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用凝胶平板电泳分析多个样品时,必须保证各板电泳条件严格一致。因此,最好是在同一电泳槽中做许多块平板的同时电泳。Anderson等的多重平板电泳装置较好地解决了这一问题,但要使用大量铂丝,而且结构复杂。我们结合自己的条件,设计制作了一台大型潜水式电泳槽,结构比Anderson等人所制做的装置简单得多,成本也低,而效果令人满意。电泳槽结构见图1。电极板是将电解用高 相似文献
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用凝胶平板电泳分析多个样品时,必须保证各板电泳条件严格一致.因此,最好是在同一电泳槽中做许多块平板的同时电泳.Anderson等的多重平板电泳装置较好地解决了这一问题,但要使用大量铂丝,而且结构复杂. 我们结合自己的条件,设计制作了一台大型潜水式电泳槽,结构比Anderson等人所制做的装置简单得多,成本也低,而效果令人满意. 电泳槽结构见图1.电极板是将电解用高 相似文献
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脲梯度电泳方法的技术关键 总被引:3,自引:1,他引:2
介绍在应用丙烯酸胺-脲梯度电泳技术进行蛋白质折叠、去折叠研究工作中的实验步骤和技术关键,并在文献方法的基础上作了改进。通过加入15%~0%的甘油,抵消在凝胶中由于脲浓度不同而引起的溶液粘度变化,保证在凝胶上脲浓度不同的部位对蛋白质保持同样的电泳阻力,防止前沿偏斜.采用核黄素光照催化合脲凝胶的聚合,以防止凝胶在梯度灌制完成前发生聚合.加浓缩胶和样品梳于脲梯度胶上可较好地克服边缘效应,获得好的样品迁移图谱. 相似文献
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陈立业 《生物化学与生物物理进展》1989,16(1):76-77
为了简化常规电泳操作,我在实际工作中研制了一种组合式无胶封板状电泳槽,可显著地简化操作,节省时间。现介绍如下。 一、电泳槽结构特点 采用组合方式 由三块部件构成完整电泳槽。上板与下板合拢后构成凝胶模板,倒入胶液后利用凝胶本身的封固作用使上下板顶端构成上电极槽。 相似文献
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纳米银水凝胶涂膜干预气管导管表面铜绿假单胞菌黏附及生物膜形成的实验研究 总被引:2,自引:1,他引:1
目的研究纳米银水凝胶涂膜对气管导管(endotracheal tube,ETT)表面铜绿假单胞菌粘附及细菌生物膜(biofilm,BF)形成的干预作用。方法实验共设6组,分别为空白对照组,涂纳米银3.5、7.0、10.5、14.0和17.5μg/cm^2组。参考Brown平板法,制备ETT、表面铜绿假单胞菌BF模型。通过超声振荡-平板菌落计数法检测体外培养6、12、18h时各组ETT表面BF中的活细菌粘附数量。借助激光共聚焦显微镜观察BF中的活死菌分布情况,并测量BF厚度。结果(1)与空白对照组相比,最小量涂膜组(3.5μg/cm^2)体外培养6h时,导管表面活细菌的粘附量显著减少(P〈0.05),12h时差异无显著性(P〉0.05);最大量涂膜组(17.5μg/cm^2)体外培养6h时,ETT表面几乎未见细菌粘附(P〈0.05),18h时BF中的活菌数量及BF厚度均显著减少(P〈0.05)。(2)激光共聚焦显微镜观察可见,培养6h时,空白对照组ETT表面粘附的死活菌呈不规则散点样分布,未见明显的细菌菌落形成,而各实验组ETT表面仅有细菌零星分布,其数量少于空白组。18h时空白对照组表面可见大量活死菌堆积粘连,有小菌落形成并相互交通成地图状,可见典型BF结构,而此时最大量涂膜组(17.5μg/cm^2)表面仅见数量不等的菌落形成,菌落周围可见数量不等的细菌分布。结论纳米银水凝胶涂膜可有效减少ETT表面铜绿假单胞菌的粘附数量,延缓导管表面细菌BF形成,其作用强弱随培养时间及单位面积中的纳米银剂量的变化而变化。 相似文献
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《生物技术通报》2015,(11)
旨在解决手工点样斑点杂交中样品点密度小、点样体积受限制和点样点不规整等问题,建立了一种新的点杂交膜预处理方法。首先根据预设点样点的大小、排列方式和密度,制作柱状凸起模具;其次将模具固定于杂交膜上,使模具凸起部位与膜紧密接触;再将熔化的石蜡涂布于膜上非模具接触部位,待石蜡凝固后移走模具,获得预处理杂交膜。以荧光染料IRDye800标记的抗体为样品进行直接点样检测,同时提取水稻、小麦和大豆的蛋白进行点杂交实验验证。结果显示,利用上述方法得到非点样部位具有疏水性的预处理NC膜和PVDF膜,其点样点位置、形状和大小固定,点样密度高。不同体积荧光染料标记抗体直接点样得到的荧光图像整齐规范,水稻、小麦和大豆蛋白与水稻看家蛋白抗体Anti-HSP杂交后均能检测到稳定信号。杂交膜经预处理后可最大限度实现点样点位置、大小和形状的统一,并能显著提高上样体积和点样密度。 相似文献
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中国科学院上海生物化学研究所代谢调节控制组 《生物化学与生物物理进展》1974,1(3):52-55
聚丙烯酰胺凝胶电泳已经广泛地应用于分离复杂的蛋白质或核酸混合物。但柱型圆盘凝胶电泳技术,对一系列不同样品的比较仍存在问题。垂直的平板凝胶电泳装置,具有下列优点:1.平板表面大,有利于凝胶的冷却;2.一系列样品能在相同的制板、电泳、显色条件 相似文献
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基因芯片接触式点样条件的优化 总被引:7,自引:0,他引:7
样品的点制是基因芯片制备中的关键一步,影响因素众多,如点样液和液面高度、基片的选择、控制湿度、点样针运行速度、与基片接触时间等。对玻片点制各条件进行了摸索和优化,并对膜芯片的点制参数进行筛选,以期得到规整和重现性好的样品点。 相似文献
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Isco公司新生产的小蓝箱(Little Blue Tank)不但便于回收特定凝胶带的DNA和RNA,还改进了水下微型凝胶的特性。这种装置包括一只水平缓冲液箱、一只紫外线透性的9×10cm凝胶盘、一个适用于12样井和3样井胶板的梳子,以及回收样品的两种电洗提附件。电极可防止外侧胶列弯曲(胶列的弯曲会减少有效样品的含量),缓冲液箱的深蓝色又使被淹没的样井显而易见。电洗提杯可快速收集和浓缩凝胶和溶液中的蛋白质和其它大分子化合物。还有小容量的盐阱,它能有效地回收低达几纳克的DNA。电压可选 相似文献
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在基因的结构与功能的研究中,如基因的物理图谱,测定DNA序列,DNA杂交,DNA重组,都必须首先获得高纯度的足量的DNA片段。如何从凝胶中回收DNA组份则是比较困难而又关键的问题。从已发表的文献来看,目前尚没有一种公认满意的方法。我们根据本实验室的具体条件,摸索建立了一种“带前洗脱槽法”,用此法从凝胶中洗脱回收DNA取得了非常满意的效果。在紫外灯下确定DNA带的位置,在带前挖一个适当大小的凹形槽(图1)。用适当宽度的透析膜包被梳子的一面,两侧面和底面(图2)。将梳子置DNA带前,未包被透析膜的一面紧贴带的凝胶。凹形槽其余部分用较高浓度(1%)的琼脂糖凝胶填 相似文献
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生物学实验技能包括设计技能,观察技能,操作技能和报告技能等不同方法,其测评的内容应有不同的侧重;实验技能测评的方法可以归结为纸笔型,辨认型,作品型和实作型4种,其真实性水平不尽一样,可根据测评目的和实施条件的不同加以灵活选择。 相似文献
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本电泳装置经过多次实验,表明仪器性能良好,可满足各种电泳的要求。它具有活动的上槽,能调节上下的距离直至250毫米,槽的两侧至少可同时做二块凝胶板,便于比较实验。凝胶板的大小和厚薄可用不同长度的玻板和不同规格的衬条(宽窄、长短、厚薄)来调节凝胶模框。本电泳槽不仅能做单向或双向电泳,还可作盘状电泳。因此是一种多用途的电泳装置。 相似文献
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中国人COL2A1基因座的扩增片段长度多态性 总被引:1,自引:0,他引:1
用聚合酶链式反应、高分辨聚丙烯酰胺凝胶水平电泳及银染技术对位于人类Ⅱ型胶原基因终止密码下游非转录区1.3kb处的可主数目串联重复育列进行了研究。制备了由人类不同基因型DNA混合而成的人类等位基因型参考物,根据实验结果进行了命名。 相似文献
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用免疫印迹技术检测人红细胞膜血型糖蛋白(GP)比PAs试剂染色和BLOTTO法点样量少,区带清晰,异常GP的检出率较高,其放射自显影的影像反差好。本文还就该方法的可靠性,最适点样量的选择,血样的有效保存时间以及 125Ⅰ-蛋白A的效价等方面进行了讨论。 相似文献