氮素对不同类型玉米籽粒氨基酸、蛋白质含量及其组分变化的影响

以普通玉米掖单22和高油玉米高油115为材料,研究了不同供氮条件下玉米籽粒中蛋白质及其组分的含量、清蛋白和球蛋白含量、醇溶蛋白和谷蛋白含量、籽粒氨基酸总鼍以及氨基酸组分含量的品种差异。结果表明。氮素供应水平对两种类型玉米灌浆期间籽粒蛋白质含量变化作用相同,前期逐渐下降,至成熟期略有升高;籽粒清蛋白和球蛋白、醇溶蛋白和符蛋白含量变化动态各处理基本一致,两种类型玉米籽粒清蛋白含量随时间的推移逐渐降低。球蛋门含量的变化动态旱单峰曲线,峰值出现在授粉后30d。醇溶蛋白含量均呈“V”型变化,以授粉30d后最低。谷蛋白的含量则均呈上升趋势。氮素供应水平对两种类型玉米籽粒中各蛋白质组分禽量的变化的影响作用有所不同。对高油115籽粒中球蛋白含量的影响较小;施氮水平并不改变两种类型玉米籽粒氨基酸总量的变化趋势。但两种类型玉米籽粒中氨基酸组分的含量变化较大。     

五龄家蚕若干组织器官蛋白质数据库构建

为构建家蚕蛋白质数据库,达到从蛋白质水平研究基因的表达及表达产物的加工修饰的目的,采用五龄家蚕休体壁、中肠和脂肪为材料获取蛋白质样品,用蛋白质双向电泳技术分离、纯化蛋白质,对其中的40个蛋白质斑点进行了氨基酸序列分析及同源性检索,发现其中58.5％的蛋白质与果蝇的有关蛋白质具有较高同源性,36.5％与其他生物的蛋白质具有较高同源性,只有5％与家蚕已知蛋白拷贝产高同源性,研究发现有27个蛋白质的N－末端氨基酸序列在家蚕中是第一次被检测到,并通过互联网向SWISS－PROT数据库进行了登录。研究证明利用蛋白质数据库的结果,可以得到基因表达及其产物修饰的信息。     

日粮必需氨基酸模式对草鱼生长及蛋白质周转的影响

通过调整原料种类和配比,以及补充氨基酸,设计了6种必需氨基酸(EAA)模式的日粮,其EAA平衡关联度分别为0．7071,0．7259,0．7409,0．7512,0．7827和0．8231。试验设计目的为研究EAA模式的平衡效果对草鱼种生长和肌肉、肝胰脏蛋白质周转代谢的影响。结果表明：(1)日粮EAA模式的平衡,促进草鱼生长和饲料的转化;(2)EAA模式的平衡能提高肌肉、肝胰脏的蛋白质生长速率(FGR),和蛋白质合成速率(FSR)与降解速率(FDR),但EAA模式的改变,对肌肉、肝胰脏蛋白质的沉积效率(PRE),即FGR与FSR的比值,和蛋白质合成的翻译效率(KRNA)不产生影响。(3)日粮EAA模式的平衡促进肌肉、肝胰脏蛋白质增长的原因是蛋白质合成能力的提高,和蛋白质合成的增加较降解的增加更占优势。     

不同发育阶段草鱼肾脏蛋白质组差异的初步分析

为了研究草鱼在不同发育阶段抗病能力差异的发育遗传学原因,以1龄草鱼和3龄草鱼的免疫器官肾脏为材料研究其在蛋白质组水平的差异。提取1龄草鱼和3龄草鱼肾脏的全蛋白,用二维聚丙烯酰胺凝胶电泳进行蛋白质的分离,染色后,扫描成像,经PDQUST软件分析,分别检测到大约900个蛋白质点。这些蛋白质点主要分布在pH4.5-7之间,其分子量大部分在66.2kDa以下。在3龄草鱼中检测到了3个在1龄草鱼中没有的差异蛋白质点,和20个上调、下调的差异点。经MALDI-TOF质谱分析和数据库搜索,证明在3龄草鱼肾脏中上调的差异点中有4个是与免疫或肾脏发育相关的蛋白质。这些初步的研究结果提示草鱼在不同发育阶段抗病能力的差异可能具有其发育遗传学基础。       

不同施肥水平对不同品种小麦籽粒蛋白质和地上器官游离氨基酸含量的影响

研究了小麦不同品种开花后各地上器官游离氨基酸含量的变化动态及其与籽粒蛋白质含量的关系,以及氮素营养的调节作用。结果表明,小麦叶片和颖壳十穗轴游离氨基酸含量均在开花后持续增加,至花后14d达到最大值,之后开始下降。茎和叶鞘游离氨基酸含量则在开花后上升较缓慢,至花后21d达最大值。籽粒游离氨基酸含量一般在开花后就持续降低。各地上器官游离氨基酸含量与成熟期籽粒蛋白质含量均呈显著或极显著正相关,说明源器宫中游离氨基酸供应充足,有利于籽粒蛋白质积累。增施氮肥能够提高各地上器官中的游离氨基酸含量,进而促进籽粒蛋白质的合成,提高籽粒蛋白质含量。品种之间籽粒蛋白质含量的差异,是由各地上营养器官向籽粒运输氨基酸的综合作用所造成的。     

草鱼同工酶发育遗传学研究——Ⅰ.不同组织器官的同工酶分析

采用垂直淀粉凝胶电泳及特异性组织化学染色技术,研究了草鱼成体脑、眼、心、肾、肌、肝等6种组织中的6种同工酶系统(LDH、MDH、GDH、ADH、LDH、EST)的分化表达谱式。结果表明,草鱼的同工酶系统具有明显的组织特异性。与绝大多数硬骨鱼类相比,草鱼的LDH、m-MDH和ADH同工酶具有特殊的表达谱式:m-MDH和ADH均由两个基因座位编码;肾脏在LDH-A_3B与LDH-A_2B_3之间多出1条LDH酶带(LDH-X)。本文还讨论了草鱼同工酶的遗传基础和亚基组成,以及本实验的某些结果与其他作者的结果不相符的原因。     

氨基酸组成对蛋白质耐热性的影响

为了研究一级结构对蛋白质耐热性的影响,利用软件DNAMAN对16个家族32种蛋白质序列进行了氨基酸含量分析,并统计分析了氨基酸组成对蛋白质耐热性的影响。通过比较同一家族的高低温蛋白质序列及16个家族中所有高温和低温蛋白质序列中氨基酸含量的变化可以推断(从低温到高温)：Ser、Cys．含量降低显著,Arg、Ile、Pro含量升高显著。由此可知高温蛋白质倾向于含有疏水性氨基酸而避免亲水性氨基酸。     

饲料蛋白水平对大规格草鱼生长、饲料利用和氮代谢相关酶活性的影响

为探讨饲料蛋白水平对草鱼（Ctenopharyngodon idellus）生长、饲料利用和氮代谢的影响,以鱼粉和酪蛋白为蛋白源制备蛋白水平分别为15%、20%、25%、30%和35%的5种等能（13.71 kJ/g）饲料饲养草鱼（20910） g 8周。结果表明:饲料蛋白水平对草鱼的增重率、特定生长率、饲料效率均影响显著（P0.05）,其中25%蛋白组最高。通过二次多项式的回归分析得出:当饲料蛋白水平为26.50%和27.20%的时候,特定生长率和饲料效率分别达到最高。15%蛋白组的摄食率显著高于其他蛋白组（P0.05）。蛋白质保留率和蛋白质效率随蛋白水平的升高而显著降低（P0.05）。各蛋白组的成活率、血清丙氨酸转氨酶活性和血清天冬氨酸转氨酶活性均无显著差异（P0.05）。血清总蛋白、血清尿素氮、肝脏天冬氨酸转氨酶活性、肝脏谷氨酸脱氢酶活性和肌肉腺苷酸脱氨酶活性随蛋白水平的升高显著增加（P0.05）,而肝脏丙氨酸转氨酶活性先增加后稳定,这表明高蛋白组（30%和35%蛋白组）相对于低蛋白组（15%和20%蛋白组）有较多的蛋白质用于分解代谢提供能量。       

草鱼不同组织胆汁酸组成分析

正胆汁酸是由胆固醇通过一系列酶促反应在肝细胞中合成的,根据侧链羟基数目的多少胆汁酸分为初级胆汁酸和次级胆汁酸。初级胆汁酸随食物到达肠道,在肠道微生物的作用下脱羟基形成次级胆汁酸~([1])。初级胆汁酸和次级胆汁酸都可与牛磺酸或者甘氨酸结合形成结合型胆汁酸。肝脏中合成的以及经由肠肝循环回到肝脏的胆汁酸都被储存在胆囊中。胆汁酸的主要生理功能是帮助脂溶性营养物质的消化吸收,高脂肪的摄入刺激胆汁酸     

乙烯对欧芹离体叶片中蛋白质代谢的影响（简报）

乙烯促进离体欧芹叶片中蛋白质的降解速率,加速多数种类蛋白质含量的下降,同时也促进数种蛋白质的合成。     

草鱼垂体催乳素的分离、纯化与鉴定的研究

 草鱼垂体催乳素的分离、纯化与鉴定的研究陈松林,邓文涛,陈细华,夏盛芹（中国水产科学研究院长江水产研究所淡水鱼类种质资源与生物技术国家重点实验室,沙市４３４０００）催乳素（ＰＲＬ）是由动物脑垂体合成与分泌的一种多肽激素,其在鱼类的主要功能是调节鱼体渗透...     

Effects of different methods of acid hydrolysis on the nitrogen distribution in two soils

Summary An inorganic (Bainsville) and an organic (Farnham) soil were hydrolyzed by continuous and stepwise hydrolysis with hot 3N HCl for 1, 2, 3, 4, 11, 15, 18 and 24 h and continuously with hot 6N HCl for 24 h. The following nitrogen forms were determined: total N, hydrolyzable-N, amino acid-N, amino sugar-N and ammonia-N. Proportions of ‘unknown’ N were computed from these data. Continuous hydrolysis with 3N HCl yielded more amino acid-N and less ‘unknown’ N than did stepwise hydrolysis with the same acid strength. But continuous hydrolysis for 24 h with 6N HCl produced more amino acid-N and less ‘unknown’ N than did hydrolysis with 3N HCl by either method. It was estimated that 33 and 54% of the total N in the inorganic and organic soil, respectively, was protein-N. The ‘unknown’ N in the inorganic and organic soil constituted 51 and 37% of the total N, respectively. From our work it appears that the ‘unknown’ N is not proteinaceous. It can be readily degraded chemically and microbiologically to NH₃ and N-gases. More attention needs to be given to identifying the ‘unknown’ N which constitutes a large portion of the total soil-N. A more adequate knowledge of the chemical constitution of the ‘unknown’ soil N may lead to the development of technologies that will make more efficient use of the N in soils.     

草鱼呼肠孤病毒在CIK细胞中复制及形态发生的研究

以草鱼呼肠孤病毒（ＧＣＲＶ）感染的草鱼肾细胞系（ＣＩＫ）为模型,进行了草鱼呼肠孤病毒在细胞内的形态发生的研究。当病毒以感染复数为５￣１０ＰＦＵ／ＣＥＬＬ感染ＣＩＫ细胞时,在病毒感染细胞４ｈ以内的切片中,可观察到脱去部分外层衣壳的不完整病毒颗粒。感染细胞８ｈ,可观察到浆胞内病毒发生基质,其内含有大量的直径约５０ｎｍ的亚病毒颗粒,无外层蛋白结构。感染１２￣１６ｈ后,这些亚病毒颗粒装配上外层蛋白结构,形     

草鱼PAX7基因的克隆、序列分析及组织表达

配对盒基因7(Paired box 7 gene,PAX7)在神经嵴发育及原肠胚形成、肌肉自主更新与再生中扮演着重要角色,对细胞更新、分化、凋亡等起着十分重要的调控作用。参照Gen Bank中斑马鱼、线鳍电鳗和虹鳟等物种PAX7序列的保守区域设计简并引物,进行反转录PCR扩增,获得草鱼PAX7基因的部分序列,长645 bp,编码214个氨基酸,包含编码128个氨基酸的PAX7蛋白配对框(PD)。氨基酸序列比对结果发现,草鱼PAX7基因与其他物种具有高度的相似性,与斑马鱼、线鳍电鳗、日本青鳉、金头鲷、虹鳟、大西洋鲑、北极嘉鱼、人、野牦牛、褐家鼠和小鼠的PAX7氨基酸序列同源性可达90%-97%;各物种PAX7部分氨基酸序列的系统进化树结果显示,草鱼与斑马鱼、日本青鳉、北极嘉鱼、大西洋鲑、虹鳟、线鳍电鳗和金头鲷聚为一大支,小鼠、褐家鼠,野牦牛与人类另聚一支,所得结果符合物种传统分类进化地位。运用实时荧光定量PCR检测草鱼PAX7基因在各组织中的差异表达,结果显示PAX7基因在肌肉中表达量最高;其次是前肠和皮肤,在心、脑、肾和肝中仅少量表达,所得结果与该基因的功能相一致。     

草鱼与鲢鱼肥胖基因克隆与序列分析

肥胖基因产物leptin是调节哺乳动物摄食、能量代谢等生命活动的重要细胞因子。 应用RT-PCR和RACE法获得了草鱼(Ctenopharyngodon idellus)和鲢鱼(Hypophthalmichthys molitrix) leptin基因的全长cDNA序列分别为1 096 bp和1 176 bp,编码173和172个氨基酸。氨基酸序列同源性分析表明,草鱼和鲢鱼的leptin序列与其它鲤科鱼类leptin的同源性较高,而与其他鱼类的leptin同源性很低,但所有鱼类的leptin均含有用于形成二硫键的高度保守的半胱氨酸。系统进化树分析显示,草鱼和鲢鱼leptin与其他鱼类leptin聚于一进化分支。应用PCR和Genome Walker方法,进一步获得了草鱼和鲢鱼leptin基因的内含子和5′侧翼区序列。结果表明,获得的草鱼和鲢鱼leptin基因长度分别为2 129 bp和2 192 bp,含有与其他脊椎动物leptin相似的基因结构（含三个外显子和两个内含子）。本研究为深入研究鱼类肥胖基因结构功能关系与鱼类抗肥胖品系定向遗传选育奠定了良好的基础。     

Optimum Ratio of Histidine in the Piglet Ideal Protein Model and Its Effects on Body Metabolism

A 4 ‐ 4 Latin square design was used to determine ileal apparent digestibility of amino acids (AAs) in corn, soybean meal, feather meal and dried whey in young pigs. The data were then to be used in formulating a basal diet for studies on AA metabolism in young pigs. Eight castrates T-cannulated at terminal ileum (average initial body weight 12.5 ± 0.62kg) were divided into 4 groups on the basis of body weight and transferred to individual metabolism crates. They were then fed four experimental diets containing the four feedstuffs to be tested (corn, soybean meal, feather meal and dried whey). The trial lasted 20 days, which included 4 five-day periods for ileal digesta collection. It was found that the digestibility of the AAs was similar to that reported in literature. Based on the findings a basal diet for this research was formulated according to an ideal protein model for the 10 to 20kg piglet, on the basis of digestible AAs and containing 14.13MJ/kg digestible energy, 18.22% crude protein, 1.04% digestible lysine and 0.23% digestible histidine.     

高效氯氰菊酯对草鱼器官酸性磷酸酶活性的影响

研究了暴露于不同高效氯氰菊酯浓度下草鱼Ctenopharyngodon idellas鳃、肝胰脏和肾脏的酸性磷酸酶(Acid Phosphatase,ACP)的活性变化。实验中高效氯氰菊酯浓度设5组,其中对照组1个(0μg/L),处理组4个(0.5μg/L、1.0μg/L、3.0μg/L、5.0μg/L)。每组随机投放40尾草鱼,分别于1d、5d、12d取样,测定鳃、肝胰脏和肾脏的ACP活性。结果显示,鳃ACP活性低浓度(0.5μg/L、1.0μg/L)短时间(1d)暴露下显著增加(P<0.01),高浓度(3.0μg/L、5.0μg/L)暴露时显著下降(P<0.01);肝胰脏ACP活性暴露1d时,除0.5μg/L组外,其他处理组均显著下降(P<0.05、P<0.01),暴露5d、12d时,各处理组均显著上升(P<0.05、P<0.01);肾脏ACP活性除0.5μg/L组在暴露1d、5d时无显著变化(P>0.05)外,其他处理组在暴露时间内均显著下降(P<0.01)。实验表明:高效氯氰菊酯能够通过影响草鱼鳃、肝胰脏和肾脏中酶的活性,干扰这些器官的代谢平衡,进而对这些器官产生毒害作用。     

鲤的微卫星引物对草鱼基因组分析适用性的初步研究

运用微卫星DNA-聚合酶链反应(STR—PCR)基因分型技术,选取已发表的28对鲤的微卫星引物,探讨鲤的引物用于草鱼基因组微卫星分析的可能性。通过优化PCR反应条件,消除了影子带和异源核酸双链分子两类微卫星相关假阳性带对STR—PCR分析的干扰。在此基础上,筛选出7对引物可在湘江野生草鱼基因组中扩增出特异性条带,占总数的25％;其中的4对引物(约占总数的14．3％)在8尾湘江野生草鱼小群体中即检测到了个体间等位基因的多态性。这些初步的结果表明鲤的微卫星引物可以用于草鱼基因组的分析。     

草鱼TRAP-PCR反应体系的建立

目的:通过优化草鱼TRAP-PCR反应体系,将新型分子标记-靶位区域扩增多态性(target region amplified polymorphism,TRAP)引用到草鱼遗传多样性研究中。方法:以草鱼DNA为材料,分析了模板DNA、Mg2 、dNTPs、引物浓度,以及循环参数、退火温度对TRAP-PCR扩增结果的影响。结果:确立了稳定性强、重复性好的草鱼TRAP-PCR最佳反应体系和扩增参数:在25μl的PCR反应体系中,含约50ng模板DNA,1UTaq酶,1×PCR缓冲液,2.0mmol/L MgCl2,4种dNTPs各0.2mmol/L,固定引物与随机引物各15pmol;首先使模板在94℃变性3min;然后94℃变性1min,38℃退火1min,72℃延伸lmin进行5个循环;接着94℃变性45s,55℃退火45s,72℃延伸lmin再进行35个循环,最后72℃延伸7min。结论:TRAP-PCR反应体系稳定可靠,该新型分子标记可应用于草鱼遗传多样性研究中。     

CO_2对离体欧芹叶片中蛋白质代谢的影响

以离体欧芹叶片为实验系统 ,研究了CO2 对叶片中蛋白质降解的影响。对离体欧芹叶片中游离氨基酸含量及可溶蛋白含量的分析结果表明 :CO2 具有抑制离体欧芹叶片中蛋白质降解的作用 ,这为进一步了解CO2 延缓叶片衰老的作用机理很有意义。