细胞是机体抵御病原微生物的首道防线,亦是机体有效启动和维持免疫反应的重要参与者,而模式识别受体是固有免疫细胞发挥免疫功能的重要免疫分子,因此,机体对固有免疫细胞及其模式识别受体的精细调控尤为重要。表观遗传学是近年研究热点,其在固有免疫调节中的作用逐渐受到重视。就近年表观遗传学中的DNA甲基化、组蛋白共价修饰及非编码RNA等在调节固有免疫细胞分化发育及其模式识别受体的相关研究作一简述,以期为感染、炎症、自身免疫病等研究与防治提供新的思路和策略。     

固有免疫信号分子hsa-miR-146b调控脑卒中关联信号分子的生物信息学分析与实验研究

该研究旨在运用生物信息学方法预测固有免疫信号分子hsa-mi R-146b与脑卒中关联的分子调控网络。实验运用UCSC基因组浏览器、人类mi RNA疾病数据库、TF-mi RNA调控数据库、mi RNA靶基因预测验证数据库和Genecards数据库研究hsa-mi R-146b的上游转录因子、下游靶基因及信号通路的多个调控途径,绘制hsa-mi R-146b的核心调控网络图。采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激慢病毒感染的小胶质细胞BV2细胞,采用实时定量PCR检测早期生长反应基因1(early growth response 1,EGR1)、Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、mi R-146b、脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)的m RNA水平变化,对hsa-mi R-146b调控网络进行验证。UCSC数据库中显示,hsa-mi R-146b在多个物种中具有高度保守性。生物信息学分析显示,hsa-mi R-146b受转录因子EGR1调控的同时,又调控下游TLR4、BDNF和MMP9等39个靶基因。所有基因构成一个以hsa-mi R-146b为核心的调控网络,在脑卒中的发生与发展中起着重要作用。在LPS刺激的BV2细胞中,EGR1、TLR4、mi R-146b、BDNF和MMP9m RNA水平升高,而RNA慢病毒技术干扰小胶质细胞中的EGR1的表达后,TLR4、mi R-146b和MMP9 m RNA水平降低,BDNF升高,表明EGR1是调节mi R-146b表达和下游信号分子TLR4、BDNF和MMP9的关键信号分子。综上所述,生物信息学方法预测并初步验证了hsa-mi R-146b分子在脑卒中疾病中的调控网络,为深入阐明hsa-mi R-146b在脑卒中疾病中的机制奠定了实验基础。     

仿刺参(Apostichopus japonicas)miRNA研究进展

Micro RNA(mi RNA)是一类普遍存在于长约22 nt的非编码小分子RNA,它通过与靶基因m RNA特定位点的结合,实现靶基因在转录时的剪切降解,或下调靶基因在转录后的翻译水平。mi RNA在细胞分化、细胞增殖、细胞调亡和新陈代谢等生命活动中发挥重要调控功能,是当前生物学研究领域的一大热点。仿刺参(Apostichopus japonicus)具有很高的营养价值和医药价值,是我国重要的水产养殖经济品种之一。目前,对仿刺参mi RNA的研究取得了一些进展,本研究就mi RNA的研究方法与技术,mi RNA参与仿刺参的生长、夏眠、免疫和疾病等过程的研究进展进行综述,并对其mi RNA研究前景进行展望,以期为今后开展相关研究提供参考。     

微小RNA靶基因预测及功能分析方法综述

miRNA主要的功能是与靶标miRNA的3′或5′非翻译区甚至CDS区进行不完全不精确的碱基配对,从而抑制信使RNA(miRNA)的翻译或降解miRNA。然而,目前对大多数mi RNA的调节机制及其结合的靶基因知之甚少。基于计算生物学的mi RNA靶基因预测提供了一种有效且经济的分析方法,对目前几个典型的mi RNA靶基因的生物信息学分析方法进行了系统阐述,详细论述了mi RNA靶基因的预测方法和靶基因下游的生物信息学分析,包括mi RNA差异筛选、靶基因预测、靶基因富集分析、mi RNA和靶基因相互作用网络的构建、mi RNA与通路的网络构建等,系统论述了mi RNA差异表达的分析方法和步骤,为实验验证结果提供了可靠的参考方法,为开展mi RNA的功能分析和实验研究提供借鉴。     

细胞因子网络调控与免疫性血小板减少性紫癜相关性研究

细胞因子是由免疫细胞和某些非免疫细胞经刺激而合成分泌的一类具有广泛生物学活性的小分子蛋白,它在机体正常和异常的生命活动过程中均具有重要而复杂的生物学作用,它们之间通过合成和分泌的相互调节.受体表达的相互调节、生物学效应的相互影响等组成一个复杂的细胞因子网络.免疫性血小板减少性紫癜(ITP)是一种以血小板减少和皮肤粘膜出血为特征的自身免疫性疾病,研究表明细胞因子水平的异常导致的细胞因子网络失衡在ITP发病中具有重要作用.细胞因子疗法已被用于自身免疫性疾病,随着细胞因子网络与ITP研究的不断深入和基因工程技术、细胞分子生物技术的日趋成熟,细胞因子疗法将成为治疗ITP的有效措施.     

microRNA在常见致死性心脏病中的改变

微小RNA(micro RNA,mi RNA)是一类真核生物内源性非编码单链的小RNA分子,长度大约为19-23个核苷酸,拥有高度的保守性,不编码蛋白质,也是近年来研究最热门的一个新领域,通过与靶m RNA特异性结合来调节基因表达,且表达都具有组织特异性。最近,许多研究表明mi RNA在心血管系统疾病和肿瘤疾病方面的相关研究都取得了突破性的进展,mi RNA在肿瘤疾病中是通过调节癌基因及抑癌基因而调控肿瘤的生物学过程,在心血管系统疾病中与心肌肥厚及心肌再生等过程有密切的关系,包括冠状动脉疾病、心肌肥大、心肌梗死、心律失常、高血压和心力衰竭等疾病,且在心脏病学中扮演着及其重要的角色。Mi RNA的表达量增加或者减少对心血管疾病都有影响,该文对新近有关的mi RNA在心血管系统疾病中的研究进展、诊断、治疗以及预后予以综述。     

鱼类细胞因子研究进展

免疫系统是指机体识别和消除异物的防卫系统,主要功能是防御和维护机体自身稳定。鱼类免疫系统包括细胞免疫和体液免疫;细胞因子(Cytokine)是其中重要的组成部分。细胞因子是一类由免疫细胞和非特异性免疫细胞合成或分泌的小分子多肽物质,具有调节多种细胞生理功能的作用。在一般状况下,细胞因子的分泌量很低,或处于失活状态;但在机体的免疫细胞或组织受到刺激发生新的基因转录后,其含量将会大幅度上升,并识别细胞上高亲和性的表面受体,以协同形式结合其他的细胞因子或者抗病毒分子发挥生物学效应,发挥免疫调节作用。       

微小RNA与免疫调节

微小RNA(miRNA)是一类22核苷酸的高度保守的小分子非编码RNA,主要通过与靶mRNA的3′非编码区碱基互补配对结合而引起靶RNA降解或翻译抑制.越来越多的研究显示,miRNA在免疫反应中具有新型调节作用,包括调节免疫细胞的发育和分化、B细胞抗体的产生、炎性介质的释放、细胞信号转导等.miRNA在维持机体免疫系统...     

MicroRNA在自然杀伤细胞发育分化及功能调控过程中的作用

自然杀伤(natural killer, NK)细胞是固有免疫系统中重要的效应细胞,在宿主抗感染、抗肿瘤中发挥重要作用,并参与免疫调节。NK细胞主要由骨髓造血干细胞发育分化而来,NK细胞的发育、成熟及功能依赖于微环境、胞内转录因子及转录后水平的调节。MicroRNA作为一种小非编码RNA,主要在转录后水平上调节靶基因的表达,在NK细胞的生命过程中发挥重要作用。研究发现年龄会影响NK细胞的miRNA表达谱,进而影响NK细胞的发育与功能。基于miRNA对NK细胞发育及功能的调节作用,miRNA可能作为潜在的靶标来保护或恢复患者NK细胞功能,从而治疗相关疾病。为此,文中将对microRNA在NK细胞发育分化及功能调控过程中的研究进展做初步概述。     

Inactivation of CD4+ CD25+ regulatory T cells during early mycobacterial infection increases cytokine production but does not affect pathogen load

Mycobacterium tuberculosis uses numerous mechanisms to avoid elimination by the infected host. In this study, we investigated the possibility whether, similar to other pathogens, M. tuberculosis exploits natural CD4+ CD25+ T-regulatory cells (Treg) to suppress the effector function of responding host lymphocytes, thus enhancing its survival. During a Mycobacterium bovis bacille calmette guerin (BCG) pulmonary infection, we observed a 2.8-fold increase in forkhead box P3 (Foxp3+) CD25+ Treg in the lung. To inactivate the Treg in vivo, an mAb was given against CD25 (PC61) 3 days before a pulmonary infection with BCG or M. tuberculosis. Following PC61 treatment, we observed significantly decreased CD25 expression on CD4+ T lymphocytes for at least 23 days in the blood, spleen and lung when compared with the control mice. To determine whether Treg inactivation affected the protective antimycobacterial immune response, we measured cytokine production by flow cytometry. We observed small, but significant increases in the percentages of both IFN-gamma-producing and IL-2-producing CD4+ cells from the spleen and the IL-2-producing CD4+ cells from the lungs of PC61-treated BCG-infected mice compared with the infected control mice. Despite this, there was neither a difference between the lung bacterial burdens of PC61-treated mice and control mice, measured until day 44 postinfection, nor was there an effect on infection-induced lung pathology. Together, these data imply that the absence of natural Treg early after infection results in a small increase in cytokine production, but this does not alter the course of either M. tuberculosis or BCG infections. This contrasts with the important role that natural Treg play in the pathogenesis of many other intracellular infectious organisms.     

T细胞免疫在抗结核杆菌感染中的研究进展

结核分枝杆菌是引起结核病的病原体,该细菌可侵犯全身各组织器官。结核病是一种慢性传染性疾病,具有持久性特点。该细菌为胞内寄生菌,特异性免疫以细胞免疫为主,主要包括CD4＋T细胞免疫和CD8＋T细胞免疫。结核分枝杆菌特异性免疫应答的特点之一是感染早期T细胞免疫应答延迟。其机制与结核杆菌抑制免疫细胞（CD4＋和CD8＋T细胞及DC）凋亡延迟应答,通过特异性Treg细胞抑制作用延迟应答以及结核杆菌慢性感染期间存在IFN-γ信号调节网络和ESAT-6抗原的慢性刺激作用有关,以此可调节和维持免疫应答。深入了解抗原特异性T细胞特异性免疫应答的机制,有益于抗结核疫苗的研制,为临床工作提供理论依据和科学方法。     

Fc gamma receptors regulate immune activation and susceptibility during Mycobacterium tuberculosis infection

The critical role of cellular immunity during tuberculosis (TB) has been extensively studied, but the impact of Abs upon this infection remains poorly defined. Previously, we demonstrated that B cells are required for optimal protection in Mycobacterium tuberculosis-infected mice. FcgammaR modulate immunity by engaging Igs produced by B cells. We report that C57BL/6 mice deficient in inhibitory FcgammaRIIB (RIIB-/-) manifested enhanced mycobacterial containment and diminished immunopathology compared with wild-type controls. These findings corresponded with enhanced pulmonary Th1 responses, evidenced by increased IFN-gamma-producing CD4+ T cells, and elevated expression of MHC class II and costimulatory molecules B7-1 and B7-2 in the lungs. Upon M. tuberculosis infection and immune complex engagement, RIIB-/- macrophages produced more of the p40 component of the Th1-promoting cytokine IL-12. These data strongly suggest that FcgammaRIIB engagement can dampen the TB Th1 response by attenuating IL-12p40 production or activation of APCs. Conversely, C57BL/6 mice lacking the gamma-chain shared by activating FcgammaR had enhanced susceptibility and exacerbated immunopathology upon M. tuberculosis challenge, associated with increased production of the immunosuppressive cytokine IL-10. Thus, engagement of distinct FcgammaR can divergently affect cytokine production and susceptibility during M. tuberculosis infection.     

miRNA在植物病原调控方面的研究进展

miRNA是一类在真核生物体内普遍存在的,长度在22 nt左右的单链小RNA分子。大量研究发现,miRNA可广泛参与植物的生长发育、新陈代谢、物质运输、逆境响应及病原防御等多种生理生化过程。目前已经从植物中鉴定到大量的miRNA,但其中参与植物病原调控相关miRNA的研究较少。miRNA作为一种重要的转录调控因子,可参与调控病原相关分子模式触发的免疫反应和效应因子触发的免疫反应。拟南芥中,miRNA393通过靶向生长素受体基因对植物生长素进行负调控,从而在抵御细菌侵染方面发挥作用;水稻中,miRNA528可响应水稻条纹病毒(RSV)的侵染,人为提高miRNA528水平有助于维持水稻对RSV的抗性。阐述了miRNA的作用机制,与植物细菌、真菌和病毒侵染相关的miRNA研究进展,总结了葡萄,苹果,梨和桃等具有重要经济价值果树中病原调控相关miRNA研究情况,旨在为今后miRNA在植物,特别是在果树抗病研究方面提供全面的理论依据。     

微小RNA分析技术研究进展

微小RNA（miRNA）是一类起重要调控作用的非编码小分子RNA。准确分析组织或细胞中miRNA的表达水平是研究其生物学功能的基础。近年,研究者开发出多种方法检测不同生理、病理过程中miRNA的差异表达,发现miRNA的异常表达与癌症等多种疾病密切相关。目前,miRNA已逐渐成为重要的疾病诊断生物标志物乃至治疗靶点。miRNA的分析技术贯穿miRNA的研究和药物研发过程,并起到关键作用。我们针对miRNA的不同研究阶段所采用的定性和定量分析方法,着重阐述了用于初始miRNA研究的克隆测序类技术、分析miRNA表达谱的高通量芯片技术、研究具体目标miRNA及其前体表达的qPCR和改良Northern印迹技术,以及将修饰后miRNA作为药物的药代动力学评价技术。     

MicroRNA定量检测方法的研究进展

MicroRNA是一类内源性的非编码小分子RNA, 通过下调蛋白编码基因的表达而对不同的细胞发育过程起到重要的调控作用。分析组织或细胞样本中microRNA的表达可为研究这类分子的生物学功能提供重要的信息。近年来, 研究者发展了许多方法检测不同的生理和病理学过程中microRNA的表达差异, 并发现microRNA的异常表达与癌症、神经紊乱和心脏疾病等的发生相关。文章系统地介绍了最新发展的microRNA定量检测方法, 详细阐述了基于探针杂交技术的Northern blotting法、微阵列芯片法、纳米金标记法、桥连同位素标记法, 以及基于扩增技术的定量PCR检测法、滚环扩增法、引物入侵法和新一代大规模高通量测序法等, 并对这些方法的优缺点进行了分析比较。