吸附法提取赤霉素工艺研究

介绍一种用大网格聚合物吸附剂从发酵液中分离、提取赤霉素的新工艺。通过树脂筛选、定向合成,到动态吸附容量测定、吸附、解吸和结晶条件等的研究,最后合成了一种对赤霉素动态吸附容量较高(达41.1mg/ml湿吸附剂),与国外Amberlite XAD-4相当的吸附剂GD-46。该吸附剂在最佳条件下对赤霉素结晶收率可达55—57%,总收率达80%,比原萃取工艺提高10%。并总结了一条在生产上可行,技术上先进的工艺流程,供工厂企业选用。     

赤霉素发酵液的絮凝预处理研究

通过过滤滤饼常数的测定,分析、讨论了用絮凝法预处理赤霉素发酵液的合理性。实践证明,絮凝不仅可以大大改善发酵液的固液分离效果,同时使滤液浓缩后的沉淀量减少了２／３,萃取过程中的乳化现象也得到了明显的改善。     

气相色谱法测定发酵液中胆固醇的含量

气相色谱法测定了发酵液中胆固醇的含量。采用Rtx-1（100%二甲基聚硅氧烷）毛细管色谱柱、FID检测器进行分析测定。当胆固醇浓度在0～200μg/mL范围内与色谱峰面积呈良好线性关系（r=0.9981）。方法的平均回收率为99.38%,相对标准偏差为0.75%（n=8）,最低检出限可达到0.816μg/mL。气相色谱法作为发酵液中胆固醇含量的快速测定方法,具有试剂用量少、操作简单、结果准确等特点。     

利用高效液相色谱法测定单细胞蛋白发酵液中氨基酸

利用酵母菌发酵工业废糟渣生产单细胞蛋白 (SCP)类饲料 ,其发酵液也含有蛋白类物质 ,酸水解后用高效液相色谱法测定氨基酸含量 ,结果表明 :酵母菌发酵液中氨基酸含量全面 ,总量达 2 95 .1mg·L- 1 ,有较高的应用价值。     

一种快速筛选产琥珀酸厌氧菌的方法

为筛选得到高产琥珀酸的厌氧菌株,建立了一种快速半定量分析发酵液中琥珀酸的方法。首先通过高效液相色谱法(HPLC)分析出产琥珀酸厌氧菌发酵液中主要含有琥珀酸,乳酸和乙酸,然后将发酵液经过纸层析展开后,发现琥珀酸可以和副产物乳酸,乙酸完全分开,最后用半定量的方法求出琥珀酸的含量。结果表明纸层析法简单经济,可以作为产琥珀酸厌氧菌的初筛方法。     

赤霉素

赤霉素(Gibberellin)有二大类:植物赤霉素(Plant Gibberellin)和霉菌赤霉素(Fungal gibberellin)本篇着重介绍霉菌发酵生产的赤霉素。赤霉素产生菌和赤霉素命名赤霉素是植物生长刺激素之一,又称九二○。目前已发现62种,其中霉菌赤霉素二十余种。Wollenweber(1931)首先对霉菌赤霉素产生菌株进行分类研究,由于其产生菌孢子形似镰刀,故属于镰刀菌属,又将其无性生殖分生孢子期菌命名为Fusarium moniliforme     

应用柱前衍生化高效液相色谱法开辟了一种简单、快速的DNJ产生菌的筛选途径

【目的】应用柱前衍生化高效液相色谱法筛选产1-脱氧野尻霉素(DNJ)菌株,并对其进行系统鉴定。【方法】利用芴甲氧酰氯(FMOC-Cl)柱前衍生化高效液相色谱法筛选DNJ产生菌;通过形态特征、培养特征、生理生化特征以及16S rRNA序列相似性分析等多项分类方法对DNJ产生菌进行鉴定;在10 L发酵罐水平进行发酵研究,利用FMOC-Cl柱前衍生化高效液相色谱法测定DNJ含量。【结果】从80株具有α-糖苷酶抑制剂活性的土壤放线菌中筛选得到一株DNJ产生菌,菌株编号为PW409,初步确定为戈壁三素链霉菌(Streptomyces gobitrici);发酵研究表明,DNJ为链霉菌PW409的次级代谢产物,发酵液中DNJ浓度为12.1 mg/L。【结论】首次将FMOC-Cl柱前衍生化高效液相色谱法应用于DNJ产生菌的筛选,并首次报道从戈壁三素链霉菌发酵液中鉴定到DNJ。     

应用HPLC一反相色谱法测定米根霉乳酸发酵液中的有机酸

提出了一种利用高效液相色谱法分析米根霉乳酸发酵液中有机酸的方法,应用反相Wakosil-II 5C18RS色谱柱,以0．01mol/L磷酸（pH2\5)作为流动相,发酵液经稀硫酸预处理后直接进样分离定量,在10min内把其中的乳酸,苹果酸,富马酸等完全分离定量,各种酸回收率大于97％。经多次实验结果证明：本方法是测定乳酸发酵液中各有机酸的快速,有效的定量测定方法。     

菰黑粉菌的分离鉴定及其发酵液中植物激素的检测

在显微镜下观察孢子形态,并观察单菌落的形态和菌株的微观形态,PCR扩增其ITS-5.8S rDNA序列,测序并在NCBI中进行同源比较,确定其种属。液体培养该菌株,通过高效液相色谱法检测发酵液中植物激素。结果表明：用菌落形态与孢子形态鉴定和分子生物学鉴定的方法,对茭白中分离的一个菌株鉴定为菰黑粉菌,且在其发酵液中检测到植物激素IAA、ABA和GA3,其中IAA含量为0.1306mg/L,ABA含量为0.01367mg/L。     

赤霉素对拟南芥主根分生区和伸长区的调控

赤霉素是一类重要的植物激素,在植物整个生长发育的调控过程中起重要作用。近年来,人们发现赤霉素对拟南芥主根生长存在促进作用。本文从根系的解剖结构、赤霉素的源靶部位、促进作用的机理、赤霉素信号转导途径以及与其他激素的关系等方面,综述了赤霉素对拟南芥主根分生区和伸长区的影响。     

反相高效液相色谱法测定肠球菌FQ15发酵液中的有机酸

目的研究肠球菌FQ15发酵液中的有机酸在不同发酵时间的变化趋势。方法建立反相高效液相色谱法测定此株益生菌发酵液中有机酸的主要成分及其在发酵不同时间的变化趋势。结果丙酸、丙酮酸、乳酸、乙酸的浓度都是在菌体生长处于衰亡期时达到最大值,乳酸随发酵时间的延长浓度明显下降,而乙酸在发酵后期含量呈上升趋势。结论此方法重现性好,精密度高,为研究微生物合成中有机酸种类及变化趋势提供了一种可供参考的快捷分析手段。     

用HPLC法测定发酵液中的生物素含量

采用高效液相色谱法测定发酵液中生物素的含量。色谱柱为Symmetry C18,流动相为V(甲醇):V(pH 2.5磷酸缓冲溶液)=14:86,检测波长为210 nm,柱温为35℃。结果表明,样品进样量在5-150μg/mL范围内线性关系良好,加样回收率在95%以上,相对标准偏差RSD为6.6%,最低检测限为0.01μg/mL。该方法简便、快捷、准确、重现性好,可用于发酵液中生物素的含量测定。     

基因工程菌高密度发酵液中碳源物质甘油的定量检测及其浓度的优化控制

比较了高碘酸氧化法,铜离子络合法、高压液相色谱法和甘油激酶法四种不同的方法定量测定重组工程菌ＹＫ５３７／ＰＳＢ－ＴＫ高密度发酵液中甘油的浓度,发现甘油激酶法可以排除发酵液中其他物质的干扰,精确测定甘油的含量。在此基础上对发酵培养中甘油的浓度进行了优化,结果表明,甘油浓度控制在较低的水平有利于菌体密度的提高。在５Ｌ自动发酵罐中,控制甘油浓度在５ｇ／Ｌ左右,经２０ｈ的培养,最终细菌密度达到１２０ＯＤ６     

基于超高效液相色谱法快速测定短链脂肪酸方法的建立

建立了采用超高效液相色谱法全面快速分析粪便与发酵液中短链脂肪酸的方法。以InertSustain AQ-C18色谱柱对粪便与发酵液中短链脂肪酸进行分离,流速为0.5 mL/min,波长为210 nm,流动相为20 mmol/L NaH_2PO_4(pH 2.2)与乙腈进行梯度洗脱。结果表明:该方法能在10 min内快速分离11种短链脂肪酸,加标培养基中各短链脂肪酸回收率为95.15%～107.01%,精密度为0.58%～7.33%,加标粪便样本中各短链脂肪酸回收率为98.43%～105.14%,精密度为1.13%～5.20%。该方法可用于粪便、发酵液中短链脂肪酸的检测,具有快速、简单及全面等优点。     

赤霉素对甘蔗生长的影响

赤霉素对甘蔗生长发育及其产量的效应,正如和其他作物一样表現极为复杂。从我們的試驗結果也可初步看出,赤霉素虽有促进甘蔗生长、增粗、叶面积加大和糖含量提高等作用,但也有抑制分蘗(尤其是前期分蘗)的作用。这种促进和抑制作用,对甘蔗生产来讲都是有利的。因为前者能提高甘蔗的产量和品质。后者,能减少后期的无效分蘗和促进前期分蘗的成林率,避免养分过多的消耗,从而也間接的有利于产量和品质的提高。此外,赤霉素能提高糖含量的結論,与国外报导有矛盾。因此,有必要进一步研究其药效和在生产上推广应用等問題。     

气相色谱法在酒精酵母筛选中的应用

将气相色谱法用于酒精酵母的筛选之中,直接测定发酵液中的乙醇含量。检测器为FID,色谱柱:φ1.6mm×3.2M;担体:GDX—101;柱温:104℃;气化室温度:150℃。气相色谱法测定结果与蒸馏法测定结果相同。     

溶氧浓度对A群脑膜炎球菌荚膜多糖产量及质量的影响

目的研究不同溶氧(dissolved oxygen, DO)浓度对A群脑膜炎球菌(Meningococci group A)荚膜多糖产量及质量的影响,确定A群脑膜炎球菌发酵时的最适DO浓度。方法通过调整发酵罐搅拌转速,通气量和罐内压力,使得A群脑膜炎球菌发酵时发酵液中的DO浓度分别为5%、10%、20%和30%,测定不同DO浓度细菌的生长情况、葡萄糖和氢氧化钠消耗情况,发酵结束后从发酵液中提纯荚膜多糖,比较不同DO浓度荚膜多糖的产量和质量。结果 DO浓度对A群脑膜炎球菌的生长及代谢影响显著,当DO浓度为20%时,发酵液中细菌的终浓度是DO浓度5%的1.9倍,是DO浓度10%的1.3倍;发酵液中的葡萄糖消耗速率和氢氧化钠的用量均随着DO浓度的升高而降低。DO浓度对A群脑膜炎球菌荚膜多糖的产量及质量也有明显影响。当DO浓度为20%时,A群脑膜炎球菌荚膜多糖产量是DO浓度为5%的3倍,是DO浓度为10%的1.7倍;荚膜多糖细菌内毒素含量较DO浓度为5%下降78%,较DO浓度为10%下降64%;分子大小也优于其他溶氧浓度。结论 DO浓度为20%是A群脑膜炎球菌发酵时的最适DO浓度。     

藤仓赤霉菌赤霉素生物合成及代谢调控研究进展

赤霉素是最重要的植物生长调节剂之一,在农业生产中得到越来越广泛的应用,具有广阔的市场前景,但其工业化的高生产成本严重制约着它的广泛应用。近年来,利用生物技术提升赤霉素产量日益成为研究热点。赤霉素生物合成是多种酶协同作用的过程,阐明赤霉素的生物合成机制,利用代谢工程策略调控代谢流量,对提高赤霉素产量至关重要。文中综述了当前藤仓赤霉菌赤霉素生物合成途径、关键酶、环境因素、代谢流调控等方面的研究进展,在代谢调控方面进行了展望,以期为实现赤霉素稳产高产提供思路。     

维生素B_2的高效液相色谱法分析

维生素B_2通常被列为水溶性的维生素。但实际上由于维生素B_2结晶的结构不同,它在水中的溶解度很低,一般为1:1300～1500。由于维生素B_2的特性,其测定不能和其他的水溶性维生素同样处理。对维生素B_2的分离测定,通常应用化学法或微生物法,但这些方法既费时间,又费力,在某些特殊情况下,还要用萃取来消除干扰物质。我们选用反相色谱法,应用荧光检测器检出,能在柱上除掉干扰物质,对样品不须做复杂的处理,此方法用于发酵液中维生素B_2的分析,,具快速、准确、选     

赤霉素影响几种植物开花试验的初步报告

1.在诱导的长日条件下赤霉素可以促进长日性植物雪里蕻、矢车菊植株提早开花,又可诱导要求低温的二年生植物乌塌菜开花。在非诱导的短日条件下赤霉素可以诱导雪里蕻、矢车菊、乌塌菜植株现蕾。但是要求冬性较强的二年生植物乌塌菜开花所需的赤霉素剂量比雪里蕻、矢车菊为高。因此赤霉素可以替代长日性植物的光照条件及要求低温的二年生植物的低温作用,是与Lang用二年生天仙子等以及用金光菊(Rudbeckia bicolor)、冬洋油菜(Brassica napus v.oleifera)等植物所得的结果是一致的。 2.赤霉素可以打破多年生蓿根性植物如芍药、牡丹休眠芽的休眠而提前开花。 3.赤霉素对鳞茎类植物如漳州水仙、风信子植物的开花没有促进作用。