对弹性组织的选择性染色 (俄西印——新复红法)

1)切片脱蜡,入100%酒精.2)以俄西印——新复红(orcinol-new fuchsin)液于37℃染15分钟。染液配法为:新复红(new fuchsin)(C.I.,No.678)2克俄西印(orcinol)4克蒸馏水 200毫升上液煮佛5分钟,加37.2%三氯化铁溶液(ferricchloride)25毫升,再煮5分钟,待凉,过滤,其沉淀收集于滤约上,并须洗净晾干,将沉淀溶于95%酒精100     

以龙胆紫染硫酸酯多醣类的组织化学意义

甲、方法:1)固定于任何固定液皆可,但以酒精为最合适。石蜡切片,厚3微来。切片脱蜡,降酒精,至蒸馏水。2)以龙胆紫(gentian violet)水溶液1∶250,000或1∶1,280,000染色24小时(即0.25毫升0.1%龙胆紫贮存液加入100毫升蒸馏水内;或以0.1毫升0.1%龙胆紫液加入128毫升蒸馏水内)。3)滤纸吸干切片,然后在亚尼林二甲苯(anilinc-xylene)1∶1或1∶2液内脱色及脱水约5分钟(或稍长),直至紫色不再从切片上脱下为止。以二甲苯洗2—3次,用树胶封片。若染透明质酸(hyaluronic anid)可以甘油封片。     

于铬化及碳蜡包埋后染神经终足及线粒体

(一)固定:猫、兔以加有20—40毫克亚硝酸钠(Sod nitrite)的0.9%氯化钠液50—100毫升灌注(亚硝酸钠作为血管扩张剂):继以含10%蚁醛之0.9%氯化钠液300—500毫升灌注;取其脊髓,继续以上述10%蚁醛液固定,最少两天;置5—10毫米长的脊髓在室温下入下液浸5天。配法:重铬酸钾5克;氟化铬(chromiumfluaride)2克;蒸馏水100毫升,再入5%重铬酸钾于38—40℃下浸2—4星期,此液应换数次。     

涡虫神经纤维的硫酸铜-硝酸银显示法

整体染色:(1)在10毫升福末林(普通的);45毫升95％乙醇;2毫升冰醋酸組成的混合剂內固定24—48小时。(2)不用洗滌,轉入70％乙醇內3—10天。(3)在蒸餾水內洗滌一小时。(4)在50℃下,在10％硫酸銅(CuSO_4·5H_2O)內浸3小时。(5)不經洗滌,在50℃下,轉入1％硝酸銀內1.0—1.5小时。(6)在蒸餾水內洗3分钟,連續三次,每次一分钟。(7)在40—45℃时水浴內,在下述显影剂內还原,显影剂配法:1％連苯三酚10毫升;56％乙醇(一般为60％)     

绿色植物保存法的一点经验

在制作绿色植物浸渍标本时我们研究出下列方法可得满意的结果,兹介绍如后。保色液的配制:硫酸铜20克、浓盐酸2或3滴、水100毫升。将植物材料放入保色液中,如热至95℃左右,经半小时(视材料大小而略有增减)后,取出,在清水内充分洗净,然后放入5—10%福尔马林或70%酒精中保存即可。     

神经组织的氨基-银液染色

1) 神经组织以95%乙醇或10%甲醛(普通甲醛,甲醛盐液,中性甲酫)固定;石蜡切片。 2) 取氨基银液150—200毫升于染色皿内。 配法:0.035M的甘氨酸(glycine)或dl-蛋氨酸(dl-methionine)或dl-α-氨基-正-酪酸(dl-α-amino-n-butyricacid)或dl-组氨酸(dl-histidine)(硷性基游离)或dl-α-丙氨酸(dl-α-alaniae)的溶液与0.02M硝酸银溶液等量混合,     

植物维管束透明法

1.选幼嫩蚕豆一株连根拔出,用清水洗净根、茎表面污物备用。 2.将根部浸入碱性洋红溶液(配制:取0.5克碱性洋红溶解于2毫升95%酒精中后,用自来水稀释至150毫升)中染色12小时左右,待细小叶脉染为红色后,取出,用清水漂洗数分钟。     

酚-次氯酸钠显色法测定大鼠脑中游离氨-N含量

本文介绍一种用酚-次氯酸钠试剂直接测定动物组织样品中游离氨-N含量的方法,此法简便、灵敏、省时,最小检测量为0.05微克氨-N。酚-亚硝基铁氰化钠试剂:取酚0.6克、亚硝基铁氰化钠5毫克、加水至50毫升,放置24—48小时后使用。次氯酸钠试剂:Na_2HPO_4·12H_2O 1.79克、Na_3PO_4·12H_2O 1.9克、氢氧化钠0.5克、次氯酸钠原液1毫升,加水至50毫升,贮于棕色瓶内。硫酸铵标准液(1毫升=0.05     

一种半永久玻片标本的制备方法

这里介绍一种用蔗糖液制备半永久玻片标本的方法。用这种蔗糖液制备半永久玻片标本研究染色体是很方便的和有实际意义的。这种用蔗糖液制备的半永久玻片标本,可以保存较长时间(一年或更长)。蔗糖液的制备方法取40克蔗糖(化学纯)溶解在60毫升水中,并加热至沸,直至溶液总体积减少了1/4时为止。为避免蔗糖液冷却后出现结晶,要向蔗糖液滴入2—3滴香柏油,细心搅匀,然后再加0.2克苯酚结晶,该糖液可保存一个月以上。花药制片方法 1.从经卡诺固定剂(95％酒精:冰醋酸3:1)固定的保存在70％酒精中的花序上取出一些花药,用醋酸地衣红色液(醋酸洋红、醋酸间     

胞间连丝玻片的制备

将柿子或黑枣的种子浸于温水中24小时,剥去种皮,将胚乳切成薄切片并于I—KI溶液(I 1克,KI 1.25克,蒸馏水100毫升)中固定3—5分钟,移入5％H_2SO_4溶液中3—5分钟。将切片置载片中央滴一滴结晶紫染色,3分钟后用50％酒精洗1—2     

显示环氧树脂厚切片中多糖,蛋白质和脂类的细胞化学方法

用花生(Arachis hypogaea L.)种子的子叶组织作为模式材料,Epon 812包埋的组织进行厚切片后,按下列三步染色。第一步,PAS 反应:(1)在0.5%高碘酸(0.3%硝酸配制)中10分钟;(2)自来水洗1—2分钟,蒸馏水经过;(3)锡夫试剂中30分钟;(4)偏亚硫酸氢钠溶液三次洗涤,每次2分钟;(5)自来水洗5分钟,蒸馏水经过。第二步,苏丹黑 B 液染色:(1)70%酒精中1—2分钟;(2)新鲜配制的0.3%苏丹黑 B 液(70%酒精配制)中染色,40—60℃,30分钟至1小时;(3)70%酒精中分色1分钟;(4)自来水冼,蒸馏水经过。第三步,考马斯蓝染色:(1)7%醋酸中1—2分钟;(2)1%考马斯蓝(7%醋酸配制)中染色,60℃,20分钟;(3)0.1%醋酸液中分色1分钟;(4)自来水冼5分钟,蒸馏水经过;(5)自然干燥或在40℃电热温箱中烘干。干燥后的切片用甘油胶封固。经这三步染色的切片,细胞内的多糖、脂类和蛋白体同时被显示:淀粉粒及纤维素的细胞壁为樱红色,油滴为黑色,蛋白体为蓝色。制片能长期保存。     

草履虫的纤毛染色方法

(一)杀死固定 1.固定液配制酒精95％5毫升,苦味酸(饱和液)15毫升,冰醋酸20毫升,甲醛60毫升,蒸馏水100毫升。将上面四种药物混合后,再加等量的蒸馏水稀释,即成200毫升的固定液。如要少配或多配,可依次按1∶3∶4∶12∶20的比例进行。此固定液可长期保存,效果不变,也适应其他原生动物和动物组织的固定。 2.固定的方法用吸管吸取培养草履虫的烧杯边缘的培养液,可得到高浓度的草履虫,投入离心管中,然后以9∶1的比例加入固定液(即草履虫培养液9份,固定液1     

蝗虫性细胞减数分裂制片方法的改良

最近,我室采用分离、滴片方法观察蝗虫性细胞减数分裂,取得良好效果。现介绍如下。 1.取材在麦熟和稻熟季节采集蝗虫。取其精巢固定于卡诺液中0.5—1小时。去固定液,用95％酒精洗3次,移于70％酒精中,置于低温下可长期保存。 2.制片方法 (1)用眼科镊把精巢取出,装入瓶中,加入碎玻璃反复振荡,使组织捣碎。 (2)用吸管吸取捣碎液放入离心管内,以1000转/分的速度离心3—5分钟。去上清液,     

绿藻保色液的配制和使用方法

一、无鞭毛绿藻保色液的配制和使用方法1、保色液的配制取醋酸汞(HgACO)10克、中性醋酸铅(Pb(ACO)_2)10克,溶于1000毫升90%酒精(C_2H_2OH)中,混匀后静置24小时,取澄清液即得绿藻保色液。2、使用方法无鞭毛藻类如礁膜、刺松藻等,它们的植物体较大,处理较简单。只要把植物体冲洗干净,去掉杂藻,而固着物体大小适中,即可移入保色液中,一星期以后换液一次,然后蜡     

去氧核醣核酸,多醣类,蛋白质的三色染色

甲)材料及固定:哺乳类、两栖组织,包括甲状腺、肾、小肠、胃、睾丸;昆虫的精巢,肌组织;及数种植物组知,固定于 Carnoy 氏液,福尔马林液,Helly 氏液,或 Smith 氏液皆可。乙)试剂试剂 T:天青 A-schiff 液——溶0.5克天青 A(azureA)于100毫升漂白液内(见下)可保持数周,用前加100%偏亚硫酸氢钾(K-me(?)abisulfite)数滴。试剂Ⅱ:漂白液——1N盐酸5毫升;10%偏亚硫酸氢钾或钠5毫升;蒸馏水90毫升;新鲜制备。试剂Ⅲ:高碘酸液(periodic acid solu)——高碘酸0.8克;蒸馏水90毫升;0.2M醋酸钠10毫升;新鲜配制。试剂Ⅳ:硷性复红 schiff 液——根据 Stowell 氏法(1945)配制,溶液置冰箱内可保持数月。     

焦性磷酸酶的组织化学显示法

甲) 硷性焦性磷酸酶(alkaline pyrophosphase)的显示法: 1) 新鲜组织片固定于冷的5%中性福尔马林液中(此液含有0.9%氯化钠)1小时。 2) 以0.9%氯化钠洗10—20分钟。 3) 冰冻切片(20—35微米),切片径入0.9%氯化钠中或酶作用基液中(Substrate solution)。 4) 切片入酶作用基液内,在37℃下作用3小时,基液之     

纸层析法测定庆丰霉素

我们通过试验,找到了一种测定庆丰霉素的纸层析法,此法简易、快速、较准确。现介绍如下。一、试剂层析溶剂:正丁醇:冰乙酸:蒸馏水=2.8:1:1。显色剂:0.3克茚三酮,5毫升吡啶用95%的乙醇定容为100毫升配成。春雷霉素溶液(作定量标准用):贮备液为2毫克/毫升,用时以蒸馏水稀释为500微克/毫升。贮备液可在冰箱中保存三个月。     

鱼类染色体的观察

在早春到市场上买性成熟的活雄鲤一条,取其精巢(性腺已发育到第Ⅳ期),做染色体的观察。 1.固定将精巢放入Carnoy固定液(无水酒精3份,冰醋酸1份),固定3小时,再换入70％酒精中。 2.染色用镊子和解剖针仔细取出精巢内的精细小管(细如白发),一小段,放手掌上剔去周围异物之后,放置载玻片上,加醋酸洋红(45％醋酸100毫升加洋红1克煮沸、冷却、过滤即成),染色2-3小时。     

介绍一种绿藻的保色法

取醋酸汞(HgACO)10克、中性醋酸铅[Pb(ACO)_2]10克,溶于1000毫升90%酒精中,充分混匀后静置24小时,取上清液即得绿藻保色液.无鞭毛绿藻类,如石莼、礁膜、刺松藻、浒苔等,由于它们的植物体较大,只需把新采来的标本冲洗干净,去除杂藻,固着基物大小     

运动神经末梢(运动终板)制片法

运动神经末梢分布到骨骼肌纤维并和肌纤维紧密相贴,组成运动终板。运动终板呈卵圆形的板状隆起,一般长40—60微米,厚约10微米,大小可随肌纤维的粗细而改变。 1.取材蜥蜴、壁虎、蛇及幼年的哺乳动物的肋间肌。肌肉每块厚度3毫米左右。 2.固定组织人下列固定液呈透明。柠檬酸20克,葡萄糖7克,1％氯化金水溶液1毫升,蒸馏水100毫升 3.方法步骤 (1) 用洁净滤纸将固定后的组织吸干。 (2) 1％氯化金水溶液,浸30—60分钟(放置暗处)至肌肉组织呈金黄色为止。