形目8种鸟类线粒体DNA多态性研究

采用１４种限制性内切酶,对号鸟形目８种鸟类（Ｔｙｔｏａｌｂａ、Ｔｃａｐｅｎｓｉｓ、Ｏｔｕｓｂａｋｋａｍｏｅｎａ、Ｏｓｃｏｐｓ、Ａｓｉｏｏｔｕｓ、Ａｆｌａｍｍｅｕｓ、Ｓｔｒｉｘａｌｕｃｏ、Ｇｌａｕｃｉｄｉｕｍｃｕｃｕｌｏｉｄｅｓ）线粒体ＤＮＡ进行限制性片段长度多态分析,结果表明：不同种间存在基因组长度多态性,短耳号鸟为２３３５ｋｂ,长耳号鸟为１９７８ｋｂ,斑头鸺留鸟为１８６２ｋｂ,红角号鸟为１７６５ｋｂ。号鸟形目种间具有较高的遗传变异,其中仓号鸟和草号鸟的平均遗传距离为１０％,长耳号鸟和短耳号鸟平均为１０８％,红角号鸟和领角号鸟平均为１３１％,灰林号鸟和斑头鸺留鸟为１２３％,其中红角号鸟与斑头鸺留鸟的平均遗传距离最大为１７５％。号鸟形目鸟类线粒体ＤＮＡ的进化速率为每百万年变化２０％～２２％,提示号鸟形目两个科间在距今２８００～３０００万年前分歧开来,同时,鸱号鸟科各种间的分歧时间在距今２０００～２５００万年前,即处于中新世中期。     

鸮形目8种鸟类线粒体DNA多态性研究

采用14种限制性内切酶,对鸮形目8种鸟类(Tyto alba、T.capensis、Otus bakkamoena、O.scops、Asio otus、A.flammeus、Strix aluco、Glaucidium cuculoides)线粒体DNA进行限制性片段长度多态分析, 结果表明:不同种间存在基因组长度多态性,短耳鸮为23.35 kb,长耳鸮为19.78 kb,斑头鸺鹠为18.62 kb,红角鸮为17.65 kb.鸮形目种间具有较高的遗传变异,其中仓鸮和草鸮的平均遗传距离为1.0%,长耳鸮和短耳鸮平均为10.8%,红角鸮和领角鸮平均为13.1%,灰林鸮和斑头鸺鹠为12.3%,其中红角鸮与斑头鸺鹠的平均遗传距离最大为17.5%.鸮形目鸟类线粒体DNA的进化速率为每百万年变化2.0%～2.2%,提示鸮形目两个科间在距今2 800～3 000万年前分歧开来,同时,鸱鸮科各种间的分歧时间在距今2 000～2 500万年前,即处于中新世中期.     

长耳Xiao越冬栖息地环境因子分析

通过对河北省保定市直隶 督署博物馆越冬长耳Ｘｉａｏ种群数量和习性的长期观察及其越冬栖息地环境因子的分析,得出如下结论：总督署博物馆虽地处保定闹市中心,但由于其建筑格局等因素影响,院内噪声值、大气中的二氧化硫、氮氧化物、总悬浮物微粒的含量明显低于院外;博物馆院内种植有多株高大的常绿乔木为长耳Ｘｉａｏ提供了良好的栖息、隐蔽场所;越冬长耳Ｘｉａｏ种群数量的变动与温度有一定的对应关系;近年来在总督署博物馆     

纵纹腹小Xiao,雕Xiao及长耳Xiao的卵壳超微结构研究（Xiao形目：…

本文首次报道纵纹腹小Ｘｉａｏ，雕Ｘｉａｏ，长耳Ｘｉａｏ卵壳的气孔、木册层、锥体层、乳锥体、壳膜，基底帽等结构的扫描电镜观察，并对不同种类进行分析，初步探讨了它们的分类价值和生态意义。     

一个增大的鸟类线粒体基因组

本文首次报道一个增大的鸟类线粒体基因组,其种类是鸟纲、xiao形目、鸱xiao科的短耳xiaoAsio flammeus。经14种限制性内切酶的单酶解和双酶解消化后的电泳图谱显示,其基因组大小约为23.5kb左右,与通常的鸟类mtDNA基因组相比,约高出6kb左右。     

中国大陆部分地区Drosophila immigrans果蝇种群中mtDNA的遗传多态？…

选用１４种限制性内切酶分布在中国大陆部分地区的Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａｉｍｍｉｇｒａｎｓ果蝇种群的线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）进行了分析,在６个地理种群的４６例单雌系中仅检测到１１种限制性类型,表征种群内均一程度的Ｉ值平均为０．８３３,衡量种群间等同程度的Ｊ值平均为０．７９７,在整个种群中只有１６．８％（Ｇｓｔ）的变异是由种群间变异所引起的,说明分布在中国大陆部分地区的Ｄ     

胡子鲇mtDNA多态性及限制性酶切图谱

用８种限制性内切酶对胡子鲇（ＣｌａｒｉａｓｆｕｓｃｕｓＬａｃｅｐｅｄｅ）肝脏线粒体ＤＮＡ（ＭｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌＤＮＡ,ｍｔＤＮＡ）进行了分析。ＸｈｏⅠ、ＥｃｏＲⅠ、ＰｓｔⅠ、ＢａｍＨⅠ、ＸｂａⅠ、ＨｉｎｄⅢ在ｍｔＤＮＡ分子上分别有２、３、１、１、３和５个切点。胡子鲇种内存在ｍｔＤＮＡ酶切片段长度多态性（Ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｆｒａｇｍｅｎｔｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ,ＲＦＬＰ）。经ＢｇｌⅠ、ＢｇｌⅡ酶解,ｍｔＤＮＡ都出现两种酶切类型,Ⅰ型各具２个片段,Ⅱ型各具１个片段。ｍｔＤＮＡ分子量为１０．２４２×１０６ｕ,长度约为１６．６８ｋｂ。用双酶解法建立了胡子鲇ｍｔＤＮＡ的限制性酶切图谱,并对ＲＦＬＰ现象进行了分析。     

藏鼠兔与高原鼠兔表型及分子性状的比较

本文应用限制性内切酶分析藏鼠兔和高原鼠兔的线粒体ＤＮＡ限制性片段长度多态性,并结合形态、生镜、地史和化石资料综合探讨两物的异同。结果表明,形态上差异显著的两个物种,在分子水平上也同样具有明显的区别,用１６种酶分别消化各样品,共检出３０例限制性类型,两种间存在丰富的多态性;它们的ｍｔＤＮＡ分子均为１７．９ｋｂ（千碱基对）左右;平均遗传距离为０．０４５５,分歧时间约为距今二百三十万前的上新世晚期,相当     

苏云金芽孢杆菌(Bt)晶体毒蛋白基因在烟草叶绿体中的表达

将全长３．５ｋｂ的Ｂｔ基因３’端缺失,得到长为２．１ｋｂ、１．８ｋｂ的基因。分别将这３个长度（１．８ｋｂ、２．１ｋｂ、３．５ｋｂ）的基因置于水稻叶绿体ｐｓｂＡ基因的启动子和终止子调控之下,并与选择标记基因ａａｄＡ（编码氨基糖苷－３’－腺苷酸转移酶,具壮观霉素抗性）表达盒相连;以烟草叶绿体基因ｔｒｎＨ－ｐｓｂＡ－ｔｒｎＫ为同源片段,构建成叶绿体转化载体ｐＢＴ３、ｐＢＴ８和ｐＢＴ２２。用基因枪把Ｂｔ基     

玉米（Zea mays L.）cdc2和Prh1基因的染色体原位杂交物理定位

首次报道了玉米两个低拷贝基因ｃｄｃ２和ｐｒｈ１生物素标记的染色体原位杂交结果。供试探针为这两个基因的ｃＤＮＡ克隆ｃｄｃ２ＺｍＡ和ＺｍＰＰ１,其长度分别为１．３ｋｂ和１．７ｋｂ。结果表明,ｃｄｃ２ＺｍＡ的信号分布在第４、８和９染色体长臂,与着丝粒的百分距离分别为５７．８７±２．６８、２８．４２±１．４５和８８．１６±３．２８,检出率为１０．０７％．３．１３％和８．３３％。ｐｒｈ１ＺｍＰＰ１的信号分布在第４、６和８染色体长臂,与着丝粒的百分距离分别为５３．６２±１．１７．６０．７７±２．９０和１７．１０±１．６１,检出率为１２．０７％．５．１７％和６．４７％。对非放射性原位杂交技术以及基因ｃｄｃ２和ｐｒｈ１的物理位置与功能间的关系作了讨论。     

麦迪霉素4″—O—丙酰基转移酶（mpt）基因结构的研究

对含有麦迪霉素４″－Ｏ－丙酰基转移酶（ｍｐｔ）基因的ＢａｍＨＩ－ＢａｍＨＩ８．０ｋｂ的ＤＮＡ片段进行限制性酶切分析,绘制出了含有２１个酶切位点的限制性酶切图谱。以含有碳霉素异戊酰基转移酶基因（ＣａｒＥ）的２．４ｋｂ ＤＮＡ片段为探针,经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分子杂交,将ｍｐｔ定位于一个ＥｃｏＲＩ－ＥｃｏＲＩ－ＰｓｔＩ３．０ｋｂ的ＤＮＡ片段上,将该片段克隆至大肠杆菌／链霉菌穿梭质粒载体ｐＷＨＭ３     

Tx基因与Igk基因的同源性研究及其在不同细胞株的表达

本文对以前报道的Ｔｘ基因２．８ｋｂ片段的核苷酸序列与人免疫球蛋白ｋａｐｐａ链Ｃ区基因的核苷酸序列及其编码产物的氨基酸序列进行了同源性比较。结果表明,Ｔｘ基因与ｋａｐｐａ链Ｃ区基因的同源性高达９９．５％以上,编码区的同源性高达１００％。从而提示Ｔｘ基因与ｋａｐｐａ链Ｃ区基因可能是同一种基因。限制性内切酶图谱及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交分析,也进一步支持这一观点。本文还报道了ｋａｐｐａ链Ｃ区基因在不同细     

纵纹腹小Xiao在中国的分布,栖息地及各亚种的梯度变异（Xiao形…

文章首次报道了纵纹腹小Ｘｉａｏ Ａｔｈｅｎｅ ｎｏｃｔｕａ不同亚种之间第１枚初级飞羽外羽及最外侧１枚小翼羽的斑纹特征,爪的累积长度及左脚中趾爪长的差异．增补了小Ｘｉａｏ在国内新的分布点,在国内的４个亚种中,Ａ,ｎ．ｌｕｄｌｏｗｉ栖息于最冷,多风的高海拔地区,它的羽色最深,体形最大,翅也最长;Ａ．ｎ．ｃｒｉｅｎｔａｌｉｓ分布于较干热的沙漠地区,体色明显变白,是国内亚种中羽色最淡的,我国甘肃、青海一带     

中国主要鹅品种的线粒体DNA多态性与起源分化研究

运用19种限制性内切酶对中国11个家鹅品种138个样本进行了mtDNA的限制性片段长度多态性（RFLP）分析。在使用的19种内切酶中,有7个酶检测出多态。综合27种限制性态型（restrictionmorph）,可得到6种mtDNA单倍型（hopotype）。伊犁鹅与另外10个鹅品种没有共享的单倍型,遗传距离和UPGMA聚类分析也表明,伊犁鹅与这些品种具有不同的起源。EcoRV、HaeⅡ、HincⅡ和KpnⅠ4种酶的限制性态型可作为鉴别两种起源家鹅的母系遗传标记。起源于鸿雁的10个鹅品种群体内出现一定的遗传差异,其群体多态度（π）、单倍型间平均遗传距离（P）、品种间平均净遗传距离（δnet）分别为0．025％、0．266％和0．029％。白羽鹅品种在形成过程中经历过创立者效应（foUndereffect）。这10个鹅品种可能起源于两个不同地理区的鸿雁类群。     

马铃薯GBSS基因5‘侧翼区调控作用的研究

将０．４、０．８、１．６、２．９ｋｂＧＢＳＳ基因的５＇侧翼区与ＧＵＳ基因融合,构建了双元表达载体。０．８ｋｂＧＢＳＳ－ＧＵＳ通过基因枪介导在块茎切片中获得了瞬间表达。以上建构物通过农杆菌介导转入了马铃薯。Ｘ－Ｇｌｕｃ染色及ＰＣＲ结果证实已获得转基因植株。利用离体块茎诱导系统,ＧＵＳ表达用荧光进行定量检测,结果显示,２．９、１．６、０．４ｋｂＧＢＳＳ－ＧＵＳ的表达均以块茎明显高于茎段,达２￣１０倍。     

由小麦×玉米获得的普通小麦加倍单倍体后代的RFLP变异

用小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ　ａｅｓｔｉｖｕｍＬ．）的ｒＤＮＡ克隆ｐＴａ７１和与小麦基因组有部分同源性的玉米（ＺｅａｍａｙｓＬ．）ＤＮＡ克隆作探针,对由小麦ｘ玉米获得的普通小麦加倍单倍体（ＤＨ）后代群体进行ＲＦＬＰ分析。结果发现,不但用ｐＴａ７１在这些ＤＨ后代中检测到ｒＤＮＡ所发生的明显的减少和扩增及非转录间隔区的限制性片段长度的变化,而且用与小麦基因组部分同源的玉米克隆ＭＲ１３和ＭＲ５０在一些ＤＨ后代中检测到缺失变异,特别是用ＭＲ１３在普通小麦ＤＨ系的１８号株的基因组中检测到大幅度的限制性片段长度的变化,即原来的４．３ｋｂ的强信号带消失,取而代之的是４０．０ｋｂ、２．５ｋｂ和２．０ｋｂ三条杂交带。这可能与小麦基因组ＤＮＡ较大的重排事件有关,也可能是由外源的玉米ＤＮＡ插入造成的。     

三江白猪线粒体DNA的多态性

采用22种限制性内切酶分析了三江白猪mtDNA多态性。在60头个体中检出30种限制性态型,归结为7种基因单倍型;其间的差异来自少数限制性位点的突变。单倍型间平均遗传距离为0．35％,群体遗传多态程度为0．044％。三江白猪遗传多样性非常贫乏,说明三江白猪与地方种猪起源于一个共同祖先,在品种形成早期受到创立者效应的制约。     

中国大陆部分地区Drosophila immigrans果蝇种群中mtDNA的遗传多态性研究

选用14种限制性内切酶对分布在中国大陆部分地区的Drosophilaimmigrans果蝇种群的线粒体DNA（mtDNA）限制性片段长度多态性（RFLP）进行了分析。在6个地理种群的46个单雌系中仅检测到11种限制性类型。表征种群内均一程度的I值平均为0．833。衡量种群间等同程度的J值平均为0．797。在整个种群中只有16．8％（Gst）的变异是由种群间变异所引起的。说明分布在中国大陆部分地区的D．immigrans果蝇的遗传组成均一程度高,遗传多态程度低,遗传变异贫乏。由UPG法分析6个种群的净遗传距离,显示了分布在秦岭华阳种群（HY）的特殊性。推测D．immigrans果蝇扩散到云南的高海拔地区可能是较晚发生的事件。并推测中国大陆的D．immigrans种群比分布在中国台湾,日本的种群原始。     

中国大陆若干群体的黑果蝇的线粒体DNA多态性研究

本文研究了果蝇Ｄ．ｖｉｒｉｌｉｓ种群Ｄ．ｖｉｒｉｌｉｓ线粒体ＤＮＡ（ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌＤＮＡ,ｍｔＤＮＡ）的多态性。用９种限制性内切酶ＸｂａⅠ,ＥｃｏＲⅠ,ＰｓｔⅠ,ＨｉｎｄⅢ,ＢｇｌⅡ,ＳａｃⅠ,ＳｃａⅠ,ＥｃｏＲＶ和ＰｕｖⅡ,对青岛、南京、上海、宁波与泉州５个Ｄ．ｖｉｒｉｌｉｓ群体的ｍｔＤＮＡ进行了限制性片段长度多态性（ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｆｒａｇｍｅｎｔｓｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ,ＲＦＬＰ）的研究。在５群体中,发现５种不同的酶切图谱,它们彼此之间的遗传差异π为０．４６％－１．７６％,群体内遗传差异πｉｊ为０．００％－０．３３％,群体间的差异ｄｘｙ,为０．００％－０．８２％。分布于中国大陆的Ｄ．ｖｉｒｉｌｉｓ的群体间遗传差异在总遗传差异中所占比例γｓｔ值为２４．６２％。我们发现,Ｄ．ｖｉｒｉｌｉｓ的栖息环境对ｍｔＤＮＡ的遗传变异有十分明显的影响,而不同地理纬度的群体之间其遗传距离并无倾群（ｃｌｉｎｅ）表现。     

马铃薯GBSS基因5′侧翼区调控作用的研究

将０．４、０．８、１．６、２．９ｋｂＧＢＳＳ基因的５′侧翼区与ＧＵＳ基因融合,构建了双元表达载体。０．８ｋｂＧＢＳＳＧＵＳ通过基因枪介导在块茎切片中获得了瞬间表达。以上建构物通过农杆菌介导转入了马铃薯（ＳｏｌａｎｕｍｔｕｂｅｒｏｓｕｍＬ．ｃｖ．Ｄｅｓｉｒｅｅ）。ＸＧｌｕｃ染色及ＰＣＲ结果证实已获得转基因植株。利用离体块茎诱导系统,ＧＵＳ表达用荧光进行定量检测,结果显示,２．９、１．６、０．４ｋｂＧＢＳＳＧＵＳ的表达均以块茎明显高于茎段,达２～１０倍。０．８、１．６、２．９ｋｂＧＢＳＳＧＵＳ表达高于０．４ｋｂＧＢＳＳＧＵＳ。蔗糖浓度的升高可诱导ＧＢＳＳＧＵＳ的表达,而光照抑制了ＧＢＳＳＧＵＳ的表达。