浅谈叶绿体色素的提取,分离实验的基本原理

在进行“叶绿体中色素的提取和分离”实验时,不少老师和同学常提出以下一些问题:提取叶绿体中的色素为什么必须用丙酮?用纸层析法分离各种色素时,各种色素在滤纸上为什么会有不同的分布?为什么用不同质量的滤纸或在不同温度条件下实验,所得的结果不一样?等等。要解释这些问题,就需要了解叶绿体中色素的基本结构及其化学性质和纸层析法的基本原理,以及影响纸层析的各种因素等。     

叶绿体色素分离方法的改进

目前多采用纸层析法分离叶绿体色素。一般做法是将少量叶绿体色素的提取液滴于一滤纸中央,用电吹风或自然风干后,在原处再滴少量色素提取液,再风干,如此重复多次,直到滤纸中心的色素斑呈深绿色为止。然后,再将适当的推动剂滴于色斑上,使色素自滤纸中心向四周移动。由于不同色素在滤纸上移动的速度与距离不同,从而把它们分离开来。也有先将色素提取液浓缩于一纸捻一端,而后在滤纸上分离所含色素的。     

水浴法提取叶绿体中色素的探讨

"叶绿体中色素的提取和分离"是中学生物学教学中的一个经典实验,人教版高中<生物>多种版本教材中均将其列为必做实验.该实验分为2步:1)是提取绿叶中的色素;2)是采用纸层析法分离绿叶中的色素.只有制备高质量的色素提取液,纸层析分离的效果才明显.     

三种展层剂层析效果的比较

植物色素的层析方法有多种。目前多采用纸层析、薄板层析和柱层析三种,其中以纸层析法最为常用。此法虽简便、经济、易行,但如展层剂选择不好,常会造成层析效果不佳。为提高色素的分离、提纯效果、增大各色素带间的距离,我们选用双重展层剂,分     

叶绿体提取液中色素分离实验方法的改进

高中生物教材采用纸层析法将叶绿体提取液中的色素进行分离。如果采用课本介绍的方法步骤进行实验,色素的分离效果往往不令人满意。笔者对该实验略作改进后,色素的分离效果十分显著,现介绍如下：１　方法步骤１－１　取直径１１ｃｍ的干燥圆形定性滤纸一张,用直径１ｍｍ的毛细吸管,吸取已提取的色素滤液,在滤纸中央点成圆的色素斑,重复４—５次。１－２　取一枚缝衣针,穿一根细棉线,在棉线末端打个线结。然后将针穿过滤纸的色素斑中心,在距线结约４ｃｍ处剪断棉线。１－３　取直径为１０ｃｍ的培养皿一套。向培养皿底中加入５ｍｌ…     

叶绿体色素的提取和分离实验的拓展

叶绿体色素的提取和分离实验的拓展张淑兰（山东省潍坊教育学院生物系,２６２５００）高中课本中叶绿体色素的提取和分离是用层析法验证叶绿体色素的种类和各种色素的颜色。叶绿体含有四种主要光合色素：叶绿素ａ、叶绿素ｂ、叶黄素和胡萝卜素。这些色素不溶于水,但溶于...     

对叶绿体中色素的提取和分离实验的改进

对叶绿体中色素的提取和分离实验的改进任金龙（山东省阳信县第一中学,２５１８００）根据高中生物实验四的目的要求可知,该实验是验证叶绿体中的色素的种类和颜色。而做实验时,首先要对色素进行提取,然后再用纸层析法进行分离。按实验步骤,进行色素的提取要用的材料...     

"光合色素的提取与分离"的实验教学

1 教学目标(略) 2 重点和难点 1)教学重点:①叶绿体中色素的种类和各种色素的颜色。②学会用纸层析法将色素进行分离。解决方法:通过实验,验证叶绿体中色素的种类和各种色素的颜色。通过学生间的观察、讨论,明确了各种色素在滤纸条上扩散速度以及产生这种现象的     

"叶绿素的提取和分离"实验的一种方法

我们以灯芯柱纸层析法为基础,进行该实验,取得了较好的效果,现介绍如下。　　具体的方法是：①取洗净、揩干的天竺葵叶片５ｇ剪碎,加８５％丙酮５ｍｌ研成匀浆;②取滤纸一张剪成２．５ｃｍ×５．５ｃｍ的长方形,从一端开始卷起,卷成柱状,卷时将两边对齐,捻紧备用;③将纸芯插入滤纸中央并立放于培养皿上,培养皿内装有四氯化碳（不用汽油）,纸芯下端浸入四氯化碳中;④用尖镊夹取研好的色素匀浆均匀堆于纸芯周围,盖上皿盖,静置观察。１５ｍｉｎ左右色素可充分扩展,分离结束。此实验方法具有以下特点：①克服了提取液中色素量少…     

关于做好“纸层析法分离氨基酸”实验的总结

分析了影响“纸层析法分离氨基酸”实验效果的关键操作,并提出相应的解决方案.     

Biology与《生物·分子与细胞》教材纸层析分离实验的比较研究

纸层析法分离叶绿体中的色素是高中生物学教学中难度较大的一项实验,实验所用试剂、用具相对较多,不易清洗,某些药物还有一定的毒性。在一节课内不易完成实验,即便能够完成,也难以取得理想的实验效果。针对这种情况,本课题组借鉴Biology（Seventh Edition）作法,对该实验进行改良,与《生物·分子与细胞（必修1）》（第2版）教材进行比较,取得良好效果。主要差异有3方面：     

聚酰胺分离低极性萜类成分和脂溶性色素的应用研究北大核心CSCD

以穿心莲、冬凌草、银杏叶、枇杷叶4种含有不同萜类化合物的中草药为试材,在乙醇-水体系下,运用聚酰胺柱色谱对茎叶类中药中低极性萜类成分和脂溶性色素进行分离研究。实验结果表明,聚酰胺柱层析法可安全有效脱去脂溶性色素,而达到富集低极性萜类化合物的效果。这可解决硅胶等柱色谱进行此类成分分离所带来的安全性和分离效果差的问题,同时为萜类成分的产业化富集提供了新的方法。     

天然棕色棉色素提取、纯化及其UV光谱研究

选用16种溶剂对天然棕色棉色素进行溶解性试验,发现蒸馏水和pH=9的氢氧化钠溶液是最为经济有效的色素提取溶剂(60℃)。在此基础上,对棕色素进行粗提、纯化、UV光谱测定和化学性质初步鉴定,其中5种纯化方法效果显著,分别是：乙醇沉淀法、重结晶法、铅盐法或铜盐法、纸层析法和柱层析法,并设计了几种纯化方法综合应用的工艺流程。对色素进行UV光谱检测,以218nm附近强吸收、264nm附近弱吸收。根据溶解性试验和化学性质鉴定,推断棕色素化学结构含有双键和酚羟基的存在。     

纸层析法分离叶绿体色素的一点改进

我们对卢英梅先生等在《植物生理学通讯》[1994,30（2）：131]上介绍的用纸层析法分离叶绿体色素的方法又做了一点改进。现介绍于后：先取一圆形滤纸（φ15cm）,于其回心处戳一圆形小孔。另取同样的滤纸剪成长8cm、宽1．5cm的滤纸条,用毛细滴管沿其一长边点样,色素扩散的宽度在0．2cm以内,风干后,再重复操作数次,然后沿长度方向卷成芯,使芯的一端带有色素溶液,将带有色素的一端插入上述圆形滤纸的小孔中,使与滤纸刚刚齐平。再取一结晶皿放入一大培养皿（φ12cm）中,内加展层剂（丙酮一无色汽油的体积比为1：3）,将纸芯另一端浸…     

聚酰胺分离低极性萜类成分和脂溶性色素的应用研究

以穿心莲、冬凌草、银杏叶、枇杷叶4种含有不同萜类化合物的中草药为试材,在乙醇-水体系下,运用聚酰胺柱色谱对茎叶类中药中低极性萜类成分和脂溶性色素进行分离研究。实验结果表明,聚酰胺柱层析法可安全有效脱去脂溶性色素,而达到富集低极性萜类化合物的效果。这可解决硅胶等柱色谱进行此类成分分离所带来的安全性和分离效果差的问题,同时为萜类成分的产业化富集提供了新的方法。     

纸上层析法及其在昆虫学中的应用

纸上层析法作为一种微量的分析方法,目前在生物学中的应用已经愈来愈广泛,特别是在动植物代谢过程的研究中,氨基酸、醣、有机酸、类固醇、嘌呤、嘧啶、酚类、色素、维生素、抗菌素、生物碱、无机离子等等都可以利用纸上层析法来分析而得到满意的结果。 在昆虫学的研究中,由于昆虫个体较小,许多适用     

叶绿体中色素分离方法的改进

提取高等植物叶绿体中的色素，可以用圆形滤纸层板法。此方法与滤纸条层析法原理相似，但更简便易操作。其方法是：取一预先干燥过的圆形定性滤纸，用毛细吸管吸取少量色素滤液（色素滤液的制取与课本同），滴在其中央，待滤液风干后，再重复２～３次。然后对着滤液点处，用滴管慢慢滴加层析液，几分钟后，滤纸上就会出现４条环形色素带，从里到外依次为：黄绿色（叶绿素ｂ）、蓝绿色（叶绿素ａ）、黄色（叶黄素）、橙黄色（胡萝卜素）。叶绿体中色素分离方法的改进@霍文高$东明县第一中学!山东东明274500     

氨基酸纸层析中茚三酮显色改良法

本文报道氨基酸纸层析中茚三酮显色与展层同时进行的改良方法,此方法克服了以前操作上的烦琐和斑点模糊等不足点。自1944年Consdon、Gordon和Mortain提出用滤纸来分离氨基酸、糖、肽类等物质以来,在国内外均用茚三酮喷雾法和浸湿法来显色,作为定性、定量的检测方法之一。目前国内在氨基酸研制和生产方面大多数还是采用纸层析法、而层析法中其重要的环节是显色,显色主要采用茚三酮喷雾和浸湿二法,此法不易掌握,我们根据目前生产上和氨基酸研制工作上急需解决的问题,提出了一个改良的显色法,即展层和显色同时进行,达到了较满意的效果。     

张志良等编《植物生理学实验指导》中不足之处和改进意见

由高等教育出版社出版、张志良主编的高等学校实验课教材《植物生理学实验指导》一书,在我校生物教育专业已使用多年,教材内容涉及基础性实验、综合性实验和研究性实验,既有最基本的实验方法,也采用了现代科学技术(金琎 2003)。在多年的教学过程中,我们感到教材中的某些实验有商榷之处,如"叶绿体色素的提取和分离(纸层析法)"和"植物呼吸速率的测定(小篮子法)",这些方法或多或少存在一些不足之处,教学中,我们对这2个实验做了一些改进,取得了较好的结果,现提出来与大家共切磋。     

pH调控双水相萃取色素蛋白复合体及其分配行为研究

为发展色素蛋白复合体分离纯化新方法,探究pH调控PEG1000/柠檬酸钾双水相系统萃取分离纯化色素蛋白复合体。优化萃取条件,光谱法研究其分配行为,检测产物纯度和生物活性。结果表明,最佳萃取条件为调节pH9.0,相组成CPEG100019.0%/C柠檬酸钾20.0%,蛋白质加量3.42 mg/g,K和萃取率达到最大,分别为8.8及86.0%。响应面分析法揭示,PEG1000和柠檬酸钾质量浓度及pH对分配系数和萃取率影响显著。调节pH7.0,反萃取分配系数和反萃取率最小为0.15及86.6%。蛋白质总回收率为74.2%。pH对色素蛋白复合体分配行为具有调控作用,pH大于8.5体系,色素蛋白趋于分配上相,反之分配于下相,PEG1000/柠檬酸钾以及蛋白质加入量不影响色素蛋白复合体分配于上相。电泳表征发现,萃取(pH9.0)上相存在2个蛋白质组分,相对分子量(MW)为7.0 kD及14.0 kD。反萃取(pH7.0)使相对分子量7.0 kD蛋白质组分分配于下相,该组分为LH2β亚基,经萃取和反萃取产物生物活性稳定。pH可调控PEG1000/柠檬酸钾双水相系统萃取分离色素蛋白复合体,产物纯度高,生物活性稳定。