抗马拉硫磷淡色库蚊不同基因型的自然内禀增长率及其对抗性演化的影响

本文涉及淡色库蚊(Culex pipiens pallens)抗马拉硫磷纯合子(RR)、杂合子(RS)和敏感纯合子(SS)的自然内禀增长率及其对马拉硫磷抗性演化的影响。RR、RS和SS的内禀增长率分别为0.1118、0.1171和0.1339。RR和RS基因型在无杀虫剂时呈现出繁殖不利性,RR和RS的相对适合度分别是SS的0.65和0.68。 影响淡色库蚊对马拉硫磷进化的某些因子在计算机上进行了模拟。模拟的因子包括R等位基因的起始频率(P_o)、所用马拉硫磷的剂量和迁入率(m)。模拟结果表明(I)不用药时R等位基因衰减是由于RR和RS基因型的繁殖不利性;(2)在起始种群N_o=200,P_o=0.1,使用杀死全部SS和RS的剂量(8ppm)处理,使R等位基因为有效隐性,并且m≥0.15时可阻止马拉硫磷抗性的发生。     

镶嵌式防治对抗性演化影响的论证

为了评估镶嵌式防冶对抗性演化的影响,我们以淡色库蚊(Culex pipiens pallens)作为模型昆虫,用抗马拉硫磷(单因子)品系(RM)和抗氰戊菊酯(多因子)品系(RF)构成抗性个体频率均为0.1的一个“什成群体”(M品系),然后在F₁代分成三个亚品系。Rmf亚品系用马拉硫磷和氰戊菊酯作镶嵌式模拟处理,并与单用马拉硫磷(Rm)和氰戊菊酯(Rf)逐代处理的亚品系作比较。处理10代后,Rm和Rmf对马拉硫磷的抗性分别是M晶系的266.4和6.1倍,而Rf和Rmf在处理5代后,对氰戊菊酯;山抗性均已达243.3倍。漠拟结果表明：(1)以杀虫饥理不同的杀虫剂进行镶嵌式防冶,在一定的条件下能延缓抗性的发展;(2)对单因子遗传,内马拉硫磷特别有效,而对多因子遗传的氰戊菊酯效果不佳。此外,还讨论了抗性治理的策略。     

马拉硫磷和敌百虫混用和轮用的研究:淡色库蚊的酯酶同功酶与抗性的关系

用马拉硫磷和敌百虫单独处理30代和31代的淡色库蚊,见到对马拉硫磷和敌百虫的抗性分别为敏感品系的286和303倍,而以马拉硫磷和敌百虫轮用(32代)和混用(31代)处理的品系对马拉硫磷和敌百虫的抗性均在70倍以下。 离体酶的活性测定和酯酶同功酶的酶谱分析均表明,抗性品系体内羧酸酯酶活力高于敏感品系;酸性磷酸酯酶和乙酰胆碱酯酶的活力两者差异不显著,可见马拉硫磷和敌百虫的抗性主要和羧酸酯酶活力的增长有关。     

用溴氰菊酯选育抗敌百虫淡色库蚊的研究

将室内选育成功的抗敌百虫淡色库蚊Culex pipiens pallens Coq.品系(RD)分为二个分系,一个不再用敌百虫处理,称之为RD衰退品系(RD_139-x),34代后对敌百虫的敏感度增加了10倍,对溴氰菊酯的敏感度无显著变化.另一分系改用溴氰菊酯选育,命名为Rde品系,53代后对溴氰菊酯抗性达200倍左右,对敌百虫敏感度上升约10倍,对DDT的交互抗性高达118倍,对马拉硫磷、杀螟硫磷的敏感度与敏感品系(SEN,上海昆虫所保存)比较也有上升,呈负交互抗性现象.用高剂量溴氰菊酯处理幼虫、也证明Rde在20分钟内麻痹率比敏感品系低,可见抗性机制主要是抗击倒因子(Kdr).但增效醚(Pb)对溴氰菊酯明显增效,可见mfo酶也起重要作用,推测抗性为多因子遗传.     

淡色库蚊酯酶等位基因及其在自然种群中的频率分布

酯酶基因扩增所产生的酯酶活性升高是库蚊Culex pipiens对有机磷杀虫剂抗性的主要机理之一。采用分子杂交技术和限制性酶切片段长度多态性(RFLP)分析,已鉴定出多种酯酶等位基因类型。该文通过酯酶基因特异性片段的PCR扩增及扩增片段的酶切片段分析,对淡色库蚊Culex pipiens pallens四种有机磷抗性品系的酯酶等位基因进行分型,并测定分析自然种群中不同酶型的频率分布。研究结果表明：PCR分型方法具有快速、准确的特点。不同的有机磷杀虫剂对酯酶等位基因具有明显的选择作用。双硫磷品系为B₁型;毒死蜱和敌百虫品系为B₂型;马拉硫磷品系为B₁型和B₁/B₂杂合型。不同地区采集的种群表现出不同的酶型频率分布。该文就杀虫剂对酯酶等位基因选择作用及自然种群的酶型频率分布进行了讨论。     

抗性小菜蛾的乙酰胆碱酯酶敏感性

用FAO推荐的点滴法测定了小菜蛾Plutella xylostella(Linn.)对马拉硫磷和西维因的抗药性,并对抗性?和敏感(S)小菜蛾幼虫的胆碱酯酶(ChE)的性质、活性、动力学和抑制作用进行了研究.广州天河、上海梅陇的小菜蛾对马拉硫磷的抗性分别是江西南昌种群的113.8和27.4倍;它们对西维因的抗性是》3.1倍.R幼虫ChE对乙酰胆碱(ATCh)、丙酰胆碱(PrTCh)和丁酰胆碱(BuTCh)的活性分别是S幼虫的0.3、0.7和9.9倍;它们的V_max分别是0.4、1.4和7.0倍;K_m分别是209.1,87和37.8倍.毒扁豆碱、西维因、对氧磷、敌敌畏和残杀威对R幼虫AChE的抑制中浓度I₅₀,分别是S幼虫的333.3,66.7,17.2,12.5和10.0倍.对氧磷、敌敌畏、残杀威和西维因对R幼虫的双分子速率常数K₁,分别是S幼虫的126.4,86.5,32.9和12.3倍.由此可见,AChE敏感度降低是小菜蛾对有机磷和氨基甲酸酯产生抗性的主要机理之一.本文中还讨论了防治抗性小菜蛾的策略.     

淡色库蚊对敌百虫抗性的研究——水解酶同敌百虫抗性关系

本文利用离体水解酶测定和聚丙烯酰胺圆盘电泳技术研究了淡色库蚊(Culex pipiens pallensCop.)对敌百虫抗性和水解酶的关系。实验结果表明:(1)抗性品系的羧酸酯酶活力远比敏感的大,并随着对敌百虫抗性水平的升降而增减。(2)酯酶同功酶谱表明,抗性品系有一染色强度很深的特征性羧酸酯酶带E₅,该带在抗性和敏感品系的杂交子代F₁中也发现,但强度不如抗性品系,这同F₁代的抗性水平下降相平行。(3)无论胆碱酯酶或是磷酸酯酶活力,在二品系中未见到明显差异。抗性和敏感品系的胆碱酯酶对敌百虫和敌敌畏的敏感度相似。     

球形芽孢杆菌TS-1丙酮粉对七种蚊虫的毒力测定

用乳糖-丙酮沉淀法制备的球形芽孢杆菌Bacillus sphaericus,TS-1菌粉对七种蚊虫幼虫进行了毒力测定,以淡色库蚊,致倦库蚊最为敏感,其LC₅₀分别为8.1μg/L(1.79×10²cfu/ml),8.9μg/L(1.96×10²cfu/ml),三带喙库蚊敏感性较淡色库蚊差13倍,2龄白纹伊蚊和中华按蚊分别差20和600倍;黄斑伊蚊,二株埃及伊蚊剂量高达10⁵—10⁶cfu/ml相差1,000—10,000倍以上几乎无效.本文结合B.t.I.标准生物测定方法,对毒力测定中检查时间、数据、虫龄、虫数、饲料等问题进行了讨论.     

淡色库蚊对敌百虫的抗药性研究——抗性谱及联合作用

1973年采集于上海闸北区的淡色库蚊幼虫在室内以敌百虫选育抗性品系(RD品系)获得成功,F₁₂代的LC₅₀已为室内正常品系(SEN)的240多倍。RD品系的抗性谱表明,对有机磷杀虫剂均具有不同程度的交互抗性;对有机氯如DDT、丙体666和氨基甲酸酯类等杀虫剂无明显的交互抗性;对天然除虫菊和拟除虫菊酯类有低度的负交互抗性。并测定了29种药剂与敌百虫混用对RD品系和SEN品系的增效作用。还测定了对敌百虫有较高交互抗性的杀虫剂分别与TPP,TOCP、稻瘟净、异稻瘟净和增效醚混用后的增效作用。     

麦长管蚜抗吡虫啉品系和敏感品系的生殖力比较

通过建立抗性品系和敏感品系的种群生命表,比较麦长管蚜Sitobion avenae(Fabricius)抗吡虫啉品系和敏感品系的生殖力差异,结果表明,抗性品系适合度显著下降,世代历期延长,成蚜寿命缩短;在繁殖上表现为产仔量下降,生殖期缩短。以净生殖率(R0)和内禀增长率(rm)来评价抗性品系的相对生物适合度,抗性品系分别是敏感品系的0.5200和0.7481。因此,麦长管蚜对吡虫啉的抗性品系存在显著的生殖劣势。     

羧酸酯酶和酸性磷酸酯酶在抗有机磷和敏感淡色库蚊发育期的变化

本文研讨羧酸酯酶(CarE)和酸性磷酸酯酶(ApE)在抗马拉硫磷(RM)、抗敌百虫(RD)和敏感(s)品系淡色库蚊Culex pipiens pallens不同发育期中的变化,以及某些杀虫剂和抑制剂对α-醋酸萘酯羧酸酯酶(α-NA CarE)的抑制作用.RD和s品系不同发育期的ApE变化情况如下:(1)RD和S品系间无明显差异;(2)幼虫发育期的ApE水平较低,而在变态期的ApE活性突然上升为最高,表明ApE可能参与蚊虫的发育和分化.RM、RD和S品系的CarE水平在幼虫期随虫龄增长而增高.RM和S品系的CarE活性比维持在20—35倍,RD品系在10—25倍,但三个品系的CarE活性在变态期突然下降.新羽化成蚊的CarE活性出现一个很高的峰.羽化后十天内CarE活性有一定的波动,十天后CarE活性逐渐下降,但仍高于幼虫期和蛹期.此外还讨论了对氧磷、敌敌畏、速灭威、毒扁豆碱、TPP和异稻瘟净对RM、RD和S品系α-NA CarE的抑制作用.     

灭幼脲Ⅰ号对致倦库蚊幼虫磷酸酶活力的影响

本文用稍加改良的磷酸苯二钠法,测定了经灭幼脲Ⅰ号处理的致倦库蚊4龄期幼虫的酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活力的变化,发现被处理幼虫的这两种磷酸酶活力均受到影响.在整个4龄期,灭幼脲Ⅰ号对AKP活力的抑制都比较明显,抑制强度甚至达80%,对ACP活力的抑制则比较弱;但在化蛹前,当对照幼虫的ACP活力增高时,被处理幼虫的ACP活力却下降,致使两者活力也相差一倍以上.由于灭幼脲Ⅰ号对幼虫两种磷酸酶产生明显的抑制作用,从而导致幼虫的生长发育缓慢,幼虫4龄期延长,幼虫不能化蛹而终于死亡.     

灭幼脲Ⅰ号对致倦库蚊幼虫磷酸酶活力的影响

本文用稍加改良的磷酸苯二钠法,测定了经灭幼脲Ⅰ号处理的致倦库蚊4龄期幼虫的酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活力的变化,发现被处理幼虫的这两种磷酸酶活力均受到影响。在整个4龄期,灭幼脲Ⅰ号对AKP活力的抑制都比较明显,抑制强度甚至达80％,对ACP活力的抑制则比较弱;但在化蛹前,当对照幼虫的ACP活力增高时,被处理幼虫的ACP活力却下降,致使两者活力也相差一倍以上。由于灭幼脲Ⅰ号对幼虫两种磷酸酶产生明显的抑制作用,从而导致幼虫的生长发育缓慢,幼虫4龄期延长,幼虫不能化蛹而终于死亡。     

在无杀虫剂压力下淡色库蚊的抗性稳定性研究(英文)

本文对淡色库蚊（Ｃｕｌｅｘ ｐｉｐｉｅｎｓ ｐａｌｌｅｎｓ Ｃｏｑｕｉｌｌｅｔｔ）的毒死蜱抗性品系、抗一敏杂交品系及抗性酯酶Ｂ_２纯合品系在无杀虫剂压力选择下的抗性水平变化进行了研究。结果表明,在毒死蜱抗性品系中,抗性水平逐代下降,ＬＣ_（５０）从Ｆ_０代的０．２０９９ｍｇ／Ｌ快速降至Ｆ_８代的０．０２６２ｍｇ／Ｌ,然后继续缓慢地降至Ｆ_（１６）代的０．０２０７ｍｇ／Ｌ。从毒死蜱抗性品系中的这种抗性水平下降,可以推断该品系中并不是纯的高抗性酯酶基因扩增个体,在传代中抗性个体的比例由于其生物学方面的不适应性而逐步减少。本研究中的抗性品系与敏感品系的杂交群体的抗性变化趋势也证实了这种推理。在纯的抗性酯酶Ｂ_２基因扩增品系中,抗性水平则在后代中基本上保持稳定,并且所有的个体抗性水平和酯酶活力水平更趋集中。本文进一步对蚊虫抗性的演替进行了讨论。     

不同敌百虫抗性淡色库蚊幼虫中谷胱甘肽和谷胱甘肽转移酶的比较

本文比较了三种不同敌百虫抗性淡色库蚊的谷胱甘肽和谷胱甘肽转移酶的活力。结果表明谷胱甘肽含量随着从幼虫、蛹、成虫的发育面逐渐增加,敌百虫抗性品系比敏感晶系有明显高的谷胱甘肽转移酶的活力,同时敌百虫处理幼虫导致谷胱甘肽含量下降。推测敌百虫抗性可能同谷胱甘肽和谷胱甘肽转移酶活力增高有关。     

STABILITY OF ORGANOPHOSPHATE RESISTANCE IN CULEX PIPIENS PALLENS COQUILLETT UNDER RELAXATION OF INSECITICDE SELECTION*

Abstract The stability of resistance in the organophosphate resistant strain of Culex pipiens pallens with amplification of single gene coding for esterase B₂ was determined under relaxation of insecticide selection. Insecticide resistance and amplification of esterase were both lost when strains were not homozygous for the presence of amplified gene, probably due to biological disadvantage of the esterase gene. LC₅₀ and LC₉₅ of chlorpyrifos for this strain were 0. 2099 mg/L and 0.9036 mg/L in the F₀ generation respectively, but 0. 0207 mg/L and 2. 8027 mg/L respectively in the F₁₆ generation. In the homozygous strain, insecticide resistance was still stable and amplification of esterase remained after 16 generations under relaxation of insecticide selection, which indicated that copy of esterase gene was not lost in the offspring of this strain. The evolution of insecticide resistance in mosquitoes is discussed.     

幼虫期食物量对致倦库蚊实验种群动态的影响

在室温26±1℃和相对湿度80%的条件下,以食物充足和食物缺少两种处理饲养致倦库蚊Culex quinquefasciatus Say幼虫.实验表明,幼虫期食物量不仅对幼虫有影响,而且对成蚊期一系列种群参数均有明显影响.净增殖率R₀、内禀增长能力r_m和有限速率γ降低,种群增长受抑制不仅是由于幼虫期食物量减少使幼虫发育速率减慢、存活率下降所致,且与成蚊的年龄特征存活率及年龄特征产雌率有关.各年龄组雌蚊所产的卵的孵出率随年龄的增长而下降,故以卵孵出数计算产雌率m_x所得的种群参数值较为客观,而以卵孵出率与年龄关系的回归方程校正以卵数计算的m.,同样达到上述目的.本文还提供广州致倦库蚊实验种群生命表特征的资料.     

中美有机磷杀虫药剂抗性库蚊复合种群酯酶基因扩增的研究(英文)

用脉冲电场凝胶电泳技术,从北京和美国加州的有机磷杀虫药剂抗性库蚊复合品系中分离出一条49kb的酯酶基因扩增片段。该片段可能是一个完整的扩增单元,也是迄今分离出的最大的一条昆虫酯酶基因扩增片段,扩增基因结构的研究正在进行之中。本文还重点讨论了DNA大片段的制备方法和脉冲电场电泳分离技术。