Transgeni根癌农杆菌介导的小麦转基因植株再生(英文)

根癌农杆菌菌株Ａｇｌ Ⅰ的Ｔｉ 质粒ｐＵＮＮ－２ 带有Ｕｂｉ１ 启动子驱动的ｎｐｔ Ⅱ基因。７ 种基因型小麦幼胚或胚性愈伤组织用于农杆菌介导的转化实验。经过不同浓度巴龙霉素的筛选,３ 种基因型小麦产生抗性愈伤组织并再生植株。再生植株经ＰＣＲ 和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交鉴定为转基因植株,转化频率（ 再生转基因植株的小麦愈伤组织数／ 用于转化实验的愈伤组织数） 为３．７％ ～５ ．９％ 。小麦基因型及转化材料的起始生理状态是影响ＴＤＮＡ转移的重要因素。     

根癌农杆菌介导的小麦转基因植株再生

根癌农杆菌菌株Ａｇｌ Ⅰ的Ｔｉ质粒ｐ＾ＵＮＮ－２带有Ｕｂｉ１启动子驱动的ｎｐｔⅡ基因。７种基因型小麦幼胚或胚性愈伤组织用于农杆菌介导的转化实验。经过不同家度巴龙霉素的筛选,３种基因型小麦产生抗性愈伤组织并再生植株。再生植株经ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交鉴定为转基因植株,转化频率为３．７％－５．９％。小麦基因型及转化材料的起始生理状态的影响Ｔ－ＤＮＡ转移的重要因素。     

黄瓜‘新津春四号’遗传转化体系的建立

对根癌农杆菌介导‘新津春四号’黄瓜(Cucumbis sativus L.)遗传转化的影响因素进行了研究。结果表明,黄瓜叶片适宜的潮霉素(Hygromycin,Hyg)筛选浓度为40 mg L-1;500 mg L-1羧苄青霉素(Carbenicillin,Carb)可有效抑菌。预培养2 d有利于转化;共培养2 d有利于提高转化频率并避免农杆菌的过度生长;添加150μmol/L乙酰丁香酮(Acetosyringone,AS),农杆菌浸染液pH5.7、浓度0.8,浸染时间8 min为最佳遗传转化条件。再生植株经gus基因的瞬时表达检测及PCR检测证明hpt基因已成功转化。     

根癌农杆菌介导的黄瓜转基因研究进展

黄瓜Cucumis sativus是世界性的重要蔬菜作物。农杆菌介导的转基因技术是研究植物基因功能及品种改良的重要手段。为进一步加快黄瓜的转基因研究和育种进程,文中针对农杆菌介导的黄瓜遗传转化方法,从黄瓜再生能力的影响因素、遗传转化条件和过程中各类添加物质等方面,阐述了根癌农杆菌介导的黄瓜转基因研究进展及存在的问题,并对提高黄瓜遗传转化效率和安全筛选标记的应用等前景进行了展望,以期为黄瓜抗逆育种和果实品质改良等研究提供参考。     

发根土壤杆菌Ri质粒对黄瓜进行遗传转化的研究

以发根土壤杆菌Ｒｉ质粒介导,对载体ｐＢＴＣ－８上的Ｔ－ＤＮＡ转化黄瓜进行了初步研究。采用黄瓜的各种不同外植体片断与土壤直菌共培养的方法,诱导出具有典型毛状根特性的转化根,转化根经诱导培养形成愈伤组织,冠瘿碱检测表明,转化根及愈伤组织含有农杆碱和甘露碱。愈伤组织进一步分化培养再生出完整植株。再生植株表现卡那霉素抗性。     

根癌农杆菌介导的高粱遗传转化体系的研究

采用根癌农杆菌介导法将杀虫晶体蛋白基因cryIA(b)转入高粱胚性愈伤组织中,建立农杆菌转化高粱的遗传转化体系,获得70棵再生植株。经GUS及PCR检测,结果表明,cryIA(b)基因确实转移到高粱恢复系0-30中,报告基因GUS在再生植株中也得到表达。转化植株的抗病性鉴定正在进行中。     

黄瓜花叶病毒香蕉株系衣壳蛋白转基因烟草的研究

构了侵染香蕉的黄瓜花叶病毒两个株系的衣壳蛋白基因的植物表达载体,并通过农杆菌共培养法的基因枪法,分别将两个株系的ＣＰ基因转化入了两种烟草植株。其ＣＰ基因转化频率及植株再生率研究结果表明,农杆菌共培养法比基因枪法,土耳其烟比本生烟,农杆菌１：１０倍稀释液比培养原液和１：１００倍稀释液,具有更高的转化频率和植株再生能力。Ｓｏｕｔｈｅｍ ｂｌｏｔ,ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｍ ｂｏｌｔ检测ＣＰ基因整合研究结果     

由根癌农杆菌介导向毛白杨导入激素合成基因建立遗传转化系统

用携带基因1,2的根癌农杆菌AG(84)转化毛白杨外植体,在无激素的MS0培养基上获得转化根。分离单根或切成根段在分化培养基上能分化芽而再生完整植株。由T－DNA上带有基因4的根癌农杆菌C58C1（PBZ6111）转化毛白杨外植体,在MS0培养基上能直接分化不定芽而再生植株．在转化中使用叶柄作外植体比使用叶片的转化率提高一倍以上。基因1,2引入毛白杨后,植株根系发达,生根率达100％。基因4引入毛白杨则使植株节间变短,植株矮化．纸电泳分析表明,带有基因1,2的转化植株能表达特异的农杆碱,带有基因4的转化植株能表达特异的胭脂碱。     

发根农杆菌对黄瓜的遗传转化

发根农杆菌对黄瓜的遗传转化施和平李玲潘瑞炽（华南师范大学生物系广州５１０６３１）关键词发根农杆菌,黄瓜,毛状根,冠瘿碱ＧＥＮＥＴＩＣＴＲＡＮＳＦＯＲＭＡＴＩＯＮＯＦＣＵＣＵＭＩＳＳＡＴＩＶＵＳＢＹＡＧＲＯＢＡＣＴＥＲＩＵＭＲＨＩＺＯＧＥＮＥＳＳＨＩ...     

影响根癌农杆菌介导水稻转化的因素分析

根癌农杆菌与来自水稻成熟种子盾片的愈伤组织共培养,将GUS基因导入水稻愈伤组织,并获得了转基因植株。通过比较影响根癌农杆菌转化频率的各种因素,表明激素配比为2,4-D1mg/L、TDZ0.5mg/L、NAA1mg/L时,可以大大促进籼稻愈伤组织的分化能力;酚类化合物的加入使农杆菌的转化频率提高8.9%-23.5%;共培养时农杆菌的稀释方式及适当调整潮霉素（hygB）的使用浓度影响到农杆菌的转化频率。     

不同类型沙地上差巴嘎蒿细根的分布状态

 以生长于流动沙地和固定沙地上,处于植被演替不同阶段的半灌木差巴嘎蒿(Artemisia halodendron)种群为对象,用土钻取样法研究了生长季（2000年）降雨期前后差巴嘎蒿的根系随土壤深度的分布、生长动态及其与根际土壤含水量的动态关系,观察到：1)降雨期前各土层的根际土壤含水量随深度的增加而升高,增加的幅度为流动沙地>固定沙地;降雨期后根际土壤含水量随深度的增加而减少,减少的幅度为固定沙地>流动沙地。2)表土层（0～15 cm）中差巴嘎蒿的主根分布量在流动沙地显著高于固定沙地。3)降雨期前,差巴嘎蒿细根(直径<1 mm)分布比例在两种不同类型沙地上的差异表现为:在土层0～45cm中固定沙地(84.9%)极显著高于流动沙地(61.9%),而在深土层（>45 cm）中流动沙地（38.1%）显著高于固定沙地（22%）;降雨期后,不论是在固定沙地还是流动沙地细根多集中于0～15 cm的表土层中,流动沙地的细根分布比例由降雨期前33%增至降雨期后的78%,固定沙地由降雨期前的49%增至降雨期后的63%。表明流动沙地差巴嘎蒿种群细根的生长比固定沙地活跃,能够在生长季降雨期后迅速调整细根的分布比例,使细根分布适应降雨期后浅层土壤含水量高的特点。固定沙地的细根分布难以迅速适应土壤水分的变化,不利于差巴嘎蒿对水分的吸收,成为种群衰退的一个重要因素。     

REEXAMINATION OF PORE WATER SULFIDE CONCENTRATIONS AND REDOX POTENTIALS NEAR THE AERIAL ROOTS OF RHIZOPHORA MANGLE AND AVICENNIA GERMINANS

Soil redox potentials and pore water sulfide concentrations on a mangrove island in the Belizean barrier reef system were significantly correlated with the presence of the aerial roots of mangrove trees. Sulfide concentrations were three to five times lower near the prop roots of Rhizophora mangle (red mangrove) and the pneumatophores of Avicennia germinans (black mangrove) than in adjacent (≤ 1 meter away) unvegetated sediment. Soil redox potentials were also significantly higher near the aerial roots. A comparison of the two species revealed that sulfide concentrations in the rhizosphere of R. mangle were as low as that of A. germinans. However, sulfide concentrations in areas occupied by the black mangrove were variable and a function of pneumatophore density. The occurrence of an oxidized rhizosphere around the roots of both species suggests that the adult trees are equally capable of exploiting reduced sediments as long as their respective pathways for root aeration are functional.     

极性和NAA浓度对发根农杆菌遗传转化黄瓜子叶的影响

本文研究了极性和NAA浓度对发根农杆菌（Agrobacteriumrhizolgenes）R1000和R1601诱导黄瓜子叶产生毛状根的影响。结果表明,感染发根农杆菌R1000和R1601的黄瓜子叶都仅在其下端产生毛状根。培养基中加人0．1mgL-1和5．0mgL-1NAA预培养和共培养都可提高发根农杆菌R1000和R1601对黄瓜子叶外植体下端的生根能力。但仅用5．0mgL-1NAA预培养和共培养的感染发根农杆菌R1000和R1601的子叶外植体上端可不同程度地生根,生根率分别为32．5％和6．48％。经检测,毛状根均含有农杆碱和甘露碱。     

干旱对小麦幼苗诱导蛋白表达与某些生理特性的初步探讨

试验以－１．２ＭＰａＰＥＧ６０００处理动小麦种子（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｌｉｖｕｍＬ．）．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ图谱分析表明,水分胁迫诱导幼芽及整株均产生４８．４ｋＤ、４１．５ｋＤ二个蛋白质亚基。在幼根中未出现以上二个蛋白亚基。胁迫４８ｈ后,根干重／芽干重比呈上升趋势,幼芽细胞膜楔对透性增大和相对含水量降幅度均大于幼根。     

遮荫对水曲柳幼苗细根衰老的影响

细根周转对森林生态系统碳地下分配和养分循环具有重要影响,而衰老是细根周转过程中最重要的阶段。根据“源-汇”理论,细根衰老受碳向细根分配的影响。为此,该研究通过控制水曲柳(Fraxinus mandshurica)苗木向根系的碳分配的遮荫处理试验,采用树木生理分析技术,重点研究了在光合产物供应停止情况下水曲柳幼苗根系的生理变化(即根尖、1级根到3级根的细胞活力、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量和膜透性的变化)。目的是从生理水平上证实:1)碳分配对细根衰老产生怎样的影响;2)细根衰老的顺序是否与分支顺序相反。实验结果表明,遮荫处理使细根活力、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量显著降低和膜透性增大,导致细根出现明显衰老。从根系顶端向基部随着根序增加,细胞活力、可溶性糖含量和可溶性蛋白含量提高,膜透性降低,从生理水平上表明细根衰老具有逐渐变化的顺序性,并且这种顺序性与根发育的顺序性相反。     

高水位条件下池杉根系的生态适应机制和膝根的呼吸特性

  池杉(Taxodium ascendens)属于典型的耐水树种, 掌握其根系对淹水环境的生态适应机制对于研究林木耐水机理十分重要。通过对江苏省里下河低湿地17年生池杉在高水位(6～10月淹水, 全年平均地下水位-5 cm)、中水位(8～9月淹水, 全年平均地下水位-18 cm)和低水位(常年不淹水, 全年平均地下水位-41 cm)条件下的根系进行调查, 结果表明, 池杉在高水位条件下形成细长的气生根, 气生根依附于树干北侧或潜伏于树干外表皮内侧和纵裂的树皮缝隙中; 中水位池杉能形成直径(7.9±2.2) cm、高(7.7±2.7) cm的膝根, 每株立木拥有膝根数(5.8±1.7)个; 低水位池杉也能形成膝根, 但个体小、数量少。林木地下和地上生物量均呈现出明显的高水位<中水位<低水位的趋势, 但是地下/地上生物量的比值却呈相反趋势, 表明池杉耐水性虽然很强, 长期处于较高水位时生长会明显受抑, 尤其是地上生物量生长受抑更显著。高、中和低水位池杉的地径/胸径之比分别是2.66±0.11、2.08±0.10和1.75±0.08, 说明水位较高的环境能促进树干基部的相对粗生长。长期淹水导致地下根的容重降低, 但是气生根和膝根的容重却明显大于地下根。高、中水位池杉细根的Fe和Mn浓度显著高于低水位, 其中Fe的浓度相差10倍以上, 但是叶的Fe、Mn浓度在不同水位之间没有显著差异。膝根的呼吸具有明显的季节差异, 8月和9月平均每个膝根的呼吸速率为2.1～2.5 mgCO₂&#8226;h^–1, 6月和11月为0.7～0.9 mgCO₂&#8226;h^–1, 3月为0.4 mgCO₂&#8226;h^–1; 膝根吸收O₂的摩尔数是释放CO₂摩尔数的4.6倍, 说明膝根吸收的O₂除了供自身呼吸, 大部分是提供给地下根利用。池杉之所以具有较强的耐水性, 与其在缺氧环境中能形成气生根和膝根、树干基部膨大和根系容重降低等有利于改善根系通气条件的生态适应机制密切相关。     

GRAVITROPISM IN ABSCISIC-ACID DEFICIENT SEEDLINGS OF ZEA MAYS

We did not detect any abscisic acid (ABA) in roots or leaves of carotenoid-deficient mutants of Zea mays. Similarly, we did not detect any ABA in roots or leaves of seedlings treated with Fluridone (an inhibitor of carotenogenesis) even after subjecting them to polyethylene glycol (PEG)-induced moisture stress. Primary roots of untreated, Fluridone-treated, and mutant seedlings were strongly graviresponsive. These results suggest that 1) ABA is not necessary for positive gravitropism by primary roots of these cultivars of Z. mays, and 2) ABA is synthesized via the carotenoid pathway.     

发根农杆菌对骆驼刺的转化及转化组织的形态发生

将骆驼刺离体再生苗的茎切段经发根农杆菌A4菌株感染后,在含500mg/L头孢霉素的MS无激素培养基上培养,产生了转化的发根和愈伤组织.转化根在附加2mg/L2,4-D和0.5-1mg/L6BA的MS培养基上培养后,亦可诱导出愈伤组织.在含3mg/L6BA和0.5mg/LNAA的培养基上诱导出了苗的分化.冠瘿碱分析表明,在95%以上的发根和75%的转化愈伤组织及再生植株中都显示了T-DNA的整合和表达.染色体检查发现,约81%的发根细胞具有正常染色体数(2n=18),其余则存在染色体数目的变化,在继代培养一年之后,转化体仍维持旺盛的再生能力.     

工布乌头根中的二萜生物碱

工布乌头（ＡｃｏｎｉｔｕｍｋｏｎｇｂｏｅｎｓｅＬａｕｅｎｅｒ）系毛茛科乌头属植物,分布于西藏及四川西部,其块根有剧毒,泡酒外用可治疗跌打损伤和毒虫咬伤［１］。Ｙｕｅ等［２］、王锋鹏等［３］和庞志功等［４］曾从该植物分离到５个二萜生物碱。本文报道从四川产工布乌头的块根分离出的４个二萜生物碱。根据ＭＳ、１Ｈ－ＮＭＲ、１３Ｃ－ＮＭＲ等波谱分析,确定其中一个微量成分为新Ｃ１９－二萜生物碱,命名为工布生（ｋｏｎｇｂｏｅｎｓｉｎｅ,１）另外３个已知化合物分别鉴定为瓜叶乌碱甲素（２）、印乌碱（３）和它拉乌头胺…     

水分胁迫下小麦地上和地下部的反应及其抗旱性研究

本试验较系统地研究了四个小麦品种水分胁迫下地上、地下部的形态、生理和信息传递物质的变化及其抗旱性,为高等植物的抗旱机理研究提供了一些有价值的资料。为抗旱育种和育农栽培提供理论上的依据。