促进肠道蠕动的激素——胃动素

协和发酵公司宣布重组胃动素已进入第1阶段临床试验。三和化学公司与NKK合作进行重组胃动素的临床前的试验,估计1992年春着手第1阶段临床试验。“协和发酵”的重组胃动素衍生物“KW5139”是22个氨基酸的蛋白,将第13位蛋氨酸变换成亮氨酸。它是用基因操作容易制造的改良型。用基因操作很难制造分子量1万以下的蛋白。为了克服这些,该公司采取把4个氨基酸的核苷酸片段串联插入胃动素中,作为高分子蛋白一次生产,之后使羧肽酶A和B起作用合成胃动素的方法。     

人甲状腺髓样癌TT细胞胃动素基因表达的调控(英文)

目的:研究人甲状腺髓样癌TT细胞系中胃动素基因表达调控。方法:通过人甲状腺髓样癌TT细胞体外培养,观察经cAMP,生长激素或甲状腺雌激素诱导后,胃动素表达的改变以及胃动素对TT细胞生长、侵袭和转移的影响。结果:甲状腺髓样癌TT细胞表达胃动素mRNA,胃动素可抑制TT细胞的生长。当胃动素基因沉默后,TT细胞转移和侵袭能力增加。当TT细胞分别经cAMP、胃动素、生长激素或甲状腺刺激素孵育48小时后,胃动素基因转录增加,降钙素基因相关肽与胃动素mRNA比值持续下降。环磷酸腺苷可降低TT细胞增殖和c-myc基因的表达。结论:人甲状腺髓样癌细胞生长活性可能与甲状腺C细胞(低的降钙素基因相关肽与胃动素比率)分化的表型有关。     

人甲状腺髓样癌TT细胞胃动素基因表达的调控

目的:研究人甲状腺髓样癌TT细胞系中胃动素基因表达调控.方法:通过人甲状腺髓样癌TT细胞体外培养,观察经cAMP,生长激素或甲状腺雌激素诱导后,胃动素表达的改变以及胃动素对TT细胞生长、侵袭和转移的影响.结果:甲状腺髓样癌TT细胞表达胃动素mRNA,胃动素可抑制TT细胞的生长.当胃动素基因沉默后,TT细胞转移和侵袭能力增加.当TT细胞分别经cAMP、胃动素、生长激素或甲状腺刺激素孵育48小时后,胃动素基因转录增加,降钙素基因相关肽与胃动素mRNA比值持续下降.环磷酸腺苷可降低TT细胞增殖和c-myc基因的表达.结论:人甲状腺髓样癌细胞生长活性可能与甲状腺C细胞(低的降钙素基因相关肽与胃动素比率)分化的表型有关.     

日开发糖尿病病人专用水稻

日本农林水产省计划与民间企业合作开发能降低血糖含量的新稻种,为糖尿病患者提供具有疗效的主食。这一科研计划的核心内容是应用转基因技术,把促进分泌胰岛素的激素DNA导入水稻细胞,从而使人们在进食这种水稻后,体内胰岛素含量逐渐增加,达到抑制血糖升高的作用。据悉,有多家日本知名企业和机构将参与这项研究,日本三和化学研究所负责设计控制血糖含量的激素分子,日本造纸公司提供转基因技术,农林水产省的农业生物资源研究所负责制备让这种激素集中在稻谷食用部分的基因——启动基因。按计划,这种功能性水稻将在2005年开发成功…     

26肽蜂毒素与基因变构IL-2嵌合蛋白的原核表达、纯化及活性测定

在E .coliDH5α中表达26肽蜂毒素与基因变构人白细胞介素2的嵌合体蛋白 ,并进行初步纯化和抗原性检测。利用剪接式重叠延伸 (splicedoverlapextension ,SOE)技术在26肽蜂毒素与基因变构IL-2的基因之间导入四个易形成空间结构的氨基酸残基组成的连接肽 (Gly4Ser)₃,构建嵌合体蛋白的基因,克隆到原核表达载体pGEX4T-2中,重组质粒转化宿主菌DH5α,经IPTG诱导表达目的融合蛋白,纯化蛋白经Thrombin酶切后进行SDS-PAGE与Western-blot鉴定。结果表明重组蛋白有良好的抗原性 。     

利用套叠PCR技术进行基因突变和拼接

利用套叠PCR技术（又称重叠区扩增基因拼接法）对hGM-CSF基因内第28位氨基酸处的糖基化位点进行突变和进行人促性腺激素基因,腺苷酸激酶短肽与胰岛素样生长因子－基因三者之间的拼接,结果表明采用该技术能在体外实行有效的基因重组和定点突变,其成功率为100％,这一技术不需要内切酶消化和连接酶处理,技术操作员简单易行,在基因拼接,基因内部突变方面具有良好的应用价值。     

采用固相法合成高纯度生产激素释放因子

工业技术院纤维高分子材料研究所合成了由44种氨基酸构成的人生长激素释放因子(GRF)。从脑下垂体中放出的人生长激素是受丘脑下部产生的GRF控制的。自从1982年发现GRF是由44种氨基酸组成的肽以后,在全世界范围内进行了对它的合成研究。现在该研究所的大箸信一等使用了连结氨基酸成为肽的自动合成装置,在溶媒中使用二氯甲烷、氯仿、甲醇等,通过固相合成法,成功地合成了在世界上居领先的高纯度GRF。     

动物蛋白质营养中小肽的吸收及其生理作用

蛋白质在动物消化道内经过各种消化酶的作用,不仅形成游离氨基酸,而且还生成相当数量的小肽。小肽以完整形式被吸收进入循环系统从而被组织利用。对小肽的吸收机制及其特点、蛋白质消化过程中小肽的释放及其影响因素,一些蛋白质中潜在的生物活性肽和作用以及由此产生的营养学效应作一综述。     

降钙素基因相关肽的合成

降钙素基因相关肽是一个包含有37个氨基酸残基的具有较强降血压生理功能的活性多肽。我们采用常规的固相合成方法,以简单的装置最后经无水氟化氢处理,将肽从树脂上切下,同时脱除所有侧链保护基。粗产物在30％乙酸溶液中用碘作为氧化剂使二个半胱氨酸氧化,形成二硫键。合成的α-人降钙素基因相关肽经反向高效液相层析分离,获得在高效液相层析为单一峰的产物。经酸水解氨基酸分析证明与理论值相符并具有全部生理活性。     

大熊猫及其近种活化素基因βA亚基成熟肽序列的克隆分析及其在分类地位上的应用

借鉴互联网中已经克隆到的Activin基因βA亚基成熟肽序列,设计并合成1对兼并引物,利用PCR技术从大熊猫,小熊猫,马来熊的基因组DNA中直接扩增目的基因片段,并分别克隆到大肠杆菌载体pBlueScript^ 当中,然后对培养产物进行行序列测定,DNA序列分析表明,三种物种的Activin基因βA亚基成熟肽序列长度均为359bp,无内含子,基因片段编码一个含有119个氨基酸残基的肽段。大熊猫,小熊猫,马来熊在该成熟肽核苷酸和氨基酸序列上表现出高度的同源性,其中核苷酸同源性为93.9%。氨基酸同源性高达99%以上,此外,3种动物的核酸限制性酶切图谱也高度相似,与GenBank中收录的其他物种Activin基因βA亚基成熟肽序列相比较,显示此片段在处于不同进化程度的物种之间仍具有高度保守性,运用系统发育与进化树软件包PHILIP,并结合克隆序列对大熊猫,小熊猫,马来熊进化与分类地位进行了探讨,采用不同的统计学分析方法,所得到的3个物种系统发育进化树的拓扑结构完全一致,相比较而言,大熊猫与马来熊有着较近的亲缘关系,而小熊猫与上述两个物种的亲缘关系相对疏远,结果支持将大熊猫与马来熊归为熊科,而将小熊猫单列成科的学术观点,这是首次以生殖相关的核基因作为研究对象,为大熊猫及其近种进行系统分类研究所提供的又一分子生物学证据。     

海藻肽的化学结构特征和活性作用研究进展

海藻中的肽类化合物具有显著的生物活性和药理作用,对其氨基酸序列及活性作用的研究已经取得了一些重要进展。发现的海藻肽类化合物并确定其化学结构式的主要有二肽、环肽和脂肽,这些肽类化合物具有抗肿瘤、降血压、降血脂、抗凝血、促进神经细胞分化、抗氧化、抗菌和抗病毒等生物活性。预测海藻肽类化合物在疑难病症的治疗上将发挥重要作用。     

小肽在猪营养中的研究

蛋白质在消化道中的消化终产物往往大部分是小肽而非游离氨基酸,小肽能完整地被吸收并以二、三肽形式进入血液循环,小肽在蛋白质营养中有着重要的作用。动物为了达到最佳生产性能,必须需要一定数量的小肽,作者就目前国内、外对小肽在猪营养中的研究及应用现状作一综述。随着蛋白质和氨基酸营养研究的深入,人们已逐渐认识到肽营养的重要性。Aga r(1953)观察到,肠道能够完整转运双甘肽。其后Naey(1959)和Smith(1960)首先提出肽可被完全转运的确切证据。最简单的肽是由2个氨基酸组成的二肽,其中含有1个肽键。含有3、4、5个等氨基酸的肽分别被称为三、四、五肽等。由2--10个氨基酸通过     

人Latexin基因及蛋白质的生物信息学分析

Latexin(Lxn)是人的羧肽酶抑制剂,并有肿瘤抑制因子的作用。利用生物信息学分析Lxn基因的启动子和Cp G岛以及Lxn蛋白质的理化性质、结构特点、功能特征后发现,Lxn基因存在两个启动子和Cp G岛,且一个Cp G岛与启动子重合;Lxn是全长222个氨基酸,等电点5.52,无信号肽、无跨膜结构的亲水不稳定蛋白质;蛋白质二级结构有4个α螺旋和9个β折叠,三级预测结构可信度为99.55%,拉曼图表明结构稳定;与Lxn相互作用的蛋白质主要是羧肽酶,另外Lxn还参与炎症反应和温度引起的痛觉反应等生物过程;启动子和氨基酸在灵长类间的同源性极高。对Lxn的表达、结构及功能的预测分析可以为研究Lxn在生命过程中的作用提供重要的信息。     

大熊猫生长激素受体(GHR)cDNA的克隆与序列分析

根据已报道的若干物种GHR 基因cDNA 序列设计引物, 利用RT- PCR 技术首次从大熊猫肝脏组织总RNA中扩增出GHR 基因编码区全长cDNA 序列, 克隆于pGEM®-T 载体后进行测序和序列分析。结果表明,大熊猫GHR 的ORF为1 917 bp , 编码638 个氨基酸的前体蛋白, 由18 个氨基酸的信号肽和620 个氨基酸的成熟肽组成,与人、狗、猪GHR 结构相似, 大熊猫GHR 成熟肽由246 个氨基酸的胞外区、24 个氨基酸的跨膜区和350 个氨基酸的胞内区组成, 并具GHR 的特征性结构。序列相似性比较显示, 大熊猫GHR 与哺乳类GHR 具有69 %～93 %的高序列相似性, 与爬行类和鸟类的序列相似性也达到60 % , 而与鱼类的序列相似性较低, 仅为30 %左右。与其它哺乳动物GHR 相比, 大熊猫GHR 在氨基酸序列上也存在明显的特异性。     

靶向FoxM1 多肽P201对人肝癌HepG2 细胞的杀伤作用及关键氨基酸分析

目的:初步探究靶向FoxM1多肽P201对人肝癌细胞的杀伤作用、死亡途径以及寻找多肽序列中关键的氨基酸残基。方法:本研究选取人肝癌HepG2细胞为主要研究对象,采用MTT法、AO-EB双染和流式细胞术检测P201多肽对HepG2细胞的杀伤作用和死亡途径,结合模体序列捜索、反义肽氨基酸、虚拟丙氨酸突变和分子对接等方法:确定P201多肽的关键氨基酸。结果:MTT法检测60.0μg/mL P201多肽对HepG2细胞作用48 h抑制率高达96%,形态观察和定量测定显示细胞早期凋亡的发生与P201多肽作用时间和剂量呈一定依赖关系;共确定5个氨基酸(第1、2、4、7、9位残基)为P201多肽的关键氨基酸残基。结论:初步揭示P201多肽对HepG2细胞的强杀伤作用与细胞凋亡相关并确定关键氨基酸为多肽分子的优化和多肽抗癌靶向药物的进一步研发提供了重要的依据与参考。     

Salusins:新的心血管调节及有丝分裂的活性肽

孤儿G蛋白偶联受体的配体的发现 ,对生物学的研究有重大意义。SchichiriM等最近发现了两种性质相似的小分子生物活性肽———Salusin α (2 8个氨基酸 )和Salusin β(2 0个氨基酸 ) ,是TOR2A基因 (编码torsindystonia蛋白家族 )的mRNA选择性拼接转录的产物。静脉给予Salusins可以迅速且明显地降低大鼠平均动脉压与心率 ,其中Salusin β的降压作用甚至强于一些降钙素基因相关肽 (如肾上腺髓质素 )。Salusins还可提高细胞内钙离子浓度 ,上调多种基因表达 (如细胞有丝分裂 )。Salusin β还可刺激大鼠垂体释放精氨酸加压素。在人的组织、…     

北京鸭消化道内分泌细胞的免疫组织化学研究

应用七种消化道激素抗血清，对北京鸭消化道内分泌细胞进行了免疫组织化学定位，促胃素释放肽细胞大量分布于腺胃和肌胃。生长抑素细胞在腺胃和肌胃数量很多，在幽门部密集，且偶见于十地二指肠，胃素细胞在幽门部非常密集，并较多分布于整个小肠，肌胃内亦有少量。５－羟色胺细胞大量见于肠管各段，并偶见于幽门，少量胰多肽细胞见于腺胃、十二指肠和空肠，未检出胃动素和抑胃肽细胞。     

以鸡信号肽由酵母菌分泌产生人溶菌酶

日本工业技术院化学技术研究所天然有机化学部长田中秀明等将鸡溶菌酶的分泌信号肽的合成基因与编码人溶菌酶的化学合成基因相连结的质粒导入酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中,使其有效地分泌产生人溶菌酶获得成功。     

适体家族新成员－肽适体

肽适体是一种从随机氨基酸的肽文库中筛选出来,可以高亲合力地与靶物质特异性结 合的短肽序列．它的主要结构包括恒定的展示支架蛋白及通过两端限制性插入的高变肽环． 酵母双杂交技术常用于筛选针对细胞内特异性靶蛋白的肽适体过程,筛选出的肽适体通过特 异性结合识别靶标发挥类似“干扰基因”的作用从而影响蛋白的生物学活性．     

香猪雌激素受体α、β基因cDNA的克隆及分析

本文采用RT-PCR技术,分别从香猪的子宫和卵巢总RNA中扩增了雌激素受体α和β(Erα、Erβ)两种cDNA,分别长1788 bp和1581 bp,包括起始密码子和终止密码子,碱基序列与大白猪的Erα、Erβ基因的相似性为99.3%和99.6%.Erα、Erβ两个基因编码595、526个氨基酸,N-末端的20、24个氨基酸残基为信号肽,成熟肽序列与大白猪之间均有4个氨基酸不同.三维结构分析发现,与大白猪相比,香猪Erα成熟肽第192、231位氨基酸由Ser、Met变为Gly、Thr,位于DNA结合结构域,成熟肽438位氨基酸由Val变为Gly,位于Erα的配体结合结构域;Erβ成熟肽中,167位和360位氨基酸由Asp和Phe变为Glu和Pro,位于受体的DNA结合域和配体结合域,这五个位点的氨基酸替代可能影响Ers蛋白与雌激素受体应答元件、雌激素等配体的结合,改变相关基因的转录效率,并可能影响香猪的卵巢、子宫等繁殖系统的发育,与香猪的低繁殖力有关