我国市售较大婴儿配方乳粉中糖含量研究

目的：了解我国市售6～12月龄（2段）较大婴儿配方乳粉中不同糖原料的添加情况,测定和分析糖（单糖和双糖）含量分布情况,以期为食品安全国家标准《较大婴儿配方食品》修订中增加糖含量的要求提供依据。方法：2017年6—7月间,购买我国市场不同品牌不同配方的较大婴儿配方乳粉60例,收集整理产品标签信息,分析糖原料的添加种类和添加率;在此基础上,使用国标方法检测产品中乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖以及蔗糖等的含量,统计分析终产品糖含量的分布,并与我国标准的拟修订要求进行比较。结果：60例2段配方乳粉中添加的糖原料主要包括乳糖、麦芽糊精、白砂糖、玉米糖浆、葡萄糖浆、高麦芽糖浆、果葡糖浆以及淀粉8种,乳糖的添加率最高为95%,其他糖的添加率普遍较低。产品配料表中使用的糖原料与终产品中相应糖的含量呈对应关系,所有产品中的糖均以乳糖为主,其中76%的产品中乳糖含量达到了碳水化合物的80%以上,38%的产品达到了90%以上,而产品中葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、果糖的含量较低。结论：目前我国市售较大婴儿配方乳粉中虽然添加一些糖配料,但终产品中除乳糖外,其他糖含量较低。推动在国标中规定糖的含量,有助于进一步减少除乳糖外其他糖的使用。如在国标中以乳糖与碳水化合物的比进行规定,建议在充分保证较大婴儿安全和营养的基础上,综合考虑市售产品的实际情况。     

牛乳基和羊乳基奶粉中16种氨基酸含量的测定及比较

目的：对乳粉中氨基酸分析的水解方法进行研究,比较牛乳基奶粉和羊乳基奶粉中氨基酸的含量。方法：样品用含巯基乙酸的盐酸溶液水解提取,经定容、过滤、真空浓缩、复溶、过膜后,用氨基酸分析仪测定,外标法定量。结果：应用含0.05%巯基乙酸的盐酸水解液对奶粉样品进行水解的同时有效防止了蛋氨酸的氧化,相对氧化水解方法节省前处理时间,方法的回收率为94%~97%,相对标准偏差小于3.0%。通过对牛乳基和羊乳基奶粉样品中的16种氨基酸分析,牛乳基奶粉中赖氨酸含量略高于羊乳基奶粉,其他相应氨基酸含量不存在显著性差异。结论：该方法准确快速、重现性好,适用于奶粉中氨基酸含量分析的检测要求。     

火麻仁复合蛋白饮料的研制

以全脂乳粉、火麻仁为原料,探讨了火麻仁复合蛋白饮料的制备工艺条件。通过正交试验研究了火麻仁复合蛋白饮料产品配方及乳化稳定剂的复配方案。结果表明：火麻仁复合蛋白饮料最佳配方为全脂乳粉2.0%、火麻仁3.0%、核桃仁1.0%、白砂糖6.0%;火麻仁复合蛋白饮料最佳稳定剂为单,双甘油脂肪酸酯0.04%、蔗糖脂肪酸酯0.05%、山梨醇酐单硬脂酸酯0.02%、结冷胶0.03%。     

婴幼儿配方粉及成人营养品中脂肪酸含量检测方法的性能研究

目的：建立适用于婴幼儿配方粉及成人营养品中脂肪酸检测的方法,并在不同基质中验证其性能。方法：在AOAC 2012.13方法基础上进一步修改建立了直接甲酯化法,并对其检测婴幼儿配方食品及成人营养品中主要功能性脂肪酸的能力进行验证。方法验证包括其准确性、回收率、精确度及定量限。本实验还研究了此方法在7种不同基质（乳基、豆基、部分水解蛋白及氨基酸配方）婴幼儿配方粉中的适用性,并与现行国标GB 5413.27-2010检测4种脂肪酸的能力进行了比对。同时,还评价了此方法检测包埋DHA原料的能力。结果：直接甲酯化法表现出了良好的准确性、回收率及精确度,在不同基质及使用不同包埋工艺的DHA原料中均显示了很好的适用性。此方法与现行国标方法测定7种乳粉试样中的4种脂肪酸的结果一致性均在90%~106%范围内,表现出了很高的一致性。结论：直接甲酯化法预处理步骤简单、方便、快捷,作为乳粉样品中脂肪酸含量的日常检测方法具有较大的推广潜力及价值。     

国内市售添加食品用菌种的预包装食品标签标识情况调查及分析

目的：分析我国市售添加食品用菌种的食品产品相关信息，主要包括产品种类、菌种信息的标签标识以及声称的使用等情况，为完善我国该类食品的管理模式，提高菌种标签标识管理的科学性提供参考。方法：在大中型超市、便利店进行采样和记录，同时通过登录我国主要网络购物平台进行检索和查询，收集添加食品用菌种产品的种类及标签等信息，并进行整理和分析。结果：共采集符合要求的样品510份，样品种类主要包括饮料、发酵乳、婴幼儿配方食品、糖果、饼干等；菌种主要标示为种名称（67.6%）；活菌型产品中有74.7%对菌种量进行了标示，标识方式主要为保质期内含量（35.4%）和添加量（33.6%），标识位置主要为配料表（35.8%）及独立标识（31.7%）；部分样品使用了涉及肠道、消化、吸收、腹泻、便秘等的功效声称。结论：目前，国内市售添加食品用菌种食品产品的种类丰富，产品标签上对于菌种名称、菌种量的标示方式较为多样。部分产品未正确使用“活菌”“益生菌”等术语，类似功效声称的使用值得商榷。在标示了适用人群包括婴幼儿的样品中，存在未规范使用和标示菌株的情况。建议相关管理部门进一步完善菌种使用和标识的相关规定；监管部门应加强标签标识的监管力度；行业应严格遵守食品标签和声称的管理规定。     

羊奶营养研究进展及羊乳基婴儿配方奶粉开发

牛奶和羊奶都可以作为婴儿配方奶粉的乳基来源,但二者的营养素构成和维生素和矿物质含量存在明显的差异。羊奶比牛奶含有较少的αs1酪蛋白和较多的β酪蛋白,非蛋白氮含量也高于牛奶。羊奶中的脂肪球要显著小于牛奶,小直径的脂肪球分布明显高于牛奶,脂肪球总表面积明显大于牛奶,山羊奶中还含有很高比例的短链和中链脂肪酸、共轭亚油酸和长链多不饱和脂肪酸,而且ω-3 长链多不饱和脂肪酸含量高于牛奶。羊奶中的低聚寡糖含量比牛奶中的更多,且种类和结构也更接近于人乳寡糖。羊奶作为乳基的婴儿配方奶粉较之牛乳基配方奶粉具有特有的营养特性和潜在的健康益处。     

济南地区市售19种乳、豆粉蛋白质、氨基酸含量分析

通过对济南地区市售１９种乳,豆粉的蛋白质和氨基酸分析表明：纯乳粉中Ｅ／Ｎ一般均大于１。调制性乳粉Ｅ／Ｎ一般均小于１。由等电聚焦分析表明：乳粉的蛋白质变性指数依次为进口乳粉＜纯乳粉＜豆乳粉。     

预包装老年食品现状及主要营养声称分析

目的：了解我国老年预包装食品市场,为老年食品国家标准的制定及老年食品的研发提供科学依据。方法：使用横断面调查,分析收集的220例预包装老年食品营养声称情况。结果：220例老年食品可分为调制乳粉、液态饮料类、糕点类和芝麻糊等四类,分别占调查总数的31.4%、12.3%、39.5%和16.4%。调制乳粉类以强化补充蛋白质、钙、铁、锌、维生素C和维生素A、D、E为主要特点,部分产品添加膳食纤维、牛磺酸、植物甾醇和益生菌。维生素B1、B2、叶酸添加率较低,未发现有维生素K、烟酸等的添加。液态饮料类以“低脂、脱脂、无乳糖” 为特点,55.5%产品强化钙。糕点、饼干类分为糕点类（73.5%）和饼干类（26.5%）,营养声称“富含膳食纤维”“粗粮纤维”“无蔗糖、麦芽糖醇”等为特点,但“低脂”产品仅占8.0%,脂肪含量总体较高。芝麻糊等类,藕粉类（27.8%）、芝麻糊（58.3%）、核桃和其他坚果粉（18.9%）,冲调食用,易于老年人消化和吸收,口感丰富。结论：目前市售的老年食品较少,品种单一,以调制乳粉、糕点、饼干为主;添加营养素的种类和含量参差不齐,部分产品脂肪含量过高。乳粉、豆粉及其制品可以作为老年食品的首选载体。建议加强老年食品的标准化管理,促进老年食品产业的发展。     

四种生鲜乳营养成分的比较分析

目的：对牛乳、山羊乳、水牛乳、骆驼乳四种生鲜乳的营养成分进行比较分析。方法：采集牛乳、山羊乳、骆驼乳、水牛乳各50份,按照国家标准测定四种生鲜乳中蛋白质、脂肪、18种氨基酸和10种脂肪酸含量,并对数据进行方差分析、主成分分析和判别分析。结果：不同哺乳动物来源生鲜乳的营养成分差异显著,具有各自的指纹特征,其判别分析的交叉检验正确判别率为995%。结论：上述营养成分含量可作为鉴别牛乳、山羊乳、骆驼乳、水牛乳的指纹信息指标。     

大熊猫乳中酶的活力与激素含量分析

测定了两只大熊猫乳中几种酶的活力和激素浓度,并与成都麻羊和中国荷斯坦牛乳进行了比较。脱脂乳中γ-谷氨酰转肽酶、乳过氧化物酶活力明显低于牛乳,而淀粉酶活力高于牛乳,N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶活力与牛乳接近;两只大熊猫乳中均检测到较高浓度的胰岛素和生长激素,胰岛素含量明显高于牛乳,T3和IGF-I含量显著低于成都麻羊乳。     

Altered levels of the Taraxacum kok-saghyz (Russian dandelion) small rubber particle protein,TkSRPP3, result in qualitative and quantitative changes in rubber metabolism

Several proteins have been identified and implicated in natural rubber biosynthesis, one of which, the small rubber particle protein (SRPP), was originally identified in Hevea brasiliensis as an abundant protein associated with cytosolic vesicles known as rubber particles. While previous in vitro studies suggest that SRPP plays a role in rubber biosynthesis, in vivo evidence is lacking to support this hypothesis. To address this issue, a transgene approach was taken in Taraxacum kok-saghyz (Russian dandelion or Tk) to determine if altered SRPP levels would influence rubber biosynthesis. Three dandelion SRPPs were found to be highly abundant on dandelion rubber particles. The most abundant particle associated SRPP, TkSRPP3, showed temporal and spatial patterns of expression consistent with patterns of natural rubber accumulation in dandelion. To confirm its role in rubber biosynthesis, TkSRPP3 expression was altered in Russian dandelion using over-expression and RNAi methods. While TkSRPP3 over-expressing lines had slightly higher levels of rubber in their roots, relative to the control, TkSRPP3 RNAi lines showed significant decreases in root rubber content and produced dramatically lower molecular weight rubber than the control line. Not only do results here provide in vivo evidence of TkSRPP proteins affecting the amount of rubber in dandelion root, but they also suggest a function in regulating the molecular weight of the cis-1, 4-polyisoprene polymer.     

烟草磷转运蛋白基因NtPHT2;1的克隆和表达分析

植物对磷酸盐的吸收与利用主要依靠磷转运蛋白,其中PHT2家族编码的低亲和磷转运蛋白主要负责植物在正常供磷条件下磷酸盐的吸收、转运与再利用。为了探究低亲和磷转运蛋白基因NtPHT2;1在烟草转运磷酸盐中的作用和表达模式,本研究以普通烟草K326的cDNA为模板,克隆得到NtPHT2;1,对该基因进行生物信息学分析和蛋白质的亚细胞定位,并通过荧光定量PCR技术对该基因在低磷等非生物胁迫下的基因表达模式进行分析。结果表明：（1）NtPHT2;1基因的全长为1 764 bp,编码587个氨基酸。（2）亚细胞定位结果表明,NtPHT2;1蛋白定位于叶绿体上。（3）同源性比对发现,NtPHT2;1蛋白与辣椒CaPHT2;1蛋白的同源性最高达到91.00%。（4）启动子分析表明,NtPHT2;1启动子含有参与调控植物衰老、逆境胁迫相关的顺式作用元件。（5）组织表达模式分析表明,NtPHT2;1在叶片中的表达量最高,新叶中的表达量比老叶中的高;在低磷诱导条件下,该基因的表达量与正常条件相比差异不显著。（6）不同非生物胁迫下的表达模式表明,在盐胁迫和干旱胁迫下,该基因的表达量显著降低。研究认为,NtPHT2;1基因主要是负责烟株正常生长发育条件下磷酸盐的转运与利用。     

A novel cDNA from Parthenium argentatum Gray enhances the rubber biosynthetic activity in vitro

Natural rubber (cis-1,4-polyisoprene) is an isoprenoid compound produced exclusively in plants by the action of rubber transferase. Despite a keen interest in revealing the mechanisms of rubber chain elongation and chain length determination, the molecular nature of rubber transferase has not yet been identified. A recent report has revealed that a 24 kDa protein tightly associated with the small rubber particles of Hevea brasiliensis, therefore designated small rubber particle protein (SRPP), plays a positive role in rubber biosynthesis. Since guayule (Parthenium argentatum Gray) produces natural rubber similar in size to H. brasiliensis, it is of critical interest to investigate whether guayule contains a similar protein to the SRPP. A cDNA clone has been isolated in guayule that shares a sequence homology with the SRPP, thus designated guayule homologue of SRPP (GHS), and the catalytic function of the protein was characterized. Sequence analysis revealed that the GHS is highly homologous in several conserved regions to the SRPP (50% identity). In vitro functional analysis of the recombinant protein overexpressed in E. coli revealed that the GHS plays a positive role in isopentenyl diphosphate incorporation into high molecular weight rubbers as SRPP does. These results indicate that guayule and Hevea rubber trees contain a protein that is similar in its amino acid sequence and plays a role in isopentenyl diphosphate incorporation in vitro, implying that it contributes to the enhancement of rubber biosynthetic activity in rubber trees.     

Molecular Cloning and Characterization of Rubber Biosynthetic Genes from <Emphasis Type="Italic">Taraxacum koksaghyz</Emphasis>

Rubber biosynthesis requires the action of specific enzymes known as cis-prenyltransferases (CPTs). These enzymes are responsible for the sequential addition of isopentenyl pyrophosphate units to the growing polyisoprene chain, a biochemical reaction thought to be stimulated by the presence of small rubber particle proteins (SRPPs). We have cloned, characterized, and analyzed the expression of three CPT genes (TkCPT1–3) and five SRPP genes (TkSRPP1–5) from the rubber-producing plant Taraxacum koksaghyz. The deduced TkCPT amino acid sequences showed significant levels of sequence identity with Hevea brasiliensis CPTs. We also found no obvious differences between SRPPs from T. koksaghyz, another rubber producer, and a non-rubber plant. The roles of the individual TkCPTs and TkSRRPs in rubber biosynthesis are discussed.     

小麦冰重结晶抑制蛋白基因TaIRI5的克隆及分析

为了明确小麦冰重结晶抑制蛋白基因(TaIRI5)在小麦生长发育过程中的作用,该研究以小麦品种‘北京841’为材料,利用RT-PCR方法克隆TaIRI5基因,并对该基因进行生物信息学分析、组织特异性表达分析、启动子活性分析以及亚细胞定位分析。结果显示:(1)成功克隆到TaIRI5基因,该基因全长1203 bp,开放阅读框为858 bp,编码285个氨基酸,蛋白质分子量为70.7 kD,等电点为5.07,属于疏水性蛋白。(2)实时荧光定量PCR结果显示,TaIRI5基因在小麦的根、茎、叶片、雌蕊、雄蕊、护颖、种子中均有表达,其中根部的相对表达量最高,在雌蕊中表达量最低,表明该基因在小麦的生长发育过程中起重要作用。(3)TaIRI5基因的启动子分析表明,该区域除CAAT-box和TATA-box启动子核心元件外,该序列还包含9个光响应元件和6个激素应答元件及其他元件;利用TaIRI5基因不同长度(498 bp、999 bp、1500 bp)的3个候选启动子,构建了含有GUS基因的pCAMBIA1301融合表达载体;烟草转化实验表明,3个候选启动子都能启动该基因的表达,但表达模式略有差异。(4)成功构建含有GFP基因的融合载体pCAMBIA1300-TaIRI5-GFP,亚细胞定位结果显示,TaIRI5定位于细胞膜上。该研究结果为进一步研究小麦TaIRI5基因功能奠定了基础。     

烟草NtSKOR1基因的克隆及功能分析

该研究利用拟南芥AtSKOR蛋白序列,通过NCBI的Blast搜索获得烟草NtSKOR1基因CDS序列。设计全长CDS扩增引物,通过RT PCR方法从栽培烟草中克隆得到NtSKOR1基因,对其进行生物信息学、表达特性等分析,并利用CRISPR/Cas9技术获得NtSKOR1的敲除材料。结果表明：(1)NtSKOR1基因CDS由2 466 bp核苷酸组成,编码821个氨基酸,推测NtSKOR1蛋白等电点为6.36,分子量为94.21 kD。(2)NtSKOR1定位于细胞膜,有6个跨膜区,无信号肽序列;NtSKOR1蛋白含有孔形成区(P)及锚定蛋白区(ANK)等典型SKOR类蛋白功能域。(3)进化树分析表明,烟草NtSKOR1蛋白与番茄和马铃薯的SKOR蛋白遗传距离最近,与禾本科植物的SKOR蛋白遗传距离较远。(4)组织特异性表达分析表明,NtSKOR1基因主要在烟草根中表达,其表达模式与拟南芥一致;钾胁迫处理后,NtSKOR1基因呈先降低后升高再降低的表达模式。(5)CRISPR/Cas9敲除NtSKOR1基因,烟草叶片钾含量显著降低,表明NtSKOR1基因是控制烟叶钾离子的关键基因之一。该研究结果为解析烟草钾离子吸收转运的分子机制提供重要依据。     

Micromorphological characterization and label-free quantitation of small rubber particle protein in natural rubber latex

Commercial natural rubber is traditionally supplied by Hevea brasiliensis, but now there is a big energy problem because of the limited resource and increasing demand. Intensive study of key rubber-related substances is urgently needed for further research of in vitro biosynthesis of natural rubber. Natural rubber is biosynthesized on the surface of rubber particles. A membrane protein called small rubber particle protein (SRPP) is a key protein associated closely with rubber biosynthesis; however, SRPP in different plants has been only qualitatively studied, and there are no quantitative reports so far. In this work, H. brasiliensis was chosen as a model plant. The microscopic distribution of SRPP on the rubber particles during the washing process was investigated by transmission electron microscopy–immunogold labeling. A label-free surface plasmon resonance (SPR) immunosensor was developed to quantify SRPP in H. brasiliensis for the first time. The immunosensor was then used to rapidly detect and analyze SRPP in dandelions and prickly lettuce latex samples. The label-free SPR immunosensor can be a desirable tool for rapid quantitation of the membrane protein SRPP, with excellent assay efficiency, high sensitivity, and high specificity. The method lays the foundation for further study of the functional relationship between SRPP and natural rubber content.