生物工程技术讲座(九)

双链的DNA分子是由一条单链上的碱基与另一条单链上碱基相配对组成。分子中的碱基腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T)间有两处,鸟嘌呤(G)和胞嘧啶(C)间有三处通过氢(H)结合配对,形成双链间的对应互补。由H在双链分子间形成的结合虽稳定,但是可逆的即经加热或碱     

问：怎样理解DNA分子空间构象的相对稳定性？

问：怎样理解ＤＮＡ分子空间构象的相对稳定性？答;ＤＮＡ分子结构稳定性主要是指其空间构象（即双螺旋结构）的相对稳定性。ＤＮＡ空间构象的稳定性原因有三：第一个原因是ＤＮＡ分子中存在大量的氢键。根据对碱基构象的研究,发现在腺源吟Ａ和胸腺闻咤Ｔ之间可以形成２...     

《生物工程讲座》名词解释(Ⅰ-Ⅳ讲)

1.bp碱基对。DNA长度的单位。1000bp=1kb。 2.kp千碱基对。参见bp。 3.A,G,T,C DNA双链上四种脱氧核苷酸(或其碱基)的符号,A为脱氧腺嘌呤核苷酸,G为脱氧鸟便嘌呤核苷酸,T为脱氧胸腺嘧啶核苷酸,C为脱氧胞嘧啶核苷酸。在双链上。A恒与T配对,G恒与C配对。在RNA链上,四种核苷酸的符号为A,G,u,c,相应为腺嘌呤核苷酸,鸟便嘌呤核苷酸,尿嘧啶核苷酸和胞嘧啶核苷酸。     

DNA碱基组成的比较研究

当把各种生物的DNA中碱基鸟嗦吟和胞 嚓咤(G十C）含量进行比较时,可以看出病毒 DNA和原核细胞细菌DNA中G十C含量变 化范围非常宽,分别为30.9-73多和22.8一 73关。真核细胞原生生物的DNA中G十C含量 变化范围也呈类似情况,G+C占碱基组成的 23-65多。我们注意到昆虫纲中DNA的G+C 含量变化范围则显著缩小,为31.9-41.6%, 在鱼纲、两栖纲、鸟纲和哺乳纲中的DNA的 G十C含量变化范围,则进一步缩小,变化范围 皆为40-45拓,含量变化相差只有4-5务。由 此可以看出,在生物演化过程中,各类生物 DNA中G+C含量变动范围趋于缩小,并趋 于稳定在G十C占DNA碱基组成的4。一料多 范围〔工,。笔者曾制备家蚕蛹生殖腺（翠丸和卵 巢）DNA,并对其碱基组成进行分析^[2]。本文 报道大鼠和鲤鱼辜丸DNA的制备及其紫外吸 收特性和碱基组成分析。     

谈谈DNA的碱基配对

在高中“生物”课讲脱氧核糖核酸(DNA)的分子结构,介绍碱基互补配对原则时,学生常会向老师提出:为什么腺嘌呤(A)一定与胸腺嘧啶(T)配对,鸟嘌呤(G)一定与胞嘧啶(C)配对。从如下几方面解释可较圆满地回答这个问题: 1.每种生物双链DNA的四种碱基都是腺嘌呤(A)的百分比等于胸腺嘧啶(T)的百分比;鸟嘌呤(G)的百分比等于胞嘧啶(C)的百分比。     

人与小鼠染色体的免疫化学的差异

自从1972年Dev等〔13报告了荧光标记的 抗一腺嘿吟的抗体结合至用热与甲酸胺变性过 的人的中期染色体以后,用抗一腺嘿吟与抗一胞 吻咤的抗体进行研究已日趋广泛［[2,31。其结果 提示人们,利用抗核普酸血清的免疫学技术可 获得很多关于染色体结构的知识并可能找到一 种新的免疫化学的染色体分带。本文就是应用 一种新的ABC (Avidin-Biotin-peroxidase-Complex) 免疫化学的方法〔4,51,用抗一胸腺嚓淀脱氧核昔 抗血清标记人与小鼠的染色体,观察二者的区 别,从而提供一种新方法,即能在杂交瘤细胞中 区分人与小鼠的染色体。     

遗传物质的损伤与修复

核酸(DNA和RNA）是遗传物质。对于细 胞生物学来讲,它们都以DNA作为遗传的分子 基础,遗传信息以遗传密码的方式贮存于DNA 分子中的核普酸（或简单地说是有机的碱基即 9-咤和a吟）的排列顺序之中。     

Watson-Crick模型的修饰

一、引言 26年前,Watson-Crick提出了DNA的双螺旋结构模型。他们指出,DNA通常是双股的,并以糖-磷酸酯骨架反平行走向。碱基是按着腺嘌呤与胸腺嘧啶、鸟嘌呤与胞嘧啶的方式配对。这是由大量实验支持的。鸟嘌呤与胞嘧啶以三个氢键牢固地配对,腺嘌呤与胸腺嘧啶配对则有所变动。现在似乎这种配对时的构象     

DNA数字化的数学基础与氨基酸配对规律分析

根据已经发现的DNA碱基配对规律,证明DNA只能有两种类型的氢键和碱基,一种类型的氢键和一种类型的碱基两两组合,正好得到四种具体的碱基,从而发现DNA的数学基础是只能由两套二进制系统组合成的精准碱基配对结构。用这两套二进制系统组合,得到一对决定每个具体碱基的唯一二进制数字组。对DNA的碱基链数字化,用碱基配对的规律,找到碱基二进制数字组的配对规律。利用这个规律,去编制已经发现的遗传密码表,发现氨基酸也按照碱基二进制数字组的配对规律,进行严格的配对,而且两种氨基酸之间的配对方式,可以表现出多种类型。这一规律,能够解释机体中蛋白质的动态变化和许多神秘的配对现象。     

紫外线为何能杀死病菌？

紫外线为何能杀死病菌？答：紫外线照射引起病菌细胞的核酸ＤＮＡ链的磷酸二脂键和氢键断裂,胸腺嘧啶（Ｔ）与胞嘧啶（Ｃ）的水合作用以及胸腺嘧啶的二聚体（ＴＴ）形成,这样便引起ＤＮＡ双链结构扭曲变形,阻碍碱基间的正常配对,破坏ＤＮＡ模板的正常功能,影响双链的...     

DNA鸟嘌呤四联体研究进展

鸟嘌呤(G)四联体(G-quadruplex,G4),是指在DNA或RNA链中,富含G碱基的区域通过Hoogsteen氢键配对使G环互联形成的一种四链二级结构。人和动物的研究结果表明,G4广泛参与了DNA复制、转录、翻译和端粒结构维持等一系列基本的生物学功能。相比之下,植物G4生物学功能研究严重滞后。综述了人和动物DNA G4的研究方法,生物学功能及其可能的作用机制等研究进展;总结了植物G4的研究现状及其可能的生物功能;最后展望了G4在人类疾病诊断和治疗,农用物分子育种等方面的应用前景。     

细菌分类学中日益重要的DNA体外杂交方法

由于微生物分类学中日益广泛应用分子生物学和遗传学成就,例如DNA中G C克分子%、核甙酸序列的相似性和基因组大小等,使人们对微生物的认识从表型相似性逐步深入到遗传本质的相关性,从而探索其间的亲缘关系。DNA链由腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T)、鸟嘌呤(G)和胞嘧啶(C)四种碱基和脱氧核糖及磷酸相连而成,其中碱基的组成和排列直接关系着决定性状的“遗传密码”。因此,这些测定项目是本质性的。从最近的     

核酸分子中碱基含量的计算

关于核酸分子中碱基含量的计算,在遗传学和高中生物教学中相当重要,但在教科书中通常没有专门讲述。我们根据碱基互补配对规律及中心法则进行归纳总结,从DNA结构、DNA复制、转录、翻译等方面探讨了DNA、RNA、蛋白质3者之间的关系,分析了核酸分子中碱基的含量。互核酸分子中碱基含量的计算1．且已知双链DNA分子中一种碱基的含量,推断其他碱基的含量：例1：一双链‘DNA分子中,（A－C）占碱基总量的Zo％。求A、T、G、C各占多少？解：在双链DNA分子中,据规律知,1．2由碱基含量推断核酸分子的结构——单链或双链、DNA或RNA…     

G四链体结构及其稳态

G四链体(G-quadruplex)是一种由DNA或者RNA构成的非典型核酸二级结构,广泛存在于生物体内,调节基因转录、复制等功能。然而,在生物体中,具有G四链体的核苷酸序列特征的片段并不一定能够形成由Hoogsteen键连接的G四链体结构。多种因素能够调控G四链体结构展开-折叠动态平衡:阳离子能够促进G四链体结构折叠; DNA/RNA解旋酶、转录因子能使G四链体结构展开、分子伴侣可促进G四链体结构折叠;小分子配基能够稳定G四链体结构促进其折叠;互补配对碱基序列、loop区长度也会影响G四链体结构展开-折叠过程。本综述旨在阐述影响G四链体结构展开-折叠动态平衡的因素,并为以后研究G四链体的调控机制和方向提供思路和依据。     

Sulfolobus acidocaldarius DNA聚合酶IV跨越损伤合成能力的酶学特征

[目的]以嗜酸嗜热硫化叶菌Sulfolobus acidocaldarius的DNA聚合酶IV （Saci_0554）为例,表征其跨越模板上损伤碱基的DNA合成效果。[方法]将DNA聚合酶IV （SacpolIV）在大肠杆菌中进行重组表达,经亲和层析纯化得到SacpolIV蛋白;利用人工合成的带有不同损伤的寡核苷酸片段作为模板DNA,用尿素变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,鉴定SacpolIV在体外跨越各种损伤碱基进行跨损伤合成的催化能力。[结果]SacpolIV重组蛋白能够不同程度地跨越嘌呤和嘧啶损伤,跨越能力的高低取决于损伤碱基与正常碱基形成氢键的能力。本研究还发现,SacpolIV能够在DNA链中掺入核糖核苷酸,但掺入核糖核苷酸的效率低于脱氧核糖核苷酸。[结论]本研究证实SacpolIV具有很强的跨越损伤合成能力,能够跨越多种氢键配对能力减弱的损伤碱基,为其在细胞内的跨越损伤合成功能提供了生化证据。     

核酸原位杂交及其应用于哺乳动物基因定位的进展

核酸原位杂交应用于基因定位的研究是在七十年代发展起来的。这一技术的基本原理是利用核酸分子的碱基顺序配对的互补性(A:T,G:C),将已知的有同位素标记的外源核酸与细胞标本的染色体上经过变性解聚后的单链 DNA,通过二者特定碱基顺序的互补,结合成专一性的核酸杂交分子,经放射自显影方法     

用DNA探针检定细菌

<正> 在现代细菌分类学中,作为比较菌种间类似性的最终手段,极其重视比较其全染色体DNA的碱基序列。如果菌株间有70％以上的碱基序列相同,则为同一菌种,否则,就是相异菌种。尽管是比较全染色体碱基序列的相同性,但并不是直接比较决定DNA的碱基配对,而是测定某种细菌的两条DNA链中的一条链,与另一种细菌的一条DNA链反应时,用多大比例才能形成双链DNA,进而推测其相同性。     

Ser-His-Gly·核酸缀合物的合成

寡核苷酸碱基间有强烈的相互作用 ,基本上按照碱基互补配对原则 ,形成稳定的二级结构和三级结构 ,如发夹、双链、三链、G 四聚体、假结等 ,可以作为分子的骨架。短肽上可有氨基、羧基、咪唑基、羟基等活性官能团。现把酶活性中心常见的丝氨酰 组氨酸作成丝氨酰 组氨酰 甘氨酰苏氨醇 (Ser His Gly Tol)的亚膦酰胺单体 ,并参入到一条能形成三链的寡核苷酸中间 ,发现仍能高亲和力地形成三链 ,Kd 为 0 .5 μmol/L。     

假互补肽核酸及其分子生物学效应

假互补肽核酸（pseudocomplementary peptide nucleic acids,pcPNAs）是肽核酸（peptide nucleic acids,PNA）的一种衍生物,通过碱基修饰可以使pcPNAs 同时与双链DNA两条链中相应的靶序列结合;而在pcPNAs识别靶序列并结合时,pcPNAs自身两条链间由于空间位阻作用,不会自身互补结合. pcPNAs与DNA、RNA甚 至肽核酸相比具有独特的杂交特性,因此具有非常广泛的分子生物学效应.本文就pcPNAs寡聚体的结构、与核酸杂交的特点及杂交模式,分子生物学效应以及应用等 方面进行介绍.     

遗传学实验

（十八） 姊妹染色单体色差方法实验原理 在DN人复制过程中,5-澳脱氧尿咯吮核昔(5- Bromodeox y-U ridine简称BrdUrd）掺入新合成的DNA 链,并占有胸腺咯咤(Thymidine, T）的位置,所以哺 乳类细胞在含有BrdUrd的培养液中经历两个分裂周 期的培养之后,其两条姊妹染色单体的DNA双链在化 学组成上就有了差别：即一条染色单体的DNA双链 之一含有BrdUrd,而另一染色单体的DNA双链都含 有BrdUrd,这样的细胞经过制片和荧光素染色后,就 能观察到两条明暗不同的染色单体。二股都有BrdUrd 的姊妹染色单体发出的荧光较强,其中只有一股有 BrdUrd的单体荧光较弱。利用这种方法,可以清楚地 看到姊妹染色单体交换的情况（图18-1)