γ-射线对大鼠小肠粘膜上皮细胞RNA合成的影响及其机理的研究

本文观察了15戈瑞γ-射线全身照射后,大鼠小肠粘膜上皮细胞核体外转录活性,从染色质结合的RNA聚合酶和可溶性RNA聚合酶活性变化探讨辐射对核转录活性的抑制机理。实验结果表明:(1)照后2小时、8小时和24小时,核转录活性分别下降22.7％、20.8％和28.2％;(2)染色质结合的RNA聚合酶活性变化与细胞核转录活性变化基本平行,提示核转录活性降低与核内染色质损伤有关;(3)照后24小时,核分离的可溶性RNA聚合酶抑制58％,提示辐射至少部分是通过抑制RNA聚合酶而影响细胞核转录活性;(4)在细胞核和分离的RNA聚合酶都观察到RNA聚合酶Ⅱ抑制程度大于RNA聚合酶Ⅰ和酶Ⅲ,酶活性下降主要表现在RNA聚合酶Ⅱ提示不同类RNA聚合酶对辐射的敏感性不同,酶Ⅱ对辐射更敏感。     

小肠粘膜上皮细胞膜—骨架与吸收及防御

本文介绍了当代关于小肠粘膜柱状上皮细胞膜－骨架的结构模型，并阐明它们在营养成分吸收，粘膜栅，获得性免疫栅和细胞增殖中的作用及其与医学的关系。其膜－骨架作用受小肠肽调节，而小肠肽又受中枢调节肽调控。今后人们应从分子－细胞－组织进行多层次研究。这将有利于更入地阐明它们在吸收，防御与炎症中的作用，并启迪对其它系统细胞膜－骨架的研究，且指导设计更有效的口服药物。     

γ线全身照射对大鼠肝癌细胞核RNA合成的影响及其机制的研究

作者观察了8Gy γ线全身照射正常和DEN诱发的肝癌大鼠其肝(癌)细胞核RNA合成的辐射生物效应,发现:<1>正常大鼠在受照射后4h出现一过性的RNA合成增高期,而后表现为抑制,出现双相效应;而肝癌大鼠在受照后4和18h均表现为強烈抑制;<2>在抑制了内源性染色质模板后,转录外源模板的游离型RNA聚合酶出现与染色质结合型酶相似的辐射效应,提示射线可直接影响RNA聚合酶;<3>在照射后4和18h,RNA聚合酶Ⅱ的活性变化率显著高于酶Ⅰ,提示酶Ⅱ及其复合体成分对射线更敏感;<4>肝癌大鼠在受照射后其核RNA合成的抑制与转录活性RNA聚合酶分子数目的减少以及酶的催化效率(延长速度)减低有关,而正常大鼠则是通过不同的机制实现。     

不同月龄大鼠空肠粘膜上皮细胞的形态、增殖及凋亡

为研究雄性大鼠空肠在发生、发育和衰老过程中上皮细胞增殖与凋亡形态学的变化,本实验采用增殖细胞核抗原(PCNA)免疫细胞化学染色、原位末端标记(TUNEL)法检测了不同生长发育阶段SD大鼠空肠绒毛粘膜上皮及小肠腺上皮的细胞增殖、凋亡的变化情况,并统计测量了不同发育阶段大鼠空肠绒毛的高度、肌层厚度及绒毛杯形细胞、肠腺杯形细胞的数量变化。观察到大鼠空肠肠腺隐窝增殖细胞的阳性着色表达从出生后开始增强,到3月龄时达最高峰,12月龄时增殖细胞阳性染色又减弱;凋亡细胞主要分布于固有层,凋亡阳性细胞数在3月龄最多;大鼠空肠绒毛的高度从初生后开始增加,到3月龄达顶峰,而后开始变矮;空肠肌层在3周龄、12月龄较厚;杯形细胞数量于生后3周迅速增长,不同发育阶段的大鼠空肠肠腺隐窝的杯形细胞数量与年龄呈正相关。     

卫星RNA对黄瓜花叶病毒基因组RNA体外合成的影响

卫星ＲＮＡ对黄瓜花叶病毒基因组ＲＮＡ体外合成的影响杨海花,康良仪,赵大健,田波（中国科学院微生物研究所,北京１０００８０）关键词卫星ＲＮＡ,黄瓜花叶病毒,依赖ＲＮＡ的ＲＮＡ聚合酶,体外合成利用卫星ＲＮＡ生防制剂控制田间的番茄、青椒、烟草等由黄瓜花叶病...     

重金属对蚯蚓胃肠道上皮细胞超微结构损伤的研究

重金属污染区的白颈环毛蚓（Ｐｈｅｒｅｔｉｎｅｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａ）胃肠道粘膜上皮细胞损伤的透视电镜观察,结果表明,重金属的轻污染区以及中,重污染区的新蚯蚓胃肠道粘膜上皮细胞均发生了不同程度的损伤,表现为上皮细胞的核周腔扩大,甚至解体, 时可见一线粒体肿胀,凝聚及线粒体嵴消失呈空泡变,高尔基复合体,内质网扩张,溶酶体增生,这些病变随污染程度的不同而不同,重污染区比轻污染要严重。     

大鼠前列腺上皮细胞角蛋白8mRNA表达调节的定位研究

本文应用反义ＲＮＡ探针原位杂交法，研究雄激素对大鼠腹侧前列腺上皮细胞角蛋白８ ｍＲＮＡ表达的影响，发现１，在任何ＶＰ组织切片中，ＣＫ８探针专一、大量任何ＶＰ组织切片中，ＣＫ８探针专一、大量定位于ＶＰ腺上皮细胞中，ＣＫ８ ｍＲＮＡ是前腺上皮细胞特而灵敏的标志。２。去睾大鼠ＶＰ ＣＫ８ ｍＲＮＡ染色增强，提示ＣＫ ８ｍＲＮＡ有过度表达，注射雄激素又可抑制其过度表达，注射雄激素又可抑制其过度表达。３。与     

肠上皮细胞RNA干扰Hsp70基因转染条件的研究

旨在研究肠上皮细胞(IEC-6)RNA干扰效率的特染条件,并对4对Hsp70干抚序列进行筛选,为进一步以RNA干扰(RNAi)技术研究Hsp70对胃肠道的保护功能以及介导信号通路的机理打下基础.以24孔培养板培养IEC-6细胞,利用阳高子脂质体特染FAM-siRNA片段进入IEC-6细胞,采用荧光倒置显微镜和流式细胞仪检测FAM-siRNA和特染试剂Lipofectamine 2000不同剂量比例对特染效率的影响,并进一步采用RT-PCR和Western blotting方法对Hsp70干扰序列进行筛选.试验结果表明,采用脂质体转染法可获得较高的转染效率,其中以80 nmol/L FAM-siRNA+1μL Lipofectamine 2000组的转染效率最高(85.77％).针对4个不同靶位点,进行Hsp70基因干涉,结果表明,4个组中Hsp70 mRNA的表达显著下降,其中oligo 4组的基因表达极显著降低.Western blotting的结果表明,oligo 2、oligo3和oligo4组中的Hap70蛋白表达极显著降低.最终确定80 nmol/L FAM-siRNA+1μL Lipofectamine 2000为最佳转染条件,以oligo 4(Hap70的基因位点为3672 -3692)为最佳RNA干扰靶基因.     

γ线全身照射对大鼠肝癌细胞核RNA合成的影响及其机制的研究

作者观察了８Ｇｙγ线全身照射正常和ＤＥＮ诱发的肝癌大鼠其肝（癌）细胞核ＲＮＡ合成的辐射生物效应,发现：＜１＞正常大鼠在受照射后４ｈ出现一次性的ＲＮＡ合成增高期,而后表现为抑制,出现双相效应;而肝癌大鼠在受照后４年１８ｈ均表现为强烈抑制;＜２＞在抑制了内源性染色质模板后,转外源模板的游离型ＲＮＡ聚合酶出现与染色质结合型酶相似的辐射效应,提示射线可直接影响ＲＮＡ聚合酶;＜３＞在照射后４和１８ｈ,ＲＮＡ     

ATP浓度和缺氧暴露对大鼠脑线粒体RNA和蛋白质体外合成的影响

本文探讨介质中ATP浓度和急,慢性缺氧暴露对大鼠脑线粒体内RNA和蛋白质合成的影响。用差速离心法分离正常和低压舱模拟4000m高原急性连续缺氧暴露3d和慢性连续缺氧暴露40d大鼠脑线粒体,用体外无细胞（cell-free in vitro)^3H-UTP和^3H-Leucine掺入法分别测定线粒体RNA和蛋白质合成活性,结果显示,大鼠急性缺氧暴露后大脑皮质线粒体RNA体外合成活性降低40%,蛋白质合成活性降低60%;慢性缺氧暴露后线粒体RNA和蛋白质合成活性分别为对照的72%和76%;ATP对正常大鼠脑线粒体RNA以及蛋白质的体外合成活性的影响均呈双相性,大于或小于1mmol/L均可产生不同程度的抑制效应,结果提示,缺氧可在转录和翻译两个水平上影响脑线粒体mtDNA的表达,而慢性缺氧暴露时,线粒体半自主性功能的改善可能是机体对缺氧适应的细胞机制之一;ATP对脑线粒体内转录和释放活性的调节是一种经济有效的反馈调节方式。     

RNA干扰HIF-1α影响宫颈癌HeLa细胞上皮细胞间质变标记蛋白的研究

目的 通过RNA干扰技术沉默人宫颈癌HeLa细胞缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）的表达,在细胞水平研究HIF-1α对宫颈癌HeLa细胞上皮细胞-间质变标记蛋白（E-cadherin,N-cadherin,vimentin）表达的影响.方法 将人宫颈癌HeLa细胞株（H0细胞）、转染pGenesil-1空白质粒的HeLa细胞株（H1细胞）及转染HIF-1α-shRNA质粒的HeLa细胞株（H2细胞）分别行常氧及缺氧（150 μmol/L CoCl2培养12 h）培养,应用Western印迹、免疫细胞化学法检测每组HeLa细胞中HIF-1α、上皮标记蛋白E-cadherin、间质标记蛋白vimentin、N-cadherin的表达情况.结果 Western印迹分析各缺氧组HIF-1α、E-cadherin、vimentin及N-cadherin的平均光密度值,免疫细胞化学显示H0细胞、H1细胞缺氧时HIF-1α、N-cadherin、vimentin蛋白高表达,而E-cadherin低表达,H2细胞在乏氧时HIF-1α、N-cadherin、vimentin蛋白表达显著减弱,而E-cadherin高表达.结论 通过shRNA干扰抑制人宫颈癌HeLa细胞HIF-1α,可一定程度上抑制乏氧环境中宫颈癌HeLa细胞上皮细胞-间质变.     

增龄对大鼠输卵管粘膜上皮糖蛋白的影响

目的揭示增龄对大鼠输卵管粘膜上皮糖蛋白的影响.方法分别以5只1月龄、8月龄和18月龄健康雌性SD大鼠作为性成熟前期组(IMG)、性成熟期组(MG)和更年期组(CMG).取输卵管石蜡切片,然后进行PAS及PAS-阿尔新蓝染色.结果①PAS反应显示:峡部粘膜上皮阳性反应明显,三组阳性产物平均光密度值相比,MG与IMG、CMG间差异有高度显著性(P<0.01).②PAS-阿尔新蓝染色显示:峡部粘膜皱襞处上皮细胞游离面有少量淡蓝色阳性产物出现,三组间淡蓝色阳性产物未见明显差异.结论大鼠输卵管峡部粘膜上皮能合成和分泌两种蛋白质:中性糖蛋白和酸性糖蛋白.增龄对大鼠输卵管峡部粘膜上皮中性糖蛋白的合成和分泌有明显的影响,对酸性糖蛋白无明显影响.     

STAT3小干扰RNA的构建及对缺氧复氧人肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的:构建信号转导与转录因子3(STAT3)小干扰RNA(siRNA)表达载体,并观察其对缺氧复氧后人肾小管上皮细胞(HKC)凋亡的影响。方法:设计3对人STAT3 siRNA靶序列,用DNA重组技术克隆至质粒pRNAT-U6.1/neo中,构建重组质粒pRNAT-U6.1-STAT3 siRNA,检测并筛选出最佳抑制效率的siRNA质粒载体。重组质粒转染至缺氧复氧后HKC细胞,Western blotting和Real Time-PCR测定STAT3蛋白和mRNA表达量,流式细胞仪测定细胞凋亡,间接荧光法测定Bcl-2和Bax表达的变化。结果:靶向STAT3基因表达的质粒载体构建成功,并筛选出抑制效率最佳的重组质粒。缺氧复氧后HKC细胞STAT3表达、凋亡率和Bax/Bcl-2比值增加;缺氧复氧后HKC细胞转染重组质粒后STAT3表达、凋亡率和Bax/Bcl-2比值明显降低。结论:成功构建并筛选最佳抑制效率的靶向STAT3的重组质粒载体。该载体可有效抑制缺氧复氧后HKC细胞中STAT3信号转导通路的活化,并进一步通过上调Bcl-2、下调Bax蛋白的表达,从而抑制细胞凋亡。     

硝普钠灌注对移植小肠粘膜细胞凋亡的影响

目的：探讨外源性一氧化氮（nitricoxide,NO）供体硝普钠（sodiumnitroprusside,SNP）对移植小肠粘膜细胞凋亡的影响。方法：64只220-300g雄性SD大鼠随机分成3组：A1组（n=8）,仅行剖腹关腹手术;A2组（n=12）：12对大鼠随机作为供受体行同种异体节段小肠移植,无SNP干预;A3组（n=16）：16对大鼠随机作为供受体行同种异体节段小肠移植,SNP加入灌注液进行供肠灌注。采用前述3。组动物模型再灌注5小时肠造口标本,TUNEL法检测小肠蜡块标本的细胞凋亡情况。结果：与A1组（3．86±4．74％）相比,A2（22．44±10．94％）、A3组（17．12±8．44％）小肠粘膜的细胞凋亡指数均有显著增高（P〈0．05）,A3组较A2组细胞凋亡指数显著降低（P〈0．05）。结论：小肠移植导致小肠粘膜细胞凋亡增加,外源性NO供体SNP灌注能够显著降低植入小肠的细胞凋亡,从而可能减弱粘膜屏障的损伤。     

硝普钠灌注对移植小肠粘膜细胞凋亡的影响

目的:探讨外源性一氧化氮(nitric oxide,NO)供体硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)对移植小肠粘膜细胞凋亡的影响。方法:64只220～300g雄性SD大鼠随机分成3组:A1组(n=8),仅行剖腹关腹手术;A2组(n=12):12对大鼠随机作为供受体行同种异体节段小肠移植,无SNP干预;A3组(n=16):16对大鼠随机作为供受体行同种异体节段小肠移植,SNP加入灌注液进行供肠灌注。采用前述3组动物模型再灌注5小时肠造口标本,TUNEL法检测小肠蜡块标本的细胞凋亡情况。结果:与A1组(3.86±4.74%)相比,A2(22.44±10.94%)、A3组(17.12±8.44%)小肠粘膜的细胞凋亡指数均有显著增高(P<0.05),A3组较A2组细胞凋亡指数显著降低(P<0.05)。结论:小肠移植导致小肠粘膜细胞凋亡增加,外源性NO供体SNP灌注能够显著降低植入小肠的细胞凋亡,从而可能减弱粘膜屏障的损伤。     

电离辐射对大鼠小肠吸收酪氨酸的影响及其机制的初步探讨

用在体方法研究电离辐射后大鼠小肠吸收酪氨酸(Tyr)的变化并对其机制进行了初步探讨。结果说明,以较低剂量6Gyγ线照射后第3天,出现暂时Tyr吸收障碍,以后很快恢复,并持续在正常水平。随照射剂量的增加,吸收障碍加重,3Gy以下照射,则不出现Tyr吸收障碍。6Gy照射后早期及不同剂量照射后第3天,肠上皮细胞计数及空肠和血浆的二胺氧化酶(DAO)活性变化与肠吸收Tyr的变化有较好的一致关系,表明肠上皮的损伤是引起照射后吸收障碍的原因之一。提示DAO活性也是能反映肠道辐射损伤的一个较敏感指标。实验还测定了小肠粘膜Na~ ,K~ -ATP酶活性以及用加入葡萄糖后的小肠壁电位差和短路电流的增加幅度来判断Na~ 的跨膜转运情况,说明Na~ ,K~ -ATP酶活性下降及Na~ 转运障碍也是引起肠吸收Tyr障碍的原因。     

不同液体复苏对失血性休克大鼠肠粘膜的影响

目的:观察不同液体复苏对失血性休克大鼠肠粘膜的影响以及肠粘膜的变化。方法:利用大鼠失血性休克模型以及不同的补液方式,在复苏后120分钟时处死大鼠,取回肠4cm,做病理切片并根据Chiu等方法评估回肠黏膜上皮损伤指数。结果:液体复苏组的肠粘膜损伤程度小于休克不补液组(p<0.05),而限制型液体复苏组的肠粘膜损伤程度小于充分液体复苏组(p<0.05)。结论:通过本实验对肠粘膜的观察可以得出,对于失血性休克,液体复苏时有效的抗休克方式,而对于复苏的方式来说,从肠黏膜的保护方面来说,限制型液体复苏是优于传统的充分液体复苏的。     

不同液体复苏对失血性休克大鼠肠粘膜的影响

目的：观察不同液体复苏对失血性休克大鼠肠粘膜的影响以及肠粘膜的变化。方法：利用大鼠失血性休克模型以及不同的补液方式,在复苏后120分钟时处死大鼠,取回肠4cm,做病理切片并根据Chiu等方法评估回肠黏膜上皮损伤指数。结果：液体复苏组的肠粘膜损伤程度小于休克不补液组（p〈0.05）,而限制型液体复苏组的肠粘膜损伤程度小于充分液体复苏组（p〈0.05）。结论：通过本实验对肠粘膜的观察可以得出,对于失血性休克,液体复苏时有效的抗休克方式,而对于复苏的方式来说,从肠黏膜的保护方面来说,限制型液体复苏是优于传统的充分液体复苏的。     

RNA和蛋白质合成抑制剂对番茄种子吸湿-回干抗吸胀冷害效应的影响(简报)

吸湿－回干处理明显增强低温吸胀番茄种子的超氧物歧化酶、过氧化氢酶活性和呼吸速率,进而提高种子活力。在吸湿－回干处理的吸湿过程中加入ＲＮＡ和蛋白质合成抑制剂,虽然超氧物歧化酶和过氧化氢酶活性仍有增强,但种子的呼吸速率和活力显著降低。     

RNA合成抑制剂对光敏感核不育水稻花粉育性的影响（简报）

用2－硫尿嘧啶（2－TU）和尿嘧啶（U）喷施一次和二次枝梗原基分化期及花粉母细胞形成期的水稻农垦58S叶面,前者使可育日长条件下的农垦58S花粉败育率显著增加。此种作用可因U的处理而解除。但对照品种农垦58则无类似的变化：