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目的:建立并优化重组水疱性口炎病毒(VSV)载体病毒包装体系,以获得稳定高效的重组VSV载体疫苗包装系统。方法:以prVSVΔG-GFP为骨架载体,pBS-N、pBS-P、pBS-G、pBS-L为辅助载体,探索不同的骨架质粒及辅助质粒用量、包装细胞系、重组痘病毒vTF7-3作用时间、转染试剂作用时间等因素对重组VSV载体病毒包装的影响,用光学显微镜及荧光显微镜观测重组VSV载体病毒的包装效果,应用TCID50法测定重组VSV的滴度。结果:重组VSV的包装效率随着辅助质粒或包装质粒总量的减少而降低,293T细胞较BHK21-WI2细胞包装效率更高,适当延长重组痘病毒vTF7-3作用时间或转染试剂作用时间能提高VSV包装效率。优化的病毒包装条件为:选用293T细胞,v TF7-3以5~15 MOI感染细胞1 h或以5 MOI感染细胞1~4 h,总质粒用量为3.67~22μg,转染细胞6~14 h可获得高效包装的rVSVΔG-GFP。采用优化包装条件高效包装了rVSVΔG-ZE病毒。结论:获得了稳定高效的重组VSV包装体系,为重组VSV载体的疫苗研究奠定了基础。 相似文献
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《微生物学免疫学进展》2020,(4)
<正>治疗性疫苗可能是治疗慢性乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染的治疗方案的重要组成部分。作者先前证明,表达HBV中部表面糖蛋白(HBV Middle Surface Glycoprotein,MHBs)的重组野生型水疱性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)在HBV复制小鼠模型中诱导功能性免疫应答。然而,VSV具有一些不良的致病特性,在人类中使用此平台需要进一步的病毒减毒。因此,作者 相似文献
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《微生物学免疫学进展》2015,(5)
<正>水疱性口炎病毒(VSV)被广泛地用于疫苗载体及瘤细胞溶解剂的研究。但出于对安全性的考虑,大大限制了它在人体中的应用。归属于细胞因子的Ⅲ型λ干扰素(IFN-λ)家族与IFN-α/β家族有着相同的信号转导路径,所以也能激发相似的抗病毒活性。不过,IFN-λ是通过一种细胞型特异性方式表达的独特的受体-复合物形式实现信号转导的,正是这个原因限制了它只对上皮屏障组织具有活性, 相似文献
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溶瘤病毒利用肿瘤细胞抗病毒信号通路缺损或病毒受体过表达的特点,实现在其中选择性高复制进而杀伤肿瘤细胞,同时刺激机体产生特异性抗肿瘤免疫反应,是目前肿瘤治疗研究领域的热点。水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)能依赖肿瘤细胞干扰素信号通路的缺陷特异性靶向肿瘤细胞,具有复制高效、广泛组织嗜性、人群低致病性、基因组较小且易操纵等优势,是一种具有发展潜力的溶瘤病毒载体。对水疱性口炎病毒的病毒学特征以及目前基于VSV溶瘤病毒关于提高肿瘤选择性、延长半衰期、增强溶瘤效果的研究进展进行综述,为基于VSV溶瘤制剂的开发提供依据,为肿瘤治疗提供新的策略。 相似文献
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新城疫病毒引起的新城疫是一种常见的禽类传染病。新城疫病毒可诱导感染的宿主产生细胞、体液和黏膜免疫应答,是一种理想的疫苗载体,可表达病毒和细菌的多种蛋白。这些病原体包括禽流感病毒、人副流感病毒3型、犬瘟热病毒、禽巨肺病毒、呼吸道合胞病毒、Nipah病毒、水疱性口炎病毒、狂犬病毒、牛短崭热病毒、传染性支气管炎病毒、重症急性呼吸综合征冠状病毒、埃博拉病毒、马尔堡病毒、肠病毒71型、脊灰病毒、Ⅰ型人类免疫缺陷病毒、传染性法氏囊病毒、诺如病毒、非洲猪瘟病毒、牛疱疹病毒1型、西尼罗病毒、鹅细小病毒、猪圆环病毒Ⅱ型、传染性喉气管炎病毒、鸡毒支原体和博氏疏螺旋体等。本文简要综述重组新城疫病毒的构建及其免疫机制的研制现状。 相似文献
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细菌是人类感染的常见病原体,研制疫苗防治细菌感染是当前的热点研究领域之一。乳杆菌是一种新型的疫苗载体,我们简要综述了乳杆菌介导的破伤风梭菌、肺炎链球菌、幽门螺杆菌、铜绿假单胞菌、霍乱弧菌和炭疽芽孢杆菌等几种细菌疫苗的构建及其作用机制等方面的研制现状。 相似文献
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<正> 重组DNA技术现已发展到基本上能将任何基因明确编码序列,并在各种微生物或动物培养细胞中得以合理水平的表达。目前基因的克隆和表达已不是什么难题,尽管各种蛋白表达的实际水平和提纯中的实际问题差异很大,但可能使所有的蛋白都能大量生产和高度纯化。同时,快速有效地DNA测序以及在基因特定位置上诱生各种突变的方法,使我们较易对广大范围的生物体进行基因组操纵。 虽然病毒表面抗原一直是大多数病毒疫苗研究的主焦点,但是很好地认识其他免疫决定簇的抗体形成,对病毒内部抗原免疫应答的重要性越来越受到重视,尤其对于细胞 相似文献
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关文竹 《微生物学免疫学进展》2018,(3)
正重组水泡性口炎病毒(r VSV)疫苗载体的临床效果的证实,刺激了对其他血清学上不同的水泡性病毒载体用于对抗新兴的病毒性疾病的治疗和/或预防性疫苗载体的研究。这些病毒中的脑炎病毒属甲病毒委内瑞拉马脑炎病毒(VEEV)和东部马脑炎病毒(EEEV),已被证明具有自然疾病暴发的潜力,但是还没有疫情发生时获得许可的疫苗。在这里作者报道,从基因组c DNA中拯救出的重组伊斯法罕 相似文献
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蜥蜴利什曼原虫是一种新型疫苗载体,它已用于研发婴儿利什曼原虫、硕大利什曼原虫、刚地弓形虫、人免疫缺陷病毒1型、人乳头瘤病毒16型、丙型肝炎病毒疫苗。本文就重组蜥蜴利什曼原虫载体疫苗研制现状进行综述。 相似文献
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《微生物学免疫学进展》2014,(2):20-20
<正>以前的研究发现,细胞的Poly(C)结合蛋白2(PCBP2)可以下调水疱性口炎病毒的基因表达。作者的研究表明,水疱性口炎病毒感染可以诱导含细胞RNA结合蛋白的细胞质中颗粒状结构的形成,这些蛋白包括PCBP2、T细胞限制性细胞内抗原1(TIA1)以及TIA1相关性蛋白(TIAR)。通过小干扰RNA(siRNAs)而使TIA1缺失,而非TIAR缺失,而使水疱性口炎病毒的生长和基因表达增强。该病毒诱导的颗粒似乎与经过热休克或氧化应力触发的 相似文献
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今年七、八月份,国际上研究痘苗病毒载体及其在重组疫苗应用方面处于领先地位的两家实验室的负责人,Bernand Moss(美国国立卫生研究院)和Enzo Paoletti(美国纽约州卫生处)先后访问了我国,在北京、上海进行学术交流。 在研究痘苗病毒的转录方面,Moss实验室已建立了能分别检测痘苗病毒早期或晚期转录系统,对目前 相似文献
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由于人们对狂犬病病毒的病原性和免疫原性了解尚不够透彻,因此进一步提高常规疫苗的免疫原性和降低成本还面临着许多问题。例如,干扰素(IFN)在抗狂犬病免疫中有何作用?一旦病毒进入神经系统,抗体是否还具有保护作用?狂犬病毒糖蛋白(Rabies Virus Glycoprotein, R. G)是不是唯一的保护性抗原?暴露前和暴露后两种疫苗的发展前景如何?近年来 相似文献
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门哥病毒(Mengo Virus)的一些与众不同的特点使其成为用于疫苗载体研究的良好候选株,该病毒具有广泛的宿主范围,其中包括啮齿类动物、猪、猴,很可能还有人类,并能特异地在感染细胞的胞浆中表达自己的基因。将其基因组5′端的非编码区部分缺失后,致弱病株可以稳定地复制。本文报道了一种致弱的门哥病毒重组体(vLCMG4),它含有编码淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)核蛋白的一种免疫显性细胞毒T—淋巴细胞的表位基因。经对BALB/c鼠小剂量一次性免疫后,以vLCMG4可使小鼠对致死量的LCMV的攻击产生保护性免疫,并可诱导出一种LCMV特异的CD8~ 细胞毒T淋巴细胞应答。表明重组门哥病毒疫苗是通过诱导细胞免疫应答而发挥其抗传染病的保护作用的。 相似文献
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重组载体疫苗是目前人类免疫缺陷病毒疫苗的研究热点,近几年来不仅在病毒载体和细菌载体选用的种类方面有了新的突破,而且对载体疫苗的组合免疫策略和最佳免疫的选用方面已有全新的认识。本文就用于该病毒重组疫苗的病毒载体(包括痘病毒、α病毒、仙台病毒、甲型流感病毒、腺病毒、狂犬病病毒、疱疹性口炎病毒和单纯疱疹病毒载体)以及细菌载体(包括卡介苗、李斯特单胞茵、沙门茵和布氏杆菌载体)等的研究进展进行综述。 相似文献