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本研究报道从睡眠剥夺(SD)48—72h的灵长类原宗(primitivestock)Tupaiabelangerichinensis(TBC)提取内源性“睡眠因子”(sleepfactor)S2C和S4B。收集的尿液经超滤,清液冻干经SephadexG15分离得到FractionⅠ-Ⅴ。活性测定发现Fraction-Ⅲ(S2C)呈现显著δ-增强促眠效应。经SephadexG25和SephadexLH20进一步净化的S4B也呈现显著δ-增强促眠效应。 相似文献
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祁连山植被水文效应的多层次Fuzzy综合评判 总被引:8,自引:0,他引:8
祁连山植被水文效应的多层次Fuzzy综合评判车克钧,傅辉恩(甘肃省张掖祁连山水源林研究所734000)Multiple-LevelFuzzyComprehensiveEvaluationonHydrologicalFunctionsofVegetationsontheQilianMountains¥.CheKejun;FuHuien(QilianMountainsInstituteofForestforWaterSourceConservation,Zhangye,GansuProvince734000).ChineseJournalofEcology,1993,12(3):31-35.BymeansofmuItiple-levelfuzzycomprehensiveevaluation,thehydrologicalfunctionsoffourvegetationtypesareanalyzed.PiceacrassifoliaforestisshowntobethebesttypeforwaterconservationonQilianmountains,Sabinaprzewlskiiforesta 相似文献
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少棘巨蜈蚣(ScolopendrasubspinipesmutilansL.Koch)经95%乙醇脱脂后,再经4℃水冷渗,水提液低温旋转浓缩,冻干,得到的冻干粉先后经过SephadexG-25柱,等电聚焦制备电泳,再经SephadexG-150柱,SephadexG-100柱,最后经HPLC制备得到一个纯的碱性蛋白,命名为SSmp-d.该蛋白经HPLC、超薄等电聚焦电泳检验是均一的.采用HPLC和Protein-PakTM125柱测定其分子量为24.64kD.IEF-HPCE显示其等电点为9.27.氨基酸分析表明SSmp-d含较多的Arg、Lys等碱性氨基酸,另外还含有较多的Ala、Leu.使用蛋白质自动序列分析仪测定了SSmp-dN端的11个氨基酸,序列为NH3+-Asp-Val-Asn-Phe-Arg-Leu-Ser-Gly-Ala-Asp-Pro. 相似文献
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L—山梨糖脱氢酶的纯化及性质的研究 总被引:12,自引:2,他引:10
从5L罐发酵L-山梨糖的Gluconibacter oxydans SCB329和Bacillus thuringiensis SCB933混合菌株中差速离心收集SCB329菌体,破碎,离心获得无细胞抽提液,硫酸铵分级沉淀蛋白后依次经DEAE Cellulose 52和Q Sepharose FF柱层析分得到了L-册梨糖脱氢酶(SDH),它能将L-册梨糖脱氢氧化为L-册梨酮,SDS-PAGE电泳测 相似文献
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芦荟凝集素的分离、纯化和部分性质的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
新鲜芦荟叶(Aloe vera L.var.chinensis(Haw.)Berger)于室温用低浓度NaCl溶液提取。离心和透析后,经N-乙酰氨基葡萄糖0Sepharose 4B亲和层析,分离纯化出芦荟凝集素(ACL)。用SephadexG-100测表观分子量为35KD,SDS-PAGE出现两条色带;染色 ;宽带和较浅的罕带。亚基分子量分别为15KD和20KD。能专一性凝集兔血细胞和人血红细胞 相似文献
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青霉胞外菊粉酶的纯化和性质研究 总被引:1,自引:0,他引:1
青霉菌(PenicilliumSP.91-4)产生的胞外菊粉酶(extracellularinulinase)粗酶液,经硫酸铵沉淀,超滤浓缩,Sephadex-G-100凝胶过滤,DEAE-Sephacel离子交换柱层析等步骤,得到提纯30倍的酶E。酶E反应时最适pH4.5,最适温度为50℃,在pH4.7~7.6范围内,温度50℃以下酶E活性稳定;其活性受Ag^+,Cu^2+PCMB强烈抑制。采用 相似文献
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利用微丝(microfilament,MF)解聚药物细胞松驰素B(cytochalasinB,CB)处理G_0期小鼠C_3H_(10)T_(1/2)成纤维细胞,对G_0至S期DNA合成,胸腺嘧啶核苷激酶(thymidinekinase,TK)活性、TK基因表达、钙调素(calmodulin,CaM)水平和一些细胞周期早期基因的表达进行了观察,G_0期细胞经3mg/LCB处理2h,促MF解聚增强了血清对S期细胞TK活性、TK基因表达和DNA合成的刺激作用,并促进细胞提前进入S期.血清刺激G_0期细胞进入晚G_1期和S期时,CaM水平明显升高,而CB预处理则使CaM含量进一步增加,特别是CB处理促使S期CaM增加向核内转移.CB处理明显增强血清对c-jun、c-fos和c-myc基因表达的刺激作用,而PKC抑制剂H_7则抑制CB处理对这些基因转录的刺激作用,说明CB使G_0期细胞MF解聚刺激c-jun、c-fos和c-myc的转录活性与PKC的作用有关.结果表明G_0至S期早期MF的重组可促进细胞进入S期,增强DNA合成. 相似文献
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L-山梨糖脱氢酶的纯化及性质的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
从5L罐发酵L-山梨糖的Gluconobacter SCB329和Bacillus thuringiensis SCB933混合菌株中差速离心收集SCB329菌体,破碎,离心获得无细胞抽提液,硫酸铵分级沉淀蛋白后依次经DEAECellulose 52和Q Sepharose FF柱层析分离得到了L-山梨糖脱氢酶(SDH),它能将L-山梨糖脱氢氧化为L-山梨酮,SDS-PAGE电泳测得分子量约为60KD。动力学性研究表明它为一个典型的Michaelis-Menten氏酶,对L-山 相似文献
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白介素10的临床应用研究 总被引:2,自引:0,他引:2
1989年,Fiorentio等发现Th2细胞分泌一种能抑制Th1细胞功能的未知因子,称为细胞因子合成抑制因子(cytokinesynthe-sisinhibitoryfactor,CSIF)。Moore等发现CSIF与EB病毒(EBV)中BCRF-... 相似文献
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不同生态条件下苹果叶面附生物种群演替的初步研究 总被引:2,自引:0,他引:2
不同生态条件下苹果叶面附生物种群演替的初步研究陈功友,郑铁民,任国兰,时向阳(河南农业大学,郑州450002)郭艳春,宋爱仙(河南省植保总站,郑州450002)(郑州市园艺场,450002)SuccessionofEpiphyticMicrofloraPopulationsonApplePhylloplaneunderDiffcrentEcologicalCondi-tions¥.ChenGongyou,ZhengTiemin,RenGuolan,ShiXiangyang(Henan,AgriculturalUniuersity,Zhengzhou450002),GuoYanchun(HenanGeneralStationofplantprotection,Zhengzhou450002),SongAixian(HorliculturalFarmofZhengzhouMunicipality,Zhengzhou450002).(ChineseJournalofEcology,1993,12(4):7-13.Seasonalvariationsofepiphyticmicrofloraonapplephyll 相似文献
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超结瘤大豆(Glycine m ax (L.) Merr.) nts 382 和不结瘤大豆Nod 49 的叶和根组织水提取物经Sephadex G25 过滤、洗脱,再根据洗脱物对硝酸还原酶(NR)活性的影响可划分为4 个组分(fraction)样品,即nts 382(Nod 49) F1、nts 382(Nod 49) F2、nts 382(Nod 49) F3 和nts 382(Nod 49) F4。其中, nts382 F2 和F4 抑制NR 活性作用在接种USDA110 后明显下降, 但接种的nts 382 F2 却能提高大豆Bragg 的结瘤数达一倍, 而接种的nts 382 F3 和F4 的作用不明显。NR 活性抑制因子不是刺激结瘤的因子, 刺激结瘤的因子主要分布在接种的nts382 F2 部分中。与这一现象相反, Nod 49 F2 和F4 抑制NR活性的作用在接种后更强, 且也抑制大豆nts 382 的结瘤, 其中Nod 49 F4 抑制结瘤的作用基本不能逆转。抑制结瘤因子主要分布在接过种的Nod 49 F4 部分中 相似文献
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通过PCR定点突变的技术,将蛇毒蛋白Echistatin基因的C端进行了突变(Ala48→Arg48→,Thr49→Val49),模拟纤维蛋白N端的四肽(Gly-Pro-Arg-Val),以期增加Ecs(Echistatin)的活性。突变的基因重组到表达质粒pJC264上,经IPTG诱导,以CheY-Ecs融合蛋白方式进行了表达,表达量占菌体总蛋白的15~20%。SephadexG-75初步纯化该融合蛋白,然后用CNBr裂解,透析,冻干,反相HPLC纯化C端突变体Ecs蛇毒蛋白,N端十个氨基酸分析与天然的相符,在PRP(platelet-richplasma)测活体系中,10μmol/L的ADP诱导,C端突变体Ecs抑制血小板凝聚的活性约为野生型4倍。得到了Ecs的C端突变后使Ecs抑制血小板凝聚的活性提高的结果。 相似文献
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重组人GM—CSF基因在昆虫细胞中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
利用苜蓿夜蛾核型多角体病毒(AcNPV)带β-Galactosidase基因标记的非融合蛋白基因转移载体pBlueBac将人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)基因成功地插入病毒AcNPV的基因组中.hGM-CSF基因在感染重组病毒的草地夜蛾(Spodopterafrugiperda)培养细胞Sf9中得到表达,感染后的Sf9细胞培养液能刺激人骨髓细胞在体外形成典型的集落,表达水平可达2.7×1055CFU/ml。以hGM-CSF单抗所作的WesternBlotting表明,表达的hGM-CSF对是3种糖基化程度不同的产物,分子量分别约为15kd,18kd和20kd。 相似文献
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人妊娠5-8周的胎盘绒毛经匀浆后,用2mol/L urea-PBS提取,通过Heparin-Sepharose 4B亲和柱层析,再经Sepharose CL-6B凝胶过滤层析,得到人早期胎盘纤维连接蛋白(early placenta fib-bronectin,epFN)。经还原及非还原SDS-PAGE和免疫印迹电泳分析,epFN分子量约500kD,是由两个250kD亚基组成,与人足月胎盘纤维连接 相似文献
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系统感染TMV (tobacco m osaic virus)的番茄(Lycopersicon esculentum Mill.)叶胞外蛋白提取液经冰冻干燥浓缩、- 20℃丙酮沉淀、CM-Sephadex C-25离子交换层析、DEAE-Sephadex A-25离子交换层析和Sephadex G-75凝胶层析纯化,获得PAGE均一的β-1,3-葡聚糖酶.SDS-PAGE证明,它包含分子量为36 kD 和27 kD的两个同工酶.以昆布多糖为底物,酶的最适pH 在4.8—5.2之间,在pH 4—8稳定;酶的最适温度在30—40℃之间,在40℃保温1h 后酶活性不变;Km 值为9.2 m g/m L.在系统感染TMV 的番茄叶胞外蛋白提取液中,有分子量为22 kD、27 kD和36 kD的3个β-1,3-葡聚糖酶同工酶 相似文献
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本工作采用分离培养家兔肺内小动脉平滑肌细胞(PASMCs),观察了外源性血小板活化因子(plateletactivatingfactor,PAF)、BN52021(PAF受体拮抗剂)、吲哚美辛、维拉帕米对PASMCs产生血栓素A_2(TxA_2)、前列环素(PGI_2)及对细胞膜Ca~(2+)-ATPase活力的影响。结果表明:(1)基础状态下PASMCs存在花生四烯酸(AA)代谢。(2)外源性PAF通过受体后途径激活环加氧酶促进AA代谢致TXA_2及PGI-2增加,TXA_2/PGI_2比值无明显变化。(3)外源性PAF能直接抑制Ca~(2+)-ATPase活力。(4)维拉帕米可逆转PAF抑制PASMCs膜Ca~(2+)-ATPase活力的效应。 相似文献
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经SephadexG-75凝胶过滤,QAE-SephadexA-50和CM-SephadexC-25离子交换层析的步骤,从湖南产尖吻蝮(Dienagkistrodonacutus)蛇毒中纯化出两个出血毒素(DaHT-1和DaHT-2).SDS-PAGE测得分子量均为23.5kD,IEF-PAGE测得等电点分别为5.6和5.2,两者具有相似的氨基酸组成,其中酸性氨基酸(Asx,Glx)分别占23%和24%,DaHT-1和DaHT-2的最小出血剂量(MHD)分别为0.5μg和0.8μg。都具蛋白水解酶活性,无对TAME,BAEE的水解活性和PLA2酶活性.两者的蛋白水解酶活力与出血活性并非正相关.DaHT-1和DaHT-2的最适温度分别为35℃和40℃,最适pH为6-9,对热均不稳定,温度高于60℃活性完全丧失。金属离子的分析显示每摩尔毒素蛋白约含0.5mol的Zn,1mol的Ca,较多的Na、K、Mg,不含Co。 相似文献
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宛氏拟青霉菌木聚糖酶的分离纯化 总被引:3,自引:0,他引:3
经自然筛选分离得到一株产高木聚糖酶活力的拟青霉属菌,初步鉴定为宛氏拟于霉(PaecilomycesvariotiBainier)菌。该菌所产的木聚糖粗酶液分别经硫酸铵,乙醇沉淀,SephadexG-100,DEAE-SephadexA-50分离纯化后得4个组分,分别称为I,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ。其反应最适温度和pH分别为I,pH4.2,47℃,Ⅱ,pH4.2,52℃,ⅢpH4.0,47℃,Ⅳ,pH3.8,4 相似文献