环六亚甲基双乙酰胺对胃癌不同细胞周期两条信号系…

环六亚甲基双乙酰胺（ＨＭＢＡ）对ＭＧｃ８０－３不同时相细胞内ｃＡＭＰ－ＰＫＡ与ＤＡＧ－ＰＫＣ两大系统不仅具有正负调控作用,而且其作用具有周期特异性。其中Ｇ１期是最敏感的调控时相,与对照组相比,ｃＡＭＰ水平上升１０２．３％,ＰＫＡ活性升高３４８％,ＤＡＧ含量下降５１．４％,ＰＫＣ活性降低３２．３％;次敏感时相为Ｇ２期;Ｍ期基本没受影响,Ｓ期变化规律不同于其他时相。     

环六亚甲基双乙酰胺对人胃癌MGc80-3细胞的诱导分化及PKA-RⅡ与PKC-α亚型在细胞内分布的变化

用HMBA作为诱导分化剂.研究了HMBA对人胃癌MGc80-3细胞的诱导分化效应,并采用免疫荧光技术观察了PKA-RⅡ与PKC-α亚型在细胞内分布的变化.细胞经5mmol/L HMBA处理后,细胞形态产生明显变化.细长突起明显增加,生长速度减慢,倍增时间延长.24小时,48小时,72小时的生长抑制率分别为20%.40.6%.54.8%.细胞在软琼脂上生长不成集落.细胞周期时相的分布发生变化、G_0+G_1期比对照组增加18.4%.而s期细胞比对照组减少14.8%.细胞内cAMP、DG水平也发生了显著变化.HMBA处理24小时后.细胞内cAMP水平上升62%.DG水平下降64.7.处理48小时后.cAMP水平上升76.2%.而DG水平下降的69.8%.以上结果充分表明了HMBA对人胃癌MGc80-3细胞的诱导分化作用.实验中还发现细胞经HMBA处理后.PKC-α分布于胞质,而PKA-RⅡ向胞核移位.提示HMBA对细胞的诱导分化作用与信号传递通路密切相关.     

环六亚甲基双乙酰胺对人胃癌MGc80-3细胞的诱导分化及PKA-RⅡ与PKC-α亚型在细胞内分布的变化

用HMBA作为诱导分化剂.研究了HMBA对人胃癌MGc80-3细胞的诱导分化效应,并采用免疫荧光技术观察了PKA-RⅡ与PKC-α亚型在细胞内分布的变化.细胞经5mmol/L HMBA处理后,细胞形态产生明显变化.细长突起明显增加,生长速度减慢,倍增时间延长.24小时,48小时,72小时的生长抑制率分别为20%.40.6%.54.8%.细胞在软琼脂上生长不成集落.细胞周期时相的分布发生变化、G_0+G_1期比对照组增加18.4%.而s期细胞比对照组减少14.8%.细胞内cAMP、DG水平也发生了显著变化.HMBA处理24小时后.细胞内cAMP水平上升62%.DG水平下降64.7.处理48小时后.cAMP水平上升76.2%.而DG水平下降的69.8%.以上结果充分表明了HMBA对人胃癌MGc80-3细胞的诱导分化作用.实验中还发现细胞经HMBA处理后.PKC-α分布于胞质,而PKA-RⅡ向胞核移位.提示HMBA对细胞的诱导分化作用与信号传递通路密切相关.     

环六亚甲基双乙酰胺体外诱导胚胎性癌B7—2细胞分化对MS_3基因表达的影响

MS_3 cDNA是多潜能胚胎性癌细胞专一的顺序,HMBA可诱导B 7—2细胞分化为原始内胚层样细胞。用定量细胞质RNA点印迹杂交法分析了MS_3基因在小鼠胚胎性癌B 7—2细胞经HMBA诱导前和诱导后的表达水平。小鼠成纤维细胞NIH3T3被用作阴性对照,MS_3基因的表达水平在B 7—2细胞经HMBA诱导5天后下降了86％。鉴于HMBA对B 7—2细胞的诱导效率约为90％,这一实验结果表明在HMBA诱导分化中,MS_3基因的表达被抑制。     

六亚甲基二异氰酸酯改性β-环糊精及其焦化废水处理

以六亚甲基二异氰酸酯（HDI）为交联剂与β-环糊精（β-CD）聚加成反应,制得的HDI-β-环糊精交联聚合物（β-CD-HDI）用于焦化废水的处理。采用红外光谱（IR）及扫描电子显微镜（SEM）对交联产物进行分析表征,结果发现所得交联物即为目标产物。实验结果表明了废水处理和再生的工艺参数：聚合物用量40 g/L,温度20℃;HDI-β-CD多次使用后可用甲醇浸泡、洗涤进行再生,再生10次吸附率仍然在58.1%以上。     

两套第二信使系统(环腺苷一磷酸与二酰基甘油)在人胃癌MGC80-3细胞增殖分化调控中的相互关系

细胞增殖分化及癌变调控机理是至今尚未解决的重大问题。近年来有人提出cAMP与双信使[DG和三磷酸肌醇(IP3)]系统对细胞增殖分化的正负调控作用的假说与细胞增殖失控的癌变机理之间的关系日益引起人们的重视。尽管cAMP与双信使系统对细胞增殖分化     

环六亚甲基双乙酰胺对小鼠畸胎癌B7-2克隆细胞的诱导分化

近年来,有不少研究工作者报道了用化学物质诱导恶性癌细胞进行有限的分化。这类物质主要有维生素A酸(RA),丁酸钠(Na-butyrare),二甲基亚砜(DM-SO),环腺嘌呤核苷酸(c-AMP)以及环六亚甲基双乙酰胺(hexamethylene bisaceta-mide,HMBA)等,它们能使癌细胞恶性表型受到抑制,并向一定类型的体细胞分化。HMBA最早用于研究小鼠红白血病细胞的诱导分化,并为研究珠蛋白基因表达提供了很好的实验模型。随后,Jakob等     

黄芪对儿童哮喘T细胞亚群细胞周期的影响

目的:观察黄芪对发作期哮喘患者T细胞亚群细胞周期的影响,揭示黄芪在哮喘治疗中的意义。方法:课题以儿童哮喘病人T细胞亚群为研究对象,对CD4+、CD8+T细胞进行分离,采用细胞培养技术,用黄芪对其进行体外处理,使用流式细胞仪测定经黄芪处理和未经黄芪处理的CD4+、CD8+T细胞的细胞周期分布情况。结果:儿童哮喘患者CD4+、CD8+T细胞分别在经黄芪处理和未经黄芪处理的条件下培养,在CD4+T细胞中,黄芪组的S期CD4+T细胞百分比显著低于对照组,有统计学意义(P<0.01);G1期细胞百分比显著高于对照组,有统计学意义(P<0.01)。在CD8+T细胞中,黄芪组的S期CD8+T细胞百分比低于对照组,有统计学差意义(P<0.05);G1期细胞百分比高于对照组,有统计学意义(P<0.05)。结论:黄芪抑制发作期哮喘患者CD4+、CD8+T细胞DNA合成,进而调节细胞周期使之停滞在G1期。黄芪对发作期儿童哮喘患者有一定的治疗意义。     

聚六亚甲基双胍对蝙蝠蛾幼虫病原菌粉棒束孢的杀菌效果和毒性评价

为了解聚六亚甲基双胍对冬虫夏草寄主昆虫蝙蝠蛾幼虫病原菌粉棒束孢的杀菌消毒效果和对蝙蝠蛾幼虫的毒性,本文采用了悬液定量杀菌试验、现场试验、稳定性试验及昆虫毒性评价方法,对该消毒剂的消毒相关性能及安全性进行试验观察。结果显示含2g/L聚六亚甲基双胍消毒液对粉棒束孢孢子悬液或者现场试验作用45–60min,杀菌率均可达到99.00%以上。聚六亚甲基双胍消毒原液及稀释液37℃保存3个月与1个月的下降率分别为2.10%和3.20%,性质比较稳定、杀菌效率短期内无显著降低;含量≤10g/L聚六亚甲基双胍消毒液对蝙蝠蛾幼虫死亡影响不显著,无明显的不良反应,属于实际无毒类物质。聚六亚甲基双胍消毒液性质稳定、杀菌效果好、无毒,可用于蝙蝠蛾幼虫饲料、饲养盒等的消毒。     

抑制O~6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶活性与肿瘤细胞对亚硝脲药物敏感性关系的研究

80％以上的肿瘤细胞为O~6-甲基鸟嘌吟-DNA甲基转移酶(O~6-MT)活性较高的Mer~+型,能够修复亚硝脲药物(NU)造成的DNA烷化损伤,对NU不敏感。本实验证明,用0.75,0.50和0.25mmol/L甲基亚硝脲(MNU)分别处理Mer~+型的HeLaS3,SMMC-7721和表现Mer~-型特征的Cc801,均能明显降低细胞中O~6-MT活性,从而显著提高了三种细胞对嘧啶亚硝脲和双氯乙亚硝脲的敏感性,提示降低O~6-MT活性是使用NU对Mer~+型肿瘤进行有效治疗的前提。     

DNA损伤与细胞周期调控

DNA损伤和损伤后修复可引起细胞周期阻滞,这一事件由三个阶段组成：损伤的识别,损伤信号的传递以及细胞周期阻滞.在某些情况,这种细胞周期阻滞会失效.     

细胞周期的关卡调控途径研究进展

目前已从不同物种、不同种类细胞中筛选到很多关卡基因和蛋白质,如ATM、RAD53、CHK₁等.有关它们在具体关卡调控途径中的作用,以及和癌变发生的关系已有许多报道.     

Structure and Sites of Phosphorylation of 14-3-3 Protein: Role in Coordinating Signal Transduction Pathways

The 14-3-3 family are homo- and heterodimeric proteins whose biological role has been unclear for some time, although they are now gaining acceptance as a novel type of adaptor protein that modulates interactions between components of signal transduction pathways, rather than by direct activation or inhibition. It is becoming apparent that phosphorylation of the binding partner and possibly also the 14-3-3 proteins may regulate these interactions. 14-3-3 isoforms interact with a novel phosphoserine (Sp) motif on many proteins, RSX_1,2SpXP. The two isoforms that interact with Raf-1 are phosphorylated in vivo on Ser185 in a consensus sequence motif for proline-directed kinases. The crystal structure of 14-3-3 indicates that this phosphorylation could regulate interaction of 14-3-3 with its target proteins. We have now identified a number of additional phosphorylation sites on distinct mammalian and yeast isoforms.     

ERK3信号通路的活化阻止细胞增殖

ERK3是ERK家族中结构较为独特的成员,尤其在分子生物学特征上与ERK家族其他成员明显不同,如基因结构中外显子之间的大内含子、蛋白质结构中活化环的丝氨酸单磷酸化位点以及激酶C端的延伸序列等.ERK3具有独特的丝氨酸单磷酸化位点,导致所有以苏氨酸/酪氨酸双磷酸化位点为磷酸化靶点的MEK分子均不能活化ERK3.ERK3的C端延伸序列能与细胞周期蛋白D3结合并调控ERK3的亚细胞定位,从而影响ERK3对细胞周期的调节.据目前文献推测,ERK3调控细胞周期的信号通路可能为:Ras→B-Raf→ERK3激酶→ERK3→G1期CDK复合物减少→S期抑制因子增多→细胞增殖阻滞于S期→细胞停止增殖,进入分化.此外,ERK3信号通路的活化与细胞分化、胚胎发育、胰岛素分泌以及肿瘤的发生密切相关.     

抗酶1基因转染对HeLa细胞增殖及细胞周期的抑制作用

研究抗酶(antizyme)1对人宫颈癌HeLa细胞增殖与细胞周期的影响,并分析抗酶1对细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达影响.采用定点突变技术,将抗酶1的frameshift位点缺失,随后将突变基因重组至真核表达载体pEGFP-N1中,鉴定后转染HeLa细胞.通过MTT法检测细胞增殖变化,流式细胞术分析抗酶1对细胞周期的影响.RT-PCR和Western印迹检测抗酶1转染对细胞周期蛋白 D1基因表达的影响.酶切结果显示,抗酶1突变基因成功克隆至pEGFP-N1中.成功转染HeLa细胞后,检测结果显示,抗酶1能够减慢HeLa细胞增殖速度,并使细胞停滞于G₀/G₁期,细胞周期蛋白D1基因的表达同时受到抑制.实验说明,抗酶1基因能够抑制HeLa细胞增殖,通过降低细胞周期蛋白D1的表达阻滞细胞周期.     

保卫细胞的ABA信号转导

植物激素脱落酸(ABA)调节植物体多种生理过程,尤其在一些逆境条件下,植物体中ABA大量合成,诱导气孔关闭,从而有效地调控植物体内的水分平衡.尽管人们对ABA诱导气孔关闭作用已得到共识,但有关信号转导的细节还很不清楚.该文简要介绍了研究气孔保卫细胞信号转导途径的相关技术以及与ABA信号转导直接相关的ABA受体、第二信使、蛋白质磷酸化和离子通道调节等方面的最新妍究进展.并在前人研究工作的基础上,勾画出气孔保卫细胞ABA、H2O2的信号转导模式图.     

Effects of Exogenous Zinc on the Cellular Zinc Distribution and Cell Cycle of A549 Cells

Carotenogenesis in Nocardioform actinomycete Rhodococcus rhodochrous was investigated using carotenogenesis mutants and inhibitors, and a postulated carotenogenesis pathway was proposed. At the end of the synthesis, fatty acid or mycolic acid was esterified by different esterases to the same C-6 hydroxyl group of β-D-glucoside.     

14-3-3蛋白在细胞周期调节中的作用

14-3-3是一个在真核细胞中广泛表达、功能复杂的蛋白家族,主要通过磷酸化依赖的方式与靶蛋白结合,从而发挥其调控作用。细胞周期的调节对维持基因组的稳定性至关重要。近年来的研究发现,14-3—3蛋白可以和越来越多的细胞周期调节蛋白相互作用,调节G2／M期和G1／S期转换,从而对细胞周期起调控作用。简要综述了14—3—3蛋白在细胞周期调节中的作用。     

Analysis of the Cell Cycle and a Method Employing Synchronized Cells for Study of Protein Expression at Various Stages of the Cell Cycle

Study of protein expression during the cell cycle requires preparation of pure fractions of cells at various phases of the cell cycle. This was achieved by the development of methods for cell synchronization. Successful cell synchronization requires knowledge of the duration of all phases of the cell cycle. So, in the present review these interrelated problems are considered together. The first part of this review deals with basic methods employed for analysis of duration of cell cycle phases. The second summarizes data on treatments used for cell synchronization. Methods for calculation of percent of cells at various stages of the cell cycle in fractions of synchronized cells are considered in the third part. The fourth part of this review deals with a method of study of protein expression during the cell cycle by means of immunoblotting of synchronized cell fractions. In the Appendix, basic principles are illustrated with practical examples of analysis of the cell cycle, synchronization, and study of expression of some proteins at various stages of the cell cycle using synchronized XL2 (Xenopus laevis) cells.     

Polo样激酶1在细胞周期及细胞周期监测点中的功能

Plk1（Polo-like kinase 1）是一类从酵母到人类都高度保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,是真核细胞有丝分裂的重要调控因子.Plk1随有丝分裂进程定位于不同位点,调节分裂期进入、纺锤体形成和胞质分裂等过程.Plk1能够与磷酸化的停靠蛋白结合,从而在不同空间被激活以满足其在细胞周期中的不同功能.Plk1还参与G2和M期DNA损伤监测点的调节,对于DNA损伤恢复后重新进入有丝分裂期是必须的.目前,Plk1的重要功能尤其是在DNA损伤监测点中发挥的重要功能正在被广泛研究.Plk1在多种恶性肿瘤中存在过表达且与肿瘤发生密切相关,对于Plk1功能的深入研究为以Plk1为靶的肿瘤治疗提供理论依据