野鸦椿的植物化学成分研究

从野鸦椿 (EuscaphisjaponecaKantiz)枝叶的甲醇提取物分离得到 6个化合物 ,通过波谱分析鉴定为 5 ,7 dihydroxy 2 methyl benzopyran 4 one(Ⅰ ) ,3,4 ,5 trihydroxy benzoicacidmethylester(Ⅱ ) ,3,7 dihydroxy 5 octanolide(Ⅲ ) ,methyl 5 ,7 dihydroxy 2 (Z) octenoate(Ⅳ ) ,7 hydroxy 2 octen 5 olide(Ⅴ )和vomifoliol(Ⅵ )。     

β-甘露聚糖酶AuMan5A/Af酶学性质的改善与其Asp320的相关性分析

【目的】为改善宇佐美曲霉5家族β-甘露聚糖酶(AuMan5A)的酶学性质,本实验室前期将AuMan5A底物结合凹槽内一个7肽(~(316)KSPDGGN~(322))组成的loop替换为烟曲霉5家族β-甘露聚糖酶对应的氨基酸片段(PSPNDHF),得到loop替换突变酶AuMan5A/Af。为揭示AuMan5A/Af酶学性质显著改善与其Asp~(320)的相关性,定点突变构建突变体AuMan5A/Af~(D320G)。【方法】采用大引物PCR技术将AuMan5A/Af基因(Auman5A/Af)中编码Asp~(320)的密码子GAC突变为Gly~(320)的GGT,构建出突变体基因Auman5A/Af~(D320G),并在毕赤酵母GS115中进行表达,分析表达产物AuMan5A/Af~(D320G)的酶学性质。【结果】AuMan5A/Af~(D320G)的最适温度T_(opt)为70.0℃,变性温度T_m为71.5℃,介于AuMan5A(T_(opt)=65.0℃,T_m=64.5℃)和AuMan5A/Af(T_(opt)=75.0℃,T_m=76.6℃)之间;在70.0℃的半衰期为40 min,高于AuMan5A的10 min,但较AuMan5A/Af的480 min显著缩短;比活性分别是AuMan5A和AuMan5A/Af的2.7和0.3倍;催化效率(k_(cat)/K_m)分别是AuMan5A和AuMan5A/Af的3.9和0.3倍。【结论】将Asp~(320)突变为Gly~(320)显著影响了AuMan5A/Af的酶学性质,证明了Asp~(320)对AuMan5A/Af温度特性改善、比活性和催化效率显著提高的重要作用。     

5—羟色胺受体的分型,分布和功能

5-HT受体分为5-HT_1、5-HT_2和5-HT_3受体三种亚型。5-HT_1受体又可划分为5-HT_(1A)、5-HT_(1B)、5-HT_(1C)、5-HT_(1D)受体亚亚型;5-HT_3又划分为5-HT_(3S)、5-HT_)3P)、5-HT_(3A)受体亚亚型。5-HT_1受体可能还有新的亚亚型。5-HT受体的上述分型,为解释5-HT的复杂生理、病理生理作用及其某些拮抗效应提供了依据。     

中国南海侧扁软柳珊瑚中孕甾烷类化学成分的研究(英文)

从南海侧扁软柳珊瑚Subergorgia suberosa的二氯甲烷-甲醇提取物中首次分离鉴定了8个孕甾烷类化合物,经波谱鉴定为3β-O-palmitoyl-pregn-5-ene-20-one-3-ol (1),3β-O-palmitoyl-5α-pregn-20-one-3-ol (2),5α-pregn-1-ene-3,20-dione (3),3β,5α-pregn-20-one-3-ol (4),3β-pregn-5-ene-20-one-3-ol (5),3β,5β-pregn-20-one-3-ol (6),5β-pregn-3,20-dione (7),pregn-4-ene-3,20-dione (8).其中化合物1,2为新化合物.     

TET蛋白去甲基化作用的相关研究进展

TET(ten-eleven translocation)蛋白属于酮戊二酸和Fe2+依赖的双加氧酶,能够产生催化氧化作用。在TET蛋白家族的催化氧化作用下5-甲基胞嘧啶(5-methylcytosine,5mC)可转化为5-羟甲基胞嘧啶(5-hydroxymethylcytosine,5hmC),并可进一步转化为5-甲酰胞嘧啶(5-formylcytosine,5fC)和5-羧基胞嘧啶(5-carboxylcytosine,5caC)。TET蛋白在DNA胞嘧啶的去甲基化、胚胎发育和基因重新编码等过程都存在重要作用,其中TET蛋白参与DNA胞嘧啶的去甲基化过程的作用机制一直是研究热点,另外,有研究发现TET与肿瘤的发生也存在联系,可能成为新的肿瘤分子标志。     

作者索引

作　　者期 (页码 )　　阿其拉图 (Aqilatu) 6(687)*安树青 (AN Shu-Qing) 1(5 7)　安树青 (AN Shu-Qing) 6(64 1)　白克智 (BAI Ke-Zhi) 5 (5 3 2 )　白坤甲 (BAI Kun-Jia) 5 (616)*白图格吉扎布 (BAI T.Jay ) 6(687)*白文明 (BAI Wen-Ming) 1(3 5 )*白文明 (BAI Wen-Ming) 4(4 3 1)　包国章 (BAO Guo-Zhang) 6(746)　贲桂英 (BEN Gui-Ying) 5 (5 2 0 )　别之龙 (BIE Zhi-Long) 3 (3 2 5 )　 BROWN Sandra 6(65 6)*蔡永立 (CAI Yong-L i) 1(90 )　曹永生 (CAO Yong-Sheng) 3 (3 5 1)　陈　雄 (CHEN Xiong) 6(7…     

植物组织培养简报摘编

植物名称、外植体培养基配方(mg/L)结果作者(单位) 白术(左扮。C七92云s仍acroc叩ha协)茎段 诱芽:(1)MS+BA卜6+IAAO.6一2(2)MS+BAI-6+NAAO .5召(助MS十BAI一石十IBAO .5一1琼脂0 .8% 诱芽壮苗:(4)MS+BAO.5一+JAAO.5(5)MS+BAO .5一14一NAAO.5(6)MS+BAO .5一l+工BAO .5琼脂。.4% 生根成苗:(7)0 .5M8+工BA或N八AO.5一1 外植体在(1)、(2)、(3)中,一月左右均能诱导不定芽的发生。B人浓度影响芽的数目。BAI~2,不定芽为1~2个,BA夯6,不定芽为4~10个。(4)、(5)、(6)中,不定芽一般在4个以上;不定苗的生长比(1)、(2)、(3)中…     

杂合β-甘露聚糖酶AuMan5A~(loop)的H321对其酶学性质的影响

目的:将loop置换杂合β-甘露聚糖酶AuMan5A~(loop)的H321突变回野生型酶AuMan5A对应的Gly,以分析杂合酶的酶学性质与H321的相关性。方法:采用大引物PCR技术将AuMan5A~(loop)基因(Auman5Aloop)编码H321的密码子CAC突变为Gly的GGT,构建突变酶基因Auman5A~(loop/H321G);借助表达质粒pPICZαA将该突变酶基因在Pichia pastoris GS115中实施表达,并分析重组表达产物AuMan5A~(loop) H321G的酶学性质。结果:AuMan5A~(loop/H321G)置换前后的最适温度T_(opt)均为75℃,高于AuMan5A的65℃;AuMan5A~(loop/H321G)在70℃的半衰期t_(1/2)~(70)为300 min,介于AuMan5A(10 min)和AuMan5A~(loop)(480 min)之间;AuMan5A~(loop/H321G)比活性分别为AuMan5A和AuMan5A~(loop)的12.8和1.43倍;催化效率k_(cat)/K_m为后两者的14.1和1.12倍。结论:通过H321G置换及对3种酶的温度特性、比活性和催化效率的测定及比较,证实了H321对AuMan5A~(loop)的酶学性质有一定的影响。     

2006年第1卷作者索引

(按汉语拼音字母顺序排列)B白东(3)158白逢彦(2):93柏涌海(2):121包建华(5):267鲍迎秋(1):5贝毅桦(6):366C蔡柏蔷(5):288曹彬(1):31(5):288曹欣欣(5):288曹毅(3)154(5):296常建民(1):5陈翠珠(2):126(3):134陈国勤(5):260陈辉(2):96陈剑(2):104陈江汉(1):9(3):149(4):248(6):334陈晶(3):129陈民钧(3):134陈明玉(5):279陈荣昌(5):260陈升豪(4):215陈胜平(5):281陈淑贞(4):215陈孙孝(1):5陈伟(1):20(1):47(2):96(2):104(4):225(5):301陈向齐(5):281陈新华(4):229陈裕充(1):5(3):149(5):312程波(4):241程卫萍(4):234崔凡(2):96崔亚利(4):223D…     

不同群系小鼠胚胎玻璃化冷冻保存技术的研究

利用 EFS40 ,二步法对近交系 C5 7BL/6、DBA/2和远交群 ICR小鼠囊胚玻璃化冷冻保存 ,并对冷冻后胚胎体内、外发育效果进行比较。结果表明 ,相同条件下鲜胚经培养 ,近交系 C5 7BL /6小鼠的囊胚发育率 ( 93% )与 ICR( 1 0 0 % )相比差异不显著 ( P>0 .0 5 ) ;而两近交系的囊胚孵化率明显低于 ICR( P<0 .0 1 )。 C5 7BL/6、DBA/2小鼠囊胚冷冻后发育率 ( 93% ,96% )和孵化率 ( 5 2 % ,46% )与各自对照组 ( 1 0 0 % ,1 0 0 %和 61 % ,62 % )相比均无显著差异 ( P>0 .0 5 ) ;并且与 ICR冷冻组发育率和孵化率 ( 94% ,5 3% )之间也无显著差异 ( P>0 .0 5 )。两近交系冻胚移植妊娠与各自对照组和 ICR冷冻组比较均无显著差异 ( P>0 .0 5 )。C5 7BL/6胚胎移植产仔率 ( 35 % )与对照组 ( 5 1 % )之间差异显著 ( P<0 .0 1 ) ,而 DBA/2胚胎移植产仔率 ( 4 7% )与对照组和 ICR冷冻组 ( 39% ,5 8% )相比差异不显著 ( P>0 .0 5 )。     

甲基乙烯基醚和2′(3′)-O-甲氧乙基-5′-核糖核苷二磷酸的合成

本文报导了一种制备甲基乙烯基醚(MVE)的简易方法,其合成反应途径是:(1) CH_3CHO+CH_3OH+HCl -20℃→CH_3OCH(Cl)CH_3+H_2O(2) CH_3OCH(Cl)CH_3+C_5H_5N -20°→[CH_3OCH(Cl)CH_3·C_5H_5N](3) [CH_3OCH(Cl)CH_9·C_5H_5N] -120°→CH_3OCH=CH_2+C_5H_5N·HCl 在三氟乙酸催化作用下,MVE与各种5’-核苷二磷酸(ppN)反应,用纤维素柱层析方法分离反应产物,制备了五种2’(3’)-O-甲氧乙基-5’-核苷二磷酸(ppN-2’(3’)-O-ME):ppA-2’(3’)-O-ME,ppG-2’(3’)-O-ME,ppC-2’(3’)-O-ME,ppU-2’(3’)-O-ME,以及ppΨ-2’(3’)-O-ME,产率一般为50～70%。     

热应激奶牛外周血淋巴细胞凋亡相关基因表达及血液学分析

用半定量RT- PCR分析日平均气温分别为37 .5°C (高温)、26. 5°C (临界高温) 和5 5°C (对照) 条件下奶牛外周血中HSP70mRNA、HSF1mRNA、Bcl 2mRNA和Bax αmRNA 基因丰度变化规律; 用流式细胞仪分析上述条件下外周血淋巴细胞所处的分裂时期(G0/G1 期, S期及G2/M期) 及淋巴细胞的凋亡率; 用全血自动分析仪分析外周血的血常规。研究发现: (1) 在37. 5°C高温条件下, HSP70mRNA 基因表达水平极显著高于26 .5°C和5 5°C条件下的表达量, 表达水平随温度降低呈下降趋势; HSF1mRNA 表达水平与HSP70mRNA 相反, 随温度降低升高, 5 5°C最高, 相对于其它两个温度条件差异显著; Bcl 2mRNA/Bax αmRNA 在26 5°C时最低, 相对于其它两个温度条件该基因的丰度差异显著; (2) 淋巴细胞凋亡率在26 5°C达到最高峰(10 60%),5 5°C下降至最低(2 7%), 差异显著; (3) 白细胞计数(White blood cell, WBC) (14 75×109/L) 和红细胞计数(Red blood cell, RBC) ( 3 .85×1012/L) 在高温37. 5°C时最低, 随温度下降而逐步上升。RBC 和血红蛋白(Hemoglobin, HGB) 在37. 5°C最低, 随温度降低逐步升高, 相对于其它两个温度差异显著; 红细胞平均血红蛋白含量(Mean corpuscular hemoglobin, MCH) 在26. 5°C最高(18 .8     

大果大戟的化学成分

从大果大戟的根部首次分离得到11个化合物。利用波谱方法鉴定为β-香树素(1),β-香树素乙酸酯(2),3β-乙酰化羽扇豆烯醇(3),baccatin(4),2个caffeic mters(5a,5b),棕榈酸-1-甘油酯(6),棕榈酸(7),东莨菪内酯(8),β-谷甾醇(9)和胡萝卜甙(10)。其中5a,5b是第一次在大戟属中得到;并对5a,5b的碳谱和氢谱数据进行了全归属。     

酿酒酵母NAD(H)激酶Pos5p在细胞抵抗氧化胁迫中的作用

酿酒酵母线粒体NAD(H)激酶Pos5p显示出重要功能,其缺失将导致细胞抗氧化性能出现障碍。为了了解Pos5p的抗氧化作用机制及其与调节辅酶NAD(H)和NADP(H)之间的关系,比较了在不同类型的氧化胁迫试剂作用下,野生型BY4742、POS5基因缺失体pos5-及其回补体pos5-/POS5-YEp的生长表型,同时采用高效液相色谱测定细胞内辅酶含量。结果表明,在超氧生成试剂甲萘醌(VK3)、过氧化氢(H2O2)和GSH消耗试剂马来酸二乙酯(DEM)存在时,pos5-都表现出明显的生长缺陷,而各抗氧化基因缺失体只在其相应胁迫下表现出生长缺陷。在正常生长条件下,pos5-的NADPH含量降低,pos5-/POS5-YEp则提高,表明Pos5p对胞内NADPH的供应有重要作用。在VK3、H2O2和DEM胁迫下,BY4742、pos5-及pos5-/POS5-YEp的NADP(H)含量均有不同程度的下降,其中pos5-的NADP(H)/NAD(H)比率下降最为严重,而pos5-/POS5-YEp较pos5-有明显提高,这与其氧化胁迫表型相一致。因此,在细胞面临不同类型的氧化胁迫时,Pos5p都能有效行使其NAD(H)激酶活性,补充NADP(H)的损耗,从而对细胞起到抗氧化保护作用。     

亚稀褶黑菇的化学成分

从剧毒蘑菇─亚稀褶黑菇(Russula subnigricans Hongo)子实体中分离出5个已知化合物,经波谱分析鉴定为4个麦角甾醇(22E,24R)-ergosta-7,22-diene-3β,5α,6α,9α-tetraol(1)、(22E,24R)-ergosta-7,22-dien-3β,5α,9α-trihydroxy-6-one(2)、(22E,24R)-ergosta-7,22-dien-3β,5α,6β-triol(3)、(22E,24R)-5α,8α-epidioxyergosta-6,22-dien-3β-ol(4)和神经酰胺(2S,3S,4R,2′R)-2-(2′-hydroxytetracosanoylamino)octadecane-1,3,4-triol(5)。     

核糖核酸一级结构微量分析方法的研究——Ⅰ.萤光试剂的制备和核苷二醛、5′-次甲基核苷二醛的萤光标记

本文报告了两种萤光试剂的制备方法并用一种萤光试剂标记了四种核苷二醛和四种5'-次甲基核苷二醛。萤光试剂Ⅰ,1-二甲氨基萘-5-磺酰-甘氨酰肼(DNS-Dly-NHNH_2)的制备方法:1-二甲氨基萘-5-磺酰氯(DNS-Cl)与甘氨酸乙酯(Gly-OC_2H_5)反应,得1-二甲氨基萘-5-磺酰-甘氮酸乙酯(DNS-Gly-OC_2H_5),DNS-Gly-OC_2H_5经肼解得DNS-Gly-NHNH_2。萤光试剂Ⅱ,1-二甲氨基萘-5-磺酰肼(DNS-NHNH_2)的制备方法:1-二甲氨基萘-5-磺酰氯直接肼解得1-二甲氨基萘-5-磺酰肼(DNS-NHNH_2)。DNS-Gly-NHNH_2与腺苷二醛,鸟苷二醛,胞苷二醛以及尿苷二醛反应,分别得到四种萤光标记的核苷腙:DNS-Gly-_(HO)A_R,DNS-Gly-_(RO)G_R,DNS-Gly-_(HO)C_R,以及DNS-Gly-_(HO)U_R。DNS-Gly-NHNH_2与5'-次甲基腺苷二醛,5'-次甲基鸟苷二醛,5'-次甲基胞苷二醛以及5'-次甲基尿苷二醛反应,分别得到四种萤光标记的5'-次甲基核苷腙:DNS-Gly-_(H_2)A_R,DNS-Gly-_(H_2)G_R,DNS-Gly-_(H_2)C_R以及DNS-Gly—_(H_2)U_R。     

自然光照下普陀水仙的组织培养

1　植物名称　水仙 (Narcissustazettavar.chi nensis)品种普陀水仙。2　材料类别　带鳞茎盘的双鳞片 (twinscale)。3　培养条件　以MS为基本培养基。 ( 1 )诱导小鳞茎培养基 :MS + 6 BA 5mg·L- 1 (单位下同 ) +NAA 0 .2 5～ 0 .5 ;( 2 )生根培养基 :1 /2MS(大量元素减半 ) +NAA 0 .0 5。培养基均加 0 .8%琼脂 (a gar) ,( 1 )加0 .5 %活性炭 (activatedcharcoal)和 4%蔗糖 (sucrose) ,( 2 )加 3%蔗糖 ,pH 5 .6～ 5 .8。培养温度 ( 2 5± 2 )℃ ,置于培养室自然光线下 ,不用灯光照明。4　生长与分化情况4.1　无菌材料的获得　 5、6月…     

真核生物基因组DNA甲基化和去甲基化分析

DNA甲基化是真核生物的重要表观遗传修饰,如胞嘧啶C~5位甲基化5-甲基胞嘧啶(5mC)和腺嘌呤N~6位甲基化6-甲基腺嘌呤(6mA)。DNA 5mC可经Tet双加氧酶催化氧化形成5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)、5-醛甲基胞嘧啶(5fC)和5-羧基胞嘧啶(5caC)。这些氧化产物不仅是去甲基化过程的中间体,而且也可能存在各自特有的表观调控功能。其中,5hmC异常可能和癌症相关,有可能成为疾病诊断的生物标志物。发展可靠、高灵敏和抗干扰能力强的DNA甲基化和去甲基化检测技术和方法至关重要,有助于理解甲基化和去甲基化的分子机制以及提高肿瘤的诊断水平。现针对DNA甲基化和去甲基化检测技术进行简要介绍。     

四爪陆龟血细胞形态学参数的初步研究

对四爪陆龟的血细胞进行了显微观察 ,并对红细胞和白细胞及其细胞核的大小和面积、血红蛋白含量以及红细胞渗透脆性等参数进行测量。结果表明 :( 1 )四爪陆龟红细胞含量平均值为 62 ( 5 2～ 83 )万个 mm3 血液 ;( 2 )红细胞的平均长度为 ( 1 6 70± 1 2 5 ) μm ,范围 1 5 60～ 1 7 5 2 μm ;( 3 )红细胞宽度为 ( 9 5 3± 0 92 ) μm ,范围 7 2 0～ 1 0 8μm ;( 4 )红细胞核长度为 ( 5 5 9± 0 5 9) μm ,范围 4 80～ 6 48μm ;( 5 )红细胞核宽度为 ( 3 65± 0 5 6) μm ,范围 2 64～ 4 5 6μm ;( 6)血红蛋白含量为 ( 7 3 0± 0 66)g 1 0 0ml血液 ( 6 5 0～8 5 0 ) ;( 7)红细胞渗透脆性 ,开始溶血浓度为 0 2 4%NaCl溶液 ,完全溶血浓度为 0 1 6%NaCl溶液 ;( 8)红细胞平均大小 (长径×短径 )为 ( 1 6 70× 9 5 3 ) μm2 ;( 9)白细胞平均值 0 5 6( 0 42～ 0 70 )万 mm3 ,其中嗜中性粒细胞大小为 ( 1 2 0 8± 1 86) μm ,嗜酸性粒细胞大小为 ( 9 2 5± 2 3 ) μm ,嗜碱性粒细胞大小为 ( 8 75±0 2 3 ) μm ,单核细胞大小为 ( 1 1 40± 1 0 6) μm ,淋巴细胞大小为 ( 7 5 0± 2 1 ) μm ,凝血细胞大小为 ( 4 2 0±1 40 ) μm。     

半乳糖基壳聚糖/5-氟尿嘧啶纳米粒抑制小鼠原位肝癌移植模型的实验研究

目的:观察半乳糖基壳聚糖(GC)/5-氟尿嘧啶(5-FU)纳米粒抑制小鼠原位肝癌移植模型的疗效及机制.方法:合成GC/5-FU纳米粒,建立小鼠原位肝癌移植模型,通过动物实验观察GC/5-FU纳米粒治疗小鼠原位肝癌移植模型的疗效,通过原位末端标记法(TUNEL法)检测肝癌的凋亡.结果:GC/5-FU纳米粒成功合成,呈规则的球形,表面光滑,大小均匀,纳米粒间无粘连.实验结束时,小鼠的肝癌组织称重,进行方差分析发现GC/5-Fu的瘤重为(0.4361±0.1153)g,5-Fu组为(0.7932±0.1283)g,GC为(1.3989±0.2125)g,和对照组为(1.5801±0.2821)g,4组瘤重之间差异有显著的统计学意义(P＜0.01).GC/5-FU组和5-FU组的瘤重明显小于GC组及对照组,差异有统学意义(P＜0.01);GC/5-FU的瘤重又显著小于5-Fu组(P＜0.01).观察各组小鼠的生存期发现对照组的中位生存时间为12d,GC组为13d,5-FU为17d,而GC/5-FU组最高为30d.GC/5-FU组的生存时间最长.通过TUNEL法观察肝癌细胞的凋亡发现GC/5-FU组的平均凋亡指数(AI)为21.34％较5-FU组的14.74％明显增高(P＜0.05),均较GC组和对照组明显增高,而GC组和对照组间的AI无明显差异(P＞0.05).结论:GC/5-FU纳米粒在体内对小鼠原位肝癌具有明显抑制作用,较5-FU明显增强.其机理可能与GC能通过细胞膜将5-FU从细胞外转移到细胞内,增强5-FU对肝癌细胞的凋亡.