有氧运动上调Agtr1a基因甲基化改善高血压肠系膜动脉ACE1-AT1R收缩轴功能

血管紧张素Ⅱ 1A受体(angiotensin Ⅱ type 1A receptor, AT1aR)是Ang Ⅱ的主要受体亚型。AT1aR基因(Agtr1a)启动子区DNA甲基化水平的变化是调控AT1aR表观遗传的重要机制。为明确运动是否通过调节Agtr1a基因启动子区甲基化水平而减弱ACE1-AT1R收缩轴功能,从而起到改善高血压血管功能的作用,本研究选用3月龄自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat, SHR)和正常血压对照组大鼠(Wistar-Kyoto, WKY),随机分为正常血压安静组WKY-C、正常血压有氧运动组WKY-E、高血压安静组SHR-C、高血压有氧运动组SHR-E,各组n=24。12周跑台运动结束后,有氧运动显著减低运动组大鼠血压和体重(P0.05);采用微血管环张力测定技术测定肠系膜动脉对去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)、血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ, Ang Ⅱ)的反应性。结果显示,有氧运动显著减弱高血压大鼠肠系膜动脉对血管收缩因子NE、AngⅡ的收缩反应(P0.05);高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)测定血浆中ACE1-AT1R收缩轴主要活性肽血管紧张素原(angiotensinogen, AGT)、AngⅡ的水平。结果显示,有氧运动显著减弱高血压大鼠肠系膜动脉对血管收缩因子NE、AngⅡ的收缩反应(P0.05);免疫印迹法和q-PCR技术测定肠系膜动脉ACE1、AT1R蛋白质和AT1aR的mRNA水平相对含量。结果显示,有氧运动显著降低高血压大鼠肠系膜动脉ACE1、AT1R蛋白质和AT1aR mRNA水平(P0.05);亚硫酸氢盐测序BSP法测定Agtr1a基因的启动子区甲基化水平。结果显示,有氧运动显著上调高血压大鼠肠系膜动脉Agtr1a基因启动子区甲基化水平(P0.05)。本研究表明,有氧运动通过上调高血压肠系膜动脉Agtr1a基因启动子区甲基化水平,即而减弱RAS系统ACE1-AT1R收缩轴功能,从而抑制高血压血管张力增高,缓解血压增高。     

缺血/缺氧对自发性高血压大鼠肠系膜动脉血管舒缩功能的影响及其可能机制

高血压引起的脑卒中、冠心病等严重并发症的发生,均与组织缺血/缺氧导致的动脉血管痉挛有关。为了研究高血压大鼠肠系膜血管缺血/缺氧后的功能学改变,本研究采用三气培养箱模拟缺血/缺氧条件处理自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)肠系膜动脉血管环,运用敏感的肌张力描记技术测定血管环对不同血管活性物质的反应性。结果显示:与WKY组大鼠相比,SHR组大鼠肠系膜动脉血管对收缩剂KCl和苯肾上腺素(phenylephrine,PE)的反应性明显提高,对内皮依赖的血管舒张剂乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)的反应性显著降低;而与SHR组和急性缺血/缺氧对照(WKY+H)组相比较,高血压合并急性缺血/缺氧(SHR+H)组对KCl和PE的收缩反应显著性增加,对ACh的舒张反应明显降低。N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)存在时,SHR+H组和SHR组血管环对ACh的舒张反应没有明显变化,而WKY组血管对ACh的舒张反应显著降低。与SHR组相比,SHR+H组CaCl2诱导的钙依赖性收缩曲线明显左移。在无钙K-H液中,SHR+H组PE和咖啡因(caffeine)诱导的...     

11-羰基-β-乙酰乳香酸抑制自发性高血压大鼠血管重构研究

目的:观察11-羰基-β-乙酰乳香酸(AKBA)对高血压血管重构的抑制作用。方法:自发性高血压大鼠(SHR)随机分为模型组(SHR),20 mg/kg AKBA低剂量组(AKBA-L),40 mg/kg AKBA高剂量组(AKBA-H)和20 mg/kg替米沙坦组(Telmi),另设Wistar-Kyoto(WKY)空白对照组。各组大鼠分别灌胃给予8周相应药物和蒸馏水。每周监测大鼠收缩压;检测大鼠血液一氧化氮(NO)和血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)水平;评估整体炎性反应和氧化应激水平;苏木精-伊红染色观察血管重构情况;马森染色观察血管胶原沉积情况。结果:8周给药期间,SHR血压持续升高,替米沙坦显著降低血压,但AKBA未显示出明显的血压调节作用。与SHR组相比,AKBA和替米沙坦都有效地减少了血管压力,减少Ang Ⅱ分泌,增加NO的产生(P0.05);其次有效地降低炎性反应和氧化应激,显著改善机体肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、过氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和丙二醛(MDA)的表达水平(P0.05)。除此之外,相比SHR组,AKBA显著抑制血管重构,降低血管厚度,横切面积和血管厚度/血管内径比值(P0.05),减少血管胶原沉积(P0.05)。结论:AKBA能有效缓解血管压力和氧化应激,减少胶原沉积,从而有效改善血管重构。     

雷米普利对自发性高血压大鼠脑动脉缝隙连接蛋白43表达的影响

本文旨在探讨血管紧张素转换酶抑制剂雷米普利(Ramipril)是否通过调节脑动脉血管细胞缝隙连接蛋白43 (connexin43, Cx43)的表达发挥其降压及保护脑动脉的作用。Wistar-Kyoto (WKY)和自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)随机分为4组:WKY组、WKY+Ramipril组、SHR组、SHR+Ramipril组(n=8)。运用无创尾动脉测压仪测量收缩压;采用苏木素-伊红染色观察脑动脉病理学改变;应用压力肌动图技术检测各组脑动脉血管收缩率;应用免疫荧光和免疫组织化学技术分析脑动脉上Cx43的分布及表达;采用real-time PCR和Western blot技术分别检测脑动脉上Cx43 mRNA及蛋白表达。结果显示:(1) SHR组收缩压显著高于WKY组(P 0.01, n=8);SHR+Ramipril组收缩压明显低于SHR组(P 0.01, n=8)。(2)相比于WKY组,SHR组脑动脉管壁增厚明显(P 0.01, n=8),而SHR+Ramipril组相比于SHR组,动脉管壁厚度明显减少。(3) SHR组脑动脉收缩率高于WKY组(P 0.05, n=8);SHR+Ramipril组脑动脉收缩率低于SHR组(P 0.05, n=8)。应用2-APB (Cx43非特异性阻断剂)或Gap26 (Cx43特异性阻断剂)预孵育后,SHR+Ramipril组动脉收缩率显著下降(P 0.05, n=8);给予Cx43非特异性激动剂AAP10预孵育后,SHR+Ramipril组动脉收缩率显著升高(P 0.05, n=8)。(4) SHR组脑动脉上Cx43 mRNA及蛋白表达水平高于WKY组(P 0.05, n=8);SHR+Ramipril组脑动脉上Cx43 mRNA及蛋白表达水平明显低于SHR组(P 0.05, n=8)。以上结果提示,雷米普利能够下调SHR脑动脉血管细胞间Cx43 mRNA和蛋白的表达,降低血压,改善高血压诱发的脑动脉重塑以及血管功能障碍。     

miR-506与PI3K/AKT通路在自发性高血压大鼠心脏重构中的作用

目的:探讨mi R-506和PI3K/AKT信号通路在自发性高血压大鼠心脏重构中的作用。方法:将12只雄性自发性高血压大鼠(Spontaneous Hypertension Rat, SHR)随机分为2组,每组6只。分别为SHR模型组和治疗组(卡托普利,30 mg·kg~(-1)),6只健康WKY大鼠作为空白对照组。SHR模型组和空白对照组灌胃等体积生理盐水,连续给药8周,采用尾动脉测压法测定给药前后各组大鼠血压,采用qRT-PCR法检测各组大鼠心肌miR-506表达量,并检测大鼠心肌组织中SOD和GPx mRNA表达水平,免疫印迹检测大鼠心肌中p-PI3K和p-AKT的蛋白表达量。结果:SHR模型组血压为(184.79±3.35)mmHg,与空白对照组比较显著升高(P0.05),治疗组血压为(133.57±1.43)mm Hg,与SHR模型组相比均显著降低(P0.05)。SHR模型组大鼠心肌中mi R-506、SOD、GPx的RNA相对表达量分别为(0.36±0.05)、(0.27±0.04)和(0.32±0.02),与空白对照组比较显著降低(P0.05),而p-PI3K、p-AKT蛋白水平显著降低(P0.05),与SHR模型组比较,治疗组大鼠心肌中mi R-506以及SOD、GPx的RNA水平显著升高(P0.05),p-PI3K、p-AKT蛋白水平显著升高(P0.05)。结论:在卡托普利治疗高血压的过程中,mi R-506可能通过抑制PI3K/AKT信号通路提高机体的抗氧化能力促进SHR心脏重塑。     

自发性高血压大鼠血管对α_1肾上腺素受体自身抗体的血管收缩作用敏感性增强

自身免疫学机制在高血压的发生发展中具有不可忽视的作用.本研究组的前期研究表明,高血压患者血清中存在高水平的α1肾上腺素受体自身抗体(α1-AA),并对正常大鼠具有α1-AR激动剂样缩血管效应.本研究利用血管环张力测定技术观察并比较该抗体对自发性高血压大鼠(SHR)和Wistar-Kyoto(WKY)大鼠胸主动脉的收缩作用,分别采用酶联免疫吸附测定、免疫组化和免疫印迹技术观察主动脉中硝基酪氨酸和诱导性一氧化氮合酶(iNOS)的表达情况.结果表明,自发性高血压大鼠胸主动脉对去氧肾上腺素(α1-AR特异性激动剂)与α1-AA(1 nmol/L~10μmol/L)的缩血管作用明显增强(P0.05);去除内皮或利用非特异性一氧化氮合酶阻断剂(L-NAME)后,α1-AA的缩血管作用明显增强(P0.05).iNOS特异性阻断剂1400W(10μmol/L)可以削弱上述WKY大鼠胸主动脉收缩的增强作用,而在SHR未观察到.SHR胸主动脉组织中硝基酪氨酸和iNOS的蛋白表达水平明显高于WKY大鼠.本研究结果表明,SHR对α1-AA的缩血管反应明显增强,这一变化与血管内皮功能障碍以及NO生物利用率降低有关,提示α1-AR自身免疫在高血压的发病机制和控制中,尤其是对α1-AA阳性的高血压患者发挥重要作用.     

玉米肽联合运动对肥胖大鼠肝组织中ATGL和TNF-α影响

目的:探讨玉米肽结合有氧运动对肥胖大鼠体脂肪和肝细胞甘油三酯脂肪酶(ATGL)及肿瘤坏死因子α(TNF-α的)影响。方法:以32只肥胖雄性SD大鼠为实验对象,随机分为安静对照组(CON)、玉米肽组(DCP)、运动组(DEX)和玉米肽运动组(DCE)(n=8)。玉米肽组和玉米肽运动组给予玉米肽饲料,其它各组给予普通饲料。运动组和玉米肽运动组进行有氧运动,干预4周后处死取材。剥离腹腔脂肪组织和肝脏,蛋白印迹技术检测肝组织ATGL和TNF-α蛋白的表达。结果:干预4周后,与肥胖对照组相比,玉米肽运动组大鼠体重以及脂肪系数显著下降(P0.05,P0.01),且显著低于单独玉米肽补充组(P0.05);肝细胞ATGL蛋白表达显示,玉米肽运动组均高于其它各组,且与对照组有显著性差异(P0.05);玉米肽运动组肝细胞TNF-α蛋白结果均低于其它组,且显著低于对照组(P0.05)。结论:玉米肽结合有氧运动能有效地降低肥胖大鼠的体重以及脂肪含量,可能是玉米肽与有氧运动的协同作用,调节了肝脏ATGL和TNF-α的表达,促进脂代谢有关。     

高脂高糖饮食对自发性高血压大鼠腹主动脉舒张功能及VCAM-1和ICAM-1mRNA表达的影响

目的:探讨高脂高糖饮食对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)腹主动脉血管舒张功能及血管间粘附分子-1 (vascular adhesion molecule-1,VCAM-1)和细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)mRNA表达的影响.方法:将24只6周龄雄性SHR大鼠随机分成高脂高糖饲料组(实验组,n=12)和普通饲料组(对照组,n=12).每3周测量其空腹体重,12周后处死大鼠,分别取两组动物的腹主动脉做离体血管环对乙酰胆碱(Acetylcholine,Ach)的舒张功能实验,并提取主动脉总RNA,通过实时定量RT-PCR实验检测其VCAM-1和ICAM-1 mRNA的表达.结果:从第6周开始,实验组SHR的体重较对照组明显增加(P＜0.01).12周时,实验组血管环对Ach的最大舒张率较对照组明显降低(69.20± 5.25 vs.79.10± 3.84,P＜0.01);实验组动脉VCAM-1 mRNA的相对表达量是对照组的1.97倍,差异有统计学意义(197.91±22.16 vs.100.33±11.44,P＜0.01),而两组ICAM-1mRNA表达的比较差异无统计学意义(97.75±8.05 vs.100.25±10.83,P＞0.05).结论:高脂高糖饮食能致SHR腹主动脉血管舒张功能明显降低,可能与其显著增加其主动脉VCAM-1 mRNA的表达有关.     

有氧运动抑制自发性高血压大鼠心肌中HMGB1/TLR4炎症通路

目的:探讨有氧运动对自发性高血压大鼠心肌中高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1 protein, HMGB1)/Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)炎症通路的影响。方法:成年雄性大鼠分为三组:同源正常血压大鼠(Wistar-Kyoto rats,WKY),自发性高血压大鼠(spontaneoully hypertensive rat, SHR),自发性高血压大鼠运动组(SHR+exercise,SHR+EX)。运动为中等强度跑台运动,自制跑台,倾斜角设置为10度,运动强度逐步增强,持续12周。尾动脉检测血压,收集左心室,Masson染色检测心肌组织纤维化水平,RT-PCR法检测心肌中纤维化相关基因的m RNA水平,ELISA法检测炎症因子白介素6(Interleukin 6, IL-6)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha, TNF-α)的蛋白水平,Western blot法检测HMGB1和TLR4的蛋白表达。结果:有氧运动可以明显降低SHR大鼠心肌中HMGB1(P0.05)和TLR4(P0.05)的蛋白表达以及炎症因子IL-6(P0.05)和TNF-α(P0.05)的蛋白水平。经过的有氧运动之后,SHR大鼠的体重(P0.05)、收缩压(P0.05)、舒张压明显降低(P0.05);心肌纤维化水平和心肌中I型胶原(P0.05)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β,P0.05)、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA,P0.05)的m RNA水平出现显著下降。结论:有氧运动可抑制自发性高血压大鼠心肌中HMGB1/TLR4炎症通路。     

ERK1/2参与自发性高血压大鼠离体血管环对apelin-13舒张反应性降低作用

研究自发性高血压大鼠(spontanously hypertensive rat,SHR)离体血管环对G蛋白偶联受体APJ的内源性配体apelin-13的血管收缩与舒张反应及其与一氧化氮(NO)和ERK1/2通路关系．采用离体血管环体外灌流方法用Power-Lab生物信息采集仪检测血管环的张力．实验分组如下：新福林(Phenylephrine,PE)组,乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)组,apelin-13组,apelin-13 + PE组,apelin-13 + Ach组,PD98059(ERK1/2抑制剂) + PE组,PD98059 + Ach组,LNNA(L-nitro-arginine,硝基左旋精氨酸,一氧化氮合酶抑制剂) + PE组,LNNA+Ach组,apelin-13(预孵育) + PD98059 + PE组,apelin-13(预孵育)+PD98059+ Ach组,apelin-13(预孵育) + LNNA + PE组和apelin-13(预孵育) + LNNA + Ach组,以WKY大鼠血管环为对照组．培养大鼠血管平滑肌细胞,Western blot检测ERK1/2蛋白表达．结果显示：a．apelin-13对于有内皮的血管表现出浓度依赖性舒张作用,血管舒张百分比SHR < WKY大鼠,而对于去除内皮血管,apelin-13则表现出收缩血管的作用,且收缩张力SHR>WKY大鼠,apelin-13预孵育,能减少SHR和WKY大鼠血管对新福林的缩血管反应性,增加对乙酰胆碱的舒张反应性;b．NOS抑制剂LNNA阻断NO形成后,血管环对apelin-13的舒张反应明显抑制,且SHR组较WKY组对apelin的舒张反应减少更明显,提示apelin-13的舒血管效应至少部分依赖NO通路,而SHR高血压大鼠NO通路障碍减弱了apelin对血管的舒张作用;c．ERK1/2抑制剂PD98059预孵育后血管环对apelin-13表现出浓度依赖性的收缩,与去除内皮后apelin-13的收缩血管效应趋势一致,血管收缩张力SHR＞WKY大鼠,PD98059逆转了apelin-13引起的血管舒张效应;d．Apelin-13促大鼠VSMCs ERK1/2磷酸化增加并呈剂量依赖性和时间依赖性,ERK1/2抑制剂PD98059可以减少apelin-13诱导ERK1/2的磷酸化．结果表明,自发性高血压大鼠离体血管环对apelin-13舒张反应性降低, NO通路和ERK1/2通路介导了apelin-13的舒张血管作用．     

TGF-β1在自发性高血压大鼠肾损害中作用的研究

目的研究转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)在自发性高血压大鼠(spontaneously hypertertensive rat,SHR)肾脏的表达及其与肾损害的关系.方法以同龄雄性正常血压(Wistar Kyoto,WKY)和自发性高血压大鼠为研究对象,分别于12周龄和24周龄时检测两种大鼠尾动脉血压、肾功能及β2微球蛋白(β2-MG),并采用免疫组织化学的方法检测TGF-β1在肾脏中的表达.结果同WKY组比较, SHR组24周时β2-MG显著增高(P<0.01);而且尾动脉血压显著性增高;而尿素氮和血肌酐的差异无显著性(P>0.01).TGF-β1在WKY组肾小管的表达无或极微量;在SHR组的肾小球有少量表达,但在肾小管的表达显著,且随高血压病程的进展, TGF-β1的表达显著性增加(P<0.01).结论 TGF-β1在自发性高血压大鼠肾小管的表达显著增加,与肾损害的各项指标呈正相关.     

Wnt信号通路抑制参与运动训练对自发性高血压大鼠心脏的保护作用

本文旨在探讨低中强度运动训练对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat, SHR)心脏的保护作用,以及Wnt信号通路在其中所起的作用。SHR和正常血压WKY (Wistar-Kyoto)大鼠随机分为高血压对照组(SHR-S)、高血压运动组(SHR-E)、正常血压对照组(WKY-S)、正常血压运动组(WKY-E)和高血压运动+Wnt激动剂组(SHR-E-Wnt)。运动组大鼠进行16周低中强度游泳运动,SHR-E-Wnt组大鼠在游泳结束前4周尾静脉注射Wnt通路激动剂Wnt agonist 1,每周测定大鼠动脉血压。运动结束后,超声心动图测定左心室壁厚度和射血功能、HE染色和Masson染色观察心肌结构和胶原纤维变化,实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot分别检测左心室心肌β-连环蛋白(β-catenin)和DVL-1 (Dishevelled-1) mRNA和蛋白表达。结果显示：与WKY-S大鼠相比较,SHR-S大鼠体重下降(P <0.05),动脉血压明显升高(P <0.01),心脏重量和室壁厚度明显增加(P <0.01...     

慢性缺氧对自发性高血压大鼠血液动力学和血管反应性的影响

本研究观察了鼠龄10周的自发性高血压大鼠(SHR)在慢性缺氧条件下(模拟海拔5000m,15d)体动脉压(SBP)、平均肺动脉压(MPAP)、左、右心室收缩指数(LVIC、RVIC)和舒张指数(LVIR、RVIR)以及血管反应性的变化。结果表明,慢性缺氧明显阻抑SHR大鼠SBP升高(P<0.05),但使SHR大鼠MPAP升高(P<0.001)。慢性缺氧还可增大SHR大鼠LVIC和LVIR,增强SHR大鼠胸主动脉对乙酰胆碱(ACh)的舒张反应,减弱其对5-羟色胺(5-HT)的收缩反应。SHR大鼠肺动脉对ACh和5-HT的反应则与主动脉相反。实验结果提示,慢性缺氧阻抑SHR大鼠血压升高与血管反应性的改变有关。     

大黄素增加BK_(Ca)通道β_1亚基表达介导自发性高血压大鼠脑基底动脉舒张

本文旨在研究大黄素干预后自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)脑基底动脉平滑肌细胞BKCa通道电生理特性和表达的变化。在使用大黄素干预处理前后,用尾动脉测压仪观察血压变化,用全细胞膜片钳记录技术观察SHR脑基底动脉平滑肌细胞BKCa通道电流的变化,用免疫组织化学染色和Western Blot观察平滑肌细胞BKCa通道表达变化。结果显示,大黄素干预后,SHR血压由(223±16)mmHg显著降低至(127±12)mmHg(P0.01),与Wistar大鼠相比没有统计学差异。大黄素显著增加SHR平滑肌细胞外向电流(P0.05),该增强作用可被BKCa通道特异性阻断剂IbTX所阻断。大黄素干预后SHR基底动脉平滑肌BKCa通道β1亚基表达明显上调(P0.01)。以上结果提示,大黄素可能通过增加BKCa通道β1亚基表达,增强BKCa通道介导的外向电流,从而发挥舒张SHR脑基底动脉的作用。     

怀菊花总黄酮对自发性高血压大鼠的降压作用及机制研究

研究怀菊花总黄酮对自发性高血压大鼠(SHR)的降压作用及其机制。将SHR随机分为模型组、怀菊花总黄酮高、中、低剂量组和依那普利阳性对照组。采用无创血压计测定血压及心率,采用放射免疫法测定血浆内皮素(ET)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(ALD)、肾素活性(PRA)含量。结果表明怀菊花总黄酮能够降低SHR的血压(P0.01)、心率(P0.05)、血浆ET(P0.05)、AngⅡ(P0.01)、ALD(P0.01)、PRA(P0.01),其降压机制可能与改善内皮功能和抑制肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)活性有关。     

BKCa增龄变化及其与血压的相关性

目的：探讨大电导钙激活钾通道（BKCa,MaxiK）增龄变化及其与血压水平的关系。方法：选取雄性9、15、21、27、33周龄自发高血压大鼠（SHR）及对照组正常血压大鼠（WKY）,每周龄两类大鼠各4只;测定各周龄SHR和WKY的腹主动脉血压;分离肠系膜小动脉及其血管平滑肌细胞;利用膜片钳全细胞模式记录肠系膜小动脉VSMCs钾电流、用四乙胺（TEA）阻断BKCa后的电流、膜电容,以计算BKCa电流值、BKCa电流密度;探讨BKCa电流密度增龄变化与血压的关系。结果：SHR肠系膜小动脉血管平滑肌细胞（VSMCs）BKCa电流密度随增龄降低,而WKY随增龄的变化无统计学意义（P〉0．05）;SHR肠系膜小动脉VSMCs BKCa电流密度与腹主动脉MABP高度相关（r=-0．7174）,而WKY肠系膜小动脉VSMCs BKCa电流密度与腹主动脉MABP低度相关（r=-0．4832）。结论：BKCa电流和电流密度随增龄衰减,血压水平是衰减程度的重要反应;BKCa电流密度与血压水平高度相关。     

黄芪对高血压大鼠血管重构中内质网应激反应的影响

目的研究黄芪对高血压大鼠血管重构中内质网应激反应(ERS)的影响,并探讨其血管保护的分子机制。方法将140只大鼠分为对照组、模型组、干预组。采用腹主动脉狭窄术建立高血压大鼠模型,干预组大鼠腹腔注射黄芪注射液8 g/(kg·d)。各组术后1、2、4、6周时采用鼠尾动脉测压法测量大鼠血压,测量血管肌层厚度、Western blot检测CRT和caspase-12的表达、TUNEL法检测血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡率。结果模型组术后VSMC形态改变,血压、动脉血管壁肌层厚度和VSMC凋亡率可时间依赖性增大,ERS分子CRT在术后1、2周表达显著升高,4、6周表达降低,而caspase-12分子2周以后表达才升高,且随时间推迟,这种高表达越显著。黄芪干预对比模型组,VSMC形态有一定改善,血压、血管壁肌层厚度和VSMC凋亡率均显著降低,6周时降低幅度最大,同时黄芪能抑制CRT的早期高表达,能抑制caspase-12的高表达,这种抑制作用随着时间的推迟越明显。结论黄芪对高血压大鼠有一定降压作用,可改善血管重构,其机制可能与其调节ERS保护性和促凋亡因子有关。     

n-3PUFA对高脂SHR 大鼠血压及血浆游离脂肪酸谱的影响

目的:观察高饱和脂肪酸及n-3多不饱和脂肪酸饮食后对自发性高血压大鼠血压、静息心率、体重、血脂、血糖及游离脂肪酸谱的影响。方法:选择8周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)30只和同龄对照大鼠(WKY)30只,随机分为6组:SHR、WKY普通饲料组各10只,SHR、WKY高脂组各10只,SHR、WKY高脂加鱼油饮食组各10只,持续喂养至16周龄。干预期间每两周测定血压和体重,干预前后测定静息心率、血脂、血糖及血浆游离脂肪酸谱。结果:(1)血压和静息心率的变化:SHR大鼠高脂饮食组较普食组血压水平显著性增高,而高脂加鱼油饮食组较高脂饮食组血压水平显著性减低;WKY大鼠高脂饮食组较普食组血压水平显著性增高,而高脂加鱼油饮食组较高脂饮食组血压水平显著性减低;SHR大鼠高脂饮食组较普食组静息心率显著性增高(P=0.007),而高脂加鱼油饮食组较高脂饮食组静息心率有下降趋势,但差异无显著性(P=0.125),WKY大鼠静息心率各组间无明显差异。(2)血浆游离脂肪酸谱:与WKY大鼠比较,SHR大鼠中亚麻酸(Linolenic acid,ALA)、花生四烯酸(Linoleic Acid,AA)与n-6多不饱和脂肪酸(n-6 polyunsaturated fatty acids,n-6PUFA含量增高,高脂饮食增加了饱和脂肪酸(Saturated fatty acid,SFA),有显著差异(P0.05),高脂鱼油组二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA)及二十碳五烯酸(Docosapentaenoic acid,EPA)增加导致n-3多不饱和脂肪酸(n-3 polyunsaturated fatty acids,n-3PUFA)含量增加(P0.05),SHR大鼠高脂鱼油组亚油酸(Linoleic Acid,LA)、AA含量减低(P0.05)。结论:膳食补充n-3PUFA可能通过影响交感神经活性和血浆脂肪酸谱的组成而改善高饱和脂肪酸所致SHR大鼠的血压升高。     

微小RNA在自发性高血压大鼠主动脉的差异表达

微小RNAs(microRNAs,miRNAs)是一类基因组编码、非蛋白质编码的小RNA,在转录后水平负性调节靶基因表达.本研究探讨miRNAs在自发性高血压大(spontaneously hypertensive rats,SHR)主动脉的表达特征及其与高血压的关系.取4、8、16和24周龄雄性SHR大鼠及同龄正常血压对照(Wistar-Kyoto,WKY)大鼠.MiRanda、TargetScan和PicTar用于候选miRNAs及靶基因预测分析.通过实时定量RT-PCR检测大鼠主动脉miR-1、miR-133a、miR-155及miR-208的表达,并进一步通过实时定量RT-PCR检测呈差异表达的miR-155和miR-208的预测靶基因mRNA表达.结果显示,SHR大鼠主动脉miR-155表达在4、8、24周时与同龄WKY大鼠无显著差异,但在16周时明显低于同龄WKY大鼠(P<0.05),且大鼠主动脉miR-155表达量与血压呈负相关(r=-0.525,P<0.05).MiR-208表达在4周龄时最高,随年龄增长明显下降(P<0.05),其表达水平与血压和年龄呈负相关(r=-0.400,P<0.05;r=-0.684,P<0.0001),但在SHR和WKY大鼠之间无显著差异.miR-1和miR-133a在各年龄组SHR和WKY大鼠间未呈现差异表达.MiR-155和miR-208表达与相应预测靶基因mRNA表达无显著负相关性.以上结果表明,miR-155表达在成年SHR大鼠主动脉明显低于WKY,并与血压呈负相关,提示miR-155可能参与高血压的发生发展,主动脉miR-155表达异常可能是SHR大鼠血压升高的原因之一.大鼠主动脉miR-208表达在幼年时最高,随年龄增长而明显下降,提示其可能与血管发育有关.     

4周电针干预对大鼠白色脂肪“棕色化”的影响及其机制*

目的: 以有氧运动作为参照,观察4周电针干预对大鼠白色脂肪“棕色化”的影响,探究其可能的分子机制。方法: 将24只8周龄雄性SD大鼠随机分为安静对照组(Sed组)、有氧运动组(Exe组)、电针组(ElA组),每组8只,每组分别干预4周。Exe组采用65%最大摄氧量强度跑台运动,1 h/d,每周6 d。ElA组采用电针刺激“足三里”和“天枢”穴,20 min/d,每周6 d,每周记录大鼠体重。4周干预结束后,心尖和腹主动脉取血处死,分离双侧腓肠肌、肾周和附睾周围白色脂肪组织并称湿重,检测大鼠体脂含量和血清Irisin的水平,检测大鼠腓肠肌中AMPKα、p-AMPKα、PGC-1α、FNDC5和脂肪组织中UCP1蛋白的表达,检测大鼠棕色脂肪组织脂滴的形态。结果: ①与Sed组相比,从第2周开始,Exe、ElA组大鼠体重的增长明显降低,4周后Exe、ElA组大鼠体重和体脂含量明显降低(P＜0.01),而Exe、ElA组之间未见显著差异(P＞0.05)。②4周干预后,ElA组和Exe组大鼠白色脂肪湿重均明显降低(P＜0.05或P＜0.01)。③Exe和ElA组大鼠的血清Irisin水平明显升高(P＜0.05),Exe、ElA组腓肠肌p-AMPKα/AMPKα、PGC-1α、FNDC5蛋白表达和白色脂肪、棕色脂肪组织中UCP1蛋白表达均明显升高(P＜0.05)。④Exe、ElA组大鼠白色和棕色脂肪组织中脂滴面积明显降低(P＜0.01)。结论: 4周的电针干预,可有效控制大鼠体重,诱导白色脂肪“棕色化”,具有与4周有氧运动近似的减脂效果,其可能是通过AMPKα-PGC-1α-FNDC5-Irisin信号通路,释放Irisin,进而与脂肪组织“crosstalk”,上调UCP1的表达,诱导白色脂肪组织“棕色化”。