脱脂沙棘籽制备活性多肽的研究

本文比较了用巯基蛋白酶酶解沙棘籽蛋白所得酶解多肽对乙醇脱氢酶(ADH)的激活率效果。结果表明,木瓜蛋白酶的酶解产物对ADH的激活效果最好。该活性多肽的最佳制备条件为,酶解p H为6.5,温度为50℃,酶解时间3.5 h,加酶量为4 000 U/g。体外实验表明,木瓜蛋白酶水解产物中ADH激活率较高的为500~2000 Da的多肽,达57.52%,与未分级的酶解液相比,活性提高显著(P0.01)。分子量在2000~3000 Da的沙棘多肽也具有一定的ADH激活率,为35.09%,说明具有ADH激活率的活性多肽分子量为500~3000 Da。木瓜蛋白酶酶解液经膜分离处理后,收集得到的500~3000 Da的多肽组成占总肽及氨基酸质量的66.50%。     

风味酶控结合乳化修饰技术制备多肽脱苦豆乳（粉）工艺

基于传统湿法制备豆乳（粉）工艺基础,采用连续密闭蒸煮浓缩、麦芽糊精/β-环糊精乳化及风味蛋白酶低限制性酶解风味修饰处理技术制备多肽脱苦强化型豆乳（粉）,研究风味修饰联控技术制备工艺对豆乳（粉）中多肽得率、苦味值的影响,并确定最佳加工工艺。采用响应面优化分析法对低酶—风味修饰联控制备多肽脱苦豆乳（粉）工艺进行优化,确定最佳工艺参数为风味蛋白酶添加量0.5%、限制性酶解时间18 min、麦芽糊精与β-环糊精添加量比值为2.5∶1、麦芽糊精与β-环糊精总添加量为16%,此条件下多肽得率达到最高为10.21%,并消除豆乳苦味。通过各理化性质发现,风味蛋白酶酶解修饰与麦芽糊精/β-环糊精乳化修饰具有协同作用。     

蛋白鲜味肽调味品生产工艺初探

蛋白二次酶解技术生产蛋白鲜味肽能够在保有传统鲜味的同时,有效提高蛋白质得率,利于人体吸收。试验根据不同水产品的呈味特点,选择沙丁鱼和对虾为实验原料,利用复合蛋白酶对原料进行初步定向酶解并超滤,制备具有独特风味的短肽。采用响应面法优化酶解水产蛋白工艺,水解度作响应值,以探究酶添加量、酶解温度、时间及pH值对鲜味肽得率的影响,得到初步酶解制备鲜味肽最优工艺条件：复合蛋白酶加酶量3.3%、温度57℃、酶解时间3.5h、pH为7.1。     

双酶法制备螺旋藻多肽的工艺研究

选用碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶结合的双酶法对螺旋藻蛋白进行水解。其中,对木瓜蛋白酶水解螺旋藻蛋白的工艺进行优化。以水解度为指标,研究了酶解时间、酶与底物比、pH和酶解温度4种因素对酶解反应的影响。在此基础上设计了3因素(加酶量、酶解温度和pH)3水平的响应面试验。结果表明碱性蛋白酶水解螺旋藻蛋白的最佳酶解条件为:加酶量4300 U/g,pH 7.0,酶解温度55℃,酶解时间160 min;木瓜蛋白酶的最佳酶解条件为:酶底比为4.5%,酶解温度60℃,pH 6.5,酶解时间210 min。利用碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶结合的双酶法制得的多肽水解度可达32.90%,与单酶法相比,水解度明显提高。     

降胆固醇活性花生多肽制备工艺的研究

以冷榨花生粕为原料,酶解制备具有降胆固醇活性的花生多肽。以体外结合胆酸盐的能力为指标,考察了酶的种类、温度、pH值、加酶量、酶解时间等因素对花生多肽降胆固醇活性的影响,确定最优蛋白酶为木瓜蛋白酶,通过正交试验的方法,确定了酶解花生粕制备降胆固醇活性花生多肽的最佳工艺条件为：温度50℃、pH 7.0、加酶量4 000 U/g底物、酶解时间4 h。     

限制性酶解-钙融合制备高钙豆粉的工艺研究

以传统湿法工艺技术制备豆粉为基础,利用木瓜蛋白酶和风味蛋白酶复合酶对豆乳进行酶解处理并混入CaCO3以提高豆乳粉的钙融合性。在单因素试验基础上,采用响应面优化分析法对限制性酶解—钙融合制备高钙豆乳粉工艺进行优化,确定最优限制性酶解—钙融合工艺参数为酶解时间156 h、酶添加量159%、均质压力2918 MPa、均质时间955 min,此条件下蛋白质分散指数为8002%、可溶性钙结合量为185 mg/g。     

脱脂沙棘籽制备活性多肽的研究北大核心CSCD

本文比较了用巯基蛋白酶酶解沙棘籽蛋白所得酶解多肽对乙醇脱氢酶（ADH）的激活率效果。结果表明,木瓜蛋白酶的酶解产物对ADH的激活效果最好。该活性多肽的最佳制备条件为,酶解pH为6．5,温度为50℃,酶解时间3．5h,加酶量为4000U／g。体外实验表明,木瓜蛋白酶水解产物中ADH激活率较高的为500—2000Da的多肽,达57．52％,与未分级的酶解液相比,活性提高显著（P〈0．01）。分子量在2000～3000Da的沙棘多肽也具有一定的ADH激活率,为35．09％,说明具有ADH激活率的活性多肽分子量为500～3000Da。木瓜蛋白酶酶解液经膜分离处理后,收集得到的500—3000Da的多肽组成占总肽及氨基酸质量的66．50％。     

米糠蛋白抗氧化活性肽的制备

以水解度(DH％)和对DPPH自由基清除率为指标,筛选出制备米糠蛋白抗氧化活性肽的最适蛋白酶.研究最适蛋白酶的酶解条件,探讨底物浓度、蛋白酶的加入量、pH值、酶解时间等因素对水解度(DH％)和DPPH自由基清除率的影响;在单因素基础上采用Box-Behnken响应曲面中心组合设计法,对酶解米糠蛋白的工艺进行优化.试验结果表明,在加酶量13970.82 U/g,时间3.05h,底物浓度4.97％的水解条件下,米糠蛋白的水解度能够达到23.67％,活性肽对DPPH自由基清除率达到64.26％.     

扇贝边蛋白资源酶法水解条件的优化

以扇贝边为原料,首先分析了其营养成分,结果表明,扇贝边干物质中蛋白质的含量为67.6%。然后用ASI,398枯草杆菌中性蛋白酶通过液体发酵对扇贝边蛋白资源进行了酶解条件优化,实验了酶解温度、酶的用量、酶水解时间和底物浓度等4因素对酶解效率的影响,确定了扇贝边的最佳水解条件:即酶解温度为50℃,蛋白酶的加入量为0.5%,即250U·ml^-1,底物浓度为6%,酶解时间为3h。     

鲜鹿茸酶降解过程的研究

研究了胰蛋白酶、Alcalase 碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶对鲜鹿茸的降解过程,确定了优化降解工艺条件,具有一定的理论意义和实践价值。确定了Alcalase 碱性蛋白酶的降解效率最高,通过单因素实验确定了降解过程中底物浓度、酶解温度、pH值和酶解时间为影响鲜鹿茸降解率的主要因素。正交试验确定最佳的酶解条件为:底物浓度0.08 g/ml、酶解温度65 ℃、pH 9.0、酶解时间6.0 h。在此条件下,鲜鹿茸降解率高达92.6%,氨基酸产品收率达12.1%。     

pH渐变条件下多酶分步连续酶解工艺制备鲟鱼硫酸软骨素与胶原蛋白肽

pH渐变条件下采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶分步连续酶解鲟鱼软骨,同时制备鲟鱼硫酸软骨素和胶原蛋白肽。分别通过温度、酶解时间、酶用量3个单因素实验,研究其对连续酶解效果的影响。综合分析得出最佳条件：碱性蛋白酶酶解温度为45℃,酶解时间为2 h,酶用量为100 U·g^-1底物;木瓜蛋白酶的酶解温度为50℃,酶解时间为2 h,酶用量为50 U·g^-1底物;菠萝蛋白酶的酶解温度为50℃,酶解时间为2 h,酶用量为30 U·g^-1底物。该工艺条件下制备的鲟鱼硫酸软骨素提取率为85%,纯度93%,胶原蛋白肽的提取率为82%,纯度为90%。研究建立的pH渐变条件下多酶分步连续酶解工艺,产率与纯度较国内现有生产方法均有提高,且碱液使用量减少,避免了有机溶剂的引入,从而可以降低生产成本,减轻环境污染负担。     

鸦胆子球蛋白酶解物对黑色素瘤细胞毒性研究

目的:优化鸦胆子球蛋白提取工艺,采用酶解法获得多肽组分,并对其细胞毒性进行研究。方法:运用L_9(3~3)表设计正交试验,筛选球蛋白提取最佳工艺参数,等电点法浓缩蛋白;采用不同蛋白酶水解球蛋白,经超滤(MWCO=3 kDa)后收集滤过液,MTT法考察小分子量酶解物对鼠源黑色素瘤B16的细胞毒性。结果:球蛋白最佳工艺参数为:NaCl浓度5%、提取时间1.5 h、固液比1:12;胃蛋白酶为最优蛋白酶源,其水解产物(≤3 kDa)对B16细胞具有显著的细胞毒性,72 h时,IC_(50)为1.08μg·mL~(-1)。结论:鸦胆子球蛋白源多肽组分具有明确的体外细胞毒性,有望进一步从中获得高活性抗肿瘤肽。     

酶辅助提取莲房原花青素工艺及其抗氧化活性研究

主要用纤维素酶和果胶酶对莲房组织进行酶解,以提高莲房原花青素提取率。采用四因素三水平正交实验对酶解时间、加酶量和酶解温度等提取工艺参数进行优化,获得了最佳工艺参数为纤维素酶添加量为0.7%,果胶酶添加量0.1%,酶解温度55℃,酶解时间2.5h,优化后的提取工艺与直接醇提法相比,能将莲房原花青素的提取率提高约48%。在此基础上采用DPPH法进行了抗氧化性的对比,结果表明酶辅助提取和醇提法提取的原花青素有着相同的抗氧化性。     

酶法水解谷朊粉工艺研究

对谷蛋白肽酶法制备工艺进行了研究.利用蛋白酶Alcalase可获得较高的水解度,其较优的工艺如下:底物浓度10%,加酶量为底物的0.5%,pH为8.75,水解温度60 ℃,水解时间90 min.酶解后期,添加蛋白酶Umamizyme进行复合酶水解,其产物具有多肽含量高、风味协调等特点.     

牦牛骨蛋白的酶解条件研究

以蛋白质水解度为评价指标,辅以固形物溶出率,比较了中性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶对牦牛骨蛋白的水解效果,研究了酶用量、料液比(底物浓度)、酶解时间对水解度的影响,采用正交试验对酶解条件进行了优化。结果显示,木瓜蛋白酶是牦牛骨蛋白水解的适宜催化剂。在一定条件下,样品水解度随酶用量和酶解时间的增加而增大,底物浓度过低或过高均不利于原料中蛋白质的酶解。木瓜蛋白酶水解牦牛骨蛋白最佳条件为:酶解温度60℃,酶解时间8 h,酶用量3500 U/g蛋白质,料液比1:25(g:m l)。     

蒸汽爆破处理沙柳原料酶解条件优化

研究蒸汽爆破预处理对沙柳原料酶解效果的影响,通过响应曲面实验设计法优化蒸汽爆破处理沙柳原料的酶解工艺。结果表明,蒸汽爆破预处理沙柳原料的最佳蒸汽爆破处理条件：压力3.5 MPa、维压时间300 s; 蒸汽爆破最佳酶解条件：pH 4.8、温度53.5 ℃、 每克底物酶加量29.8 FPU。在最优条件下,蒸汽爆破处理沙柳原料的酶解率可以达到最大值87.92%,并验证了数学模型的有效性,试验结果表明蒸汽爆破预处理可以有效提高沙柳原料的水解率。     

酶解法去除胭脂虫红色素提取液中蛋白工艺研究

本文对酶解胭脂虫体内蛋白工艺过程进行了研究,首先通过实验筛选出了木瓜蛋白酶为酶制剂,重点在单因素实验的基础上,选用了Box—Benhnken响应面分析法,得到了酶解工艺过程优化工艺条件：加酶量为3％、酶解时间为5h、温度为45℃、溶液pH值为5,水解率为4．72％。     

酶法提取金乌贼墨汁中黑色素的工艺条件研究

以金乌贼墨汁为原料,采用单因素试验,对胰蛋白酶,木瓜蛋白酶,胃蛋白酶,中性蛋白酶和碱性蛋白酶等五种酶提取黑色素的效果进行比较分析,筛选出水解效果较好的碱性蛋白酶。并通过正交试验,优化了碱性蛋白酶酶解金乌贼墨汁的最佳工艺,实验结果表明,在底物浓度2%、水解温度50℃、pH值为7.4,加酶量4200U/g和水解8h的条件下进行水解的效果较好。     

忽地笑中石蒜碱酶法提取及分离工艺研究

对复合酶法提取忽地笑石蒜碱的工艺进行优化,并用阳离子交换树脂分离石蒜碱。以纤维素酶与果胶酶的水溶液为提取溶剂,采用L9(34)正交试验考察了酶解p H、酶加入量、酶解时间和酶解温度等影响因素,以石蒜碱得率为指标,得最优提取工艺为:料液比1∶10,p H 4.5,酶添加量4%,酶解温度50℃,提取时间2.0 h,石蒜碱得率为0.1750%。D-001树脂纯化条件为:上样液p H为2,以3 BV/h流速上样,以含1.5 mol/L氨水的70%乙醇洗脱,流速为3 BV/h,初步分离后石蒜碱含量为15.28%。研究结果可为石蒜碱工业化生产提供参考。     

正交实验法优化黄柏中黄连素的酶碱法提取工艺

为了提高黄柏中黄连素的提取得率与效率,采用传统方法碱提法与酶解辅助提取相结合来优化黄柏中黄连素的提取工艺。以黄连素浸提率为评价指标,考察纤维素酶浓度、酶解时间、料液比及浸提时间对提取效率的影响。在单因素实验的基础上,通过正交实验分析各因素的作用大小以及它们之间的交互作用。优选出黄柏中黄连素的酶碱法提取最佳工艺条件为:纤维素酶浓度15‰、酶解时间1 h、料液比1∶7、浸提时间7 h,在该条件下黄连素的浸提率可达8.99%。该提取工艺浸提率高,成本低,稳定性好,可用于生产上黄柏中黄连素的提取。