猫外侧膝状体神经元HRP示踪结合生长抑素的免疫组织化学研究

本文采用HRP逆行示踪的方法,在猫视皮质的17区多点微量注射30％HRP,逆行标记外侧膝状体核（LGN）至视皮质的中继神经元,继用免疫金银法作生长抑素（SS）免疫组织化学,试图双标记LGN的中断神经元。结果显示：光镜下HRP标记细胞与SS是性细胞清晰可辨,HRP标记细胞内为较粗的棕色颗粒,分布于胞浆和树突基部;而SS免疫阳性细胞内的颗粒为银染黑色颗粒;HRP和SS双标记神经元内,上述两种颗粒共存,警备LGN的A、A1和C板层均有SS免疫阳性凶的分布;HRP标记细胞分布于A和A1板层;双标记神经元位于A和A1板层;C板层未见。本文结合以前的研究认为,SS在LGN至视皮质传导通路中的作用,可能与视觉信息的传递和调制有关。     

友鼠外侧膝状体中继神经元HRP示踪结合谷氨酸免疫组织化学研究

采用 HRP逆行追踪结合谷氨酸免疫组织化学方法观察大鼠外侧膝状体背侧核 (d L GN)中继神经元的化学递质。光镜下 HRP标记细胞与谷氨酸免疫阳性细胞清晰可辩。HRP单标记细胞位于外侧膝状体背侧核内 ,胞浆及树突基部充满棕色颗粒。免疫金银法 (IGSS)单标记的谷氨酸免疫阳性神经元分布于外侧膝状体背侧核与腹侧核 ,胞体内充满黑色银颗粒。在外侧膝状体背侧核内可见 HRP和谷氨酸双标记细胞 ,其数目占 HRP标记细胞总数的 70 .9± 6 .4%。本文提示 ,谷氨酸可能是外侧膝状体背侧核投射至视皮质的中继神经元的神经递质之一。     

生长发育过程中金黄仓鼠视皮层中Cholecystokinin(CCK)阳性神经元的变化及CCK睁眼效应观察

利用免疫组织化学方法对生后发育过程中金黄仓鼠视皮层中ＣＣＫ阳性神经元的出现时间和分布层次的变化进行了观察。利用多功能图象分析仪（ＭＰＶ）对生后不同年龄段动物视皮层阳性神经元的数量和胞体大小进行定量测定。ＣＣＫ阳性神经元在动物生后第７天开始出现,主要分布在第Ｖ,ＶＩ层;神经元的相对数量为３．９％,阳性胞体的平均面积为１９．９μｍ＾２生后第１２天动物开始睁眼时,其神经元的分布层次、胞体数量及胞体大小均     

家鸽血管活性肠肽阳性神经元在顶盖和峡核中的分布及形态特征

用免疫细胞化学技术研究了血管活性肠肽(VIP)阳性神经元在家鸽(Columba livia)视顶盖和峡核中的分布,实验结果表明.在顶盖中VIP阳性神经元主要分布在Ⅱ_1层.并有少数VIP阳性神经元位于Ⅱ_1和Ⅲ层,在峡核大细胞部(Ime)和峡核小细胞部(Ipc),VIP阳性神经元基本呈均匀分布,在Imc和Ipc内分别占细胞总数的80%和50%.     

血管活性肠肽(VIP)在文昌鱼体内免疫组织化学定位的研究

本文用免疫组织化学技术首次发现VIP在文昌鱼体内有广泛分布。结果表明,VIP免疫阳性反应出现在消化道各部位,如中肠突、中肠前和后部以及后肠、神经系统、发育早期性腺以及口腔前庭两侧皮下组织中。     

生长发育过程中金黄仓鼠视皮层中Cholecystokinin(CCK)阳性神经元的变化及CCK睁眼效应观察

利用免疫组织化学方法对生后发育过程中金黄仓鼠视皮层中ＣＣＫ阳性神经元的出现时间和分布层次的变化进行了观察。利用多功能图象分析仪（ＭＰＶ）对生后不同年龄段动物视皮层阳性神经元的数量和胞体大小进行定量测定。ＣＣＫ阳性神经元在动物生后第７天开始出现,主要分布在第Ｖ,ＶＩ层;神经元的相对数量为３．９％,阳性胞体的平均面积为１９．９μｍ２生后第１２天动物开始睁眼时,其神经元的分布层次、胞体数量及胞体大小均达到成年动物的水平,其阳性神经元主要分布在第ＩＩ－ＩＶ层,神经元相对数量为８．０％,其胞体面积为７３．２μｍ２。根据ＣＣＫ阳性神经元在睁眼期的出现率、分布层次及胞体大小都达到成年动物水平这一特点,给新生鼠施加ＣＣＫ,证明视皮层中ＣＣＫ与动物生后睁眼的迟早有一定相关性     

大鼠视皮质—外侧膝状体HRP示踪结合谷氨酸及GABA免疫组化研究

采用HRP逆行追踪观察了大鼠视皮质锥体细胞至外侧膝状体背核的投射,结合谷氨酸及GABA免疫组化方法探测了该类细胞的化学递质。光镜下HRP标记细胞与谷氨酸和GABA免疫阳性细胞清晰可辨。谷氨酸免疫阳性神经元主要分布在视皮质第Ⅱ～Ⅵ层。在第Ⅵ层可见HRP和谷氨酸双标记的锥体细胞,双标细胞的数量约占HRP标记细胞总数的42.7％。GABA免疫阳性神经元分布在皮质各层。但未见有GABA和HRP的双标记神经元。因而有充分理由推测:谷氨酸可能是视皮质投射至外侧膝状体背核的锥体细胞的神经递质之一。     

血管活性肠肽免疫阳性神经元在家鸽中脑和间脑中的分布

用免疫细胞化学技术研究了血管活性肠肽（ＶＩＰ）阳性神经元在家鸽（Ｃｏｌｕｍｂａｌｉｖｉａ）中脑和间脑核团的分布。实验结果表明,ＶＩＰ阳性神经元主要分布于如下核团：下丘侧核（ＬＨＹ）、蔡氏腹区（ＡＶＴ）、中央灰质（ＧＣｔ）、中脑深核腹部（ＭＰｖ）、中脑外侧核背部（ＭＬｄ）、脑桥脚盖致密体（ＴＰｃ）、丘脑间核（ＩＣｏ）、兰斑核（ＬｏＣ）、脑桥嘴部网状核（ＲＰＯ）、兰斑背部亚核（ＳＣｄ）、兰斑腹部亚核（ＳＣｖ）和脑桥尾部网状核巨细胞部（ＲＰｇｃ）。在这些核团中,除ＭＬｄ中的ＶＩＰ阳性神经元位于其背部外,其余核团中ＶＩＰ阳性神经元分布基本上是均匀的。     

血管钠肽(VNP)在大肠杆菌中的表达、纯化及活性分析

利钠肽家族成员在维持机体心血管平衡等方面发挥着重要的生理作用.人工设计的新型利钠肽分子血管钠肽(VNP)由C-型利钠肽和A-型利钠肽的功能结构域嵌合组成,具备两种利钠肽分子的优势功能.采用分子生物学方法,构建了BL21(DE3)/pGEX-4T-1-VNP原核表达系统,在大肠杆菌中实现了融合蛋白GST-VNP的可溶性表达.经离心、超声波破碎、GST亲和层析、G25凝胶过滤和肠激酶酶切后超滤离心便可获得电泳纯的目的产物VNP,最终每升发酵液可获得20 mg重组VNP蛋白.大鼠离体血管环张力法和去膀胱尿液收集法活性评价显示,VNP具有扩张血管和利尿双重功效.     

GABA神经元在金黄地鼠视觉中枢的分布

本文用免疫细胞化学技术研究了GABA在金黄地鼠视觉中枢的分布特征,同时用统计学方法作了定量分析,结果表明:GABA阳性神经元分布在整个视皮层和上丘中,呈不均匀分布,外膝体中GABA阳性神经元密度较低.视皮层中GABA阳性神经元密度为781mm~2,占视皮层细胞总数的19.7%,上丘中其密度为812/mm~2,占22.3%,视皮层Ⅰ层中GABA阳性神经元为52%,上丘表层(浅灰层及视觉层GABA阳性神经元为56%,GABA阳性神经元包括不同类型的细胞.在视皮层中可观察到GABA免疫疫应阳性的锥体细胞.     

GABA 及荷包牡丹碱对金黄地鼠上丘视觉神经元反应性质的影响

金黄地鼠上丘的浅层细胞为视觉神经元,在记录处电泳γ-氨基丁酸(GABA)或其拮抗剂荷包牡丹碱(bicuculline简写为Bicu)可以改变细胞对视觉刺激的反应特性。GABA 降低细胞对闪光的反应强度,Bicu 则提高细胞对闪光的反应强度,并削弱外周抑制。电泳 GABA 使76.6%(n=60)的细胞反应下降,而 Bicu 使90.0%的细胞反应增强。对自发活动也有类似的影响,Bicu 还使65.0%(n=60)的细胞感受野增大.此外这两种药物对细胞的方位选择性也有一定影响。     

家兔大脑嗅鼻沟后缘皮层对内膝体神经元电活动的下行性影响

在39只用三碘季铵酚麻痹的成年家兔上观察刺激大脑皮层听区对内膝体神经元听反应的影响。刺激 Woolsey 氏 AⅠ、AⅡ区及其周围颞叶皮层,或刺激大脑嗅鼻沟后缘皮层,能抑制一部分 MGB 神经元的听反应,但也有少数神经元受到易化。有效的颞叶皮层刺激点分布范围弥散,而嗅鼻沟后缘皮层的有效刺激点分布得相当集中。根据抑制潜伏期较短以及抑制内膝体早、晚二反应的潜伏期相同等事实,作者认为,刺激嗅鼻沟后缘皮层对 MGB 神经元的下行性影响发生在 MGB 核团之内。     

金黄地鼠视皮层通过胼胝体顺行和逆行激活的神经元的电活动和分布

用细胞外记录技术研究了金黄地鼠一侧视皮层神经元对电刺激另一侧相应部位的反应及其对视觉刺激反应的特点。(1)在17—18a 交界区大多数(78%)细胞能被电刺激对侧相应点所驱动。在17区内部,被驱动细胞数随离开17—18a 交界距离增加而减少。(2)按对电刺激的反应形式,记录的细胞可分为四类:a.逆行驱动细胞,占17—18a 交界区记录细胞数的20%;b.顺行驱动细胞,占52%中;c.自发发放因电刺激而减少或完全停止的细胞,占6%,d.其余细胞(22%)对电刺激没有可察觉的反应。(3)在17—18a 交界,除了Ⅰ层以外的各层都可记录到顺行驱动细胞,而逆行驱动细胞则主要集中在Ⅲ及Ⅴ层。(4)17—18a 交界细胞感受野(RF)多位于垂直中线附近的对侧视野内,有些 RF 跨越中线,其边界延伸到同侧约10°处。(5)逆行驱动细胞包括刁和 Blakemore 以前在视皮层中记录到的所有细胞类型和各种程度的眼优势,但单眼细胞的比例增加,非对称式 RF 和中心对称式的给-撤型 RF 的比例有所减少。     

家兔外膝体神经元回路的研究

家兔的视觉系统有其特色,其外膝体的解剖和生理特性与猫的情况有所不同。本文综述了家兔外膝体神经元回路研究的进展,特别是关于返回抑制回路的组成和机能意义为研究进展,并以此为例说明丘脑-大脑皮层的复杂相关关系。     

人胎视皮质皮质下层NPY－IR神经元的发育

本文用免疫组化方法研究了１６周至足月人胎视皮质皮质下层ＮＰＹ－ＩＲ神经元的发育。各胎龄视皮质ＳＰ层内均有ＮＰＹ－ＩＲ神经元分布。从１６周至２６周,ＮＰＹ－ＩＲ神经元密度逐渐增高并于２６周达高峰;３２周以后阳性神经元密度随胎龄增长而下降。人胎视皮质ＳＰ层ＮＰＹ－ＩＲ神经元形态也随胎龄而变化;２０周以前,ＮＰＹ－ＩＲ神经元大多是胞体较小,突起短而少的未分化神经元、ＳＰ层内ＮＰＹ－ＩＲ纤维少。２０周以后,ＮＰＹ－ＩＲ神经元胞体增大,突起增多、变长;多极和双极、双簇神经元随胎龄增长而增多;ＳＰ层内的ＮＰＹ－ＩＲ纤维大量增加,部分纤维穿入皮质板。３２周以后,多极ＮＰＹ－ＩＲ神经元逐渐减少,双极双簇神经元所占比例相对增高。ＮＰＹ免疫组化结合ＮＡＤＰＨ－ｄ组化显示人胎视皮质ＳＰ层大多数ＮＰＹ－ＩＲ神经元同时呈ＮＯＳ阳性。本研究观察到人胎视皮质ＳＰ层内ＮＰＹ－ＩＲ神经元发育可分为发生、成熟和退化三个阶段。     

胎儿视皮质皮质下层含─氧化氮合酶神经元的发育

本文用出生前１７周至３６周胎儿标本１０个,死后４小时内作常规灌注固定,取脑后作视皮质冰冻切片（３０ｕｍ）,用一氧化氮合酶（ＮＯＳ）组织化学法孵育切片２～４小时,在视皮质皮质下层（ＳＰ）可见ＮＯＳ强阳性神经元。这些神经元胞体大小不一、形态各异、突起显示呈高尔基染色外观,部分神经纤维含有膨体和生长锥。２０周以后,从ＳＰ层有ＮＯＳ阳性神经纤维伸入皮质板或白质。随着胎龄增长,ＮＯＳ阳性神经元密度增加,胞体切面积增大,神经元由幼稚趋向成熟。本研究还观察到胎儿ＳＰ内ＮＯＳ阳性神经元可从形态上明显地划分为两个阶段,并推测ＮＯＳ合成的一氧化氮（ＮＯ）在突触建立和修饰、突触间信息传递、传入纤维对靶器官的识别和脑组织局部血流调节等过程中起着重要作用。     

金黄地鼠视觉中枢发育过程中P物质神经元数量及分布的变化

本实验用免疫细胞化学技术观察了不同年龄金黄地鼠视皮层和上丘中P物质(SP)阳性神经元数量和分布的变化,同时观察了不同年龄金黄地鼠视皮层SP阳性神经元的形态和类型。结果表明,出生后10天小鼠视皮层SP阳性神经元为36％,Ⅱ—Ⅳ层密度最大,约占40％。上丘中SP阳性神经元约为37％。出生后20天,视皮层及上丘中SP阳性神经元分别减少到23％和16％。视皮层Ⅱ—Ⅳ层减少最明显,Ⅴ层和Ⅵ层变化不大。成年鼠视皮层及上丘中偶见SP神经元,但出现一些SP阳性纤维。出生10天及20天鼠视皮层中SP阳性神经元的形态及类型没有差别。