猴头菌高产麦角甾醇液体发酵工艺优化

以菌丝体中麦角甾醇产量为考察指标,在单因素实验的基础上用响应面分析法考察碳源、氮源和无机盐3个因素对麦角甾醇发酵产量的影响,以获得猴头菌液体发酵产麦角甾醇最优工艺,建立高产、稳定的猴头菌液体发酵产麦角甾醇生产工艺。经响应面分析,各因素按照对响应值的影响顺序为：氮源>碳源>无机盐,且氮源对麦角甾醇产量的影响极显著,碳源和无机盐对麦角甾醇产量的影响不显著。猴头菌液体发酵产麦角甾醇最优工艺为：发酵培养基为酵母自溶粉18g/L、复合碳源14g/L（葡萄糖:麦芽浸粉,7.4:6.6,M/M）、无机盐3.9g/L（KH₂PO₄:K₂S₂O₈,2.6:1.3,M/M）;接种量为10%,培养时间为7d,在此条件下菌丝体生物量干重达11.24g/L,麦角甾醇的产量达69.79mg/L,比优化前分别提高了71.08%和81.56%。该发酵工艺重复性好,效率高,成本低,是一个稳定且可控的猴头菌液体发酵产麦角甾醇生产工艺技术方案;通过该发酵工艺得到的猴头菌发酵菌丝体麦角甾醇含量高,为相关功能营养食品的开发提供了优质资源。     

普鲁兰菌发酵条件的研究

本文对普鲁兰菌的发酵条件进行了研究,并总结出其高产普鲁兰多糖的条件。实验结果,普鲁兰多糖产率由６％,提高并稳定在７０％左右,最高达７６％。本文对影响普鲁兰多糖高产的发酵条件进行了分析。     

乳链菌肽高产菌株AL2的发酵条件研究

对乳链菌肽高产菌株ＡＬ２的发酵条件进行了研究,发现３０℃是产乳链菌肽的最适温度;蔗糖和酵母膏是最佳的碳、氮源,浓度分别为０．５％和１％。发酵培养基起始ｐＨ为６．５;锰离子对乳链菌肽的产生有促进作用,而铜离子却有严重的抑制作用。     

玉米秸秆液态发酵制备麦角甾醇的研究

本文研究了利用电融合技术得到麦角甾醇工程菌株发酵玉米秸秆糖化液制备麦角甾醇的工艺条件,在摇床水平上研究了初始糖度,氮源,pH值,发酵时间对产麦角甾醇的影响。依据DPS的中心组合实验设计原理,采用4因素3水平的响应面分析方法,对工艺条件进行优化。结果显示,该4因素对麦角甾醇的积累存在显著相关性,在最佳工艺条件下摇床振荡培养32 h,生物量达8.67g/L,麦角甾醇含量可达2.37%。同时对玉米秸秆发酵产麦角甾醇晶体进行结构表征,为生物质资源的应用开辟新的途径。     

应用原生质体技术选育天兰淡红链霉菌

本文报道柔红霉素产生菌——天兰淡红链霉菌原生质体的制备和再生方法,并从再生菌落中筛选得到摇瓶发酵单位提高５％的高产菌株３０＃。将再生高产株经铜蒸气激光辐照,得到在生产罐中发酵水平比对照出发菌株提高１２．９％的高产菌株８２＃。     

多抗霉素染菌发酵罐批中分离抗杂菌高产菌株

探讨从多抗霉素染菌罐批中分离抗杂菌高产菌株的方法。经分离选育出抗杂菌高产株211^#、221^#两株。通过20吨级发酵罐实践表明：211^#、221^#菌株在正常罐批的发酵单位比对照分别提高12％和33％,在染茵罐批的发酵单位比对照分别提高14％和29％。     

古尼拟青霉麦角甾醇高产液体培养条件及提取工艺的优化

以古尼拟青霉生物量和麦角甾醇含量为指标,对古尼拟青霉的高产麦角甾醇培养条件及麦角甾醇提取工艺进行了优化。正交试验结果表明,高产麦角甾醇的最适液体培养基为蔗糖4%,麸皮2%,KH2PO4 0.025%和NaCl 0.05%;响应面实验结果表明,麦角甾醇最佳提取工艺为：提取溶剂浓度为80%乙醇,液料比为200:1,提取时间为65min。     

春雷霉素高产菌株US95#的选育及大罐发酵工艺控制

紫外线与光修复交替处理春雷霉素产生菌得到了高产突变株,再结合自然分离选出了US95^#。该菌株不但产量高,还具有稳定的遗传性能,并在大罐良好发酵工艺控制和条件下,罐发酵水平在春雷霉素生产上有了重大突破,发酵水平比历史最高水平提高12．9％。     

酵母菌利用糖蜜发酵产麦角甾醇的工艺条件优化

麦角甾醇是由酵母菌产生的具有重要经济价值的代谢产物。为了提高酵母菌利用糖蜜发酵生产麦角甾醇的产量,通过响应面分析法优化了发酵培养基配方,并在5 L发酵罐对发酵过程pH控制和底物流加补料方式进行了优化。结果表明,利用优化后的发酵培养基,即糖蜜总糖40 g/L,KH2PO4 1 g/L,K2HPO4 1.86 g/L,CuSO4·5H2O 17.5 mg/L,FeSO4·7H2O 13.9 mg/L,MgSO4·5H2O 12.3 mg/L,玉米浆10 mL/L,麦角甾醇产量比优化前提高了29.5%;利用恒定pH控制策略,在5 L发酵罐进行分批发酵,使麦角甾醇产量提高了62.1%;进一步采用底物流加补料策略,使麦角甾醇产量达到1 953.85 mg/L,是分批发酵的3.2倍,而且麦角甾醇产率比分批发酵提高了42.7%。为酵母菌发酵糖蜜产麦角甾醇的产业化应用奠定了基础。     

纤维素酶产生菌和糖化酶产生菌液体混合发酵的研究

应用正交试验设计研究了糖化酶高产菌株黑曲霉UV-11(Aspergillus niger UV-11)和纤维素酶高产菌株黑曲霉F_(27)(A.niger F_27)液体混合发酵条件。结果表明,发酵液糖化酶活力为6500U/ml,CMC酶活力为99mg葡萄糖/ml·h。与UV-11单菌发酵相比,糖化酶活力提高16％,CMC酶活力提高266％。     

甘蔗糖蜜酒精废液混菌发酵菌体蛋白的研究

本文报导利用甘蔗糖蜜酒精废液混菌发酵高质量菌体蛋白的研究,通过热带假丝酵母Ｃａｎｄｉｄａ ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ种合融合株Ｃｔ－３配伍其他菌株,混菌发酵时间缩短２￣４ｈ,生物量可达２０ｇ／Ｌ,粗蛋白质含量５０￣５３％,灰份≤１０％,水分为５￣８％,与Ｃｔ－３单菌发酵相比,蛋白质提高４￣６％。     

生防菌Ⅲ-61抗真菌活性产物的摇瓶发酵

对生防链霉菌Ⅲ-61产生抗真菌活性物质的摇瓶发酵工艺进行了研究。利用正交试验设计优化了发酵培养基组分,其最适配方为黄豆粉1．5％,蛋白胨0．3％,蔗糖1．0％,淀粉1．3％,磷酸二氢钾0．02％,硫酸镁0．025％,氯化钠0．5％,配咸水溶液,调pH至7～7．4,加碳酸钙1％。通过单因素试验,筛选获得了最优培养条件组合：液体种龄24h,接种量5％～10％,500mL摇瓶培养基装量为80mL,摇床转速240r／min,培养温度31℃,发酵周期96～120h。此优化的发酵培养基与发酵条件的组合昕得菌株Ⅲ-61发酵液对主要靶标黄瓜灰霉病菌的抑菌圈直径达49．5mm,较优化前提高了45．59％。     

基因组改组技术选育耐酸性琥珀酸放线杆菌

以琥珀酸产生菌Actinobacillus succinogenes CGMCC 1593为出发菌,分别经过紫外线-甲基磺酸乙酯(UV-EMS)和紫外线-硫酸二乙酯(UV-DES)诱变处理,得到7株耐酸性有所提高的突变株.以此作为候选菌库,经3轮原生质体递进融合,筛选获得4株可以在pH 5.6下生长的改组菌株.其中改组菌株F3-21在pH 5.6的完全液体培养基中生长的OD值是原始菌的7倍,在pH 5.2条件下仍能生长;其摇瓶发酵48h琥珀酸产量较原始菌株提高48%.在5L发酵罐中进行分批发酵,当控制pH在较低值(5.6～6.0)时,F3-21厌氧发酵48h积累琥珀酸38.1g/L,较出发菌株提高了45%;当控制pH在6.5～7.0时,F3-21厌氧发酵32h积累琥珀酸40.7g/L.F3-21在5L发酵罐中进行补料分批发酵,厌氧发酵72h,产琥珀酸达67.4g/L.结果说明基因组改组技术能够改进琥珀酸放线菌的耐酸性能及其琥珀酸的产量.     

抗菌活性海洋真菌HN4-13的鉴定及其发酵优化

[目的]鉴定一株来源于连云港近岸海域沉积物并具有分泌抗菌活性代谢产物的真菌菌株HN4-13,优化其合成抗菌活性物质的发酵条件.[方法]通过形态学观察及ITS序列分析方法对菌株HN4-13进行鉴定;通过基础发酵培养基筛选、碳氮源及无机盐的单因素试验,继而采用正交试验设计优化其合成抗菌活性物质的发酵条件.[结果]菌株HN4-13被鉴定为黄柄曲霉(Aspergillus flavipes),其分泌抗菌活性产物的发酵条件为:4％蔗糖、0.5％蛋白胨、0.1％ KCl、0.06％ NaH2PO4、28℃、1％接种量、160 r/min培养9d.[结论]实验结果为进一步分离纯化菌株HN4-13所产抗菌活性代谢产物提供了基础.     

Solid-state fermentation for gluconic acid production from sugarcane molasses by Aspergillus niger ARNU-4 employing tea waste as the novel solid support

Solid-state fermentation (SSF) was evaluated to produce gluconic acid by metal resistant Aspergillus niger (ARNU-4) strain using tea waste as solid support and with molasses based fermentation medium. Various crucial parameters such as moisture content, temperature, aeration and inoculum size were derived; 70% moisture level, 30 degrees C temperature, 3% inoculum size and an aeration volume of 2.5l min(-1) was suited for maximal (76.3 gl(-1)) gluconic acid production. Non-clarified molasses based fermentation media was utilized by strain ARNU-4 and maximum gluconic acid production was observed following 8-12 days of fermentation cycle. Different concentrations of additives viz. oil cake, soya oil, jaggary, yeast extract, cheese whey and mustard oil were supplemented for further enhancement of the production ability of microorganism. Addition of yeast extract (0.5%) was observed inducive for enhanced (82.2 gl(-1)) gluconic acid production.     

L-色氨酸生产菌的选育及其发酵条件的研究

以代谢控制发酵理论为指导 ,对L -色氨酸产生菌的定向选育、摇瓶发酵条件、30L发酵罐发酵条件进行了研究。以谷氨酸棒杆菌Tx5 - 32 (Phe- +Tyr- )为出发菌株 ,经硫酸二乙酯 (DES)多次诱变处理 ,定向选育出一株L -色氨酸产生菌TQ2 2 2 3(Phe- +Tyr- +5 -MTr+5 -FTr+SGr+CINr)。以摇瓶分批发酵最优条件为基础 ,对菌株TQ2 2 2 3进行了 30L发酵罐分批发酵试验 ,该菌株发酵 6 4h ,产L -色氨酸 7.2 8g·L- 1 。     

Breeding of flocculent industrial alcohol yeast strains by self-cloning of the flocculation gene FLO1 and repeated-batch fermentation by transformants

A nonflocculent industrial polyploid yeast strain, Saccharomyces cerevisiae 396-9-6V, was converted to a flocculent one by introducing a functional FLO1 gene at the URA3 locus. The flocculent strain FSC27 obtained was a so-called self-cloned strain, having no bacterial DNA. FSC27 cells could be easily recovered for reuse from fermentation mash without any physical energy. The strain produced a concentration of alcohol as high as 396-9-6V, although the fermentation rate of FSC27 was slightly lower than that of 396-9-6V. When uracil was added to the medium or when URA3 was reintroduced into FSC27 (named FSCU-L18), the fermentation rate and the growth rate increased, and the ethanol concentration produced was higher than that produced by the parent strain. The stable flocculation and high ethanol productivity were observed by using FSCU-L18 during 10 cycles of repeated-batch fermentation test.     

高产琥珀酸菌株的通量筛选

以琥珀酸放线杆菌Actinobacillus succinogenes F3—21为出发菌株,分别用吖啶黄、紫外线、紫外线．硫酸二乙酯和亚硝基胍进行诱变,产生突变菌库。用“96孔板培养－HPLC浓缩检测－厌氧瓶复筛”的模式筛选高产突变株。从1056株突变株中,筛选到一株高产菌株Ⅵ-10-C。连续传代10次,产酸水平不变。在5L发酵罐中补料分批发酵72h,Ⅵ－10－C产琥珀酸87．6g／L,生产强度1．22g/（L·h）,糖酸转化率0．66g／g;琥珀酸产量比出发菌提高了30％。代谢通量与关键酶活性分析表明：相比于F3-21,Ⅵ-10-C发酵过程中从磷酸烯醇式丙酮酸节点处流向草酰乙酸的代谢流量增加了28．9％,相对应的磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶（PEPCK）酶活提高了23．5％。结果表明用“96孔板培养-HPLC浓缩检测-厌氧瓶复筛”的模式能快速有效筛选高产琥珀酸菌株。     

常压室温等离子体诱变选育L-精氨酸生产菌及发酵条件优化

【目的】通过常压室温等离子体诱变技术选育L-精氨酸高产菌株,利用响应面设计探索突变菌株生产L-精氨酸的最佳发酵条件。【方法】采用常压室温等离子体生物诱变系统对实验室保藏的Corynebacterium glutamicum GUI089进行系列诱变,选育L-高精氨酸和8-氮鸟嘌呤抗性菌株。在单因子实验的基础上,应用Plackett-Burman设计从7个因素中筛选出对L-精氨酸合成具有显著效应的(NH4)2SO4、葡萄糖和尿素3个因素。基于上述结果,进一步采用响应面设计优化出主要影响因素的最佳参数水平。【结果】经过一系列的诱变和筛选,选育出一株L-高精氨酸(15 g/L)和8-氮鸟嘌呤(0.7 g/L)抗性菌株,并将此菌株命名为C.glutamicum ARG 3-16。此菌株的L-精氨酸产量比出发菌株提高了49.79%,且发酵液中杂酸的浓度明显降低,特别是L-脯氨酸、L-谷氨酸和L-缬氨酸。在经响应面优化后的最佳发酵条件下,L-精氨酸的产量达到39.72±0.75 g/L,比优化前提高了10.49%。【结论】通过常压室温等离子体诱变技术成功选育出一株L-精氨酸高产菌株,利用响应面法有效地优化了发酵条件,实验结果表明突变株ARG 3-16具有潜在的生产应用价值。     

莫能菌素高产菌株的诱变与筛选

采用紫外线对现有生产菌株进行诱变处理,再运用筛选剂丙酸、丁酸等对其进行选育,得到高产菌株M-3-01。投入中试车间发酵罐中,发酵效价达到50560×103u.L-1,其发酵能力比出发菌株提高了26%。