荧光素浓度对于用荧光素酶测定ATP含量的影响

在粗荧光素酶液中加合成的荧光素和不加荧光素,观察其发光反应动力学,反应系统中外加荧光素后,发光强度明显增加,以适当低浓度的荧光素酶液的发光强度增加最大。在室温(20℃)下,不同贮放时间的荧光素酶液,其反应活性随贮放时间的延长而下降。外加荧光素后,反应活性可以恢复并达到最大后保持恒定。在-15℃贮放一年后的荧光素酶粉剂,反应活性下降,外加荧光素后,反应活性可以提高到原来的水平。     

酶联荧光法测定失血性休克兔骨骼肌ATP含量

休克时全身血液供应不足,组织缺氧,三羧酸循环和线粒体呼吸链的功能受抑制,往往导致组织ATP的合成下降。因此测定休克时组织ATP的含量,可以反映细胞的能量代谢障碍。我们对G.Paul介绍的组织ATP测定方法在样品取材和试剂保存方面作了改进,并且测定了实验性失血性休克模型以及复苏条件下家兔骨骼肌组织ATP的含量。现将结果和方法报告如下。材料和方法一、材料成年家兔37只,性别不拘,体重2.0—3.0 kg。分为三组:假手术组11只;平衡盐液复苏组13只;平衡盐液 ATP-MgCl_2     

人血ATP的生物发光测定

生物发光法测定ATP具有微量、简单、快速、灵敏及专一性强等特点,我们用以测定了人血液中的ATP含量,现简略介绍如下。     

ATP生物发光测定试剂研究进展

萤火虫荧光素酶是ATP生物发光试剂的关键组成部分,可通过萤火虫尾提取纯化或基因工程技术制备,酶的活力和纯度决定了ATP生物发光试剂的性能。迄今许多先进技术在ATP生物发光试剂的制备中均有应用,包括酶基因工程改造技术、ATP循环的酶法放大技术、荧光素酶蛋白的活力及发光稳定技术,特异的细胞ATP提取技术等。ATP生物发光试剂的研究焦点主要集中在提高发光试剂的检测灵敏度和性能、增加产品的适应性等方面。     

HPLC测定生物胶中三氯生杀菌剂含量研究

研究建立了一种采用甲醇溶剂与超声波萃取生物胶体系中的三氯生,以及高效液相色谱法测定萃取液中三氯生含量的方法。考察了萃取剂种类、萃取剂比例和超声时间等因素对生物胶体系中萃取三氯生含量的影响。实验结果表明,以甲醇-水为提取剂(体积比90︰10)、超声时间20 min时提取效率最适宜,但要准确配制甲醇-水的标准液及样品的预处理。高效液相色谱法测定胶体中三氯生含量,加标回收率及精密度均满足测试要求。     

甘薯块根膨大过程中ATP酶活性、ATP和ABA含量的变化

研究选用鲁薯7号和徐薯18号为材料,对甘薯块根膨大速率变化动态及其块根中可溶性碳水化合物含量、ATP含量、ATP酶活性和脱落酸（ABA）含量的变化进行了研究分析。结果表明：（1）块根膨大速率变化动态呈一双峰曲线,第一个高峰出现在栽秧后50－70d,第二个高峰出现在栽秧后120－165d;（2）块根膨大高峰期,块根中可溶性碳水化合物含量较高,ATP含量则较低;（3）块根中ATP酶活性和ABA含量变化动态与块根膨大速率变化动态相似。讨论了ATP酶和ABA在块根膨大过程中的可能作用。     

声波刺激对中华猕猴桃ATP含量的影响

根据环境应力对植物应激效应的原理，运用声波刺激木质藤本植物中华猕猴桃茎段的愈伤组织，测定ATP含量及其变化情况，并通过与对照组(CK)相应值的比较，研究声波对植物能量代谢的影响。采用单因子实验设计，分别固定作为交变应力的声波的频率或强度这两个参数中的一个，而改变另一个指标的值，对实验材料进行处理，实验结果表明，声波对猕猴桃愈伤组织ATP的含量有着比较明显的增强或抑制的双重效应，适度的声场刺激将有利于提高植物的能量代谢水平，其中，最适的声波频率为1000Hz，而最适声强为100dB左右。     

叶片细胞的膜束缚ATP酶活性的测定

目前已在不同植物的一些器官及组织中发现细胞膜上存在离子激活的ATP酶活性。研究得较多的有根——涉及的植物如燕麦、大麦及玉米等;胚轴——如大豆、蚕豆、笋瓜等;此外尚有叶片表皮、子叶、芽鞘及种子等不同组织。这些工作均以植物组织为材料来直接分离膜分部。不少作者认为,这种束缚于细胞膜上能为离子激活的ATP酶与离子吸收、气孔关闭及激素诱导的生长等生理过程有关。叶片为具有重要生理功能的器官,但有关束缚于叶肉细胞质     

生物传感器测定氨基酸

<正> 前言利用酶只与特定的基质反应的作用分析特定基质开始于40年代,最近进展到利用微生物起源的各种酶的分析法。用这种酶选择性地分析复杂有机化合物已是可能,但需要高价酶,需要反应、显色、测定吸光度等烦杂操作,时间较长,期望一种只要把pH类电     

生物传感器测定氨基酸

<正> 前言利用酶只与特定的基质反应的作用分析特定基质开始于40年代,最近进展到利用微生物起源的各种酶的分析法。用这种酶选择性地分析复杂有机化合物已是可能,但需要高价酶,需要反应、显色、测定吸光度等烦杂操作,时间较长,期望一种只要把pH类电     

不同消化方法对测定生物样品中硒含量的比较研究

本文比较了干法消化、普通湿法消化、高压消化、微波消化对测定富含有机硒的生物样品中硒含量的影响.结果显示,高压及微波消化等密闭消化体系具有显著的优点,适合生物样品中富含有机硒的硒含量的测定.     

构建全细胞生物传感器测定农田土壤中有机磷农药甲基对硫磷含量

土壤中污染物的生物有效性评估对于准确评价环境污染风险至关重要,而全细胞生物传感器是此类评估的重要工具之一。本研究旨在使用新型全细胞生物传感器建立土壤中甲基对硫磷(methyl parathion,MP)的检测方法。首先,使用筛选出的甲基对硫磷水解酶基因(methyl parathion degrading gene,mpd)和pUC19质粒骨架以及已有的特异性诱导元件pobR为材料,构建全细胞生物传感器。然后,以96孔的酶标板为载体和以5种全细胞生物传感器为指示细胞,建立了土壤提取液样品中甲基对硫磷的分析方法,并应用于实际测试和田间土壤样品中甲基对硫磷的检测。以检测性能的最佳大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α/pMP-AmilCP为例,其检测限为6.21−6.66μg/L,线性范围为10−10000μg/L。E.coli DH5α/pMP-RFP和E.coli DH5α/pMP-AmilCP的方法用于分析土壤提取液样品中甲基对硫磷的浓度,具有较好的检测性能。这种全细胞生物传感器方法有助于快速评估土壤中甲基对硫磷的生物有效性强弱,从而有效判断有机磷农药甲基对硫磷对土壤的污染风险。