合成生物工程技术产品的一种新方法

近年来,美国哥伦比亚大学专家发明了一种新的基因拼接术,以代替传统的合成遗传工程产品的方法,大大地降低了生成成本。传统的方法包括从一种细胞染色体上移走部分DNA链,再嵌入另一细胞切片即基因。哥伦比亚大学专家现在用mRNA产生一种特     

蛋白质组学研究中的一种新方法——配体垂钓

基于表面等离子共振技术的配体垂钓技术能在蛋白质组水平上研究蛋白质的相互作用与功能,提供控制细胞功能的新靶标．其通过将受体固定在芯片表面,当被检测样品流过芯片表面时,配体与受体相结合, 实现俘获未知的相互作用的伙伴蛋白或复合体,并结合质谱技术鉴定出未知蛋白及其序列．     

一种体内研究病原体致病机理的新方法——信号标签诱变技术

信号标签诱变技术是以整个基因组为基础的研究病原体致病机制,可在体内对毒力基因进行高通量筛选的一种新方法。近几年应用该技术已对十多种病原微生物进行了筛选。这些筛选中除了找到已知的毒力基因外,还都鉴定到了未知的毒力因子。本文就该技术的原理、优缺点、应用的必要条件、技术的改进及应用该技术鉴定到的毒力基因等作一综述。 A Novel Approach to Study Pathogenesis of Pathogens in vivo——Signature-tagged Mutagenesis YAO Xiao1,2,HUANG Liu-yu1,YANG Bo-lun2,SU Guo-fu1 1.Beijing Institute of Biotechnoloy,Beijing 100071,China; 2.College of Environmental and Chemical Engineering,Xi'an Jiaotong University,Xi'an 710049,China Abstract:Signature-tagged mutagenesis (STM) is a novel approach to study pathogenesis of pathogens and to screen virulence genes with high throughput in vivo,which is based on whole genome of pathogen in question.In resent years,more than ten species of microbial pathogens have been screened with this technology.There are also unknown virulence factors being identified with exception of known virulence genes identified in all these screens.This article reviews the principle,advantages and current limitations,the requirements,modifications of STM,and to date virulence genes identified by this technology. Key words：signature-tagged mutagenesis;virulence genes;pathogens;in vivo     

一种新的视网膜神经元——网间细胞

网间细胞是近年来新发现的一种视网膜神经元,其胞体位于内核层的内缘,突起在内、外网状层中广泛伸展。在内网状层,它仅从无足细胞接收输入;而在外网状层,它总是突触前的,其突起在外水平细胞和双极细胞的树突上形成突触,从而为视信息在视网膜中的传递提供了一条离心反馈通路。其主要生理作用似乎是阻遏水平细胞的侧向抑制效应。     

一种鉴别基因差异表达的新方法——差异表达mRNA呈现技术

最近发明一种称为差异表达的ｍＲＮＡ呈现技术,鉴别不同细胞群体间的基因表达质和量之差异。以其ｍＲＮＡ为模板进行ＰＣＲ扩增所得到的ｍＲＮＡ３′末端片段可以快速进行序列分析,又可作为探针进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ或Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交,用以确定和分离这些差异表达的基因种类。     

基因体外诱变的一种新方法

在PCR的过程中,采用5溴脱氧尿苷三磷酸（BrdUTP）部分取代脱氧胸苷三磷酸(dTTP)的方法,对克隆的野油菜黄单胞菌的α淀粉酶基因进行了体外诱变。结果表明,BrdUTP浓度越高,诱变越强;浓度越低,诱变越弱。当BrdUTP浓度为dTTP的0.1%时,可以得到最多的正诱变结果。用LBSP鉴别培养基初筛,然后用Yoo改良法测定酶活,仅一轮诱变就获得了其表达产物α-淀粉酶的酶活分别降低了5倍和提高了20倍的两个突变基因。再以后者为PCR模板进行第二轮诱变,从而筛选到了α-淀粉酶的酶活提高40倍的突变体。此诱变方法克服了用碱基类似物在体内诱变由于核酸复制酶等的校正作用而造成诱变无效的难题,并为基因的体外诱变找到了一条新途径。     

治疗脑瘤的一种新方法

一种治疗脑瘤的新方法正在为脑癌患者带来新的希望。这种新疗法是使用一种以聚集人体自身的抗癌防御机制去攻击叫做“神经胶质癌”的脑瘤。美国每年大     

一种纯化蓖麻毒素的新方法

该文介绍了一种新的提取、纯化蓖麻毒素的方法,首次将P-苯胺基-1-巯基-β-D-吡喃半乳糖苷（P—aminobenzyl-1-thoi-β-D-galactopyranoside）琼脂糖凝胶作为亲和层析介质,结合凝胶层析介质Sephcaryl S-200,通过两步层析纯化,获得了高纯度的蓖麻毒素。MALDI—TOF测得分子量为62925,LD50为12．4μg／kg。该方法可以制备高纯度蓖麻毒素。     

木材制片的一种新方法

本文介绍一种木材制片的方法,这种方法可靠易行,其步骤如下: 1.取材:根据观察目的选取试验材料,要照顾三个切面的位置.材料大小一般切成1.5×1.5×1.5立方厘米为宜. 2.软化:将材料置于相当于材料5倍体积的10%乙二胺水溶液中浸泡,放在60℃温箱内;浸泡时间视材料软硬程度而定,一般3～5天即可.特别硬的材料可延长至10天以上,其间应更换一次溶液.对特别软的或腐朽的材料可以用4%乙二胺水溶液在室温下     

粉尘螨分离的一种新方法

从饲养基和屋尘等孳生场所分离尘螨的方法很多,Wildman陷阱瓶法系检验贮藏物内螨类和微小昆虫污染的标准方法,其他还有四氯化碳与乙醚混合液的馏分法(Oshima,1964)、乳酸、二氯甲烷漂浮法(Spieksma等,1967; Maunsell等,1968)和饱和盐溶液漂浮法(Sasa等,1961;1970)。上述方法收得的螨会变性,质量很不满意。有些学者(Woodring,1968;Stepien等,1971)设计集螨装置收集清洁活     

一种防治蚜虫的新方法

我校这學期在勤工儉學活动中利用菊花的莖和叶拌合50％的尿水(即人尿50斤加水50斤)防治菜蚜获得成功。共配制方法是这样的,把菊花的茎和叶切碎放在木桶內,每5斤的菊花莖和叶加5斤即50％的尿水,浸一晝夜,擰干过濾,濾液就是一种很好的土农药。把它噴射在有蚜虫的蔬菜植株上經过一天     

一种种系发生分析的新方法

利用所测定的猪脂肪组织表达序列标签以及来源于GenBank中非冗余核酸数据库和表达序列标签数据库中的人、牛及小鼠cDNA序列 ,在随机抽样方法建立的基础上 ,分别采集 70个已知功能基因的cDNA序列 ,分析了 4个物种 70× 15 0bp序列连接体的突变规律 ,建立了不同物种之间的综合种系发生分析方法。结果表明 ,在 4个物种 70个已知功能基因所构成的cDNA序列连接体同源性分析中 ,共发现 391个单碱基突变 ,不同物种之间的突变数量大大超过了同一物种基因组水平预测的 1/ 10 0 0。其中以C/T(T/C)转换和A/G(G/A)转换为主要的单碱基突变类型。种系发生分析结果表明 ,作为偶蹄目的猪和牛的遗传关系最近 ,其次是人类 ,小鼠与家猪和牛的遗传关系最远。 4种动物从共同祖先分化的顺序分别为小鼠最早 ,人类次之 ,然后为猪和牛     

一种玉米螟生物测定的新方法

<正> 生物测定是比较各种药剂对某一昆虫毒力的主要方法。生物测定结果的真实性和准确性在很大程度上决定于实验方法。多年来,对玉米螟的生物测定一般都是将玉米叶浸沾于不同浓度的药液中晾干后饲喂幼虫,然后观察死亡率。用这种生物测定法,由于多数幼虫生长不大健康,空白对照组的死亡率往往超过25％以上,因而所得实验结果难以准确真实地反映测试药剂对玉米螟的实际效果。为了改进对玉米螟室内生物测定的方法以提高研究水平,我们摸索出一种用半人工饲料和测试药剂相混合的对玉米螟幼虫的毒力测定法。用这种测定方法,空白对照组中的幼虫生长健康整齐,自然死     

一种培养草履虫的新方法

一种培养草履虫的新方法目前,稻草虽是培养草履虫普遍使用的一种材料,由于稻草受农药污染日趋严重,一般简便的稻草场培养方法,往往不能高速繁殖草履虫,达不到理想的种群。数年来我反复实验发现,以菹草（Ｐｏｔａｍｏｇｅｔｏｎｃｒｉｓｐｕｓ）和玉米粉配制的培养液...     

一种快速的活菌计数新方法研究

四唑盐（MTT）比色法是一种检测动物细胞活细胞数的方法。通过改变比色反应温度、反应时间和比色波长,建立了一种快速、准确的活菌计数新方法并将其应用于细菌PBW1培养过程中活菌浓度的测定。结果表明,新方法与平板稀释法的测定结果一致,且具有快速 、方便等优点。     

蝗虫消化道形态结构研究的一种新方法

采用扫描仪和扫描电镜相结合的方法对中华稻蝗Oxyachinensis(Thunberg)消化道内部的超微结构进行定位研究。结果表明直接将蝗虫消化道的内壁翻出(不染色)铺展于扫描仪的玻璃板上进行扫描,就能得到蝗虫消化道在自然状态下的完整图像,将扫描仪扫描后的样品用于扫描电子显微镜的样品制备,并对照上述研究结果,即可定位蝗虫消化道在扫描电子显微镜下的超微结构。为蝗虫消化道的形态学研究提供一个简便有效的方法,同时也为蝗虫消化道超微结构的定位研究提供新的手段。     

一种单个胚胎的DNA模板制备方法

建立了一种简单处理单个卵子和早期胚胎制备DNA模板的方法——KOH/DTT-Triton X裂解法,并与TE-蛋白酶K法比较了PCR扩增效率。结果,采用KOH/DTT-Triton X裂解法处理单个卵子或2-细胞胚、8-细胞胚、桑椹胚、囊胚后,作为DNA模板直接进行PCR扩增线粒体DNA片段,3对引物的PCR扩增总成功率为100%（70/70）,而TE-蛋白酶K法处理的单个卵子的PCR扩增总成功率为92.9%（65/70）,二者差异显著（P<0.05）。但两种方法所制备模板的PCR假阳性率均为0。实验设计的KOH/DTT-Triton X裂解法是一种有效的单个早期胚胎的DNA模板制备方法,经一次PCR扩增即能获得清晰的目的DNA条带,能够满足早期胚胎遗传物质检测的需要。     

一种微生物检测的新方法——原位PCR应用

原位PCR(in sztu PCR,ISPCR)是近几年发展起来的新型PCR技术,它能在细胞悬液、细胞涂片和组织切片上对待检的低拷贝或单拷贝基因进行扩增,然后再对待检基因进行原位杂交检测,因而兼有PCR快速、灵敏、特异性强和原位杂交精确定位的特点,具有非常广阔的应用前景。