人胃癌不同周期细胞膜表面ConA受体的分布与侧向运动

本文研究了人胃低分化粘液性腺癌细胞MGC 80-3不同周期时相中ConA受体的分布与侧向运动。MGc 80-3细胞经同步化培养,用F-ConA标记。被标记细胞中G_1、S和G_2期呈不连续的分布,但它们之间又存在显著的差异。M期呈较均匀的强荧光分布(与其它时相细胞比较)。荧光漂白恢复方法测定ConA受体复合物侧向运动表明:各个周期时相之间不仅运动方式不同,而且运动速率也有显著差异。M期与G_1期主要表现出扩散型运动;而S期与G_2期表现为流动型运动。G_1期的扩散系数大干M期的;S期的流动速率大于G_2期的。但可动分子百分比以G_2期最高。这些结果表明了ConA受体的动力学性质。它受到细胞周期的调节。     

双丁酰cAMP对人体肺腺癌细胞表面凝集素受体及其侵袭能力的影响

着重观察双丁酰ｃＡＭＰ对培养的人肺腺癌细胞膜上多种凝集素受体表达的影响,并将体外经双丁酰ｃＡＭＰ处理的癌细胞接种于裸鼠皮下,观察移植瘤自发性生长状况。结果表明,经双丁酰ｃＡＭＰ处理的人肺腺癌细胞表面ＲＣＡ、ＷＧＡ、ＵＥＡ－１、ＤＢＡ、ＣｏｎＡ凝集素受体表达降低,同时伴有移植瘤成瘤潜伏期延长,侵袭能力下降。结果提示双丁酰ｃＡＭＰ导致的癌细胞表面数种凝集素受体的表达下降,可能是恢复癌细胞间粘附识别能力、降低其侵袭力的机制之一     

三种细胞系(人胚肺与小儿包皮成纤维及人胃癌细胞)膜表面ConA受体的再分布和侧向扩散的研究

利用荧光染色和荧光漂白后恢复FRAP技术观察人胚肺成纤维细胞,小儿包皮成纤维细胞和人胃腺癌细胞膜表面Con A受体复合物的分布及其侧向运动.结果表明:它们的分布呈均匀连续性,极为相似.但它们的侧向运动速率各异.两种成纤维细胞差异较小,而人胃癌细胞的侧向扩散系数显著地不同于两种成纤维细胞.因此把凝集素受体的分布与运动行为表达结合起来分析,能更好地认识细胞在生长、分化或恶变过程中膜性状的差异性与共性.     

多巴胺受体激动剂对兔动脉cAMP产生系统的影响

实验观察了选择性多巴胺（ＤＡ）ＤＡ１受体激动剂ｆｅｎｏｌｄｏｐａｍ与ＤＡ２受体激动剂ｐｒｏｐｙ１－ｂｕｔｙｌ－ｄｏｐａｍｉｎｅ（ＰＢＤＡ）对兔肾动脉,肺、肠系膜动脉和股动脉环磷酸腺苷（ｃＡＭＰ）产生系统的影响。结果表明：⑴除股动脉外,ｆｅｎｏｌｄｏｐａｍ均可浓度依赖性地增加肺动脉、肾动脉和肠系膜动脉ｃＡＭＰ的生成量。选择性ＤＡ１受体阻断剂ＳＣＨ２３３９０可以显著阻断ｆｅｎｏｌｄｏｐａｍ的效应,而Ｄ     

TGFα对肝癌细胞SMMC-7721增殖和ERK蛋白的影响

目的观察TGFα诱导肝癌细胞增殖和对信号传导因子ERK蛋白表达的影响.方法应用MTT比色法观察不同浓度TGFα对肝癌细胞SMMC-7721的增殖作用.用流式细胞术检测TGFα对肝癌细胞凋亡和细胞周期的影响.用免疫组化方法检测TGFα对ERK蛋白表达影响.结果 1μg/L TGFα作用24h SMMC-7721细胞增殖率为3%(P>0.05);作用48h后增殖率达16%(P<0.05).5μg/L TGFα作用24h增殖率达18%(P<0.05);作用48h增殖率达24%(P<0.01),增殖效应呈时间、剂量依赖性.5μg/L TGFα作用肝癌细胞48h能抑制肝癌细胞凋亡,使细胞滞留于G2M期,增加PI.5μg/L TGFα能促进ERK蛋白在细胞核中的表达.结论 TGFα能促进肝癌细胞增殖,增加ERK蛋白在细胞核中的表达.     

癌基因表达与膜分子侧向运动和cAMP转运的相关性(环核苷酸对癌细胞作用)

Ehrlich癌细胞在cAMP诱导下,于接种后5-7天癌基因c-myc、c-fos、c-H-ras、c-sis的表达强烈被抑制.与此同时癌细胞膜对cAMP转运增强.膜蛋白分子扩散系数[D]值下降,均以接种后7天最为显著P<0.01.可动分子百分比提高.这反映出癌细胞的分化变异.但至接种后9天,上述癌基因重新表达,膜蛋白分子扩散系数上升,cAMP转运下降,这可能是导致接种后11天癌细胞增殖急剧上升,细胞内cAMP水平下降的原因.说明Ehrlich细胞在去恶化及恶化过程中,癌基因表达变异.膜蛋白分子运动和癌细胞多种表型之间密切相关.     

CDKs和CKIs在胃癌细胞周期调控中的相关性

研究 CDKs和 CKIs在调节胃癌细胞周期进程中的作用表明 ,全反式视黄酸 ( ATRA)通过诱导细胞滞留在 G1/G0 期而抑制胃癌细胞生长 .Western blot分析显示 ,ATRA可上调 p2 1 waf1/ cip1的表达 ,而抑制 p1 6ink4 的表达 .免疫沉淀及活性测定表明 ,CDK2 激酶活性可被 ATRA抑制 ,而CDK4 活性先被诱导上升 ,2 4 h后逐渐下降 .另外 ,ATRA可以调节 Rb蛋白的磷酸化和 c- myc蛋白的表达 .由此证实 ,ATRA诱导胃癌细胞滞留于 G1/G0 期与其上调 p2 1 waf1/ cip1的表达和抑制CDK2 和 CDK4 激酶活性 ,进而抑制 Rb蛋白的磷酸化和 c- myc的表达有关 . Rb蛋白是 ATRA抑制胃癌细胞生长的下游调节因子 .另外 ,p1 6ink4 的功能在胃癌细胞中可能丧失 .     

重组人类生长激素对胃癌细胞的体外增殖研究

目的：通过体外实验,研究重组人类生长激素对胃癌细胞的增殖的影响。方法：实验分为空白组,重组人类生长激素组,奥沙利铂组和重组人类生长激素＋奥沙利铂组。用不同浓度的重组人类生长激素处理SGC．7901细胞,采用MTT法和流式细胞仪检测人胃癌细胞株的细胞抑制率,细胞周期和DNA抑制率。结果：体外实验结果表明,重组人类生长激素对SGC．7901细胞株增殖没有明显的促进作用,重组人类生长激素组和空白组以及重组人类生长激素＋奥沙利铂组和奥沙利铂组之间没有统计显著性（P〉0．05）,细胞抑制率和停止生长的细胞在G0-G1期明显增加（P〈0．01）,同时重组人类生长激素＋奥沙利铂组和空白组以及奥沙利铂组在S期,细胞数依次下降,DNA抑制率依次增加。重组人类生长激素＋奥沙利铂组与奥沙利铂组相比,细胞抑制率有明显上升趋势。结论：体外实验表明,重组人类生长激素并不加快人类胃癌细胞的增殖,与抗癌药物一同使用时,有增加治疗功效的作用。     

重组人类生长激素对胃癌细胞的体外增殖研究

目的:通过体外实验,研究重组人类生长激素对胃癌细胞的增殖的影响。方法:实验分为空白组,重组人类生长激素组,奥沙利铂组和重组人类生长激素+奥沙利铂组。用不同浓度的重组人类生长激素处理SGC-7901细胞,采用MTT法和流式细胞仪检测人胃癌细胞株的细胞抑制率,细胞周期和DNA抑制率。结果:体外实验结果表明,重组人类生长激素对SGC-7901细胞株增殖没有明显的促进作用,重组人类生长激素组和空白组以及重组人类生长激素+奥沙利铂组和奥沙利铂组之间没有统计显著性(P>0.05),细胞抑制率和停止生长的细胞在G0-G1期明显增加(P<0.01),同时重组人类生长激素+奥沙利铂组和空白组以及奥沙利铂组在S期,细胞数依次下降,DNA抑制率依次增加。重组人类生长激素+奥沙利铂组与奥沙利铂组相比,细胞抑制率有明显上升趋势。结论:体外实验表明,重组人类生长激素并不加快人类胃癌细胞的增殖,与抗癌药物一同使用时,有增加治疗功效的作用。     

长裂苦苣菜水提取物对肺癌细胞A549增殖和凋亡的影响

为了探讨长裂苦苣菜水提取物对肺癌细胞A549的影响,本研究用不同浓度的长裂苦苣菜水提取物作用于体外培养的A549细胞,从细胞形态(显微镜观察)、细胞增殖活力(CCK-8法)、细胞凋亡(Annexin V-FITC/PI染色)、线粒体膜电位(JC-1染色)和细胞内活性氧水平(荧光探针DCFH-DA染色)几个方面检测长裂苦苣菜水提取物对体外培养的A549细胞的影响。当处理浓度达到1 mg/mL作用细胞48 h后,细胞出现明显皱缩的凋亡形态学特征,与对照组相比处理组细胞增殖活力明显下降(P0.05)。进一步用流式细胞仪检测发现≥1mg/mL的处理浓度作用细胞48 h后细胞凋亡率显著提高(P0.05),同时检测到处理组细胞的膜电位都明显下降,细胞内活性氧水平明显上升,都呈剂量依赖关系。这些结果表明长裂苦苣菜水提取物可以诱导A549细胞凋亡,并抑制其生长和增殖,是一种潜在的预防和抑制肿瘤生长的药食两用植物。     

RhoA蛋白和cAMP对人前列腺癌细胞株PC-3形态的影响(简报)

小G蛋白RhoA是细胞内信号转导的重要成分,参与对细胞的多种功能活动的调控。溶血磷脂酸(lysophosphatidicacid,LPA)与多种细胞的G蛋白偶连受体结合而发挥作用,除刺激细胞增殖外,还通过活化RhoA,诱导细胞骨架改变。cAMP是经典的第二信使,其下游激酶PKA可抑制RhoA活性,因此,cAMP在许多细胞活动中对RhoA有拮抗作用。本实验采用人前列腺癌细胞株PC-3,以绿色荧光蛋白(GreenFluorescentProtein,GFP)分别和不同RhoA结构(野生型RhoA、RhoA63L和RhoA188A)的cDNA共同转染细胞,在显微镜下(200倍视野)观察记录未转染细胞和转染细胞在LPA和cAMP作用下的形态变化,研究RhoA和cAMP/PKA介导的信号转导在调控癌细胞形态改变中的作用。     

乙酰胆碱对人胃粘膜上皮细胞和胃腺癌细胞 N受体β亚单位的影响

目的:了解乙酰胆碱(ACh)对人胃粘膜上皮细胞和胃腺癌细胞烟碱型胆碱能受体(N受体)β亚单位的影响及两者间的差异.方法:采用免疫组化法检测培养的人胃粘膜上皮细胞和胃腺癌细胞膜上N受体β亚单位的数量、数密度和面密度的变化.结果:胃腺癌细胞N受体β亚单位数量、数密度明显高于而面密度低于胃粘膜上皮细胞(P＜0.05).10-6mol/L ACh使胃粘膜上皮细胞N受体β亚单位的数目、面密度和数密度增加(P＜0.01),该作用未被阿托品阻断.两种浓度的ACh对胃腺癌细胞N受体β亚单位未见显著性影响.结论:低浓度ACh使培养的胃粘膜细胞N受体失敏,但对胃腺癌细胞N受体β亚单位的作用不明显.     

乙酰胆碱对人胃粘膜上皮细胞和胃腺癌细胞N受体α亚单位的影响

目的:了解Ach对人胃粘膜上皮细胞和胃腺癌细胞烟碱型胆碱能受体(N受体)α亚单位数量的影响及两者间的差异.方法:采用免疫组化法检测培养的人胃粘膜上皮细胞和胃腺癌细胞膜上N受体α亚单位的数量.结果:胃腺癌细胞N受体α亚单位数量、数密度明显高于胃粘膜上皮细胞(P<0.01).Ach使胃粘膜上皮细胞N受体α亚单位的数目、面密度和数密度增加(P<0.01),却使胃腺癌细胞N受体α亚单位数量及面密度减少(P<0.01).结论:Ach对正常细胞和肿瘤细胞的作用机制可能不同.     

乙酰胆碱对人胃粘膜上皮细胞和胃腺癌细胞N受体γ亚单位的影响

目的:了解Ach对人胃粘膜上皮细胞和胃腺癌细胞烟碱型胆碱能受体(nAchRs) γ亚单位的影响及两者间的差异.方法:采用免疫组化法检测培养的人胃粘膜上皮细胞和胃腺癌细胞膜上nAchRs γ亚单位的数量.结果:Ach使胃粘膜上皮细胞nAchRs γ亚单位的数量、数密度和面密度显著增加(P<0.01),但对胃腺癌细胞nAchRs γ亚单位无影响.结论:胃粘膜上皮细胞nAchRSs对不同浓度的Ach反应性不同,胃腺癌细胞nAchRs γ亚单位对Ach的敏感性降低.     

周期加载对VEC-304细胞株迁移、增殖分布的影响

在弹性膜上接种VEC－304,融合生长后擦去周边细胞形成一规则圆斑,使用弹性膜周期加载装置,对生长在弹性膜上的VEC－304圆斑施以15％拉伸应变,经显微镜观察,计算机图像处理了解细胞增殖、迁移时间过程及增殖细胞在应变场中的分布,细胞银染了解细胞形态及细胞连接情况,免疫荧光染色观察增殖细胞的分裂极。结果发现：（1）随加载时间延长圆斑沿与应变垂直向伸展成椭圆形,24h两径出现明显差异;（2）随时间增加圆斑面积扩大,但实验组沿与加载垂直方向的增大较沿加载方向为大;（3）细胞有丝分裂器（中心粒）位于细胞短轴即加载方向;（4）加载后细胞较对照组排列紧密,细胞间距更小,且出现较为明显的重叠生长现象。VEC－304在应变场中的运动迁移、增殖具有方向依赖性,周期加载可以促进细胞间连接。     

COUP—TE和RARβ受体的表达影响癌细胞对视黄酸的敏感性

视黄酸(RA)通过其受体RARs和RXRs发挥作用。Northern blot显示,RARβ的表达介导RA对癌细胞的生长抑制作用。然而,其它的结果表明,RARβ的表达还不能完全驱动癌细胞对RA的应答,由此提示,癌细胞的RA敏感性除了受RARβ影响外,还受其它因子影响。COUP-TF则是其中的一个因子。凝胶阻抑测定和CAT测定表明,COUP-TF通过降低βRARE的基础转录活性来加强癌细胞的RA敏感性。结果证实,RARβ和COUP-TF受体的表达能够调节癌细胞对RA的敏感性。     

血小板衍生生长因子受体β对骨肉瘤细胞株HOS增殖的影响

血管形成是肿瘤生长过程中不可或缺的因素。血小板衍生生长因子受体(platelet-derived growth factor receptor, PDGFR)通过与其配体结合刺激新生血管形成,与多种肿瘤的发生发展密切相关。研究表明其亚型PDGFRβ高表达于大多数骨肉瘤病人标本及细胞株中,促进肿瘤增殖,但具体机制仍未明确。在本研究中,分别对HOS骨肉瘤细胞株进行特异性配体PDGFBB刺激处理及小干扰RNA (siRNA)敲降PDGFRβ处理,然后检测其增殖、细胞周期及相关蛋白的表达。结果表明:经过PDGFBB刺激后细胞增殖能力增强;细胞周期结果显示处于G1期的HOS细胞数量增多,S期和G2/M期细胞数量减少,G2期相关蛋白Cyclin B1和CDK1以及G1期相关蛋白CyclinE2和CDK2表达增高,提示PDGFBB可能促进了G2/M期转化。而经siRNA干扰后,PDGFRβ在mRNA和蛋白水平均显示表达量下降;细胞增殖受到抑制。检测细胞周期结果发现在敲降PDGFRβ后,进入S期的细胞数量增加了约9.71%,而G2/M期的细胞数量约减少了6.78%,S期相关蛋白Cyclin A1和CDK2明显降低,提示发生了S期阻滞。因此我们推测,PDGFRβ通过调控细胞周期进程影响骨肉瘤细胞的增殖。本研究为PDGFRβ影响HOS细胞增殖及其潜在机制提供了理论依据,为PDGFRβ可以作为治疗骨肉瘤的潜在治疗靶点提供了理论依据。