Midkine家庭的研究进展

Ｍｉｄｋｉｎｅ家族包括Ｍｉｄｋｉｎｅ（ＭＫ）和肝素结合生长相关分子（ＨＢ－ＧＡＭ）,两种因子的基因结构和氨基酸组成极其相似,是一类新的肝素结合生长／分化因子。胚胎期,ＭＫ和ＨＢ－ＧＡＭ分布广泛,出生后局限于某些特定部位。ＭＫ和ＨＢ－ＧＡＭ可影响神经元和非神经以及肿瘤细胞的存活、增殖和分化,在胚胎发育和肿瘤发生中具有重要作用。     

鳙团移核鱼的遗传性状与个体生长

鳙团移核鱼的遗传性状与个体生长ＧＥＮＥＴＩＣＣＨＡＲＡＣＴＥＲＡＮＤＩＮＤＩＶＩＤＵＡＬＧＲＯＷＴＨＯＦＴＨＥＴＲＡＮＳＮＵＣＬＥＵＳＦＩＳＨＯＦＴＨＥＢＩＧＨＥＡＤＡＮＤＴＨＥＢＬＵＮＴＳＮＯＵＴＢＲＥＡＭ关键词鳙团移核鱼遗传性状个体生长Ｋｅｙ...     

苹果果实组织脱落酸结合位点的亚细胞定位

在苹果（ＭａｌｕｓｐｕｍｉｌａＭｉｌ）果实细胞的可溶性组分中存在ＡＢＡ特异结合位点,这些位点能与ＡＢＡ形成稳定的３ＨＡＢＡ蛋白结合复合物,而微粒体部分未表现出３ＨＡＢＡ结合活性。可溶性组分对３ＨＡＢＡ的结合效率与结合稳定性需要活体组织完整细胞的存在。ＡＢＡ共价交联物ＡＢＡＬＹＣＨ,具有与ＡＢＡ相同的抑制红苋菜（ＡｍａｒａｎｔｈｕｓｔｒｉｃｏｌｏｒＬ．）种子萌发的生物活性,能有效地竞争抑制果实组织圆片对３ＨＡＢＡ的结合。通过ＡＢＡＬＹＣＨ对苹果果实组织圆片及果实组织游离细胞的荧光染色表明,未成熟果实的细胞外周被特异性地染色。在ＢＳＡ存在的情况下,ＡＢＡＬＹＣＨ复合物被转运进细胞,形成密集的强烈荧光团。结果表明,ＡＢＡＬＹＣＨ与３ＨＡＢＡ的竞争性结合发生在细胞质膜水平。     

携带p53基因的重组腺病毒的构建及对肿瘤细胞抑制的研究

１　材料与方法１１　质粒ｐＣＭＶｐ５３ＢＡＭ由美国约翰·霍普金斯肿瘤中心ＢｅｒｔＶｏｇｅｌｓｔｅｉｎ教授赠送［５］;ｐＲＳｅｔＡ购于Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司;ｐＣＡ１３和ｐＢＨＧ１１为ＭｉｃｒｏｂｉｘＢｉｏｓｙｓｔｅｍＩｎｃ．产品。ｐＢＨＧ１１包含腺病毒Ａｄ５基因组３６ｋｂ中的约３４ｋｂ序列,但Ａｄ５Ｅ１区１８８ｂｐ至１３３９ｂｐ缺失,代之以氨苄青霉素抗性基因和复制起始位点。ｐＢＨＧ１１缺少包装信号φ（２２ｂｐ至３４２ｂｐ）和Ａｄ５Ｅ３区（２７８６５ｂｐ至３０９９５ｂｐ序列）。ｐＣＡ１３…     

妊娠中肾细胞因子（midkine） 与肿瘤

198 8年日本学者Ｋａｄｏｍａｔｓｕ等[1] 在视黄酸诱导的小鼠胚胎肿瘤细胞系ＨＭ 1细胞ｃＤＮＡ文库中发现一种新基因。由于该基因在小鼠妊娠中期有广泛表达 ,而在出生后 ,表达仅局限于肾脏 ,故其表达产物被命名为Ｍｉｄｋｉｎｅ (ＭＫ) ,即妊娠中期 (ｍｉｄｇｅｓｔａｔｉｏｎ)和肾脏 (ｋｉｄｎｅｙ)的英文缩写 ,目前尚无中文名 ,本文暂译为“妊娠中肾细胞因子”。妊娠中肾细胞因子属于肝素结合因子的一种多肽 ,是一种对细胞的生长和分化起重要作用的细胞因子。它能促进正常细胞的生长和分化 ,尤其可促进神经细胞的发育 ,在成年期有激发某…     

羟基脲促进HEL细胞分化机制的研究

以往研究表明, 用羟基脲诱导人红白血病细胞（ＨＥＬｃｅｌｌ）后, 能促进成年型β珠蛋白基因表达, 使ＨＥＬ细胞趋向终末分化。本文试图进一步揭示羟基脲诱导ＨＥＬ细胞分化的分子机制。ＧＭＳＡ 与Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹分析结果显示, 随着羟基脲诱导ＨＥＬ 细胞时间延长, 细胞核内的ＧＡＴＡ１ 转录因子的含量增加, 它与β珠蛋白基因５＇旁侧ＤＮＡ 序列内一个正调控序列（ＰＣＲ：－ ２２３～－ １９４ ｂｐ） 以及人工合成的ＧＡＴＡＤＮＡ 序列结合能力增加; 与此相反,细胞核内的ＧＡＴＡ２ 转录因子的含量下降, 它与ＧＡＴＡＤＮＡ 序列结合能力也下降。此外, 还检测到在羟基脲诱导ＨＥＬ细胞后, 核内与ＹＹ１ 类似的一个转录因子含量也迅速下降。实验结果表明ＧＡＴＡ２ 可能在红系细胞早期分化中起重要作用, 而ＧＡＴＡ１ 则在红系细胞终末分化过程中起调控作用。推测类似ＹＹ１ 的一个转录因子可能具有抑制ＨＥＬ细胞趋向终末分化的功能     

植物花粉管质膜类整合素蛋白的免疫印迹检测

植物花粉管质膜类整合素蛋白的免疫印迹检测孙颖徐小冬孙大业（河北师范大学生物系石家庄０５００１６）关键词整合素,花粉管,质膜,免疫印迹ＩＭＭＵＮＯＢＬＯＴＳＯＦＩＮＴＥＧＲＩＮＬＩＫＥＰＲＯＴＥＩＮＳＩＮＰＯＬＬＥＮＴＵＢＥＭＥＭＢＲＡＮＥＯＦＨＥＭ...     

银杏雄配子体发育和受精作用的研究现状

银杏雄配子体发育和受精作用的研究现状张仲鸣（北京大学生命科学学院,北京１００８７１）ＣＵＲＲＥＮＴＳＴＡＴＵＳＯＮＭＡＬＥＧＡＭＥＴＯＰＨＹＴＥＡＮＤＦＥＲＴＩＬＩＺＡＴＩＯＮＩＮＧＩＮＫＧＯＢＩＬＯＢＡＺｈａｎｇＺｈｏｎｇｍｉｎｇ（Ｐｅｋｉｎｇ...     

高产稳产聚羟基烷酸的重组大肠杆菌的构建

重组大肠杆菌Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉＨＭＳ１７４（ｐＴＺ１８ＵＰＨＢ） 含有携带聚羟基烷酸（ＰＨＡ） 合成基因（ ｐｈａＣＡＢ）＊＊ 的质粒ｐＴＺ１８ＵＰＨＢ,是很有潜力的ＰＨＡ 生产菌,但存在着质粒不稳定和不能合成３羟基丁酸（３ＨＢ） 与３羟基戊酸（３ＨＶ） 共聚物［Ｐ（３ＨＢｃｏ３ＨＶ）］ 的缺陷。将ＲＫ２ 质粒上的ｐａｒ ＤＥ 基因引入ｐＴＺ１８ＵＰＨＢ 构成质粒ｐＪＭＣ２ ,该质粒可以在宿主Ｅ．ＣｏｌｉＨＭＳ１７４ 中稳定遗传。将培养基中的磷酸盐浓度降至１８ ｍ ｍｏｌ／Ｌ,发现Ｅ．Ｃｏｌｉ ＨＭＳ１７４（ｐＪＭＣ２） 能够以丙酸为前体合成Ｐ（３ＨＢｃｏ３ＨＶ） ,其中３ＨＶ 在共聚物中的含量为５ ％ ～８ ％ 。在５Ｌ自动发酵罐中分批补料培养Ｅ．Ｃｏｌｉ ＨＭＳ１７４（ｐＪＭＣ２） ,培养基初始磷酸盐浓度为１５ ｍ ｍｏｌ／Ｌ,３０ ｈ 后每升培养液中干菌体可达４２－５ ｇ,Ｐ（３ＨＢｃｏ３ＨＶ） 占干重的７０ ％ ,其中３ＨＶ 在共聚物中的含量为４－９ ％ 。     

乙酰胆碱,谷氨酸与GABA对丘脑腹内侧核神经元活动的影响

本文采用微电泳方法观察到在大鼠丘脑腹内侧核（ＶＭ）,微电泳给予乙酰胆碱（ＡＣＨ）使所有受试神经元自发放电频率加快,谷氨酸（ＧＬＵ）使大多数神经元放电加快,它们的作用依赖于电流强度;而γ氨基丁酸（ＧＡＢＡ）和氯苯氨丁酸则抑制大多数神经元的放电活动,但前者的作用快速而暂短,而后者的作用相对缓慢而持久。在微电泳ＡＣＨ或ＧＬＵ的过程中,给予ＧＡＢＡ可拮抗它们的兴奋作用。双钴碱使大多数神经元的自发放电频率加快,而阿托品和ＭＫ８０１对自发放电的影响较小。这些结果表明ＧＡＢＡ,ＡＣＨ和ＧＬＵ等递质活动在同一ＶＭ神经元有重要的会聚作用;ＧＡＢＡ对ＶＭ神经元有紧张性抑制作用。     

利用恒溶氧．补料分批技术高密度培养大肠杆菌生产重组人骨形成蛋白-2A

对表达人骨形成蛋白２Ａ（ＢＭＰ２Ａ）的重组大肠杆菌ＹＫ５３７／ｐＤＨＢ２ｍ在５００ｍｌ摇瓶中进行了培养条件的摸索实验,继后用５Ｌ自控发酵罐进行分批培养和分批补料培养,以获取ｒｈＢＭＰ２Ａ。两种培养方式结果比较表明,在培养过程中保持３０％～４０％左右的溶解氧和限制性流加葡萄糖可以使ＢＭＰ２Ａ的含量达到２７８ｇ／Ｌ,最终菌体密度为ＯＤ６００５３（相当于干菌２１２ｇ／Ｌ）,重组蛋白的表达量占菌体总蛋白的２５％。该培养技术的关键是：（１）在培养过程中保持适当的溶解氧;（２）限制性流加葡萄糖;（３）４２℃起始诱导的时间控制在对数生长中期,持续表达时间为４ｈ;（４）细菌持续生长的比生长速率控制在０３ｈ１左右。     

地中海拟无枝菌酸菌U-32的3-氨基5-羟基苯甲酸合成酶(AHBAS)基因的克隆与序列分析

地中海拟无枝菌酸菌（Ａｍｙｃｏｌａｔｏｐｓｉｓｍｅｄｉｔｅｒｒａｎｅｉ）Ｕ３２是一种临床上重要的抗生素———力复霉素ＳＶ的产生菌。研究表明,在地中海拟无枝菌酸菌的力复霉素生物合成过程中,３氨基５羟基苯甲酸合成酶（ＡＨＢＡＳ）是合成中间体Ｃ７Ｎ母核（又称ＡＨＢＡ）的关键酶。通过筛选以广宿主粘粒（Ｃｏｓｍｉｄ）ｐＬＡＦＲ３为载体构建的地中海拟无枝菌酸菌Ｕ３２的基因文库,获得６个阳性克隆子。将含有ＡＨＢＡＳ基因的约２５ｋｂ的片段克隆到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＳＫ和ＫＳ上,进行酶谱分析得到其在染色体上的初步定位。序列测定表明地中海拟无枝菌酸菌Ｕ３２中的ＡＨＢＡ合成酶基因,由１１６７ｂｐ组成,起始密码子为ＡＴＧ,终止密码子为ＴＧＡ,共编码３８８个氨基酸,所克隆到的ＡＨＢＡ合成酶基因在大肠杆菌的启动子控制下获得诱导表达,蛋白分子量约为４３ｋＤ。     

GENUS ANTROPHYUM KAULF.FROM CHINA AND NEIGHBORING REGIONS

ＧＥＮＵＳＡＮＴＲＯＰＨＹＵＭＫＡＵＬＦ．ＦＲＯＭＣＨＩＮＡＡＮＤＮＥＩＧＨＢＯＲＩＮＧＲＥＧＩＯＮＳＸ．Ｃ．ＺＨＡＮＧ（Ｔｈｅｈｅｒｂａｒｉｕｍ（ＰＥ）,ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｏｔａｎｙ,ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ,Ｂｅｉ...     

蚕豆叶片下表皮ABA结合蛋白提取及分离条件的选择

以蚕豆（ＶｉｃｉａｆａｂａＬ．）叶片下表皮为材料,比较ＴｒｉｔｏｎＸ１００、冷丙酮和（ＮＨ４）２ＳＯ４对ＡＢＡ结合蛋白（简称ＡＢＡＢＰ）的提取效果。结果表明：０．５％（Ｗ／Ｖ）ＴｒｉｔｏｎＸ１００去垢剂提取的ＡＢＡＢＰ与ＡＢＡ特异结合活性较高（０．４８７ｎｍｏｌ／ｇｐｒｏｔｅｉｎ）,维持结合活性的时间较长（４℃下反应４０ｈ保持最大结合的６０％）;而冷丙酮法提取的ＡＢＡＢＰ特异结合活性只有０．３２５ｎｍｏｌ／ｇｐｒｏｔｅｉｎ,且容易失活,１０ｈ仅保持最大结合的３０％左右。实验比较了各种盐离子对ＡＢＡＢＰ的影响,高盐（＞３００ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ）不利于ＡＢＡＢＰ的结合反应,低浓度ＫＣｌ对ＡＢＡＢＰ活性略有促进。ＡＢＡＢＰ的结合活性需要介质中有一定量的Ｃａ２＋和Ｍｇ２＋,用ＥＤＴＡ螯合介质中Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋后,ＡＢＡＢＰ活性大大降低,分别为最大结合的７５％和６０％。ＡＢＡＢＰ与ＡＢＡ反应的最适ｐＨ在６．５,这些条件为亲和层析纯化ＡＢＡＢＰ提供了依据。     

全球气候变化与水稻

全球气候变化与水稻林伟宏,白克智,匡廷云（中国科学院植物研究所,北京,１０００４４）ＧＬＯＢＡＬＣＬＩＭＡＴＥＣＨＡＮＧＥＡＮＤＲＩＣＥＬｉｎＷｅｉ－ｈｏｎｇ;ＢａｉＫｅ－ｚｈｉ;ＫｕａｎｇＴｉｎｇ－ｙｕｎ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｏｔａｎｙ,Ａｃａ...     

过量表达的hTR75可独立介导hTNFα的细胞毒性

利用细小ＲＮＡ 病毒属脑炎和心肌炎病毒（ＥＭＣＶ）的内核糖体进入位点（ＩＲＥＳ）元件构建了人肿瘤坏死因子受体７５ 基因（ｈＴＲ７５） 和新霉素抗性基因（ｎｅｏＲ）的双顺反子表达载体, 通过电脉冲转染ＢＨＫ２１ 细胞, 筛选出分别和同时稳定过量表达两种ｈＴＮＦ受体的细胞株。这些细胞在ｍＲＮＡ 和蛋白质水平均可检测到ｈＴＲ７５ 的表达。利用野生型和具有两种受体选择性结合活性的ｈＴＮＦα突变体对这些细胞株进行测定, 发现过量表达的ｈＴＲ７５ 可以独立地介导ｈＴＮＦα对ＢＨＫ２１ 细胞的细胞毒性, 而ｈＴＲ５５ 的存在并不能显著增强这种作用。上述结果为进一步阐明ＴＲ７５ 的功能以及两种受体间的相互作用提供了一条新的途径。     

不同的下丘脑肽和神经递质对鲤鱼促性腺激素和生长激素分泌活动的影响

以１龄性腺发育中期鲤鱼为材料,采用腹腔（ｉ．ｐ）注射的方法,研究不同的下丘脑肽和神经递质对鲤鱼促性腺激素（ＧｔＨ）和生长激素（ＧＨ）分泌的影响。结果表明：促甲状腺激素释放激素（ＴＲＨ）、Ｌ－多巴（Ｌ－ＤＯＰＡ）、甲基睾酮（ＭＴ）、γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）、促黄体素释放激素类似物（ＬＨＲＨ－Ａ）和三碘甲状腺原氨酸（Ｔ３）都能显著刺激ＧｔＨ的分泌,但最大效应时间各不相同。ＴＲＨ和ＬＨＲＨ－Ａ能促进ＧＨ的分泌,Ｌ－ＤＯＰＡ、ＭＴ、ＧＡＢＡ对血清ＧＨ水平没有明显影响;Ｔ３则对ＧＨ分泌有一定的抑制作用。这说明鲤鱼ＧｔＨ和ＧＨ的分泌除了受各自的下丘脑释放因子和释放抑制因子的双重神经内分泌调控外,还受多种其它相同和不同调节因子的影响,也反映了鲤鱼ＧｔＨ和ＧＨ分泌的神经内分泌调控的复杂性。     

phbB,phbC基因在大肠杆菌中的表达及对马铃薯植株的转化和检测

利用从真养产碱杆菌（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓｅｕｔｒｏｐｈｕｓ）Ｈ１６染色体ＤＮＡ中克隆到的催化聚β羟基丁酸酯（ｐｏｌｙβｈｙｄｒｏｘｙｂｕｔｙｒａｔｅ,ＰＨＢ）生物合成的两个关键酶基因：依赖ＮＡＤＰＨ的乙酰乙酰ＣｏＡ还原酶基因（ｐｈｂＢ）以及ＰＨＢ合酶基因（ｐｈｂＣ）,同时利用大肠杆菌高效表达载体ｐＫＫ２２３３,构建了嵌合有ｐｈｂＢ和ｐｈｂＣ基因的表达载体ｐＫＣＢ,转入大肠杆菌ＪＭ１０９,通过显微镜观察及气相色谱分析检测ＰＨＢ的合成。在确证克隆基因正确的基础上构建了马铃薯块茎特异性表达载体ｐＰＳＡＧＢ（含ｐｈｂＢ基因）、ｐＢＩＢＧＣ（含ｐｈｂＣ基因）和ｐＰＳＡＧＣＢ（含ｐｈｂＢ和ｐｈｂＣ双基因）,转化５个马铃薯品种,经检测获得２０个转基因阳性株系。     

虹鳟生长激素cDNA在酵母中的表达

采用聚合酶链式反应（ Ｐ Ｃ Ｒ） 技术对虹鳟生长激素ｃ Ｄ Ｎ Ａ 进行改造。将改造后的基因克隆到含酵母 Ｐ Ｇ Ｋ 启动子的大肠杆菌酵母穿梭质粒ｐ Ｍ Ａ９１ ,转化酿酒酵母 Ｙ３３ ,构建表达鱼生长激素的酵母工程菌 Ｙ３３（ｐ Ｍ Ａｒ Ｇ Ｈ１６） ,并在酵母中获得表达,表达量约占细胞可溶性蛋白总量的３ ％ 。表达产物作为饲料添加剂投喂罗非鱼,具有明显的促进生长作用     

蝴蝶兰根段的组织培养

１　植物名称　蝴蝶兰（ＰｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓＭｅｌｌｅｒＧｏｌｄ“ＮＦＳ”）。２　材料类别　根段。３　培养条件　（１）愈伤组织的诱导及分化培养基：Ｂ５＋ＮＡＡ１．５ｍｇ·Ｌ－１（单位下同）＋ＫＴ０．２＋ＣＭ１５０ｍｌ·Ｌ－１＋３％蔗糖;（２）原球茎增殖培养基：Ｂ５＋ＧＡ０．０５＋ＣＨ１２０＋３％蔗糖;（３）小苗生长培养基：１／２ＭＳ＋２０％香蕉泥＋２％蔗糖;（４）诱导生根培养基：１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．３＋２％蔗糖。上述培养基均加０．２％活性炭,０．５８％琼脂粉,ｐＨ为５．５;培养基在１２１℃高…