蝉拟青霉液体发酵条件优化

采用液体发酵蝉拟青霉,对蝉拟青霉的发酵条件进行优化,以提高蝉拟青霉胞外多糖产量及生物量。摇瓶发酵条件下,在单因素基础上设计正交实验确定各因素的最佳组合。优化后得最佳发酵培养基:蔗糖8%,牛肉膏0.75%,酵母膏0.125%,MgSO_4·7H_2O 0.3%,KH_2PO_4 0.2%,麸皮0.5%。该条件下胞外多糖产量为5.96 g/L,生物量为42 g/L,较优化前提高了1倍。采用发酵罐进行扩大培养,对分批发酵时的初糖浓度进行了优化,并分析了补料分批发酵对发酵过程的影响。发酵罐培养时最适初糖浓度为5%,此时生物量最高为38 g/L,多糖含量最高为5.5 g/L;采用补料分批发酵时,多糖产量最高为5.89 g/L,生物量最高为40 g/L,效果优于分批发酵。     

玫烟色拟青霉最适液体培养条件的研究

通过对不同营养和不同培养条件下玫烟色拟青霉菌丝生物量和产孢量的研究,结果表明:葡萄糖为玫烟色拟青霉液体培养的最适碳源,蛋白胨为该菌生长的最适氮源,C/N为10∶1~20∶1最适于玫烟色拟青霉菌丝生长和产孢;25℃2、4 h全光照条件,对该菌生长和产孢均有利。接种后144~168 h时,菌丝生物量和产孢量均达到高峰,分别为31.72 mg/mL、24.62孢子/mL,为黑暗条件下的1.5倍和18.3倍,因此玫烟色拟青霉液体发酵终点应选择在接种后144~168 h为最好。     

古尼拟青霉麦角甾醇高产液体培养条件及提取工艺的优化

以古尼拟青霉生物量和麦角甾醇含量为指标,对古尼拟青霉的高产麦角甾醇培养条件及麦角甾醇提取工艺进行了优化。正交试验结果表明,高产麦角甾醇的最适液体培养基为蔗糖4%,麸皮2%,KH2PO4 0.025%和NaCl 0.05%;响应面实验结果表明,麦角甾醇最佳提取工艺为：提取溶剂浓度为80%乙醇,液料比为200:1,提取时间为65min。     

蝉拟青霉孢子粉对小菜蛾的致病性试验

试验采用蝉拟青霉(Paecilomyces cicadae)孢子粉处理小菜蛾Plutella xylostella L.幼虫,结果表明,蝉拟青霉可以在小菜蛾幼虫和蛹上寄生,并导致小菜蛾死亡。室内试验,蝉拟青霉对小菜蛾的致死率高达96.55%;田间试验,1.6×107个/mL浓度的022017#蝉拟青霉防治小菜蛾的校正死亡率可达75.86%。该结果可用于蝉拟青霉新型真菌杀虫剂的研制。     

虫生真菌蝉拟青霉的研究

观察了蝉拟青霉的无性世代,在24℃下载片培养结果,分生孢子经8hr萌发,24hr普遍形成菌丝,36hr出现产孢结构和产生次代分生孢子。该菌生长合适温度24—26℃,分生孢子萌芽要求相对湿度在90%以上。pH4—12范围均见生长,但以5—6为佳。对10种碳源和9种无机氮源利用检测结果,用葡萄糖作碳源孢子产量高,用果糖作碳源菌丝体产量高。不利用菊糖、L-山梨糖、L-鼠李糖。对KNO_3利用佳,但不能利用NaNO_2,和硫脲。该菌能较强抗紫外辐射。     

紫外线诱变蝉拟青霉对白粉虱致病性的影响(Ⅰ)

对蝉拟青霉进行UV诱变处理,比较诱变前菌株3L和诱变后M1、M2、M3及M4各个菌株对白粉虱的致病性和菌生理特性的变化情况,并进行相关性分析。结果表明,菌株的几丁质酶活性、孢子萌发率及生长势与致病性有密切的相关性;而产孢量、蛋白质酶活性则与致病性的关系不大。     

蝉拟青霉LB菌株的生物学特性

本文研究碳源、氮源、温度、湿度、pH值和光照等对蝉拟青霉LB菌株生长、产孢和孢子萌发的影响.结果表明,适合该菌株菌落生长和产孢的最佳碳源是可溶性淀粉和蔗糖,最佳氮源为蛋白胨;菌丝生长和孢子萌发的最适温度范围是25℃～27℃,产生分生孢子的最适温度是25℃;分生孢子萌发所需湿度范围是RH 90%～100%,当RH低于90%时很难萌发;在pH值4～10的范围内该菌能生长和产孢,菌丝生长最适pH为6,产生分生孢子和孢子萌发最适pH范围为6-7;光照处理对该菌产孢有一定的影响;分生孢子的致死条件为55℃ 10min.生物学特性显示,蝉拟青霉LB菌株是一株对营养要求不高、对环境适应能力较强的昆虫病原真菌.     

淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)培养条件的优化

以查氏培养基为基础,在碳源、氮源、pH值、温度等单因子条件研究的基础上,采用正交实验对淡紫拟青霉的培养条件进行了优化研究,得到了适合其生长的发酵培养基配方。实验结果表明,以蔗糖为碳源(60g/L),硝酸铵为氮源(1.5g/L),pH5～6,培养温度为30℃时最适合该菌的生长。     

干旱胁迫对蝉拟青霉SOD活性的影响

为探讨蝉拟青霉Paecilomyces cicadae抗旱的生理生化基础,利用聚乙二醇6000(PEG-6000)对采自贵州省荔波县的蝉拟青霉GZUIFR-3L菌株液体发酵进行胁迫,用氮蓝四唑法连续测定不同培养时间SOD活性,考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量,从而测定SOD比活力。结果表明,胁迫和非胁迫情况下,蝉拟青霉蛋白质含量、SOD活性和SOD比活力分别在发酵培养第7,8,6d时达到最大值;经干旱胁迫的蝉拟青霉SOD活力及其比活力均比未经胁迫处理的高,初步推测蝉拟青霉抗旱能力与SOD活性有一定的相关性。     

蝉拟青霉菌丝体降血糖组分确证

[目的]考察蝉拟青霉5704s菌丝体提取液的降血糖作用,探索发挥降血糖作用的主要功能组分。[方法]制备蝉拟青霉5704s菌丝体提取液,分离提取液中峰1、峰2蛋白,采用小鼠试验和体外试验测定菌丝体提取液以及不同活性组分的降血糖作用,SDS-PAGE电泳测定主要降血糖组分分子量。[结果]蝉拟青霉5704s菌丝体提取液具有较好的降血糖作用,血糖下降率为36.85%;体外试验中,提取液峰1蛋白的α-糖苷酶抑制率为71.23%,峰2蛋白的抑制率为63.17%;小鼠试验中,提取液峰1蛋白的血糖下降率为40.23%,峰2蛋白的血糖下降率为25.70%;体外试验和小鼠试验均表明提取液峰1蛋白的降血糖效果优于峰2蛋白,峰1蛋白的分子量为57 781 Da。[结论]确定蝉拟青霉5704s菌丝体提取液中发挥主要降血糖功效的组分是峰1蛋白。     

海南红树林淡紫拟青霉胞外多糖提取条件的优化

为了探讨影响红树林淡紫拟青霉胞外多糖提取的因素,确定最佳提取方案,设置不同的发酵液浓缩倍数、三氯乙酸用量等因素,设计单因素实验测定多糖提取最佳条件。然后设计正交试验,检测多糖在不同条件下的提取率,以获得最佳提取工艺。结果发现,发酵液浓缩3~5倍时多糖提取率最高,10%的三氯乙酸对蛋白质脱除效果最好;正交试验表明影响多糖提取的因素依次为乙醇用量、沉淀时间和温度,最优方案为3倍95%乙醇、4 ℃沉淀24 h。该条件下,多糖提取率可达57.835%±1.206%。研究结果为红树林淡紫拟青霉胞外多糖的提取研究提供了参考。     

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体发酵的研究

用20t发酵罐培养蝙蝠蛾拟青霉。菌粉收率达2．5％,D-甘露醇含量大于8％,腺苷含量大于0．2％．对发酵过程中pH、总糖、还原糖、得率、折光等的变化规律进行了考察．确定以发酵液pH的升高和还原糖含量作为综合判断发酵终点的依据．     

斜卧青霉Ju-A10产CMCase培养条件的优化

通过响应面分析法对Ju-A10利用不同植物纤维废弃物为碳源生产CMCase条件进行优化 ,结果显示碳源分别为玉米秸粉和高粱秸粉,碳源水平分别在8.00%、10.05%,300 mL三角瓶装液量分别为55.25 mL、49.65 mL时, CMCase为最高,分别为29.43 IU/mL、37.57IU/mL .R2分别达到了0.9099、0.8592,说明发酵预测模型可靠性较高,可应用于培养条件的优化.     

古尼拟青霉液体发酵液有机粗提物产量的研究

目的:培养基成分对古尼拟青霉液体发酵液有机粗提物产量的影响。方法:采用正交设计方法,考察古尼拟青霉液体发酵培养基3种组分马铃薯、葡萄糖和蛋白胨对其菌丝体与发酵液有机粗提物量的影响。结果:在马铃薯300g/L,蛋白胨8g/L,葡萄糖30g/L时,古尼拟青霉液体发酵液有机粗提物产量可达到136.3mg/L。结论:培养基成分对古尼拟青霉液体发酵有机粗提物产量有显著影响,该文结果对指导古尼拟青霉液体的深层发酵具有参考价值。     

淡紫拟青霉右旋糖酐酶的形成条件

比较了各种碳水化合物对淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)右旋糖酐酶形成的影响,右旋糖酐是最好的碳源,也是最佳诱导物。不同分子量(17．2—1000kD)的右旋糖酐对酶形成的诱导作用不同,酶的产生随右旋糖酐分子量的增大而增加。用分子量为1000kD的右旋糖酐作碳源时比用17.2kD的右旋糖酐作碳源时的产酶量高40％以上。用右旋糖酐和其它糖的混合物作碳源时,酶的形成受到不同程度的抑制。右旋糖酐酶形成的其它适宜条件：氮源为牛肉蛋白胨,培养基初始pH6．0—7.0.种龄为48小时,在250ml三角瓶中装50ml培养基,于28℃在200r／min摇床上培养6天。     

培养条件对灰绿拟青霉U—2菌株发酵液杀蚜活性的影响

以生物测定结果为依据,研究确定了灰绿拟青霉U－2菌株产生杀蚜活性物质的较为适宜的条件为：采用初始pH6．0的添加0．18％MgCl2、0．3％柠檬酸钠和0．4％牛肉膏的马铃薯蔗糖培养基,于26－28℃,200rpm摇瓶培养6天。     

响应面法优化蝙蝠蛾拟青霉发酵培养基配方

为了提高虫草无性型蝙蝠蛾拟青霉(Paecilomyces hepiali)菌丝体中的腺苷含量,采用响应面法对其液体发酵培养基配方进行了优化。首先采用Plackett-Burman设计法对影响蝙蝠蛾拟青霉腺苷收率的8个相关因素进行了筛选,从中确定其主要影响因子为马铃薯和蚕蛹粉。然后用最陡爬坡试验逼近上述2个因素的最大响应区域,并通过中心组合设计和响应面分析法,确定了主要影响因子的最佳浓度。优化后的培养基组成为:马铃薯8.25%,蔗糖1%,玉米粉1%,蛋白胨0.5%,蚕蛹粉0.81%,KH2PO40.1%,MgSO4.7H2O 0.1%,(NH4)2 SO40.1%。该配方所产生的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体中腺苷含量由优化前的2.15 mg/g(干重)提高到3.44 mg/g(干重)。