牛FSHR基因第10外显子单核苷酸多态性及其与双胎性状的关系

以秦川牛和荷斯坦奶牛的双胎母牛和单胎母牛为实验材料 ,以牛的FSHR基因的第 10个外显子作为标记牛双胎性状的候选基因 ,用SNP法进行了多态检测 .结果发现 ,在秦川牛的双胎母牛中突变率 6 0 % (6 10 ) ,而在单胎母牛中突变率为 2 0 % (2 10 ) ;在荷斯坦奶牛中 ,双胎母牛突变率为31 2 5 % (5 16 ) ,单胎母牛突变率为 6 6 7% (1 15 ) ;由此可见双胎牛和单胎牛二者之间FSHR基因的第 10个外显子的突变率差异明显 .这表明 ,选择FSHR基因的第 10个外显子有可能作为双胎性状的候选基因 .序列分析发现 ,在FSHR基因的第 15 0 6位碱基发生了突变 (T→C) ,但氨基酸没有发生变化 .     

显微外科切割家兔胚泡产生同卵双胎

本文介绍外科切割家兔胚泡产生同卵双胎。各期胚泡是从自然排卵的家兔采得的。移植切割早期胚泡的8只受体母兔,2只妊娠,怀孕率为25％;移植切割中期胚泡的7只母兔,3只妊娠,怀孕率47％;移植切割晚期胚泡的6只母兔,3只妊娠,怀孕率50％,共产仔兔七窝。总共移植83对同卵半胚,获仔兔24只,其中7对同卵双胎。实践证明,应用胚泡切割获得家兔同卵双胎的途径是可行的。     

第二极体数目与受精结局及胚胎发育潜能的相关性

目的 探讨第二极体数目与卵母细胞受精结局和胚胎发育潜能之间的关系.方法 根据受精后5 h内卵母细胞极体数目的 不同分为1个极体组（1PB组）、2个极体组（2PB组）、3个极体组（3PB组）和4个以上极体组（≥4PB组）.分别统计各组的正常/异常受精率（2PN率,1PN和3PN率）、优质胚胎率（优胚率）、移植胚胎所占比例以及相应着床率.采用χ2检验对数据进行统计学处理.结果 ① 2PB组的2PN率显著高于其它组,而异常受精率显著低于其它组;随着第二极体数目的 增加,异常受精比例逐渐增加;② 2PB组和3PB组的胚胎着床率显著高于1PB组,以2PB组为最;③ 2PB组和3PB组用于移植的胚胎比例无显著差异.结论① 短时受精后显示有两个极体的卵母细胞其受精结局和发育潜能优于其它极体数目的 胚胎;② 随着第二极体数目的 增加,异常受精比例逐渐增加,可能与卵母细胞减数分裂或基因调控异常有关;③ 1PB组的总受精率高达48.9 %.因此,短时受精后对于仅显示一个极体的卵母细胞需要延长观察时间,谨慎确定受精与否,以防止过度早补救ICSI;④ 1PB组的着床率显著低于2PB组,也不建议首选用于移植.     

刺五加开花后雌蕊的发育状态与受精作用

刺五加Eleutherococcus senticosus(Rupr． et Maxim．)Maxim．植株在开花后雌配子体的发育状态与 一般植物不同在于:雌配子体在开花当天均末成熟,在开花后经4-5天才发育成熟。开花第6天,雌株 和两性株的成熟胚囊百分率各为82．25％和67．25％,其余为未育、败育、退化或未成熟胚囊,未观察到 已受精的胚囊;而此时,雄株的雌配子体退化、花朵全部脱落。伴随着胚囊的分化,刺五加雌株和两性株 的花柱逐渐延长,蜜腺渐趋成熟。开花后4～6天,乳突细胞发育,柱头开始外翻;此后,蜜腺分泌花蜜, 柱头进入可授期。开花第7天,胚囊开始受精。开花后9～10天,雌株已受精的胚囊占胚囊总数的40～ 65％,两性株已受精的胚囊占胚囊总数的25～41％。刺五加花粉萌发至雌雄性核融合的间隔期约为2 ～3天。刺五加的双受精过程与一般被子植物基本相同。其受精作用属于有丝分裂前配子融合类型。 此外,还观察了成熟胚囊退化的类型,观察到多余花粉管进入胚囊以及两个精子与卵受精、两个精子与次生核融合的图象。     

间接免疫荧光鉴别奶牛胚胎性别的研究

本实验用H—Y抗体的间接免疫荧光方法对奶牛6—7日龄胚胎进行性别鉴别。用数排卵法获得的胚胎,共选37枚在含H—Y抗血清的M2培养液中温育30min,用M2培养液清洗后,在含FITC—荧光标记的羊抗鼠IgG二抗的M2中温育30min,经洗后的胚胎在Nikon倒置荧光显微镜下鉴别有无荧光,结果21枚胚胎有特异免疫荧光,判作雄性胚胎;16枚无特异免疫荧光,判作雌性胚胎,分别占57％和43％。这与自然出生公母犊各约50％和性比率无显著差别(P>0.25),判定为雄性的5枚胚胎移植给3头受体奶牛(每头移植1或2枚)、3枚判定为雌性胚胎移植给2头受体奶牛一头移植一枚,枚、另一头移植2枚)移植后两个月时检查有3头受体怀孕,其中,一头移植有荧光胚胎的受体返植无荧光胚胎的2头受体各产一母犊(体重皆41kg)。     

奶（黄）牛卵母细胞体外受精及体外发育的研究

自屠宰场获得150头淘汰黑白花奶牛和19头黄牛的卵巢,取得优、良级卵母细胞2060枚,采用两种培养液(A.B.)和三种不同试剂(Aa、Ba、Bb),对解冻牛精子获能(capacitation)。在38.5℃和相对湿度为100％的5％CO_2箱中进行成熟、受精、发育培养至196小时,其结果表明A液所获得的效果优于B液,但差异不显著;Aa试剂获能优于Bb,差异显著。共获得桑椹胚和囊胚58枚、非手术移植10头牛16次,三头妊娠,其中二头受体在妊娠二月半月后返情,外阴流血,确认为胚胎早期死亡,一头受体妊娠产犊,于1990年4月10日产公犊1头,体长87公分、身高78公分、体重29公斤、妊娠284天,正常分娩。(移植天为0天)。     

蜜蜂转化

经挪威农业大学与奥斯陆大学研究人员合作研究,成功地遗传转化了蜜蜂。他们通过核移植培育出嵌合型幼虫,鉴定发现嵌合幼虫中遗传标记的存在。 卵质移植试验在高温、相对湿度70％条件下进行。先从含有1024～2048个核的8～9小时老龄胚的前极中提取出供体卵质,然后将其注射到仅受精后1～3.5小时、含有1～4个核的受体胚前极里。830个接受     

第二极体排出时间早晚与胚胎发育潜能相关性的研究

目的探讨第二极体排出时间早晚与胚胎质量及发育潜能之间的关系。方法以本生殖医学中心2009年6月-8月IVF—ET周期患者受精卵子为研究对象,共计1170枚卵子。以受精5h为时间界限将受精胚胎分为第二极体正常排出组（正常组）和延迟排出组（延迟组）。分别观察两组卵子正常／异常受精率（2PN率,1PN和3PN率）和优质胚胎率;同时统计阳性妊娠结局所移植胚胎中,正常组和延迟组的胚胎比例各占多少。采用卡方检验对数据进行统计学处理。结果①两组正常受精卵数目之间以及异常受精卵数目之间均有显著性差异（P〈0．05）;两组总受精卵数目之间有非常显著差异（P〈0．001）。②两组的优质胚胎率之间显著性差异（P〈0．05）。③统计阳性妊娠结局所移植的97个胚胎中,来自于正常组的胚胎有92个（94．9％）,仅5个是来自于延迟组（5．1％）。结论受精5h内排出第二极体的卵子其总受精率、正常受精率以及所发育的胚胎质量均显著高于第二极体出现晚的卵子,而且有着较高的胚胎植入率。对受精5h的卵子进行第二极体观察有助于早期预测患者本次IVF-ET周期胚胎的发育潜能以及妊娠结局;还可以作为决定是否行早补救ICSI的判定指标之一。     

多原核受精与HCG日雌孕激素、获卵数、授精密度、受精率、妊娠率的关系

回顾性分析体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的686个周期,比较多原核受精组(348例)和非多原核受精组(338例)两组的一般资料、HCG日雌孕激素、获卵数、授精密度及活力、受精率、卵裂率、妊娠率.结果显示两组HCG日雌孕激素、获卵数、成熟卵率、受精率、卵裂率、妊娠率之间有显著差异(P0.05),授精密度、受精活力之间无差异.表明HCG日雌孕激素较高,获卵数多及未成熟和过熟卵子比例高,预示着发生多原核受精的可能性大,而多原核受精的发生可能有较好的临床结局.     

硬粒小麦与珍珠栗远缘杂交的受精作用和胚胎发育

对硬粒小麦(Triticum durum Desf.)和珍珠栗(Pennisetum glaucum syn.P. americanum)远缘杂交的受精作用和胚胎发育进行了研究。对授粉后的192个硬粒小麦子房进行制片观察,7.81％发生双受精,具胚和胚乳,但胚乳发育往往落后于胚的发育;3.13％只发生了单卵受精,只产生胚而无胚乳;1.04％发生了单极核受精,只产生胚乳而无胚。总受精率为11.98％,成胚率为10.94％。由于胚乳的缺乏或发育异常及败育,最终难以获得有生活力的种子。     

补救性ICSI后受精失败的原因探讨

目的:研究受精失败卵母细胞内精子解浓缩,卵子激活情况及纺锤体染色体分析,探讨补救性ICSI后受精失败的原因.方法:收集生殖中心行补救性ICSI后受精失败(受精率为0)的MII期卵母细胞,并分为早救性ICSI组和晚救性ICSI组.于取卵后48小时用免疫荧光法在激光共聚焦显微镜下观察.结果:收集95个受精失败的卵母细胞(其中早救性ICSI组46个.晚救性ICSI组49个),两组卵子激活障碍的发生率分别为60.9%,51%,没有统计学差异(P＞0.05),卵子激活障碍的发生率远高于其他影响卵母细胞受精的因素的发生率.结论:卵子激活障碍是补救性ICSI后受精失败的最主要原因.     

植物的试管受精

植物的传粉受精作用包括花粉粒从花药转移到雌蕊的柱头上并萌发,花粉管穿过柱头和花柱从珠孔进入胚珠及胚囊,在胚囊里花粉管释放出两个精子,一个与卵细胞结合,将来发育成胚;一个与极核融合,将来发育成胚乳,这样就完成了受精作用,最终发育为种子。把上述诸过程置于人工控制条件下,在无菌环境里接种胚珠或雌蕊到培养基上,然后授以无菌     

中国科学院专家试验鱼类人工授精

中国科学院水生生物研究所鱼类学家刘建康和他的一批助手在湖北省宜昌地区实验鱼类人工授精获得结果。刘建康等在今年四月上旬由上海抵达宜昌,两个多月来,他们对白鲢和鲩鱼(草鱼)进行了11次人工授精的实验。有一次,在一条重17斤的鲩鱼里得到成熟卵达四十三万粒之多。实验中,受精率一般在95％以上,孵化率最后也达到90％以上。孵化出来的鱼苗发育良好。在进行人工授精的同时,他们还置备了从受精的鱼卵到孵化出来的鱼苗的每一个发育阶段的标本,并对鱼卵和鱼苗的低     

绵羊卵母细胞的体外培养、受精与发育的观察

笔者等把屠宰母羊卵巢卵母细胞经体外培养成熟后用于体外受精,曾得到76.2—92.5％的受精率。本实验将体外成熟、受精后的羊卵在体外条件下继续培养或者在2—4细胞期移植给受体母羊之后,分别观察了培养卵的发育情况和移植羊的受胎率。     

贡嘎蝠蛾卵的扫描电镜和生物学观察

贡嘎蝠蛾卵呈椭圆形,在扫描电镜下卵壳表面分为一般卵壳区和受精孔区：一般卵壳区密布颗粒状突起;受精孔区位于卵端部,呈不规则梨形垫状,精孔开口于突起内侧凹陷上部。贡嘎蝠蛾在6月下旬—7月产卵,散产。在平均温度8－10℃、相对湿度80％－90％,卵的发育历期为50天左右,孵化率75％以上。卵常遭受霉菌和寄生蜂天敌危害。     

普通小麦与鸭茅状摩擦禾的远缘杂交 Ⅲ受精和早期胚胎的发育

用石蜡制片法和整体解剖法,对小麦品种Ｆｕｋｕｈｏ经鸭茅状摩擦禾花粉授粉后不同时间固定的子房样品进行了细胞胚胎学观察。结果表明,观察的１６８个授粉后１２０小时（５天）以内的小麦子房中有３２１％、０６％和２６２％分别发生了卵细胞单受精、极核单受精和卵细胞、极核双受精现象。发生卵细胞受精、极核受精和总受精频率分别为５８３％、２６８％和５８９％。对１１６个授粉后９天的小麦子房进行整体解剖,检测到有５００％的子房有幼胚。报道了小麦与鸭茅状摩擦禾杂交的受精过程和早期胚胎发育的情况。为小麦与鸭茅状摩擦禾杂交提供了高频率受精和胚形成的细胞胚胎学证据。     

蜜蜂的生殖

蜂群中每一个雌性的卵在特殊的培育条件下,都能长成蜂王。而且,蜜蜂一般不拒绝接受喂养从别的蜂群中移来的卵和幼虫。这就为人工育王、蜜蜂育种或是为改进王浆生产技术提供了便利条件。只有受精的卵才能长成雌性蜜蜂。养蜂的人都知道,蜂王产在小巢房(一般称为工蜂房)里的卵,多数是受过精的,而产在较大些的巢房(一般称为雄蜂房)里的卵,多数是未受精的。所     

烟草精细胞两个群体的分离

高等植物的倾向受精是一个非常吸引人的研究课题,目前对其机理还不清楚.要想探索高等植物倾向受精现象,前提之一是要分离出一定数量的两个精细胞群体作为分子生物学研究方法的材料.以前的研究表明,烟草(Nicotiana tabacum L.)花粉管中的两个精细胞体积差异明显.这种异型性的精细胞可能与倾向受精有关.烟草是二胞型花粉,生殖细胞只在体内生长的花粉管中才分裂形成两个精细胞.用体内/体外技术培养出花粉管后,爆破花粉管即可释放出花粉管内含物,其中包括两个精细胞.用微量酶液可使两个精细胞分开.然后用显微操作器可挑选出两个大小不同、数量上千的精细胞群体.这种单一纯化的精细胞群体为用分子生物学方法区分两个精细胞的DNA和蛋白质差异打下基础.本研究是高等植物的第二例、二胞花粉植物中的第一例分离两个特定精细胞群体的尝试,为构建烟草两个精细胞的cDNA文库创造了条件.     

无菌动物在奶牛乳房炎发病机理研究中的应用

乳房炎是奶牛养殖场中的高发病,经抗生素治愈后极易复发。疾病的反复发作导致奶牛的产奶量持续下降,乳头坏死,进而被淘汰。乳房炎也是哺乳期妇女常患的疾病,传统的抗生素治疗损伤新生儿的神经系统。在乳房炎的治疗方法中,抗生素因其大量的负面作用使得其已不适合在乳房炎治疗中滥用,应加快开发新的且有效的抗生素替代物用以治疗或预防乳房炎。益生菌在多种疾病的预防与治疗中都有成功的应用实例。因此,益生菌在乳房炎的治疗与预防中是否真的有效是一个有趣的研究方向。益生菌主要于宿主的肠道中发挥其关键作用,因此肠道菌群与乳房炎发病是否有关联,是益生菌能否应用于乳房炎的治疗中需要解答的首个问题。通过菌群移植,对哺乳期小鼠的乳腺组织以及身体其他各项免疫指标进行监控,探究移植健康奶牛粪便小鼠组与移植乳房炎奶牛粪便小鼠组以及移植乳房炎奶牛粪便同时进行益生菌干预组小鼠的乳腺组织是否发生炎症以及炎症程度如何。奶牛肠道菌群移植入无菌小鼠之后,这种菌群结构与功能之上的差异同时被放大形成鲜明的对比。表明健康的肠道菌群结构对于保持奶牛的健康状态有直接的影响,益生菌可调节奶牛的肠道菌群,对于维持奶牛健康,预防和缓解乳房炎有不可忽视的潜能。     

产卵前、后蟾蜍(B.bufo gargarizans)输卵管磷酸酶和粘多糖类的消长变化及其和卵胶形成的关系

Bataillon(1929,1930)和朱洗等(1942,1950,1956)曾报告过两棲类卵的受精和卵胶膜有密切的关系。他们的研究都证明蛙和蝾螈的卵,如没有外面的胶膜或用人工方法去除胶膜后都没有受精能力。由此可见,两棲类卵外的胶膜对受精作用是有很重要意义的。关于蟾蜍卵胶在受精时的机制问题,Kambara(1953)和朱洗等(1956)已作过报道。Kambara证明去掉胶膜后的蟾蜍卵,如在卵的表面涂上6％