胰岛素样生长因子-Ⅰ mRNA调节睾丸间质细胞的功能

胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)是一种含70个氨基酸残基的肽类物质,它参与调节睾丸间质细胞的功能。例如,间质细胞有IGF-Ⅰ的特异性受体;IGF-Ⅰ促进间质细胞甾体激素生成,同时IGF-Ⅰ还能增强hCG引起的睾酮及cAMP生成。IGF-Ⅰ的主要来源是肝脏,但其它非肝脏的组织中也有IGF-ⅠmRNA。用特异的     

恒河猴睾丸间质细胞对支持细胞分泌雌二醇的影响

采用无血清培养的方法,分析了促肾上腺激素皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、cAMP、内啡肽(endorphin)和纳络酮(naloxone)对原代共培养的恒河猴(Macaca mulatta)睾丸间质细胞与支持细胞雌二醇分泌水平的影响。结果显示:ACTH、LH、cAMP和纳络酮对原代共培养恒河猴睾丸间质细胞与支持细胞的雌二醇分泌水平具有促进作用,并且这种影响与共培养的间质细胞数量呈线性关系,即共培养的间质细胞数量增加,雌二醇分泌水平亦明显上升;而内啡肽对原代共培养恒河猴睾丸间质细胞与支持细胞的雌二醇分泌水平有明显的抑制作用。研究表明,恒河猴睾丸的间质细胞对支持细胞分泌雌二醇具有调节作用。     

组蛋白抑制hCG的致小鼠Leydig细胞睾酮和环核苷酸生成

两种在体内广泛存在的蛋白也是性腺自分泌旁分泌调节物质。白蛋白可明显地刺激大鼠Leydig细胞甾体激素生成。牛卵巢中具有抑制GnRH结合作用的因子证明是组蛋白(H 2 A),已表明该小牛卵巢纯化的蛋白和商用H 2A对黄体和颗粒细胞也有抗促性腺激素的作用。本文作者目的在于观察组蛋白对睾丸甾体生成细胞是否也有抗促性腺激素的作用。所采用的组蛋白是商业提供的H 2 A,H 2 AS,H 3 S,H 5 S,H 6 S,H 7 S和H 8 S。经Percoll液分离纯化的小鼠Leydig细胞进行短期培育(3 h)。培育液中加IBMX(0.25 mmol/L)     

前列腺素与雄性生殖生理

小剂量前列腺素(PGs)作用于下丘脑,增加LHRH释放,后者促使垂体分泌LH、FSH,从而刺激睾酮分泌。睾丸间质细胞的功能还直接受PGs的调节,睾酮也显著影响雄性生殖道中PGs水平。PGs可增加大鼠睾丸重量,刺激生精过程,增加精子细胞数目,提高精子活力,维持生殖道中平滑肌的收缩,参与射精过程,促进精子在雌体生殖道内的运行,故利于受精。大剂量PGs抑制雄性生殖,使血中LH、FSH、睾酮水平下降,使睾丸动脉收缩,导致睾丸萎缩,减少睾丸及副性腺的重量,抑制生精作用,降低附睾精子活力,增加畸精率。     

前列腺素与雄性生殖生理

小剂量前列腺素(PGs)作用于下丘脑,增加LHRH释放,后者促使垂体分泌LH、FSH,从而刺激睾酮分泌。睾丸间质细胞的功能还直接受PGs的调节,睾酮也显著影响雄性生殖道中PGs水平。PGs可增加大鼠睾丸重量,刺激生精过程,增加精子细胞数目,提高精子活力,维持生殖道中平滑肌的收缩,参与射精过程,促进精子在雌体生殖道内的运行,故利于受精。大剂量PGs抑制雄性生殖,使血中LH、FSH、睾酮水平下降,使睾丸动脉收缩,导致睾丸萎缩,减少睾丸及副性腺的重量,抑制生精作用,降低附睾精子活力,增加畸精率。     

人雄激素受体部分N端区cDNA片段在大肠杆菌中的克隆及表达

N端区是甾体激素受体氨基酸序列差别最大的区域,决定了甾体激素受体抗原的特异性,是制备特异性抗甾体激素受体抗体的首选部位。以前,由于雄激素受体(hAR)纯化的困难,hAR抗体主要是从部分患前列腺癌病人血液中存在的hAR自身抗体纯化获得,利用这种方法制备的hAR抗体不但量少,而且来源也非常有限。 hAR cDNA克隆成功后,利用基因重组技     

大鼠睾丸中发现微清蛋白

微清蛋白(parvalbumin)为肌肉和脑内一种分子量12000的 Ca~(2+)结合蛋白质,现已从大鼠睾丸中分离获得。利用大鼠微清蛋白 cDNA 探针,在睾丸中显示了微清蛋白 mRNA,表明它在睾丸中合成;睾丸微清蛋白也为编码肌肉微清蛋白的同一基因的产物。用免疫组化法可将微清蛋白定位于 Leydig 细胞和成熟精细胞(1～15期)的顶体区。睾丸甾体生成在大鼠生命过程中有两个活跃阶段:第一阶段高峰出现在出生前3天,     

白细胞介素-1抑制猪离体培养颗粒细胞的黄体化

白细胞介素-1(IL-1)具有广泛的生物学功能,它作为免疫介导剂而发挥重要作用。有人曾报道,腹腔巨噬细胞含有能促进小鼠黄体化颗粒细胞生成孕酮(P)的物质。因为 IL-1主要由活化的巨噬细胞生成,因而考虑 IL-1能否调控颗粒细胞的甾体生成功能。实验选用取自中等大小猪卵泡的颗粒细胞,在黄体生成素(LH)存在或不存在的条件下,与 IL-1共同培养,观察 IL-1对颗粒细胞 P 生成的影响。结果表明,IL-1显著抑制 LH 所促进的 P 生成,作用强弱取决于剂量大小。LH 所诱发的颗粒细胞黄体化形态变化也被 IL-1所     

多泡体形成过程的细胞化学研究

本实验用酶细胞化学和示踪细胞化学方法观察了睾丸间质细胞中多泡体的形成过程及其与溶酶体的关系。实验结果表明,睾丸间质细胞中多泡体的形成可分三个阶段:首先,一些含内吞物质的泡状结构进入高尔基体区域,与那里的小泡融合,形成内含少量小泡的前多泡体;然后,前多泡体互相融合,形成体积较大、基质电子密度低、内含小泡排列稀疏的低电子密度多泡体;最后,低电子密度多泡体通过表面长出微绒毛样结构并不断断裂的方式去除多余的界膜,形成体积较小、基质电子密度高、内含小泡排列紧密的高电子密度多泡体。因此,多泡体的形成既与内吞活动有关,又与高尔基体区域小泡有关。前多泡体和低电子密度多泡体不含溶酶体酶。在多泡体形成过程中,只有到高电子密度多泡体阶段,才与溶酶体发生关系,从溶酶体中获取溶酶体酶。多泡体形成后,常与自体吞噬泡靠近,可能参与睾丸间质细胞的自体吞噬活动。     

卵清蛋白糖肽对hCG信号转导系统的抑制作用

大鼠睾丸细胞经0.03%胶原酶分散后,采用不连续/连续Percoll密度梯度离心,可得到高纯度的间质细胞。0.52nmol/L hCG、0.1μmol/L霍乱毒素和10μmol/L Forsko-lin均可刺激间质细胞cAMP(霍乱毒素>For-skolin>hCG)和睾酮(三者无显著性差异)生成。采用链霉蛋白酶非特异性水解法制备的卵清蛋白糖肽对hCG、霍乱毒素和Forskolin刺激大鼠睾丸间质细胞cAMP和睾酮的生成均有显著的抑制作用,结果表明hCG寡糖链可能参与受体、G蛋白和腺苷酸环化酶之间的偶联过程,卵清蛋白糖肽Asn-糖链可直接抑制腺苷酸环化酶活性及/或G蛋白与腺苷酸环化酶之间的偶联。     

醋酸棉酚对大鼠睾丸HCG反应性及其受体功能的影响

给大鼠灌服醋酸棉酚30 mg/kg/d,每周6次,持续4周。给药2周后,血浆睾酮水平显著下降并持续至第4周,同时间质细胞呈萎缩性改变。醋酸棉酚明显抑制成年大鼠对HCG反应性,使睾丸LH/HCG受体亲和力下降,受体数目略有减少。结果提示,醋酸棉酚抑制大鼠睾丸酮的产生及降低成年大鼠睾丸对HCG的反应性,推测其机制是由于醋酸棉酚干扰了睾丸HCG受体功能而造成的。     

大鼠睾丸内皮型一氧化氮合酶表达的增龄变化

为研究雄性大鼠睾丸在发生、发育和衰老过程中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)在生精功能中的作用及其变化规律，本实验采用了免疫组织化学染色及体视学图像分析等方法，对生后1d至生后24月龄大鼠睾丸eNOS表达的变化进行了系统研究，并统计测量了阳性血管内皮细胞及间质细胞面密度的变化。结果表明：生后1d至2周龄eNOS阳性表达极少；3周龄血管内皮细胞、间质细胞及精子细胞均出现了阳性表达；1月龄至18月龄生精小管靠近管腔的精子细胞也呈阳性，阳性血管内皮细胞、间质细胞数目差异显著；24月龄血管内皮细胞、间质细胞eNOS大量表达，部分生精细胞也有表达。本结果提示一氧化氮参与精子的生成及睾酮的分泌过程，衰老时eNOS阳性表达显著增加，这种变化可能会抑制睾酮的分泌，最终会影响睾丸的生精功能[动物学报49(3)：339—345，2003]。     

睾丸间质细胞——研究自体吞噬的一种正常细胞模型

细胞在生理状态下自体吞噬出现的频率很低,很难用正常细胞来研究自体吞噬活动,一般都通过诱导自体吞噬来获得有关自体吞噬活动的资料。本实验观察了肝、肾、睾丸等组织的32种细胞,发现睾丸间质细胞中自体吞噬出现频率远远高于其他细胞,平均每100个细胞切面中可以看到25个自噬小体,从而为研究自体吞噬的过程和机理提供了一个正常细胞模型。本实验还观察到睾丸间质细胞的自体吞噬活动可分为前自噬小体、早期自噬小体和晚期自噬小体三个阶段,是一个连续的过程。前自噬小体和早期自噬小体不含溶酶体酶,只有在自噬小体与溶酶体接触后,才从后者获取溶酶体酶并将其内容物消化分解,成为晚期自噬小体。由自体吞噬所产生的残余体并不在睾丸间质细胞内积聚,而是通过胞吐作用排出细胞外。     

尿液睾酮的准确测定

在放免测定中,分离纯化样品中待测物质是保证测定准确性的一个重要步骤。生殖甾体激素常规放免测定方法,一般采用乙醚或其它有机溶剂抽提分离样品中待测的甾体激素。但这种方法不能完全将甾体同样品中可与抗血清发生交叉反应的物质分离开,往往得到过高的测定结果。本文介绍在尿液睾酮的放免测定中加用Celite柱层析纯化步骤,获得较为准确的测定结果,并和常规放免方法所得结果相比较。     

逆向溶血斑法检测小鼠睾丸间质细胞睾酮的分泌

用逆向溶血斑法检测单个小鼠睾丸间质细胞睾酮的分泌,为进一步研究单个睾丸间质细胞的结构和功能提供一种有效的途径,结果表明,分泌睾酮的睾丸间质细胞周围形成空斑,空斑面积随睾酮分泌增加而增大,说明只要获得抗体,逆向溶血斑法就可以检测任何细胞的分泌物。     

药用植物甾体生物碱的药理作用及合成途径

甾体生物碱是药用植物中广泛存在的一类代谢产物,是一类具有降压、止咳、平喘、抗肿瘤等生物活性的天然产物。目前,甾体生物碱的合成代谢途径、分离纯化、鉴别及生物学功能研究已成为国内外天然产物研究的热点之一。对药用植物甾体生物碱的药理作用进行了综述,并根据萜类物质合成途径,推测总结了甾体生物碱的合成相关途径和参与该途径的关键酶及其基因克隆的研究进展,以期为药用植物甾体生物碱的代谢途径与基因表达调控及应用研究提供参考。     

癌基因与性腺功能

癌基因存在于正常的卵巢和睾丸中,在卵巢的生卵,睾丸的生精过程及两者的内分泌功能中均起重要作用。促性腺激素,甾体激素和多种生长因子对性腺功能的高控可能与癌基因的表达有关。     

大鼠睾丸间质细胞的自体吞噬活动

本文结合超微结构和细胞化学观察,研究大鼠睾丸间质细胞(Leydig细胞)中溶酶体的结??构与功能。观察结果表明,大鼠睾丸间质细胞中高尔基体非常发达,在高尔基体的成熟面存在着CMP酶阳性反应的GERL系统,说明这种细胞有不断产生溶酶体的能力。细胞化学结果也证实在睾丸间质细胞有较多的初级和次级溶酶体。睾丸间质细胞不仅有较多的溶酶体,而且还有相当数量的自噬小体,存在着活跃的自体吞噬活动。自噬小体的界膜来源于特化的光面内质网或高尔基体膜囊,包围的内容物主要是光面内质网和少量线粒体。当自噬小体与溶酶体融合后即成为自体吞噬泡,由于酶的消化作用,自体吞噬泡内的细胞器有一系列形态变化。根据CMP酶细胞化学反应,可以区分自噬小体和自体吞噬泡,后者是一种次级溶酶体,呈CMP酶阳性反应。睾丸间质细胞是分泌雄性激素的内分泌细胞,其光面内质网和线粒体在类固醇激素分泌中起重要作用,自体吞噬活动的结果是去除部分内质网和线粒体,可能在细胞水平上起着对雄性激素分泌的调节作用。     

甾体激素受体的提纯倍数与其纯度的关系

甾体激素受体是一类具有特殊生理功能的蛋白质。存在于生物体内的各种甾体激素受体,各自接受其专一性甾体激素的信息,例如雌激素受体只能与雌激素相结合,与孕激素等其它甾体激素不能结合。同时,这种受体的含量,极为稀少,据估计,靶细胞(受体含量最多的组织)匀浆内的受体只占总蛋白的十万分之一。因此,若不经过十万倍的提纯,就不能得到单一组分的纯受体,这和酶要经上千倍的纯化相     

氟对体外培养的小鼠睾丸间质细胞增殖和细胞凋亡的影响

目的 观察不同浓度氟化钠对睾丸间质细胞增殖和细胞凋亡的影响,为氟中毒的机制研究提供依据.方法 取体外培养的睾丸间质细胞,胰酶消化后制成单细胞悬液,常规培养,待细胞融合率达80％,且未出现细胞分化时,将细胞分4组,加入不同浓度的氟化钠染毒(0,5,10,20 mg/L)睾丸间质细胞,分别干预0,24,48,72,96,1...