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《生物技术通报》1989,(4)
89飞石02人降钙素基因的化学合成与表达[英〕八、:、1飞。、,,工,…、2 Ce,le一xs87,59 (昌一3)一223一23。巨译自DB八,1988, 7(18),88一08890] 降钙素(C‘即被川一卜治疗严吸的高钙血症或骨吸收的疾病。而长期使川动物CT会导致反应性降低。合成的人CT基因 口ICT)含有双股DN入,各有106个核昔酸。构建J’贡组质粒p,!尸1尺。一hCT,井用之转化大肠杆菌K一12(LE392)。细菌产泣址的hCT在N末端多一个甲硫氨酸残基,{盯C末端无酷胺化作用。贡纵大肠杆菌细胞直接在止入/1酉普酸,}J破碎,真空冷冻干燥酸性j二清液收取hC尸f丫l衫大鼠禁食后,”… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(8)
922949在特定杆状病毒表达系统中生产具生物学活性的跳胺化eeeropin〔英〕/Andersons,H.…2 Bioe-liem.J一1091,250,Pt.1一219~224〔译自DB-A,1992,11(3),92一01388〕 构建了表达质粒pVL941一22一ceoA,其中含有:组织血纤维蛋白溶酶原激活子(t一PA)的信号肤、从金黄色葡萄球菌蛋白一A(22)衍生的合成性抗体结合部分、编码cecropin一A天然部分的合成片段(附加C末端甘氨酸密码子)。将此融合基因转入首着银纹夜蛾核多角体病毒载体基因组,再用重组病毒感染草地贪夜蛾Sfg细胞。对从细胞培养基获取的蛋白进行SDS一PAGE和blotting检测。采… 相似文献
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三得利公司确立了一种基因重组法,可大量生产酰胺化的人降钙素(hCT),结果在4月东京召开的日本农艺化学会上发表.使用基因重组生产的α酰胺化酶作用于用基因重组大量生产的目的蛋白,获得活性蛋白.用20升培养物能制造4～5克酰胺化活性型hCT.用这项技术还能大量生产由于酰胺化而产生活性的其它蛋白.三得利公司最近打算向厚生省申请批准生产hCT. hCT的生产程序如下:首先用基因重组大肠杆菌生产与融合有β半乳糖苷酶片段的蛋白,然后用蛋白酶V8切出hCTGKKR(hCT-Gly-Lys-Lys-Arg),用羧肽酶B将其变换成 相似文献
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《生物技术通报》1992,(10)
923619乙型肝炎表面抗原在乳酸克会维醉母中的克隆和表达〔英〕/Martinez,E.…2 Bioteehnol.Lett一1092,14(2)。一53~56〔译自DBA,1992,11 (7),92一03754〕 为了用乳酸克鲁维酵母生产乙肝病毒表面抗原,构建了含lac4基因启动子(来自质粒BSLAC4)、表面抗原基因(来自质粒pHBI)、LAC4终止区及其后的URA3基因(来自酿酒酵母)和LAC4基因的3‘非编码区(来自质粒pJAAS12)的质粒pDLHZ。用含表达盒区的pDLHZ转化乳酸克鲁维酵母VDI,转化子于1%酵母粉、2%蛋白膝和2%葡萄糖的培界基中进行摇瓶培养(21摇瓶装40001培养基,于50℃、25orPm培养… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(4)
921209噬菌体T7第10基因翻译增强子(TREN)的化学-酶促合成及其构件的功能〔俄〕/Gureyich,A.1.…1 Bioorg.khim一1991,17(5)一e47~652〔译自DBA,1991,10(18),91一10247〕 为了这种分析,通过化学一酶促合成法制备了TREN完整序列及其近端和远端序列。用Bam Hl和E。。Rl二种限制酶将合成序列克隆到多拷贝质粒pFPC10中。获得的新质粒用千检测TREN近端区增强翻译的能力。编码人白细胞介素一3的人工基因(克隆于pFPC10中,不含TREN的一部分)在大肠杆菌中的表达很低。引入完整的TREN序列,使人白细胞介素一3的产量大大升高。取代pTE3 … 相似文献
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《生物技术通报》1992,(8)
922913指导甲状旁膝素类似物(8一84)在大肠杆菌内表达的内核钻体结合位点〔英〕/song,W.L一ZBi。-ehem。BioPhys.Res。Commun。一1991,151 (i)一451~455〔译自DBA,1902,11(3)奋92一01358〕 设计了12种合成基因,通过用简并密码子置换 (多肤序列无突变),使每个合成基因在甲状旁腺素(PTH)一(1一5)区内含或不含内核糖体结合位点样序列(iRBS)。将12种合适的编码PTH-一(1~28)的寡核普酸擂入前体质粒pPTH一(29-84)一Ec。产生具不同编码PTH一(1一5)结构域核酸序列的质粒。此新质粒在大肠杆菌中表达(在lac启动子和操纵子控制下)产生胞内蛋… 相似文献
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《生物技术通报》1988,(3)
880936微载体培养动物细胞的流体动力学效应〔英」/Cr。ughan,M.S.…了Bioteehn-01.Bioeng一1987,29(1)一130一141〔译自CBA,1987,(5),2041〕 对于微载体培养中的流体动力学现象作了研究,以便更好地设计大规模生产用的反应器。文中用新的概念和理论模型对新旧资料作了分析。(梁博文)88093了通过对营养物的控制降低废物的分泌:在血清培养哺乳动物细胞时使产物和细胞产率达到最大值的可能采取的方案〔英〕/G laeken,M.W.…了Bioteehnol.Bioeng一1986,28(9)一1376~1389〔译自CBA,1987,(5),2118〕 在培养基中生长的哺乳动物细胞会分泌一… 相似文献
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《生物技术通报》1987,(5)
872273人溶菌酶合成基因仁专,英〕/Ikeh-ara,M.…了European Patent Appl.EP0181634.Pub.21.05.86.APPI JP 84/100546,filed 14.11.84〔译自CBA,1986- (8),3 120] 揭示了一种合成的基因及其产生的方法,用此基因转化的细胞以及产生转化细胞的方法,还揭示了培养此转化细胞产生人溶菌酶的过程。本发明使产生大量人溶菌酶成为可能,并能避免在医学上使用卵白溶菌酶而带来的副作用。(郭伟干;王文富)8722了4针对人癌肿瘤相关抗原的单克隆抗体〔专,英〕/K盯tr ight,K .H.…了PCT Pa-tent ApPI.WO8602945.Pub.22.05.86.Appl.US 670328,… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(11)
924009异源基因在牛分枝杆菌BCG中的表达:抗HIV一1Nef蛋白细饱反应的诱导〔英〕/Winter,N.…了Geue一1991,109(i)一47~54〔译自DBA,1992,11(8),92一04359〕 为了用牛分枝杆菌菌株BCG作保护性抗原载体,将编码Nef蛋白的H工V一病毒一1基因克隆于大肠杆菌一分枝杆菌穿梭载体(质粒pRR3)几中并导人BCG。质粒pRR3含一个在分枝杆菌中复制和保留必需的质粒pALSOo。片段、转座子Tn 903卡那霉素抗性基因和大肠杆菌复制原。n“f_基因在含白色链霉菌(St,epto哪歹ees albos)groES/groELi操纵子的启动子和合成核糖体结合位点的DNA表达框架(… 相似文献
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《生物技术通报》1986,(4)
8622引类固醇的微生物转化.111.真菌菌丝体的11a一经基化仁英〕/Somal,P.…了Appl.M ierobiol.Bioteehnol一1985,21(5)一267~269〔译自CBA,1985,(7),2338〕 建立了储曲霉(As乡ergillus OChrace-us)的突变株。此突变株能将黄体酮(底物浓度为409/1)转化为高产量(1一90%)的11a一经黄体酮,6刀,lla一双经化合物在高浓度底物条件下获得的量很少。其生物转化率也高得多。本研究也使理想转化的各数参数标准化。(戴顺志)862232含基因融合载体的葡萄球菌足量分泌人胰岛素样的生长因子I及其表达〔英〕/Nilsson,B.…了Nueleie Aeids Res一1985,13… 相似文献
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《生物技术通报》1994,(1)
940266用重组酿酒酵母细胞使乳糖/乳清生物转化成二磷酸果糖〔英〕/Compagn。,C.…了Biotechnol.Bioeng一1993,42(3)一39息~,l 00仁译自DBA,199,12(16),93一09221己 表达大肠杆菌户半乳糖普酶基因的重组酿酒酵母GRF18细胞能将乳糖或乳清转变成果糖一1,6一二磷酸(FDP)。用适当浓度细胞和无机磷的比例,由乳清获得了高产的FDP。根据表达载体携带lacZ基因,由不同的碳一源得到转化细胞的生物量。生物转化的时间过程示明,萄萄糖和半乳糖以不同的速度同时进行新陈代谢。乳清中的乳精以此方式全部变成FDP,产量为64%。乳清可作酿酒酵母生长的… 相似文献
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人促红细胞生成素基因的合成及在大肠杆菌中的表达 总被引：2，自引：0，他引：2
人促红细胞生成素(简称hEPO)是一种能够促进祖红细胞分化发育并进而促进红细胞生成的细胞生长因子,它在临床上可用以治疗某些贫血病人特别是由于慢性肾衰所引起的肾性贫血〔1－3〕．hEPO是一种由166个氨基酸组成的糖基化蛋白质．它的前体还带有27个氨基酸的信号肽〔4－6〕。有两对由Cys7-Cys161和Cys29－Cys33组成的二硫键,其糖基化位点为Ash--24。Ash一38．Asn一83和Ser一126〔7－8〕。由于天然来源hEPO的量极少．因此通过基因工程的手段是当前获得大量hEPO的较好的途径〔9－10〕。我们在前文中曾经报道用单链方法合成天花粉胰蛋白酶抑制荆基因〔11〕以及用单链和PCR相结合来合成绿豆胰蛋白酶抑制荆基因的方法〔12〕．我们在合成hEPO基固(包括带有信号肽的hEPO基因)时也采用了这两种方法：合成的hEPO基因在大脑杆菌、CHO细胞和昆虫细胞中均得到表达。本文报道hEPO基因的合成及在大肠杆菌中的表达结果。 相似文献
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《生物技术通报》1994,(3)
9俘1204遗传工程有助于防治病害〔会,英〕/Ward,K.A。…了Feedstuffs一2993,65(39)一14,16~17〔译自DBA,1993,12(22),93一12904〕 讨论了遗传工程技术在防治家畜疾病中的潜在价值。提出了遗传工程改良动物产率所需的步骤: (1)鉴定出获得理想表型所需特性的蛋白;(2)分离出编码相关蛋白的基因;(3)修饰基因在宿主动物中表达;(4)修饰基因转移到宿主;(5)鉴定和评估基因在转基因动物中的表达;(6)建立育种工程。澳大利亚的CSIRO应用这些原理:通过N宕eotia九a to哪e儿tos‘form‘5 JL丁质酶cDNA在转基因绵羊中的表达生产抗肉蝇绵羊,胧氨酸生… 相似文献
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《生物技术通报》2003,(5)
030 0 2 9搅拌式生物反应器悬浮培养水母雪莲细胞的研究〔中〕/黄艳… //生物工程学报 .- 2 0 0 1,17(5 ) .- 5 6 1～ 5 6 5应用 2L通气搅拌式生物反应器一步批式培养水母雪莲细胞。采用倾斜式搅拌桨代替透平桨 ,研究了搅拌转速、通气量和接种量对细胞生长和黄酮合成的影响 ,发现在 75r/min、70 0～ 10 0 0L/min和 4 .0～ 5 .0gDCW /L接种量下细胞生长和黄酮合成比较好。经过 12d培养细胞干重达 13.8gDCW /L ,黄酮产量 4 16mg/L ,黄酮含量占细胞干重的 3.0 %。水母雪莲细胞生长及黄酮合成的进程表明 ,黄酮积累与细胞生长呈正相关。对细… 相似文献
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雨生红球藻八氢番茄红素合成酶基因的克隆及表征 总被引：1，自引：0，他引：1
雨生红球藻是一种单细胞绿藻,在多种逆境胁迫条件下能够大量合成并迅速积累虾青素,其积累量最高可达细胞干重的4%,从而成为目前最理想的天然虾青素合成工具.八氢番茄红素合成酶(PSY)是虾青素合成途径中第一个限速酶.分离了八氢番茄红素合成酶基因(psy)的全长cDNA及基因组DNA.其全长cDNA包括1200个碱基,编码400个氨基酸,基因组DNA包括5个外显子,4个内含子.系统发育分析结果显示,绿藻的八氢番茄红素合成酶基因形成一个进化枝,它们与高等植物的psy亲缘关系比较近.通过GenomeWalking的方法,分离了psy基因约1kb的5′侧翼序列.将含有TATA-box和CAAT-box的297bp的序列与LacZ报告基因构成嵌合的表达载体,用基因枪法转化雨生红球藻.lacZ的瞬间表达检测结果表明,这段上游序列能够驱动lacZ表达,具有启动子活性. 相似文献
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人修饰型降钙素和鼠酰胺化酶基因在昆虫细胞中的偶联表达 总被引：2，自引：0，他引：2
人降钙素 (hCT)是 32氨基酸的多肽激素 ,C-端为α脯氨酰胺结构 ,具有调节体内钙、磷代谢等许多重要生理功能。用重组昆虫杆状病毒表达系统 ,偶联表达合成的人修饰型降钙素 (hmCT)基因与GST融合基因和大鼠酰胺化酶 (PAM)基因 ,再用抗hmCT或抗PAM抗体 ,既检测到由昆虫细胞表达的GSThmCT产物也检测到PAM产物。经GSH 琼脂糖凝胶亲和层析 ,分离纯化GSThmCT融合蛋白。这种蛋白修饰酶与底物在真核细胞偶联表达也将适用于其他生物活性肽的体外表达 相似文献