未来医疗的“奇兵”——蜂毒疗法

蜜蜂虽小,但全身都是宝,具有多种医疗保健功能。人类利用蜜蜂及其蜂产品进行的医疗保健活动,被简称“蜂疗”。蜜蜂采蜜不仅为了自己     

2种蜜蜂和3种胡蜂蜂毒前肥大细胞脱粒肽原基因的克隆及同源性分析

从中华蜜蜂、意大利蜜蜂、大胡蜂、墨胸胡蜂和亚非马蜂5种雌成蜂毒腺中快速抽提总RNA,用RT-PCR方法分别扩增各得到大小约为350bp的cDNA片段,进一步将这5个片段克隆入pGEMT-easy载体,进行测序和序列分析。结果表明：所扩增得到的5个片段长度均为341bp,均包含一个完整的开放阅读框和3′端未编码区的188bp核苷酸序列,证实为5种蜂的蜂毒前肥大细胞脱粒肽原的cDNA。经序列比较,意大利蜜蜂、中华蜜蜂、大胡蜂、墨胸胡蜂和亚非马蜂前肥大细胞脱粒肽原核苷酸序列彼此间的同源性都为90％以上。中华蜜蜂、大胡蜂、墨胸胡蜂和亚非马蜂与意大利蜜蜂的前肥大细胞脱粒肽原氨基酸序列的同源性分别为96％、100％、94％和98％。尽管大胡蜂和墨胸胡蜂与意大利蜜蜂属于不同的科,但它们的肥大细胞脱粒肽却完全相同,而中华蜜蜂与意大利蜜蜂属于同一个属,它们的肥大细胞脱粒肽却不相同。中华蜜蜂和亚非马蜂肥大细胞脱粒肽第5号位的氨基酸为精氨酸,替代了意大利蜜蜂5号位的半胱氨酸,该位置的半胱氨酸与19号位的半胱氨酸组成意大利蜜蜂肥大细胞脱粒肽分子的一个对蛋白活性起重要作用的二硫键。     

中华蜜蜂和意大利蜜蜂蜂毒前溶血肽原蛋白cDNA的克隆与序列分析

分别从中华蜜蜂Apis cerana cerana和意大利蜜蜂Apis mellifera工蜂毒腺中抽提总RNA,通过RT-PCR方法扩增,各得到了蜂毒前溶血肽原蛋白的cDNA,再将扩增产物克隆到pGEM-Teasy载体上,进行测序和序列分析。结果表明,所扩增到的这两个片段长度均为213 bp,均为编码蜂毒前溶血肽原的cDNA,并分别推导出两者所编码的氨基酸序列。经序列比较,中华蜜蜂前溶血肽原与意大利蜜蜂、印度蜜蜂Apis cerana indica前溶血肽原的同源性都为97%。所报道的中华蜜蜂蜂毒前溶血肽原的核苷酸序列的GenBank登录号为AF487907。     

蜜蜂蜂毒主要成分与功能研究进展

蜜蜂蜂毒(honeybee venom)作为重要的蜂产品之一,其中的很多蛋白在抗炎、抗癌、抗菌、抗辐射和杀虫等方面具有很好的效果.20世纪40年代以来,国内外在蜂毒活性成分分析、作用机理、重要基因克隆和毒蛋白功能等方面进行广泛地研究,取得了重要的进展.本文的目的是总结蜜蜂蜂毒主要成分磷脂酶A2、透明质酸酶、蜂毒肽、蜂毒明肽、肥大细胞脱粒肽和镇静肽等毒蛋白的基因结构、生化特性及功能等方面的研究进展,为蜂毒基因的研究和利用提供一定的理论基础.     

中华蜜蜂蜂毒透明质酶基因的克隆与序列分析(英文)

从中华蜜蜂工蜂毒腺中快速抽提总RNA ,用RT PCR方法扩增得到该蜂毒的透明质酸酶 (AcHya)基因 ,其核苷酸序列全长为 1 1 6 4bp ,可编码 3 87个氨基酸残基 ,预计分子量为 42 .6kD。将所推导出的氨基酸序列与其它 6种透明质酸酶 (Hya)氨基酸序列比较 ,结果表明 ,AcHya与意大利蜜蜂Hya非常相似 ,具有91 %的同源性 ,与长黄胡蜂Hya、常见黄胡蜂Hya、、马蜂Hya、吸血沙蠓唾腺Hya、人精液PH2 0Hya的同源性分别为 5 4 %、5 2 %、46 %、2 7%和 2 0 %。同时根据氨基酸序列用GENETYX程序绘制了 7种Hya的分子系统树 ,并根据同源性比较分析了 7种Hya的保守性、结构与功能的关系     

中华蜜蜂蜂毒磷脂酶A_2基因在大肠杆菌中的表达(英文)

将中华蜜蜂蜂毒磷脂酶A2(AcPLA2)蛋白成熟肽编码区基因(405 bp)克隆至表达载体pETBlue-1,在大肠杆菌Tuner(DE3)plac I中诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测,表达产物分子量为15kD,约占细菌总蛋白的4.6％;用意大利蜜蜂蜂毒磷脂酶A2(AmPLA2)纯品制备的兔源多克隆抗体为一抗作Western blot,表达产物显示类似于天然纯AmPLA2的特异性印迹,证实AcPLA2基因已在大肠杆菌中得到表达。     

针刺研究 大有可为：从美国NIH召开针刺疗法听证会谈起

针刺疗法是祖国医学宝库的精华之一。其影响在世界各国日益扩大。１９９７年１１月，美国国立卫生研究院（ＮＩＨ）召开有关针刺闻法的听证会。我国有三名针刺研究专家在大会上介绍针刺镇痛原理研究、针刺治疗女性生殖系统疾病及对机体免疫抑制的调整作用的临床及机理研究。专家委员会最后通过一份总结报告，在美国历史上第一次正工肯定了起源于中国的针刺疗法对某些疾病确实有效，而且副作用极小，可以应用，会议在美国产生了强烈的     

意大利蜜蜂蜂毒磷脂酶A2基因在杆状病毒-昆虫细胞系统中的表达

利用Bac to Bac系统将意大利蜜蜂蜂毒磷脂酶A₂（AmPLA₂）基因cDNA克隆至转移载体pFastBacHTa中,得到pBacHT-AmPLA₂,再将其转化入含穿梭载体Bacmid的受体大肠杆菌DH10Bac中,通过转座作用,得到含AmPLA₂基因的重组病毒rBacmid-AmPLA₂的DNA。提取其基因组DNA,用脂质体介导转染粉纹夜蛾细胞Tn-5B1-4,得到重组病毒rACV-Bac-AmPLA₂。用此重组病毒感染Tn-5B1-4细胞, 在细胞中表达AmPLA₂。SDS-PAGE电泳结果显示,与6×His Tag融合表达的产物蛋白分子量约为18 kD左右,表达量约占细胞总蛋白的5.35%。Western blot印迹显示,融合表达产物能与意大利蜜蜂蜂毒AmPLA₂抗血清发生免疫反应。生物活性测定显示,含表达产物的细胞蛋白粗提物对底物蛋黄的酶活力约为6.13 μmol·min^-1·mg^-1。     

大胡蜂蜂毒中多肽和蛋白质结构和功能的多样性

为证明大胡蜂Vespa magnifica(Smith)蜂毒具有较大的药用开发价值,本研究采用超高效液相色谱-质谱和电泳技术对其多肽和蛋白质的分布进行分析,发现其蛋白质的相对分子质量主要分布在17~45kDa范围内。蜂毒多肽类物质的相对分子质量呈"单峰"式分布,61%在500~3000Da范围内,为大胡蜂蜂毒中多肽含量最为丰富的部分。通过牛津杯法对蜂毒的抑菌活性进行研究,且以HepG2人肝癌细胞及B16黑色素瘤细胞为研究对象,用MTT法检测蜂毒的细胞毒性活性,证明其具有良好的抑菌作用和细胞毒活性,其结果与已报道的其他蜂类既有相似性又存在具体差异,展示了大胡蜂蜂毒的分子多样性,为后续该毒素的物质基础研究及药用价值开发提供参考。     

蜂毒溶血肽类似物定量构效关系计算分析

采用HyperChem7．0结构分析软件,对蜂毒溶血肽类似物的分予体积等结构参数进行了计算分析．分别利用多元线性回归、BP-神经网络计算法进行统计分析,获得两个相关性好的QsAR（quantitative structure-function relationship）模型．结果显示,蜂毒肽溶血活性与生成热、键合能、表面积、分予体积、极化能、醇水分配系数、水舍能相关．为降低溶血作用,指出在设计蜂毒肽结构时应尽量避免螺旋状结构．少用疏水性氨基酸．     

运动疗法结合针刺治疗颈肩综合征的临床效果

目的 探讨运动疗法结合针刺在颈肩综合征的临床应用效果. 方法 选择2018年1月～2021年6月我院治疗的60例颈肩综合征患者为研究对象,按照随机数字表法分为两组,每组30例.对照组采用针刺治疗,观察组在对照组的基础上加用运动疗法治疗,比较两组患者的治疗效果以及治疗前后疼痛程度、颈椎功能变化情况. 结果 观察组的治疗总...     

针刺治疗竹叶青蛇咬伤局部肿痛临床观察

目的观察针刺疗法对竹叶青蛇咬伤引起局部肿痛的疗效。方法竹叶青蛇咬伤4 h内的患者120例,随机分为两组,均给予常规治疗,治疗组加用针刺疗法。4天后观察两组局部疼痛、肿胀、功能障碍和局部组织坏死的情况并进行比较。结果两组患者的主要症状评分和局部坏死发生率均有显著性差异（P〈0.05）。结论针刺疗法对竹叶青蛇咬伤有显著性疗效。     

中国生物医药R&D的现状分析与建议

就当前制约我国生物医药发展的影响因素进行了全面、细致地分析,并相应地对下一步生物医药R&D的发展提出设想.     

针刺周期疗法对气滞血瘀型原发性痛经患者性激素、疼痛因子和炎症因子的影响

摘要 目的：探讨针刺周期疗法对气滞血瘀型原发性痛经（PD）患者性激素、疼痛因子和炎症因子的影响。方法：选取东莞市中医院2021年1月~2022年1月期间收治的PD患者122例作为研究对象,根据信封抽签法分为对照组（布洛芬缓释胶囊治疗）和研究组（对照组的基础上接受针刺周期疗法）,各为61例。对比两组疗效、中医证候积分、中文版COX痛经症状量表评分、疼痛视觉模拟（VAS）评分、炎症因子[白细胞介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）]、疼痛因子[前列腺素E₂（PGE₂）、前列腺素F2α（PGF2α）、P物质（SP）]和性激素[雌二醇（E₂）、孕酮（P）]。结果：研究组的临床总有效率为93.44%（57/61）,高于对照组的75.41%（46/61）（P<0.05）。治疗3个疗程后研究组中医证候总分、中文版COX痛经症状量表评分、VAS评分均低于对照组同期（P<0.05）。治疗3个疗程后后IL-1β、IL-6、TNF-α均下降,且研究组均低于对照组同期（P<0.05）。治疗3个疗程后研究组SP、PGF2α均低于对照组同期,PGE₂均高于对照组同期（P<0.05）。治疗3个疗程后研究组E2低于对照组同期,P高于对照组同期（P<0.05）。结论：针刺周期疗法可有效改善气滞血瘀型PD患者性激素、疼痛因子和炎症因子水平,治疗效果明显。     

针刺加艾灸结合疗法对类风湿性关节炎的近远期疗效

目的:探讨针刺加艾灸配合治疗类风湿关节炎的近远期疗效。方法:选择我院2013年4月~2014年1月门诊病房治疗的74例类风湿关节炎患者为研究对象,以随机数字表法分组,观察组37例,对照组37例,对照组实施西医疗法治疗,观察组在对照组基础上采取针刺配合艾灸治疗,对两组患者治疗后效果进行分析。结果:观察组治疗后1个月有效率为89.19%,对照组为70.27%,差异显著(P0.05);治疗后1年疗效显示,对照组有效率为59.46%,观察组94.59%,两组差异存在统计学意义(P0.05);治疗前两组患者晨僵时间、关节压痛指数、关节肿胀指数、关节功能评分、握力等指标水平无明显差异,治疗后两组患者均有变化,观察组治疗后以上指标水平明显优于对照组,两组差异有统计学意义(P0.05);治疗前血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP)与类风湿因子(RF)指标无明显差异,治疗后均有改善,但是观察组治疗后各项指标水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);对照组治疗后不良反应发生率为16.22%,观察组为2.70%,两组差异有统计学意义(P0.05)。结论:艾灸配合针刺治疗类风湿关节炎可取得较好近远期疗效,提高了患者关节功能及握力,有效缓解晨僵、关节疼痛、肿胀等症状。     

双针刺疗法在孕足月初产妇催产中的应用效果及对应激反应和内源性神经递质的影响

摘要 目的：研究双针刺疗法在孕足月初产妇催产中的应用效果及对应激反应和内源性神经递质的影响。方法：选取2020年3月~2022年5月期间我院妇产科收治的孕足月初产妇102例。根据随机数字表法分为对照组（51例）和研究组（51例）。产妇在临产宫口开至3 cm（T0）后,对照组不予以任何镇痛方法干预,研究组给予双针刺疗法干预。比较两组催产疗效、产程情况、宫颈成熟指标、应激反应和疼痛、内源性神经递质指标的变化情况。结果：研究组的临床总有效率高于对照组（P<0.05）。研究组的总产程、第一产程、第二产程、第三产程时间均短于对照组（P<0.05）。研究组的宫颈口扩张、宫颈管消退、先露位置、宫颈硬度、宫口位置大于对照组（P<0.05）。两组宫颈口开10 cm（T1）的血糖、皮质醇水平升高,但研究组低于对照组（P<0.05）。两组T1的视觉疼痛模拟（VAS）评分、P物质（SP）、β-内啡肽（β-EP）、神经肽Y（NPY）升高,但研究组低于对照组（P<0.05）。结论：孕足月初产妇采用双针刺疗法可提高催产疗效,促进宫颈成熟,缩短产程时间,同时还可减少内源性神经递质的释放,减轻产妇应激反应。     

中华蜜蜂蜂毒镇静肽基因的cDNA克隆和表达

从中华蜜蜂 (Apisceranacerana)工蜂毒腺中快速抽提总RNA ,用RT PCR扩增得到大小约为2 5 0bp的cDNA片段 ,测序得到的片段长度为 2 34bp ,为蜂毒前镇静肽原 (preprosecapin)基因编码区的cDNA .以 3′RACE方法 ,扩增和测定了 3′端非编码区 2 19bp序列 .中蜂前镇静肽原cDNA序列与已报道的欧洲意蜂该基因cDNA序列具有 92 %同源性 ,氨基酸序列具有 87%同源性 .代表成熟肽镇静肽的最后 2 5个氨基酸序列 ,中蜂与意蜂同源性为 88% .3′端非编码区cDNA序列与欧洲意蜂序列有 73 1%同源性 .将中华蜜蜂蜂毒镇静肽成熟肽编码区与 3′非编码区部分克隆 ,构建了镇静肽与谷胱甘肽转移酶融合表达的载体pGEX AcSecapin .将载体转化大肠杆菌BL2 1(DE3)进行融合表达 .表达产物与抗GST抗体在 2 9kD处有很强的交叉反应 .大肠杆菌超声破碎后的上清液用SDS PAGE检测到表达的蛋白多为可溶性融合蛋白 ,通过亲和层析柱纯化和凝血酶的切割得到了镇静肽蛋白     

五十营针刺疗法加核酪注射液穴位注射治疗支气管炎

目的:探讨五十营针刺循环疗法加核酪注射液穴位注射,治疗慢性支气管炎三年的临床疗效.方法:从1997年12月-2008年12月,选择支气管炎患者74例,年龄为38-80岁的中老年病人.纳入标准:符合上海市中医病症诊疗常规,同时符合内科疾病诊断标准.74例患者全部进行中医辨证分型,分为气虚痰阻和阴虚痰热两型.用五十营循环针刺法治疗,选取:中脘、关元,双侧太渊、神门、大陵、太溪、太冲、足三里、三阴交等穴,于辰巳时(上午8时-10时)用迎随补泻法治疗,留针时间为28分48秒,即一个经络循环周次.然后用核酪注射液穴位注射,每穴分别各取1mL核酪注射液,注射双侧丰隆、孔最穴.10次为1个治疗疗程,隔日1次,连续4个疗程.观察病人治疗前后咳嗽、咯痰、气急、喘息等主要症状以及舌苔、脉象的变化.结果:三年治疗及之后的随访显示,气虚痰阻型显效率为91.67%,阴虚痰热型显效率为73.07%.治疗效果显著,而复发率低.气虚痰阻型优于阴虚挟痰热型P＜0.05.结论:五十营循环疗法加核酪注射液穴位注射对慢性支气管炎具有较好的临床疗效,可明显改善患者的机体免疫功能,同时具有预防和减轻疾病复发的作用.     

泰国生物产业发展现状和趋势分析

泰国是农产品生产和出口大国,政府十分重视生物产业的发展,通过建立高层管理机构、出台优惠政策、制定发展规划,在生物农业、生物医药和生物能源等产业方面取得了较好的进展。未来泰国将更加重视政府指导作用,进一步完善法规建设,加大人才引进力度,实施产业优惠政策,加强生物资源和知识产权保护,重点发展生物农业、生物医药和生物能源产业。     

针刺对偏头痛治疗机制的神经影像学研究现状

偏头痛是以中重度头痛及各种神经症状为特征的神经系统疾病.针刺作为常用的非药物疗法,在偏头痛防治方面具有疗效佳、副作用少的优势,但其作用机制尚不明确.近年来,神经影像学技术的进步有助于客观评估针刺治疗偏头痛的疗效,并为探索针刺治疗偏头痛的中枢机制提供了机会.本文从针刺治疗偏头痛急性发作和针刺预防偏头痛发作的中枢机制两个方...