明党参根皮超临界萃取部位化学成分研究

采用超临界CO2萃取、柱层析、重结晶等方法,从明党参根皮部位分离得到9个化合物。经理化方法和波谱分析鉴定为二十五烷酸(1)、二十七烷醇(2)、β-谷甾醇(3)、豆甾醇(4)、异欧前胡素(5)、欧前胡素(6)、花椒毒酚(7)、珊瑚菜内酯(8)和5-羟基-8-甲氧基补骨脂素(9)。化合物5～7为首次从明党参中分离得到,其余化合物均为首次从该植物根皮中分离得到。     

明党参药材水溶性活性成分的研究

为研究明党参药材水溶性活性成分,本文采用水提取、大孔树脂吸附和硅胶柱层析等方法对其进行分离,通过物理化学性质和紫外光谱、红外光谱、质谱、1H核磁共振、13C核磁共振等手段进行结构鉴定.从30%乙醇洗脱部位中分得8个单体化合物,分别鉴定为琥珀酸(Succinic acid,1)、胡萝卜甾醇(daucosterol,2)、5-羟基-8-甲氧基补骨脂素(5-hydroxy-8-methoxy-psoralen,3)、对甲氧基肉桂酸(4-Methoxycinnamic acid,4)、5-羟基-8-甲氧基补骨脂苷(8-methoxy-5-O-β-D-glucosyloxypsoralen,5)、D-甘露醇(D-mannitol,6)、(S)2-羟基苯丙酸((S)2-hydroxyphenylpropionic acid,7)和(R)2-羟基苯丙酸((R)2-hydrexyphenylpropionic acid,8).化合物4、5、7、8为首次自明党参药材中分得,5-羟基-8-甲氧基补骨脂素及其苷系首次从该植物中同时分得.     

长松萝多糖的研究

长松萝经三氯甲烷抽提后风干,用热水提取,乙醇沉淀,经微晶纤维素柱层析纯化,得白色粉末状多糖USL。USL经Sephadex G-150柱层析证明为一组均匀多糖,其糖的含量为89.52％。经气相色谱检定,由阿拉伯糖(Ara)、木糖(Xy1)、甘露糖(Man)、葡萄糖(Glc)聚合而成,其克分子比为0.31:0.05:1.00:18.10。经Sephadex G-200柱层析测定,平均分子量为30×10~4,经高碘酸氧化,Smith降解,有甲酸、丙三醇、赤藓醇生成。红外光谱在896cm-~1处有吸收,证明USL多糖结构主要以β(1→4)、β(1→6)甙键连接而成的杂多糖。     

Beta proteobacterium sp.T1菌株产壳聚糖酶的分离纯化

目的:分离纯化Beta proteobacterium sp.T1菌株所产的壳聚糖酶.方法:采用(NH4)2SO4(20%～70%)分级盐析、阴离子交换树脂DEAE Cellulose 52柱层析、SephadexG-100柱层析技术进行分离纯化,采用SDS-PAGE鉴定酶的纯度、分子量.结果:经DEAE Cellulose 52柱层析,壳聚糖酶纯化了13.19倍;经Sephadex G-100柱层析,壳聚糖酶纯化了26.32倍.结论:纯化后的酶经SDS-PAGE鉴定已达到电泳纯,分子量29.5kDa.     

伞形科植物明党参花后果实发育的解剖结构变化

对中国伞形科(Apiaceae)特有种类明党参(Changium smyrnioides Wolff)花后果实发育过程中果实横切面的解剖结构变化进行了比较观察.结果表明:在幼果发育阶段、中果发育阶段(包含中果期Ⅰ、中果期Ⅱ和中果期Ⅲ)和熟果发育阶段(包含熟果期Ⅰ、熟果期Ⅱ和熟果期Ⅲ),明党参果实横切面的大小和形状、果壁(包括外果壁、中果壁和内果壁)厚度及其细胞形态和层数、合生面结构、胚乳形状及大小、外胚乳存在与否、珠心退化与否以及维管束形态等特征均有明显的变化.在整个发育过程中,明党参分生果横切面的形状由近五边状圆形变化至肾状圆形;果壁由厚变薄且细胞层数逐渐减少;胚乳逐渐增大,从半圆形变化为新月形、马蹄形直至“C”形;外胚乳逐渐消失,珠心逐渐退化;合生面的细胞离层越来越明显直至完全分离.此外,明党参果实中油管和维管束数量变化较小,油管可分为维管束伴生油管和果壁油管;合生面有果壁油管4～6个,此特征与明党参属(Changium Wolff)的相关描述不一致.     

半枝莲多糖的分离、纯化及其理化性质

唇形科植物半枝莲全草的热水提取液经乙醇沉淀、去蛋白、逆向流水透析、DEAE-纤维素柱层析和Sephadex G-100柱层析得纯品半枝莲多糖(S-BP)。凝胶过滤及聚丙烯酰胺凝胶电泳证明为单一均匀成分。SBP的比旋度为[α]_D~(20)=+26.2°,不含氮,分子量13000,具有890cm~(-1)红外吸收峰。经纸层析和气相色谱分析,SBP含鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,其克分子比为1.14:1.50:0.20:0.75:1.0:2.18。     

濒危植物明党参种群生存过程研究

对中国特有单种属濒危植物明党参杭州种群的生存过程进行了数量分析。针对难以测量明党参个体年龄的问题 ,基于实验数据利用 L ogistic生长模型估算其年龄并得到可估测年龄最高界限为 5 0 a。数量分析表明 ,目前明党参种群表现出衰退趋势 ,种群年龄结构类似于老年型 ,种群的净增殖率、瞬时增长率和周限增长率均较低 ,世代周期较长。运用 L eslie矩阵模型分析预测未来 30 a中种群个体数量将呈现出下降趋势。在所研究的样地中 ,明党参种群种子萌发和幼苗期 (0～ 5 a) ,成熟期 (15～2 5 a)和老年期 (4 5～ 5 0 a)受到了环境筛的强烈作用     

满山香种子中化学成分研究

为研究满山香种子的化学成分,采用满山香种子经75%乙醇提取、溶剂萃取、硅胶柱层析、SephadexLH-20柱层析和硅胶制备薄层层析等方法,分离得5个单体化合物,分别鉴定为:杨梅素(myricetin,Ⅰ)、对苯二酚(1,4-dihydroxybenzene,Ⅱ)、香草酸(vanillicacid,Ⅲ)、β-胡萝卜苷(dauosterol,Ⅳ)和银杏双黄酮(ginkge-tin,Ⅴ)。以上化合物均为首次从该植物中分得。     

子宫动脉栓塞术后经阴道与经宫腔镜治疗外生型剖宫产瘢痕妊娠临床疗效分析

目的:探讨子宫动脉栓塞术后经阴道与经宫腔镜治疗外生型剖宫产瘢痕妊娠(CSP)的临床疗效。方法:回顾性分析2013年10月至2015年5月哈尔滨医科大学附属第一医院收治的56例确诊为外生型CSP患者的临床资料,其中26例行子宫动脉栓塞术后经阴道切除外生型瘢痕妊娠病灶(经阴道手术组),30例行子宫动脉栓塞术后经宫腔镜切除外生型瘢痕妊娠病灶(经宫腔镜手术组)。比较两组患者的手术成功率、术中出血量、术后住院时间、住院费用、血HCG下降至正常时间及不良反应的发生情况等。结果经阴道手术组26例患者手术全部成功成功率为100%。经宫腔镜手术组30例患者中22例手术成功,8例因术中子宫穿孔改行腹腔镜或经腹外生型瘢痕妊娠病灶切除及子宫修补成功率为73.3%显著低于经阴道手术组差异有统计学意义(P0.05)。经阴道手术组患者的术中出血量[(20.58±6.1)mL]及住院费用((8833.04±491.5)元)明显低于经宫腔镜手术组[(69.03±7.8)mL](P0.001)、(14908.79±325.5)元(P0.001)。结论:子宫动脉栓塞术后经阴道与经宫腔镜两种术式均能达到较理想的治疗效果;经阴道治疗外生型CSP可行性强于经宫腔镜手术更安全、有效,值得临床推广。     

基于psbA-trnH序列变异分析川明参属亲缘关系及分类地位

采用PCR直接测序法对伞形科(Apiaceae)前胡族(Trib.Peucedaneae)种类川明参(Chuanminshen violaceum Sheh et Shan)、泰山前胡〔Peucedanum wawrae(H.Wolff)Su〕和华中前胡(P.medicum Dunn)以及美味芹族(Trib.Smyrnieae)种类明党参(Changium smyrnioides H.Wolff)、宝兴棱子芹(Pleurospermum davidii Franch.)、丽江棱子芹(P.foetens Franch.)和鸡冠棱子芹(P.cristatum de Boiss.)的叶绿体基因组psbA-trnH片段进行了扩增测序,获得的序列已提交至GenBank,登录号为KF557756—KF557762。结合引自GenBank的前胡族阿魏属(Ferula Linn.)1种、大瓣芹属(Semenovia Regel et Herder)1种、当归属(Angelica Linn.)2种和美味芹族的舟瓣芹属(Sinolimprichtia H.Wolff)1种、羌活属(Notopterygium de Boiss.)1种、瘤果芹属(Trachydium Lindl.)1种以及针果芹族(Trib.Scandicineae)刺果芹〔Turgenia latifolia(Linn.)Hoffm.〕的psbA-trnH片段序列,对各种类的psbA-trnH片段信息进行分析;并以刺果芹为外类群构建了MP、ML和BI系统发育树。结果表明:川明参和明党参的psbA-trnH片段长度均为258 bp、GC含量均为23%,而其他种类的psbA-trnH片段长度为228~405 bp、GC含量为26%~35%;排序后psbA-trnH序列总长度为553 bp(包括空位),其中变异位点237个、信息位点178个。川明参与明党参间的相对遗传距离最小(仅为0.02),而川明参与其他种类间的相对遗传距离为0.10~1.34,且总体上川明参与美味芹族种类的相对遗传距离较小,表明川明参与明党参及美味芹族种类的亲缘关系较近。在3类系统树上,川明参与明党参均聚在一起,并与美味芹族的属种聚为一大支,而远离由前胡族属种构成的另一大支。结合外部形态和果实解剖结构特征,建议将川明参属(Chuanminshen Sheh et Shan)从前胡族中分出并置于美味芹族中,与明党参属(Changium H.Wolff)为姐妹类群。     

锁阳多糖的提取及纯化工艺

目的:优化锁阳多糖(Cynomorium songaricum polysaccharide,CSP)的提取纯化工艺.方法:回流提取法提取CSP,以CSP得率为评价指标,在单因素试验的基础上,结合正交试验对提取工艺进行优化;以蛋白脱除率和多糖保留率为考察指标,比较Sevage法、TCA法、醋酸铅法及木瓜蛋白酶法对CSP...     

珍稀药用植物明党参呋喃香豆素成分累积分布研究

采用HPLC法测定明党参不同器官、不同生长期中珊瑚菜内酯、5-羟基-8-甲氧基补骨脂索的含量.结果表明,明党参根、茎叶、花葶及果实均含有2种呋喃香豆索,2种呋喃香豆素总量,根中以6月为最高,为163.8467 pg/g;茎叶以1月为最高,为606.1023μg/g;花葶以6月上旬(生长发育接近成熟时)为最高,为117.1185μg/g;果实以成熟期为最高,达1070.6326μg/g.提示明党参药用器官(根)和非药用器官(茎叶、花葶、果实)为天然呋喃香豆索优质药用植物资源,具有广泛开发利用的前景.     

明党参内生菌的分离鉴定及其对金黄色葡萄球菌的抑制作用

研究郑州市栽培明党参内生菌资源状况,筛选出对金黄色葡萄球菌具有拮抗作用的内生菌。采用平板培养法从明党参中分离内生细菌,通过混菌法和牛津杯双层平板扩散法筛选出对金黄色葡萄球菌具有明显抑制作用的菌株,并通过培养特征、形态特征、生化特征、全自动微生物质谱检测、16S rDNA基因序列分析和系统进化树分析对菌株进行了分类学鉴定。在明党参中共分离到29株内生细菌,通过初筛和复筛后,筛选出对金黄色葡萄球菌具有明显抑制作用的4株菌株NMY1、NMJ10、NMG10、PMG3,其中NMJ10对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径达20.3 mm,经鉴定菌株NMJ10和菌株PMG3为芽胞杆菌属新菌种(Bacillus spp.),菌株NMY1为枯草芽胞杆菌(B.subtilis),菌株NMG10为假蕈状芽胞杆菌(B.pseudomycoides)。明党参内生菌具有多样性,其中芽胞杆菌属为优势菌株,有拮抗金黄色葡萄球菌活性高的菌株存在,其代谢产物对金黄色葡萄球菌有较高抑制作用,为抗菌药源成分的开发提供了新的来源。     

明党参叶柄愈伤组织的诱导与植株再生

植物名称:明党参(Changium smyrnioides)。材料类别:幼叶柄。培养条件:将材料用自来水洗净后,用70％酒     

剖宫产瘢痕妊娠治疗方案的探讨

目的:探讨剖宫产瘢痕妊娠(CSP)的合理治疗方案。方法:回顾性分析2007年1月至2013年12月我院收治的26例CSP患者的临床资料,对其病史、临床表现、处理及结局进行总结分析,重点探讨其治疗方案与预后的关系。结果:采用的治疗方式包括口服米非司酮配伍米索前列醇后超声监测下清宫术6例、超声监测下局部甲氨蝶呤注射3例、全身甲氨蝶呤注射后清宫术2例、子宫动脉(化疗)栓塞后清宫术16例、经腹病灶切除术1例、经腹全子宫切除术1例。前三种方法尽管具有一定的成功率,但均有较高的术后大出血风险。子宫动脉(化疗)栓塞在CSP的初始及抢救治疗中均具有很高的成功率。结论:CSP治疗方案的选择需根据患者的病情、妊娠部位、生育要求等多方面进行综合考虑。在现有的治疗方案中,子宫动脉(化疗)栓塞后清宫术具有较大的优势。     

基于时间生态位在城市绿地中再引入濒危植物明党参

城市绿地作为珍稀濒危物种的保护和保存地日益受到关注,然而对其保护潜力缺少定量研究。本文通过调查亚热带城市杭州市和宁波市明党参(Changium smyrnioides)的野外生境和测定明党参的生理生态参数,确定了该种的时间生态位;进而在城市绿地中开展调查,寻找与该种野外相似的生境,分析将明党参再引入到城市绿地中的潜力和方式。结果表明,明党参分布于亚热带东部森林的落叶树下,落叶树无叶期为11月到次年4月,此时林下的光照和热量条件适宜于明党参生长。明党参12月至次年1月萌发,光热条件最适宜的3月进入快速光合和生长期,5月开花、光合变弱,6月种子成熟后休眠;在杭州市和宁波市绿地中,落叶树种分别占乔木树种总数的62%和60%,这些落叶树的林下都具有栽培明党参的潜力;由展叶物候期在4月的重要落叶树以及与野外相同或相近的落叶树提供的林下生境最适合引入明党参;目前杭州市和宁波市的城市绿地分别具有18.97和18.42km2的潜在可引种生境。若将这些生境充分利用,分别可引种1.01×10~8和0.98×10~8株明党参。     

九里香多糖和蛋白多糖的分离、纯化和分析

九里香(Murraya Paniculata L.Jack)皮部经热水提取、乙醇沉淀、SephadexG—100柱层析分离、磷酸氢钙吸附、酸溶,再通过Sephadex G-200柱层析纯化,得到灰白色粉末状九里香蛋白多糖。总糖含量为52.1％(其中葡萄糖醛酸含量为10.9％),蛋白质含量为20.0％。九里香蛋白多糖去蛋白后,即得九里香多糖,总糖含量为88.2％(其中葡萄糖醛酸含量为20.0％),经纸层析和聚丙烯酰胺凝胶园盘电泳鉴定为单一斑点和单一区带。平均分子量约为1.7×10~(-5)。组成单糖的摩尔比为葡萄糖:露甘糖:木糖:阿拉伯糖:岩藻糖:葡萄糖醛酸=1.0:0.40:0.16:0.17:0.20:0.48.     

极地真菌Geomyces pannorum SA3-2-YM次级代谢产物的研究

采用聚酰胺柱层析、硅胶柱层析、反相硅胶柱层析、凝胶柱层析和高效液相HPLC等色谱技术,对极地真菌Geomyces parmorum SA3-2-YM的发酵液提取物进行分离纯化,共得到13个化合物,通过NMR和MS等波谱数据确定结构为:cyclo-(L-Trp-L-Pro)(1)、cyclo-(L-Trp-L-Tyr)(...     

西花蓟马化学感受蛋白的cDNA克隆、时空表达分析及组织定位

【目的】研究西花蓟马Frankliniella occidentalis化学感受蛋白(chemosensory proteins,CSPs)在其嗅觉及化学感受系统中的作用。【方法】利用RT-PCR和RACE技术克隆西花蓟马化学感受蛋白基因,用DNAMAN软件进行序列分析,使用BLAST进行同源性比较,采用MEGA6的Neighbor-joining法构建了进化树。通过实时定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测了西花蓟马不同发育期以及成虫不同组织(触角、头、足、胸、腹)中该基因的表达谱。免疫新西兰大白兔制备了Focc CSP1蛋白抗体,与样品切片中Focc CSP1蛋白以及10 nm胶体金颗粒偶联的羊抗兔二抗反应,经透射电镜观察,对该蛋白在西花蓟马成虫组织中进行免疫定位。【结果】克隆并鉴定了一个西花蓟马化学感受蛋白基因,命名为Focc CSP1(Gen Bank登录号:KM527949)。该基因c DNA序列全长597 bp,完整开放阅读框(ORF)288 bp,编码95个氨基酸,成熟蛋白分子量11.377 k D,等电点4.72,具有化学感受蛋白典型的4个保守半胱氨酸位点特征。Focc CSP1与东亚飞蝗Locusta migratoria Lmig CSP(Gen Bank登录号:CAJ01476.1)的氨基酸序列一致性最高,进化关系最近。Focc CSP1在西花蓟马不同发育阶段和成虫不同组织中均有表达,在羽化1 d的雌虫中相对表达量最高,其次是2龄若虫,蛹和成虫后期表达量最低;在触角和足中相对表达量较高。成功构建了重组表达质粒p ET-30a/Focc CSP1,并诱导表达,经Ni柱纯化,获得目的蛋白;免疫定位表明,该蛋白在西花蓟马触角、足、头等部位血淋巴中均大量存在。【结论】明确了西花蓟马化学感受蛋白基因Focc CSP1的核苷酸、氨基酸序列特征。Focc CSP1广泛分布在西花蓟马多个组织及各个发育期,据此推测该基因可能在西花蓟马嗅觉识别、感受机械刺激以及调节生长发育等方面扮演重要角色。     

金环蛇(Bungarus fasciatus)蛇毒类心脏毒素的纯化及生化分析

金环蛇(Bungarus fasciatus)蛇毒经磷酸纤维素P11柱层析分离所得的第8峰(即类心脏毒素),再经磺乙基—葡聚糖凝胶G—25柱层析分离得8A、8B。再将8A、8B分别经葡聚糖凝胶G—50柱层析,得纯化的类心脏毒素A、B。经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单一的条带。无酶活性。其氨基酸组成及含量基本与Shiau Lin 1975等所测定的结果一致。