人白血病细胞系(J_(6-1))染色体带型分析和标记染色体的发现

J_6-1细胞系是我所第五研究室于1976年培养成功的非淋巴细胞型白血病细胞系。为了了解该细胞系的核型特点,我们对本细胞系,在每隔10代连续6次常规染色体分析的基础上,用染色体显带技术(包括G带和C带),对其染色体进行了带型分析。除证明J_6-1细胞系具有男性核型外,还发现有两个标记染色体。现将我们所采用的方法以及分析的结果报告如下,并就其来源和意义进行初步讨论。     

急性白血病患者外周血白细胞诱生干扰素的能力和淋巴细胞转化功能的研究

用微量细胞病变抑制法测定了53例急性白血病患者外周血白细胞诱生干扰素的水平,以及18例急性淋巴细胞性白血病患者的淋巴细胞转化功能。发现前者体外诱生干扰素的水平显著下降,并与病程转归有密切关系;后者淋巴细胞转化指数低于正常,但与干扰素水平之间无平行关系。本文还对急性白血病患者白细胞体外诱生干扰素水平下降的可能原因进行了讨论。     

人白血病细胞系（J6-1,J6-2和J6-3）的SCE及其对MMC敏感性的研究

染色体或染色单体断裂可作为研究DNA 损伤的一个细胞遗传学指标,但是在正常情况 下染色体和染色单体断裂的出现率并不高,而 姐妹染色单体互换（简称SCE）频率则较高,因 而后者是研究染色体稳定性的一个较好指标。 丝裂霉素（MMC）是一种强的致突变和 致癌剂^[2],同时又是强的SCE诱发剂。     

一例具有双重染色体畸变+21,t(6;7)(q~(21);q~(36))的先天愚型

患者的细胞同时存在两种染色体畸变的机率相当小。最近,我们在遗传门诊中发现一例先天愚型患儿,染色体核型分析为:47,XX,+21,t(6;7)(q~(21);q~(36)),现将此病例报告如下。     

浙江B型与一非B型(China-ZHJ-1)烟粉虱形态学和生物学特性的比较研究

本文对新入侵我国的B型与浙江一非B型（China-ZHJ-1种群）烟粉虱之间的生殖亲和性进行了测定,并对两个生物型在形态特征、发育历期、诱导西葫芦银叶反应及寄主植物适应性几方面进行了比较研究。结果表明,当将B型与非B型ZHJ-1种群进行杂交组合时,两生物型之间虽然有求偶行为发生,但从不发生交配,后代全部为孤雌生殖产下的雄虫;而B型、非B型各自内部羽化后0～72 h的平均交配次数分别为4.4次和1.0次, 所产后代的雌雄性比分别为2.8∶1、1.0∶1,前者性比显著高于后者。两生物型之间伪蛹形态存在明显差异,非B型ZHJ-1种群的前、后蜡缘饰宽度分别为B型的2.5～2.7倍、1.8～2.1倍。在棉花上,除B型1龄若虫历期较非B型的略长外,两生物型之间其他各虫态的发育历期均无显著差异;从2龄若虫起,非B型各虫态的体长明显长于B型,并且同一生物型内,4龄雌性若虫个体明显大于同龄雄性若虫。B型在多种寄主植物上的存活力比非B型的显著要强。B型与非B型ZHJ-1种群生物学特性的比较,为对我国烟粉虱这两个生物型进行深入的比较研究、探讨B型烟粉虱的入侵生物学提供了基础。     

p18~(INK4C)缺失通过激活LMO2加快Notch-1诱导的急性T淋巴细胞白血病进展

p18~(INK4C)(CDKN2C)属于细胞周期蛋白激酶抑制剂家族成员,通过阻断细胞周期蛋白激酶4/6使细胞周期处于G1早期.研究提示,p18缺失影响T细胞的正常发育并可能参与急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)的发生,但p18缺失导致T-ALL发生和进展的机制并不清楚.本文利用Notch-1胞内段(ICN-1)过表达诱导的T-ALL模型来研究p18影响T-ALL的发生和进展的可能机制.结果发现,p18-/-骨髓细胞过表达ICN-1可诱发T-ALL,白血病细胞表型为更加原始的CD4/CD8双阴性细胞,且这些细胞主要阻滞在DN3阶段;T-ALL细胞连续移植结果显示,p18缺失能够显著加速T-ALL的进展,且p18-/-T-ALL细胞更多地处于细胞周期的G0期,即静息状态;基因表达结果发现,与T-ALL发生直接相关的原癌基因Lmo2及共结合分子如Sfpi1,Nfe2及Ldb1等以及N-myc的表达水平在p18-/-组显著高于对照组.以上结果提示,p18缺失后可能通过激活Lmo2及N-myc等的表达从而加速T-ALL的进展.本研究对p18缺失如何加速T-ALL的发展进行了阐释,对临床伴随有p18缺失或者LMO2异常激活型突变T-ALL病人的预后提供了理论依据,具有一定的临床指导价值.     

乙型肝炎病毒(HBV)体内外对单个核细胞白细胞介素-1和白细胞介素-2诱生活性影响的研究

本研究用PAP法、胸腺细胞增殖法、脾细胞增殖法,分别检测16例体外HBV感染的骨髓单个核细胞与16例慢性乙型肝炎患者体内感染的骨髓单个核细胞(MNCs)中的HBcAg和白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-2(IL-2)的诱生活性(以△cpm值表示)。结果显示,体外HBV感染组与体内HBV感染组骨髓MNCs中HBcAg检出率分别为50％和43.7％。本实验结果表明,HBV在体外感染骨髓MNCs,且与体内自然感染相符,但光镜下未观察到致细胞病变效应(CPE)。体外感染组与体内感染组IL-I和IL-2活性均较对照组明显下降(P<0.01)。且细胞中HBcAg检出阳性者较阴性者下降更为明显(P<0.01)。IL-1和IL-2诱生活性降低与HBV侵染免疫细胞及其在细胞内复制有密切关系,从而提示,IL-1和IL-2降低可能影响HBV的清除而引起慢性化过程。     

中国人红细胞葡糖6-磷酸脱氢酶变异型的研究 Ⅵ.Gd(-) Dhon型和Gd(-) Haad Yai型

红细胞葡糖6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症经证明是引起多种溶血性贫血的原因。中国人中已报告了17种变异型。其中包括1980年Panich等在泰国华侨中发现的Dhon型和Haad Yai型。我们近年来在广东居民中亦发     

广西地区104例泰国缺失型α-地中海贫血1的研究

目的:对广西地区的泰国缺失型α-地中海贫血1的血液学、基因型、临床表现及民族分布进行分析。方法:对门诊病人进行血常规、血红蛋白电泳及-地中海贫血基因分析,收集已确诊为泰国缺失型α-地中海贫血1患者的检测数据及临床资料,并用SPSS统计软件对以上数据进行统计分析。结果:共检出104例泰国缺失型α-地中海贫血1,其中71例基因型为--THAI/αα,17例基因型为--THAI/-α3.7,14例基因型为--THAI/αCSα,2例基因型为--THAI/αQSα。统计学分析:--THAI/αα杂合子和--SEA/αα杂合子的血常规结果比较没有统计学意义,P0.05;泰国型Hb H病(--THAI/-α3.7、--THAI/αCSα、--THAI/αCSα)和东南亚型Hb H病(--SEA/-α3.7、--SEA/αCSα)的血常规结果比较有统计学意义,P0.01;民族分布上,有67例为壮族,34例为汉族,其他民族3例。结论:泰国缺失型-地中海贫血1在广西有一定的发生率,在壮族人群多见;和东南亚缺失型Hb H病相比,泰国缺失型Hb H病出现临床症状的时间更早、贫血更严重。     

急性淋巴细胞白血病患儿血清25羟维生素D3、乳酸脱氢酶、白细胞介素-6水平与危险度分层和预后不良的关系研究

摘要 目的：探讨急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿血清25羟维生素D3（25-OH-D3）、乳酸脱氢酶（LDH）、白细胞介素-6（IL-6）水平与危险度分层和预后不良的关系。方法：选择2018年6月至2019年8月在我院住院治疗的ALL患儿60例为病例组,另选取同期到我院健康查体的同龄健康儿童60例为对照组。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清25-OH-D3和IL-6水平,采用全自动生化分析仪检测血清LDH水平,对比病例组与对照组血清25-OH-D3、LDH、IL-6水平,对比不同危险度分层ALL患儿血清25-OH-D3、LDH、IL-6水平,分析其与危险度分层的相关性。ALL患儿进行规范化治疗,根据治疗结果分为预后良好组和预后不良组,对比预后良好组和预后不良组临床特征及血清25-OH-D3、LDH、IL-6水平,采用COX比例风险回归模型分析预后不良的危险因素。结果：病例组患儿血清25-OH-D3水平低于对照组,血清LDH、IL-6水平高于对照组（P＜0.05）。低危型、中危型ALL患儿血清25-OH-D3水平高于高危型,且低危型高于中危型（P＜0.05）;低危型、中危型ALL患儿血清LDH、IL-6水平低于高危型,且低危型低于中危型（P＜0.05）。预后不良组高危型患儿及白细胞计数＞100×10⁹/L的患儿所占比例、血清LDH及IL-6水平高于预后良好组（P＜0.05）,血清25-OH-D3水平低于预后良好组（P＜0.05）。血清25-OH-D3水平与ALL患儿危险度分层呈负相关（P＜0.05）,血清LDH、IL-6水平与ALL患儿危险度分层呈正相关（P＜0.05）。危险度分层及血清25-OH-D3、LDH、IL-6是ALL患儿预后不良的危险因素（P＜0.05）。结论：ALL患儿血清25-OH-D3、LDH、IL-6水平异常改变,与危险度分层相关,是预后不良的危险因素。     

一株蝉拟青霉产N~6-(2-羟乙基)腺苷静置发酵条件的研究

为了提高蝉拟青霉122菌株中N~6‐(2‐羟乙基)腺苷(HEA)的产量。采用静置液体培养方法,以HEA产量为指标,筛选得到122菌株在查氏培养基上的HEA产量优于沙氏和PD培养基;以查氏培养基为基础培养基,在26℃培养40d时,HEA产量达到最大;在黑暗条件培养优于光照条件培养;最优碳源是蔗糖和葡萄糖;最优氮源是磷酸氢二铵;最优无机盐是KH_2PO_4;最优前体物为次黄嘌呤;最适氨基酸为L‐谷氨酸。正交实验结果表明蔗糖是影响122菌株产HEA的最主要的因子,在筛选出的优化培养基上得到122菌株HEA的最大产量为(130.22±0.60)mg/L,较优化前HEA的产量提高9.73倍。     

上海地区胃癌病人运铁蛋白(Tf)、组特异性成分(Gc)、α_1-抗胰蛋白酶(α_1-AT)亚型分布的研究

用薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳分析了上海地区202例汉族胃癌病人及202例正常对照组的运铁聋白(Tf)和α_1-抗胰蛋白酶(α_1-AT)亚型的分布,发现胃癌组Tfc_1c_1纯合子频率(0.3713)和Tfc_1基因频率(0.5718)显著低于对照组(分别为0.5149和0.6782),均为p<0.01,胃癌组Tfc_2c_2纯合子频率(0.2228)和Tfc_2基因频率(0.4019)显著高于对照组(分别为0.1436,p<0.05和0.2970,p<0.01),胃癌组和对照组的α_1-抗胰蛋白酶亚型分布无显著差异。用薄层聚丙烯酰胺等电聚焦结合免疫固定分析了上海地区200例汉族胃癌病人和200例正常对照组的组特异性成分(Gc)亚型分布,发现胃癌组Go1F表型频率(0.22)和Gc1F基因频率(0.4375)均显著高于正常对照组(分别为0.14和0.3600,均为p<0.05)。     

人淋巴细胞表面抗原的研究——Ⅰ,一个和人的类Ⅰ_a抗原起反应的单克隆抗体(B_6)

K(o¨)hler和Milstein报道的杂交瘤方法为制备抗各个抗原决定簇抗体提供了精确手段。此技术已广泛应用于研究各种细胞表面抗原,可溶性、微生物和肿瘤的抗原。近年来,生产抗人淋巴样细胞的单克隆抗体(简称单抗)已取得迅速进展。至今报道的有抗HLA抗原,β-2微球蛋白,B淋巴细胞,胸腺细胞,单核细胞,T淋巴细胞的各种成份,活     

中国人红细胞葡糖6-磷酸脱氢酶变异型的研究 Ⅲ.Gd(一)苗族白沙型

在海南岛白沙县3名苗族居民中发现一种新的葡糖6-磷酸脱氢酶变异型。其特点是,酶活性显著缺乏(仅正常值的3—9％),电泳迁移率正常,葡糖6-磷酸(G6P)米氏常数降低(11—37μM),底物同类物2-脱氧G6P利用率轻度增高(9.1—9.7％),脱氧辅酶Ⅱ利用率明显升高(103.0—167.5％),而耐热性明显降低,45℃20分钟残余酶活性仅23.1—29.0％。比较了文献报告的209种变异型后认为此为一新型,定名为Gd(—)苗族白沙型。     

α-2,6唾液酸转移酶(ST6Gal1)的cDNA克隆、原核表达及生物活性研究

从HepG2细胞中提取总RNA,经RT-PCR扩增α-2,6唾液酸转移酶基因,构建于pMD-18T克隆载体中,经序列测定后与GenBank中报道的已知序列比对完全一致,再将已知目的序列插入原核表达载体pET-28a(+)中。将构建正确的原核表达载体转化表达受体菌BL21（DE3）中,IPTG诱导其进行表达并鉴定目的蛋白,对鉴定正确的目的蛋白复性后经Ni2 +亲和层析柱纯化获得高纯度的α-2,6唾液酸转移酶蛋白。然后用霍乱弧菌神经氨酸酶处理健康鸡红细胞,清除鸡红细胞表面所有类型的唾液酸寡糖链;再用表达的α-2,6唾液酸转移酶以 CMP-唾液酸作为底物在霍乱弧菌神经氨酸酶处理的鸡红细胞表面标记上SAα2,6 Gal受体。将标记有SAα2,6Gal受体的鸡红细胞应用微量血凝试验和流式细胞仪进行检测,以验证所表达蛋白的生物活性。结果表明,原核表达的α-2,6唾液酸转移酶具有较好的生物活性。     

携带线粒体CO1/tRNA~(Ser(UCN))7444G>A突变和12S rRNA 1555A>G突变的非综合征性耳聋家系的线粒体功能研究

该研究通过构建携带突变的血小板融合细胞系,探讨12S r RNA 1555AG和CO1/t RNA~(Ser(UCN))7444GA突变对线粒体功能的影响。首先,采集携带12S r RNA 1555AG和CO1/t RNA~(Ser(UCN))7444GA双突变、单突变及正常对照组患者外周血,构建血小板融合细胞系。其次,对构建成功的血小板融合细胞系进行一系列功能研究,包括细胞内活性氧类(ROS)生成量、线粒体膜电位水平、蛋白质水平和t RNA稳态水平的分析。通过对各组血小板融合细胞系的线粒体功能的研究,结果与对照组相比发现,细胞内ROS生成量显示,仅携带m.1555AG单突变组细胞ROS上升66.54%,仅携带m.7444GA单突变组细胞ROS上升83.09%,而同时携带m.1555AG和m.7444GA双突变组细胞ROS上升131.08%;线粒体膜电位水平显示,m.1555AG单突变组的ΔΨm水平下降32.86%,m.7444GA单突变组的ΔΨ水平下降0.66%,m.1555AG和m.7444GA双突变组的ΔΨm水平下降29.86%;Western blot结果显示,各突变样本的CO1、CO2均有不同程度的下降,仅携带m.1555AG单突变组中ND4、ND5和ND6差异不明显,而仅携带m.7444GA单突变组和m.1555AG和m.7444GA双突变组中ND4、ND5和ND6均有不同程度的下降;Northern blot结果显示,m.7444GA对t RNA~(Ser(UCN))稳态水平的改变并不是很明显。提示CO1/t RNA~(Ser(UCN))7444GA突变可能只是12S r RNA 1555AG突变的病理效应的修饰因子,但在耳聋的发生过程中,还是12S r RNA 1555AG突变起主导作用。     

共表达O型口蹄疫病毒3C、P1-2A基因和猪白细胞介素18基因的重组鸡痘病毒免疫原性研究

目的 对本室已筛选到的一株共表达O型口蹄疫病毒3C基因、P1-2A基因和猪白细胞介素18基因的重组鸡痘病毒rFPV-3C-P1-2A-IL-18进行免疫原性研究。方法 分别用重组鸡痘病毒rFPV-3C-P1-2A-IL-18、rFPV-P1-2A-3C和对照组282E4株FPV、PBS对小鼠进行免疫接种,并检测各免疫组的T 淋巴细胞亚类数量、CTL杀伤活性及抗体效价。结果 重组鸡痘病毒疫苗组免疫小鼠T 淋巴细胞亚类数量,CTL杀伤活性和抗体效价均显著高于对照组,且重组鸡痘病毒rFPV-3C-P1-2A-IL-18的小鼠T 淋巴细胞亚类数量和CTL特异性杀伤活性与rFPV-P1-2A-3C相比,差异显著。结论 本实验为开发新型FMDV疫苗奠定了实验免疫基础。     

动物细胞培养和细菌发酵的工艺经济学:组织型纤溶酶原激活剂的一例研究的分析

工艺决定产品,拿最近批准进入市场的tPA来说,它的售价是2200美元/剂量,是链激酶的近20倍,因而降低生产成本对这些产品是至关重要的。由于生化工程学家没有现成的生化工艺规律可循,在放大规模之前他们要做细致的小规模试验。这篇文章就通过分析一例研究,来说明决定一种产品的重要工艺、设计和经济学方面的考虑。1 模型工艺和生产系统的选择 我们选择tPA的生产作为模型工艺,因为它被认为是年轻的生物技术产业的先驱产品;同时也是第一个经过基因工程改造的哺乳动物细胞生产的上市药     

辽宁省首次从急性弛缓性麻痹(AFP)病例分离的一株人腺病毒1型重组株的全基因组序列特征分析

人腺病毒(Humanmastadenoviruses,HAdV)是一种常见的病毒病原体,在儿科患者中普遍存在.本研究首次报道了 2017年从辽宁省急性弛缓性麻痹(AFP)病例的粪便标本中分离到的一株人腺病毒1型重组株LN2017,并对其全基因组进行测序和分析.我们首先测定了 LN2017的全基因组序列,并将其与从GenBank数据库中下载的来自8个国家的38个参考株一起,构建了基于全基因组、Hexon基因,Penton base基因,Fiber基因和E3基因的系统发育树,并用RDP4.97和SimPlot3.5.1软件进行了重组分析.结果显示,LN2017病毒为HAdV-C亚属,其Hexon,Penton base和Fiber基因与HAdV-1高度相似,但是其E3基因和HAdV-2、HAdV-6高度相似.重组分析显示毒株LN2017是一个重组病毒,在E3基因区域和HAdV-2发生了重组,重组区域位于28045-31042.本研究首次证实了LN2017与 GenBank 中的 JX173080(埃及株 E13)、MH183293(上海株 SH2016)和 MH121110(德国株43C1)具有相同的重组方式,在HAdV-1内构成一个独立的分支.未来,有必要对该分支人腺病毒1型重组株的致病性和临床特征进行进一步研究,并继续加强对HAdV的分子流行病学监测.