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相似文献
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1.
差异显示技术及其进展   总被引:4,自引:0,他引:4  
差异显示技术是在转录水平上研究基因表达差异的有效方法。它通过一系列的锚定引物与随机引物组合把不同种细胞的mRNA进行分组反转录及PCR扩增,在相邻泳道上显示扩增结果,通过比较电泳图谱找出差异。差异显示技术建立至今仅五年时间便在分析基因表达差异、绘制遗传图谱、分离特异性表达基因、临床诊断遗传疾病等方面被广泛应用,并不断得到改进和完善。  相似文献   

2.
差异显示技术是在转录水平上研究基因表达差异的有效方法。它通过一系列的锚定引物与随机引物组合把不同种细胞的mRNA进行分组反转录及PCR扩增,在相邻泳道上显示扩增结果,通过比较电泳图谱找出差异。差异显示技术建立至今仅五年时间便在分析基因表达差异、绘制遗传图谱、分离特异性表达基因、临床诊断遗传疾病等方面被广泛应用,并不断得到改进和完善。  相似文献   

3.
差异显示技术及植物发育基因的克隆   总被引:1,自引:0,他引:1  
介绍了差异显示技术的原理和实验程序,及该技术在植物发育基因克隆上的具体应用。  相似文献   

4.
mRNA差异显示技术及其应用   总被引:8,自引:0,他引:8  
刘勋甲  郑用琏 《生命科学》1998,10(4):176-179
mRNA差异显示技术是国外最近发展起来的一种分离表达水平出现差别的基因的新技术。目前已广泛用于人类及其他动物生长发育基因调控、基因克隆研究,也开始用于植物基因分析、杂种优势机理等方面研究。本文综述这一新技术原理、实验步骤、应用及问题与展望。  相似文献   

5.
利用mRNA差异显示技术研究香菇发育相关基因   总被引:4,自引:1,他引:3  
以香菇子实体不分化突变株和对照菌株L98411为材料,利用mRNA差异显示技术研究二者的基因表达差异,共分离到21条差异片段,其中12个分别与泛素、ATP合成酶、锌指蛋白、GTP结合蛋白、延伸因子g1线粒体前体、过氧化物酶、硫酯酶、类TrpB酶、2,4-二烯酰辅酶A还原酶、糖苷水解酶、热激蛋白、疏水蛋白等已知基因有较高的同源性,这表明香菇子实体分化发育是一个复杂的过程,涉及到胞内转运、转录调控、细胞分化、蛋白合成、各种代谢途径中的酶、抗逆反应等诸多途径的协同调控。  相似文献   

6.
信使RNA差异显示技术的最新进展   总被引:2,自引:0,他引:2  
王莉  陆玮 《生物技术》1999,9(1):28-32
各种疾病,如肿瘤、遗传性疾病都是一种或多种基因异常表达的结果。寻找、定位疾病相关基因在目前分子生物学研究中占有十分重要的地位,Liang等1992年首创了信使RNA差异显示技术(messengerRNAdifferentialdisplay,mRNA...  相似文献   

7.
DD-PCR和cDNA RDA都是近年发展起来的新技术,它们被应用于生物及医学领域,在基因差异表达和筛选差异基因的研究中有着广泛的前景。本文论述了DD-PCR及cDNA RDA的基本技术策略,并对两者进行了比较分析。  相似文献   

8.
mRNA差异显示技术是鉴别基因差异表达方法之一,已在生物技术相关领域中广泛应用.本文介绍mRNA差异显示技术的基本原理及主要优缺点,较详细地综述了该技术在园艺植物生物技术方面的最新应用状况及取得的研究结果.  相似文献   

9.
运用多种策略改良差异显示PCR   总被引:1,自引:0,他引:1  
王光海  邹飞 《生物技术》2001,11(6):45-47
目的:改进差异显示PCR技术,提高其在筛选差异表达基因方面的效率。方法:①采用单碱基金铆钉引物;②增加引物长度;③提高PCR反应的严谨性;④应用同步重复测序电泳。结果:减少经典方法的工作量,降低了非特异性和假阳性率。用改良技术研究热适应大鼠下丘脑基因的差异表达,发现了一个差异表达基因片段,斑点杂交证实为阳性片段。结论:改进后的差异显示PCR技术是一种研究基因差异表达从而发现新基因或基因新功能的有效方法。  相似文献   

10.
迟彦  李姗  马玺  金涛  周东坡 《遗传》2005,27(2):309-314
差异显示技术是分离差异表达基因的重要方法与手段,同其它研究基因差异表达的方法如RDA,SSH,SAGE相比,差异显示技术是其中使用频率较高的方法。该技术自1992年创立以来,经过各国研究者不断完善与改进,现已大大克服以往诸多不足,扩大了应用领域。本文就差异显示技术的原理及主要优缺点作以简要概述,并着重就引物设计、降低假阳性、鉴定差异表达基因及差异显示技术的衍生技术这4个方面的研究进展作以详尽介绍。  相似文献   

11.
简要概述了差异显示技术的基本原理和过程及其在植物研究上的应用和进展.  相似文献   

12.
13.
mRNA差异显示     
分离差异表达的基因是研究生命调节过程的重要手段,mRNA差异显示技术是一种能成功分离差异表达基因的方法,文章对该方法的基本原理、方法步骤及其应用作了较为详细的介绍。  相似文献   

14.
限制性酶切片段差异显示及其应用   总被引:1,自引:0,他引:1  
差异显示技术(DD)-PCR是一种研究基因表达差异的重要而应用广泛的方法,传统的差异显示法由于在PCR时采用Poly(T)引物和随机引物而导致较高的假阳性率和产物的近Poly(A)非编码区的大量扩增。改进后的限制性酶切片段差异显示技术(RFDD)-PCR采用ToqI酶切双链cDNA,连上特殊设计的接头,再用经特殊设计的特异性配对于接头的引物来扩增,因此能重点扩增编码区并能极大地消除假阳性率。由于扩增时引物就带有荧光或放射性核素标记,还使得差异显示条带的检测更为方便、灵敏。本简要介绍了该法的原理、步骤、应用及其优缺点。  相似文献   

15.
mRNA差别显示技术在植物发育研究中的应用   总被引:3,自引:0,他引:3  
mRNA差别显示技术是近年发展起来的研究基因表达差异的有效方法,它不仅可比较基因表达差异、追踪已知基因的表达情况,而且可作为寻找特异表达基因的重要手段。本文介绍此方法在植物春化作用、光周期反应、花发育、雄性不育、成熟、衰老、种子发育和休眠及根发育等研究领域的应用概况。  相似文献   

16.
荧光标记mRNA差异显示技术   总被引:19,自引:0,他引:19  
目的:应用荧光标记的mBNA差异显示技术。方法:提取未经过/经过IFN-LPS处理的三组人单核细胞系U937的总RNA并以此为模板,采用荧光标记的锚定引物,通过逆转录、差异显示PCR反应,经5.6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离差异条带,回收后将其再扩增。结果:三组样本的DD-PCR产物电泳显示长300bp ̄2.0kb不等的扩增片段,条带清晰、明亮,背景低,各样本相互间的差异不仅呈有无的变化,亦表现出  相似文献   

17.
差异显示反转录PCR技术研究进展   总被引:12,自引:0,他引:12  
分析一对细胞或组织在不同状态下基因表达的差异,已成为分子生物学研究领域的热点之一.近年来,用于识别差异表达基因的方法已发展起来多种.DDRT-PCR是近年来较为广泛应用的一种技术.理论上,DDRT-PCR技术比较简单,但实施起来却存在着假阳性率高,凝胶中单条cDNA带成分不均一, 所获cDNA仅代表着mRNA 3′UT区(约300 bp)以及一些低拷贝数mRNA不能有效被呈现等问题.对DDRT-PCR技术的改良也主要集中在解决这些问题方面.  相似文献   

18.
mRNA差异显示RT- PCR是近 1 0年广泛使用的用于克隆和分析差异表达基因的有效技术。该文简要介绍了差异显示RT -PCR技术的原理、优缺点及其优化方法 ,重点综述了mRNA差异显示RT -PCR技术在昆虫学研究中的应用。  相似文献   

19.
mRNA差别显示技术是近年发展起来的研究基因表达差异的有效方法。它不仅可比较基因表达差异、追踪已知基因的表达情况,而且可作为寻找特异表达基因的重要手段。本文介绍此方法在植物春化作用、光周期反应、花发育、雄性不育、成熟、衰老、种子发育和休眠及根发育等研究领域的应用概况。  相似文献   

20.
差异显示和RACE技术的发展与应用   总被引:5,自引:0,他引:5  
差异显示是一套快速有效克隆差异表达基因的新技术 ,综述了该技术的原理及其技术改进、应用与展望。“快速扩增cDNA末端”(RapidAmplificationcDNAEnd)技术即RACE技术 ,是获得全长cDNA的快速有效的方法 ,阐述了该技术的发展与应用。  相似文献   

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