以细胞遗传学方法评定辐射防护药的新程序——Ⅰ.小鼠骨髓有核细胞微核测定筛选辐射防护药的研究

长期以来,在辐射防护药的筛选实验中,一直沿用以全致死或50％致死剂量照射的小鼠作为筛选模型,以照后30天活存率为评定指标。虽然死亡率是较客观,也是较易观察的指标,但费时,需要的动物数量多,还易受一些外界因素诸如气候、季节、营养等等的影响。对于一些防护效价较低的化合物,往往不易得出确定的结论。因此寻找简易、快速、灵敏与死亡又有较好相关性的评定指标,就成为研究辐射防护药的一项重要课题。     

以细胞遗传学方法评价辐射防护药的新程序 Ⅲ.以整体给药、离体照射的人类淋巴细胞染色体畸变评价胱胺的辐射防护效果

在辐射防护药的临床过渡工作中,根据动物实验结果推算人体试用效价,由于临床上不可能找到合适的急性放射病人来进行验证,如何肯定其对人类的真正防护效果,仍是一个急待解决的问题。 在目前采用的两种评定模型中,即离体照射的外周淋巴细胞体系和放射治疗的肿瘤病人,常以淋巴细胞染色体畸变率作为指标来评定辐射防护药的人体防护效果。由于这     

用染色体畸变评价辐射防护药的新方法

在辐射损伤化学防护的研究中,如何定量地评价动物实验有效的辐射防护药,外推于人类的防护效果,是当前一项十分重要的研究课题。细胞遗传学方法即染色体畸变分析,由于畸变率和照射剂量之间有密切的关系,用外周淋巴细胞染色体畸变率作为生物剂量     

食管癌病人放射治疗时外周淋巴细胞微核率的变化以及和染色体畸变率的关系

在辐射诱发的染色体畸变中,除了倒位和相互易位外,几乎都伴有断片的产生。在间期细胞中,这种染色体断片呈现为大小不等的圆形或椭圆形结构,称为微核。观察微核率的变化,称为微核测定。近年来,由于微核测定具有方法简便、观察迅速、鉴别比较容易等一系列特点,在辐射损伤的诊断、辐射防护药的筛选、辐射的细胞遗传学效应研究等     

狗和猴离体血液丙线照射后淋巴细胞酸性磷酸酯酶活力改变与辐射剂量的关系

本文用细胞化学的方法证实了在不加培养基的狗和猴离体血液中,淋巴细胞形志及Acp活力在24小时内仍能保持正常。在上述条件的基础上得出了离体血液丙线200、300、400及600拉德照射后,淋巴细胞Acp活力“4”分型改变与辐射剂量相关的方程。 文中还就离体血液丙线照射后Acp活力测定应用于生物剂量估算、某些抗放药物效价的验证以及照射后淋巴细胞Acp活力改变的机理作了初步讨论。 作者曾在丙线外照射中小剂量诊断指标的研究过程中,观察到家免的外周血液淋巴细胞酸性磷酸酯酶(Acp)活力与受照剂量之间存在线性关系 (顾远锡,1980)。以后又发现具有抗放作用的胰岛素对丙线照射狗的外周血液淋巴细胞Acp活力有一定的保护作用 (顾远锡,1980)。这些结果提示,外周血液淋巴细胞Acp活力的测定有可能作为受照剂量的估算方法,并可用来判断某些抗放药物的效价。后经动物实验证实了上述设想 (顾远锡,1981)。剂量估算方法和药物效价判断的应用,其主要对象是人,但是在人身上是无法进行整体照射情况下淋巴细胞Acp活力的剂量—效应关系的研究。进一步设想如果动物及人的离体血液经照射后,其淋巴细胞Acp活力与照射剂量之间仍存在线性关系,而且在给抗放药后取血照射仍能看出药物的保获作用,则这一生物指标不仅有可能用于整体动物     

Co_Y一线照射离体人血诱发的琳巴细胞微核与剂量的关系

微核测定法是细胞遗传学的方法之一, Matte：等Iill首先用啮齿类动物骨髓细胞微核率 来测定疑有诱变活力的化合物,并称之为微核 侧定法。Heddle^[8]推荐使用这种简便而迅速的 方法来衡量染色体损伤。目前,该方法已广泛 用于评价理化因子诱变活力的研究上。辐射诱 发微核这一问题已有不少报道,都证明淋巴细 胞微核率和辐射剂量有密切关系^[1,2]。有的工 作还证明动物的整体照射和离体实验的效应是 一致的。这就提示了一种可能：用离体照射人 血所得到微核率的剂量效应曲线来估计事故条 件下人员所受的剂量。本实验的目的是建立 淋巴细胞微核率与辐射剂量之间关系的刻度 曲线,作为估计事故受照人员剂量的参考指 标。     

鱼类血细胞的微核测定

微核测定方法简便、易行。对化学致癌剂——诱变剂的检测（Schmid,1976),辐射损伤的诊断和辐射防护药的评价（施立明等,1975;1979;1980）等方面灵敏度强,所获结果可靠,并可重复,因此得到了广泛的应用。实验用的动物种类除人以外,有小鼠、大鼠、狗等,供试的器官组织有骨髓、外周血淋巴细胞、肝细胞、生殖细胞(Lcdebur,1973;Schmid,1975;Lahdetic,1981)。在哺乳动物以外的脊椎动物中,     

35种辐照食品食用安全性评价研究— 外周血淋巴细胞微核率观察

辐照保藏食品的技术可以带来很大的经济 效益。但人们普遍关心食用后是否安全，尤其 关注它食用后的致突变效应。尽管国内外已有 了大量的动物实验表明它是安全的，但人体试 食的研究却具有特殊重要的意义。Schmid等 人‘习建立的微核测定方法，现在已广泛应用于 筛选未知的潜在致突变物，是一个简便、可靠而 又比较灵敏的指标。本文对35种辐照食品，经 混合配膳后，给70名健康青年学生（分为试验 组和对照组两组）食用90天，采用浓集法和培 养法检测外周血淋巴细胞微核率，观察食用后 的致突变效应。     

盐糔对氨基偶氮苯对致死量~(60)钴γ—线照射小鼠的预防作用

盐酸对氨基偶氮苯对用~(60)钴γ—线致死量照射的小鼠具有显著的辐射防护作用。照射前不管供口服或腹腔注射,其有效剂量均为50毫克/公斤体重。此药的优点:口服和腹腔给药都有效,从给药到出现防护效价的间隔时间较短,而有效剂量范围很宽。并且,此药的化学性质在室温中稳定。此药的一个缺点是形成变性血红蛋白,但是在有效剂量范围内,动物对此药有很好的耐受性。根据我们的初步工作,对此药的辐射防护原理进行了讨论。     

盐酸对氨基偶氮苯对致死量60钴γ——线照射小鼠的预防作用

盐酸对氨基偶氮苯对用60钴γ——线致死量照射的小鼠具有显著的辐射防护作用。照射前不管供口服或腹腔注射，其有效剂量均为50毫克/公斤体重。此药的优点：口服和腹腔给药都有效，从给药到出现防护效价的间隔时间较短，而有效剂量范围很宽。并且，此药的化学性质在室温中稳定。此药的一个缺点是形成变性血红蛋白，但是在有效剂量范围内，动物对此药有很好的耐受性。根据我们的初步工作，对此药的辐射防护原理进行了讨论。     

帕妥珠单抗生物类似药SMMU-27 静脉注射对食蟹猴的重复给药毒性探索研究

目的:观察帕妥珠单抗生物类似药SMMU-27四周静脉注射对食蟹猴的安全性。方法:20只健康食蟹猴按体重随机分为阳性对照组、SMMU-27低、中、高剂量组和辅料对照组,每组4只,雌雄各半。低、中、高剂量组剂量分别为15、150和450 mg/kg,阳性对照组给予150 mg/kg帕妥珠单抗(Pertuzumab),辅料对照组给予空白溶剂(0 mg/kg)。各组动物按相应体重慢速静脉注射给药,给药体积为15 m L/kg,给药速度约5 m L/min。每周给药1次,共给药4周,恢复期4周,期间进行各项毒理学指标检测。结果:一般症状结果显示给药期间与给药后,低、中、高剂量组和阳性对照组陆续有动物出现腹泻症状。高剂量组1只动物在d40时濒死剖解,其最早出现稀便,停药后腹泻状态也未见好转,生化指标显示在d28时碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)升高,在d14和d40时尿素(Blood Urea,BU)升高,总蛋白(Total Protein,TP)、白蛋白(Albumin,ALB)降低。低、高剂量组和阳性对照组均有部分动物白细胞(White Blood Cell,WBC)给药后数值降低,各给药组在d14时及高剂量组和阳性对照组在d28时BU升高或有升高的趋势,恢复期时有恢复趋势。高剂量濒死动物骨髓检查发现核红细胞较多,各阶段粒细胞减少,出现较多裸核;病理检查发现肾脏可见散在多发的中度肾小管扩张,近曲小管上皮轻度变性。其余指标包括一般症状、体重、尿液、心电图、免疫学指标等未见明显与供试品相关的异常变化。结论:SMMU-27主要毒性靶部位是胃肠道(腹泻)、肾脏(血清BU升高)和血液系统(WBC下降),应与这些部位表达供试品结合的相关受体有关,属供试品的药理作用放大和延伸。因此本实验条件下食蟹猴的安全剂量(NOAEL)为150 mg/kg,致死剂量为450 mg/kg。SMMU-27与等剂量阳性对照药物毒性反应基本类似。     

快速测定染色体损伤的微核测定法 Ⅰ.电离辐射对哺乳动物血液中淋巴细胞微核率的影响

本文介绍了用明胶-离心法分离和浓缩血液中淋巴细胞而后制片观察分析其微核出现率,并以此来测定染色体损伤的新方法。应用这种方法测定了大鼠受Co~(60)-r射线照射的剂量-效应和时间-效应;还对受265拉特照射后活存狗的远期效应进行观察。结果表明,与骨髓有核细胞微核测定以及染色体畸变分析的结果是一致的。本文还对其应用价值作了初步的讨论。     

丝裂霉素C诱发大鼠外周血G0期淋巴细胞核损伤指标的比较观察

本文用不同剂量的MMC处理大鼠外周血,放置18小时后直接制备淋巴细胞血涂片,进行观察。实验结果表明,MMC可诱发G_(?)期淋巴细胞的核损伤。本实验对各种核损伤指标进行了比较研究,发现微核、核变形和核碎裂等指标与MMC剂量间有很好的相关性。作者认为,大鼠外周血G_(?)期淋巴细胞核异常测试法比传统的微核测试法更敏感、合理,在致突变试验中可作为初筛的体外短期测试法,值得进一步研究。     

菖远胶囊给大鼠长期大剂量用药的安全性评价

目的：研究菖远胶囊对大鼠长期大量用药后的安全性影响。方法：通过对大鼠连续灌胃菖远胶囊13周、26周和停药4周,分别与正常对照组比较血液、生化、病理学检查结果。结果：①菖远胶囊各剂量组给药后5～30 min动物自主活动有所减弱,30 min后自主活动逐渐恢复正常,各剂量组大小便颜色偏深,高剂量组比较明显,停止给药后,上述症状均恢复正常;②大鼠血液细胞学、生化学指标中有个别指标在给药初期（13周）出现明显差异,继续给药至26周,未见明显异常,停止给药后恢复正常;高剂量组动物体重有一定降低,个别脏器质量及指数增大,停药4周后均能恢复正常;病理检查结果示,菖远胶囊各剂量组主要脏器未见由药物引起的病理学改变;整个实验期间各组动物未见死亡;③大鼠长期给予菖远胶囊的安全剂量为4.0 g/kg。结论：菖远胶囊对动物的毒性较低,是值得开发的一个中药新药。     

狗,大白鼠正常骨髓象观察

本文观察了成年ｗｉｓｔａｒ大白鼠、成年狗正常骨髓细胞形态学和骨髓象,并与正常人同系阶段细胞进行了比较,狗、大白鼠骨髓各系统、各阶段的细胞学特点与正常人的基本一致,其不同之处是狗和大白鼠的部分骨髓细胞的胞体较小,粒细胞有环状核,其增生程度略高于人,均为正常骨髓象。这对医学实验研究中,判定药物毒性、进行药物筛选以及药物的疗效观察,均具有重要的参考价值。     

三氧化二砷对黄鳝毒理学效应

以黄鳝为实验动物,研究了不同剂量的三氧化二砷对黄鳝的毒理学效应。采用鱼类致突变实验、鱼类红、白血球计数等方法,测定外周血白细胞数、红细胞微核和核异常以及肝脏过氧化氢酶（CAT）活性。结果发现：在低剂量范围内,随着三氧化二砷剂量的增加红细胞的微核率及核异常率逐渐增加、CAT活性升高,白细胞数则下降;至0．50mg／kg剂量时红细胞的微核率、核异常率,TLCAT活性均达最大值,而白细胞数达最低值;随着剂量的进一步增加红细胞的微核率、核异常率以及CAT活性均反而下降,白细胞数则上升。结果表明一定剂量三氧化二砷能明显影响黄鳝外周血细胞及肝脏CAT活性。     

雷公藤多甙诱发人外周血Go期淋巴细胞微核及核损伤的观察

本实验应用不同剂量的雷公藤多甙处理人外周血Ｇｏ期淋巴细胞,放置１８小时后,直接观察微核率及核损伤的变化。结果显示,雷公藤多甙对人外周血Ｇｏ期淋巴细胞微核率,核变形率和核碎裂率均无明显的影响,亦无明显的剂量依赖性增加。因此,作者认为,雷公藤多甙是一种对人类无潜在遗传毒性的药物,临床上可以安全作用,另一方面,本实验方法比传统的微核测试法更为直接,简便,敏感,有望成为一种简便实用检测化学诱变剂的诱变作用     

培养法与直接法外周血淋巴细胞微核率的比较研究

用⁶⁰Co r线1.0-5.0Gy照射狗,比较照后12小时培养法和直接法外周血淋巴细胞微核率,结果微核率随剂量增加而增加,培养法增加的速度和幅度明显高于直接法,经统计学分析二者存在一定的相关性。     

甲基纤维素法制备外周血微核标本的改进

人及动物外周血淋巴细胞微核测定,是细胞遗传学较常用的研究方法之一。其优点是快速简便,观察容易。因研究对象、目的不同,各种实验材料方法很多。过去我们所使用的甲基纤维素法（下简称甲纤法）^[1],由于受某些因素影响,结果淋巴细胞体积略有缩小,细胞染色欠佳,在一定程度上影响微核观察的可靠性。为克服其不足之处,进一步完善这一方法,近来作者在原方法基础上,作了改进,其效果较为满意。本文介绍改进后的方法,并将21例正常人结果与原方法130例正常人结果作比较,以供参考。     

微核细胞率与辐照后时间的关系分析

微核测定法,是在染色体分析法的基础上,于本世纪七十年代初期建立的一种细胞遗传学快速测定法。由于其方法简便、观察容易、鉴别可靠而日益受到重视。然而,许多学者只注意到微核细胞率与剂量的关系,对微核细胞率与辐照后时间的关系研究尚少。为此,我们设计了本试验。