有序差异显示:一种基因表达谱系统比较法

系统研究具有同一基因组的各种细胞群之间基因的差异表达谱十分重要。目前,研究基因差异表达的技术大致有ｍＲＮＡ差异显示［１］、ＲＤＡ［３］、ＳＳＨ［４、５］和ｃＤＮＡ阵列［６］等。近几年,还发展了一些研究基因差异表达谱系统的技术,如ＲＬＣＳ（ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｌａｎｄ－ｍａｒｋｃＤＮＡｓｃａｎｎｉｎｇ）［８］、ＧＥＦ（ｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓ－ｓｉｏｎｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｉｎｇ）［２］和ＲＮＡ指纹法［９］等。然而,这些技术或较为复杂,或灵敏度偏低。本文拟介绍一种有效的基因表达谱系统比较法——有序差…     

线粒体和核基因的协作

约占９０％的线粒体蛋白质是核基因（ｎＲＮＡ）的产物,线粒体基因组（ｍｔＲＮＡ）表达产物常与核编码的成分组成复合物发挥作用,此外ｎＤＮＡ对ｍｔＤＮＡ的复制、表达以及线粒体组装均起调控作用。线粒体中代谢物信号、反应氧族可影响ｎＤＮＡ的表达。     

两种哺乳动物mRNA的编辑

ＲＮＡ编辑的研究始于１９８６年Ｂａｎｎｅ等［１］对锥虫（ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａｔｉｄｓ）线粒体ｍＲ－ＮＡ中插入非编码尿嘧啶的研究。此后,又在植物及一些低等生物的线粒体或叶绿体中相继发现了以尿嘧啶插入ｍＲＮＡ为编辑模式的ＲＮＡ编辑。哺乳类中载脂蛋白Ａｐ...     

香蕉不同组织中总RNA的有效分离

从植物组织中提取总ＲＮＡ是进行植物分子生物学某些方面研究的必要前提。如进行Ｎｏｒｔｈｅｍ杂交分析,纯化ｍＲＮＡ以用于体外翻译或建立ｃＤＮＡ文库,ＲＴ－ＰＣＲ及差示分析等分子生物学实验,都需要高质量的总ＲＮＡ。因此,从植物组织中提取高质量的总ＲＮＡ是顺利进行上述研究的关键所在。目前常用于植物材料ＲＮＡ提取的方法有脱法［１～４］苯酚法［５,６］和ＣＴＡＢ［７,８］法等。这些方法对于提取某些植物的总ＲＮＡ是有效的,但对另外一些植物来说,却并不一定是好的方法。因为不同植物组织的细胞内外成分复杂多变,在使…     

显示基因表达差异的PAGE—银染技术

ｄｄＲＴ－ＰＣＲ（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｄｉｓｐｌａｙ　ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎ－ｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ）技术是Ｌｉａｎｇ和Ｐａｎｄｅｅ~（［１］）于１９９２年首先建立的一种在ＲＮＡ水平上显示基因表达差异,进而分离目的基因的有效方法。与其它分离基因的方法相比,ｄｄＲＴ－ＰＣＲ方法具有许多优点~（［２］）,目前已经成为筛选未知差异表达基因的最为有效的方法之一。ｄｄＲＴ－ＰＣＲ是３种技术的有机结合：（１）通过错定引物Ｔ１２ＭＮ（Ｍ＝Ａ、Ｔ、Ｃ、Ｇ,Ｎ＝Ａ、Ｃ…     

水稻红莲型细胞质雄性不育系与保持系mtRNA差异显示和差别片段？…

将Ｔ４ＲＮＡ连接酶和ＡＦＬＰ技术特点相结合构建于适于ｍｔＲＮＡ的差异显示方法,并比较水稻（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）红莲型细胞质雄性不育系,保持系和杂种一代ｍｔＲＮＡ差异。在４组引物对的选择扩增产物中共找到６个差异片段,其中差异条带ＤＴＡ为不育系仅有,条带ＤＡＢ为不育系和保持系特有,而条带ＤＢＦ１、ＤＢＦ２、ＤＢＦ３、ＤＢＦ４为保持系和Ｆ１杂种共有。这表明水稻红莲型不育系粤泰Ａ与杂种一代泰优     

油菜素内酯促进绿豆上胚轴伸长与蛋白质和核酸合成的关系

用饲喂蛋白质和核酸合成的放射性前体［３ Ｈ］－Ｐｈｅ、［３ Ｈ］－尿嘧啶和［３ Ｈ］－胸腺嘧啶证实了油菜素内酯（ＢＲ）能促进绿豆上胚轴的生长和蛋白质、ＲＮＡ 及ＤＮＡ 的合成。用蛋白质和核酸合成抑制剂（ＣＨ、Ａｃｔ．Ｄ、５－Ｆｕ）进一步探讨它们对上胚轴伸长的抑制作用与蛋白质、ＲＮＡ、ＤＮＡ 和ｍ ＲＮＡ 合成之间的关系。证明了上胚轴的伸长依赖于蛋白质和核酸的合成,尤其是依赖于ｍ ＲＮＡ 的合成。说明ＢＲ是在转录水平上调节基因的表达,进而促进上胚轴的伸长     

同时抽提DNA和RNA的简便方法

同时抽提ＤＮＡ和ＲＮＡ的简便方法刘定干（中国科学院上海生物化学研究所,２０００３１）关键词ＤＮＡＲＮＡ抽提在研究工作中,常同时需要培养细胞的ＤＮＡ和ＲＮＡ,从同一样品中同时提取ＤＮＡ和ＲＮＡ。目前,已有好几种同时抽提ＤＮＡ和ＲＮＡ的方法［１～４］。作...     

核仁小分子RNA

核仁小分子ＲＮＡ屈良鹄（中山大学生命科学学院生物工程研究中心广州５１０２７５）关键词核仁小分子ＲＮＡ（ｓｏｎＲＮＡ）;内含子（ｎｉｔｒｏｎ）;基因（ｇｅｎｅ）;核糖体（ｒｉｂｏｓｏｍｅ）真核生物（ｅｕｋａｒｙｏｔｅ）在真核生物细胞中,除了人们所熟悉的ｒＲＮＡ,ｍＲＮＡ和ｔＲＮＡ之外,还存在着许多小分子ＲＮＡ［１,２］,如核小分子ＲＮＡ（ｓｎＲＮＡ）,核仁小分子ＲＮＡ（ｓｎｏＲＮ）以及细胞过程中的调控活动,具有十分重要的生物学意义[3,4].     

三链DNA与反基因技术的研究进展

三链ＤＮＡ与反基因技术的研究进展方晔,白春礼（中国科学院化学研究所北京１０００８０）寡聚核苷酸及其衍生物能通过几个战略来实现选择性地调节基因表达［１］,在反义技术中,寡聚核苷酸以信使ＲＮＡ的专一性序列作为靶物,并由此阻止信使ＲＮＡ将信息翻译成蛋白质;...