昆虫杆状病毒基因工程研究新进展

80年代出现的昆虫杆状病毒载体表达系统 ,在国内外研究与应用发展很快 ,笔者就这一方面的新进展作一综述。1　杆状病毒基因的原核及真核系统表达粉纹夜蛾 (Ｔｒｉｃｈｏｐｌｕｓｉａｎｉ)颗粒体病毒 (ＴｎＧＶ)编码的病毒增强因子 (ｖｉｒａｌｅｎｈａｎｃｉｎｇｆａｃｔｏｒ,ＶＥＦ)基因是第一个被克隆、测序的昆虫病毒增效基因[1] ,该基因含有 3,5 5 6ｂｐ (ＧｅｎＢａｎｋＤ12 6 17) ,Ｇ +Ｃ为 46 5 % ,编码的增效蛋白由 90 1ａａ(ＧＶｅｎＰｅｐｔＢＡＡ0 2 141)组成。 1998年Ｒｉｎｃｏｎ -Ｃａｓｔｒｏ等该基因插入苜蓿尺蠖 (Ａｕｔ…     

血管生成因子研究进展

近年来,随着基因重组技术和蛋白质工程技术的完善和发展,一类可促进新生血管生成的蛋白多肽被相继发现,它们被统称为血管生成因子(ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃｆａｃｔｏｒ,ＡＦ)[1]。目前已被分离纯化和克隆的有:成纤维细胞生长因子(ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃ ｔｏｒ,ＦＧＦ)、血管内皮细胞生长因子(ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ)、血小板衍生生长因子(ｐｌａｔｅｌｅｔｄｅｒｉｖｅｄｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＰＤＧＦ)、转化生长因子(ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏ…     

黄地老虎颗粒体病毒DNA片段的克隆与颗粒体蛋白基因的定位

用ｐＵＣ１９质粒作载体,克隆了黄地老虎颗粒体病毒（Ａｇｒｏｌｉｓｓｅｇｅｔｕｍｇｒａｎｕｌｏｓｉｓｖｉｒｕｓ,简称ＡｓＧＶ）ＤＮＡＰｓｔＩ－Ｄ．Ｅ．Ｆ．Ｇ．Ｈ．Ｊ．Ｋ．等７个片段。以［￣（３２）Ｐ］－ｄＣＴＰ标记的油桐尺蠖核型多角体病毒（Ｂｕｚｕｒａｓｕｐｐｒｅｓｓａｒｉａｎｕｃｌｃａｒｐｏｌｙｈｅｄｒｏｓｉｓｖｉｒｕｓ简称ＢｓＮＰＶ）多角体蛋白基因为探针,在３７℃条件下对ＡｓＧＶ）颗粒体蛋白基因进行了定位,将其分别定位于ＢｓｌⅡ－Ｓ或ＴＰｓＴＩ－Ａ或Ｂ和ＥｃｉＲＩ－Ａ片段上。     

粘虫核型多角体病毒多角体蛋白基因结构和序列的研究

测定了粘虫核型多角体病毒（Ｌｅｕｃａｎｉａｓｅｐａｒａｔａｎｕｃｌｅａｒｐｏｌｙｈｅｄｒｏｓｉｓｖｉｒｕｓ,ＬｓＮＰＶ）两个ＥｃｏＲＶ片段的共１２０１ｂｐ序列,发现了一个７１４ｂｐ的开放阅读框（ＯＲＦ）,根据其与多种ＮＰＶ多角体蛋白基因（ｏｃｕ）同源性的比较和５＇端典型的１４ｂｐ保守序列,说明此ＯＲＦ即为ＬｓＮＰＶ的ｏｃｕ基因。根据核苷酸序列预测的多角体蛋白有２４６个氨基酸,其中酸性和碱性氨基酸数相等,疏水氨基酸含量很高,氨基酸组成中以谷氨酸（Ｇｌｕ）含量最高,谷氨酰胺和半胱氨酸含量最低。编码区碱基同源性与ＭｂＮＰＶ最高,为９７．０％;氨基酸同源性与ＭｂＮＰＶ最高,为９７．５％。密码子偏爱选用以第三个碱基为嘧啶的密码子。二级结构分析表明,α－螺旋（Ｈ）和β－折叠（Ｓ）相等,β－转角含量是Ｈ和Ｓ含量之和。     

G蛋白Rap1活化新机制：GEFs研究进展

小分子Ｇ蛋白Ｒａｓ超家庭成员都是通过与鸟苷酸交换因子（ｇｕａｎｉｎｅ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｅｘｃｈａｎｇｅ ｆａｃｔｏｒｓ,ＧＥＦｓ）结合而被活化,ＧＥＦｓ能增加这类小分子Ｇ蛋白对ＧＴＰ的摄取,并使之形成有活性的ＧＴＰ结合构象。Ｒａｐ１是Ｒａｓ样的小分子Ｇ蛋白。迄今为止,已发现Ｇ３Ｇ、ＣａｌＤＡＧ－ＧＥＦ１、Ｅｐａｃ、ｃＡＭ－ＧＥＦ１、ｃＡＭＰ－ＧＥＦⅡ、ｎＲａｐＧＥＰ、ＧＦＲ可特异的活化Ｒａｐ     

白介素10的临床应用研究

１９８９年,Ｆｉｏｒｅｎｔｉｏ等发现Ｔｈ２细胞分泌一种能抑制Ｔｈ１细胞功能的未知因子,称为细胞因子合成抑制因子（ｃｙｔｏｋｉｎｅｓｙｎｔｈｅ－ｓｉｓｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｆａｃｔｏｒ,ＣＳＩＦ）。Ｍｏｏｒｅ等发现ＣＳＩＦ与ＥＢ病毒（ＥＢＶ）中ＢＣＲＦ－...     

血管内皮生长因子

血管内皮生长因子叶正茂,周爱儒（北京医科大学生化与分子生物学系,北京１０００８３）关键词血管内皮生长因子,血管通透因子,血管生成血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ,ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ）又称血管通透因子（ｖａｓｃｕｌ...     

肿瘤坏死因子－α（TNF－α）对常见呼吸道病毒的抑制作用

用人重组肿瘤坏死因子－α（Ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ－α,ＴＮＦ－α）和人天然α干扰素（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－α－,ＩＦＮ－α）在人胚胎肺纤维母细胞（ＨＥＦ）和Ｈｅｐ－２细胞系上对常见呼吸道病毒所致细胞病变抑制进行比较观察。病毒包括不同型别的腺病毒５株,单疱病毒Ⅰ型（ＨＳＶ－Ｉ）１株,鼻病毒１株,仙台病毒１株,ＶＳＶ１株。结果提示ＴＮＦ－α和ＩＦＮ－α均具有广谱抗病毒活性。ＴＮＦ－α的抑毒作用能被ＴＮＦ－α申抗和ＩＦＮ－β单抗完全去除,被ＩＦＮ－α单抗部分去除ＴＮＦ－α的抗病毒效应。ＴＮＦ－－α中和试验的结果提示：ＴＮＦ抗病毒活性仍为ＩＦＮ－β诱生所介导。     

苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)大立方形多角体突变株的分子生物学研究

利用空斑技术,从既能形成多角体又含ＴＫ酶基因的苜蓿丫纹夜蛾重组核型多角体病毒ＡｃＭＮＰＶ－ＴＫ中,纯化了一株形成大立方形多角体的病毒突变株ＡｃＭＮＰＶ－ＴＫｍｔ５１３。用ＥｃｏＲＩ、ＰｓｔⅠ、ＢｇｌⅡ及ＫｐｎⅠ等限制性内切酶对它做了酶切分析,并克隆了多角体蛋白全基因及其侧翼部分的片段。对所克隆的部分全序列测定结果,发现在多角体蛋白基因读码框内只出现了一个碱基的突变,导致了第２５位的氨基酸密码子由ＧＧＴ变为ＧＡＴ,该位氨基酸由甘氨酸（Ｇｌｙ）变为天冬氨酸（Ａｓｐｑ）还利用ＰＣＲ技术扩增出突变了的多角体蛋白基因部分片段,并将它克隆入转移载体质粒ｐＥＶ５５,与不形成多角体的重组病毒ＴｎＮＰＶ－ＨＢｓＤ４ＤＮＡ共转染Ｓｆ９细胞,结果产生同样的大立方形多角体病毒。     

肝细胞生长因子:一种多功能细胞因子

肝细胞生长因子（ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＨＧＦ）,又名离散因子（ｓｃａｔｅｒｆａｃｔｏｒ）。其受体ｃ－ＭＥＴ是原癌基因ｃ－ｍｅｔ的产物。ＨＧＦ和ｃ－ＭＥＴ在多种细胞中都有产生,组织分布广泛。ＨＧＦ具有器官再生、创伤愈合、胚胎形成...     

一种新的内皮细胞生长因子──VEGFB

一种新的内皮细胞生长因子──ＶＥＧＦＢ以前的研究表明血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＦＧＦ）特异地作用于血管内皮细胞,强烈地促进内皮细胞的分裂增殖,在新血管形成中起重要作用。最近Ｏｌｏｆｓｓｏｎ等又...     

环境因子对香根草生长习性的影响

环境因子对香根草生长习性的影响夏汉平,敖惠修,何道泉（中国科学院华南植物研究所,广州５１０６５０）ＥｆｆｅｃｔｏｆＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＦａｃｔｏｒｓｏｎＶｅｔｉｖｅｒＧｒａｓｓＧｒｏｗｔｈ．￥ＸｉａＨａｎｐｉｎｇ;ＡｏＨｕｉｘｉｕ;ＨｅＤａｏｑ...     

血管内皮细胞生长因子及其受体的分子生物学研究进展

血管内皮细胞生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）是最直接的血管内皮细胞促分裂素,它通过其受体（ＶＥＧＦＲ）介导其活性,不同ＶＥＧＦ剪接体与不同类型的ＶＥＧＦＲ结合,通过胞内信号传导,发挥不同的生物学效应。本总结了ＶＥＧＦ及其受体的结构、特点、分类、分子生物学特征、二的连续及由ＶＥＧＦ诱导的胞内信号传导作用,并简单讨论了它们可能的     

脑金属硫蛋白GIF及其功能研究

脑金属硫蛋白ＧＩＦ及其功能研究王文清,潘宪明,刘杰（北京大学技术物理系１００８７１）（美国Ｋａｎｓａｓ医学中心）近年来在正常人脑皮层中发现了一种新的金属硫蛋白异构体,称ＧＩＦ（Ｇｆ。Ｗｔｈｌｎｈｉｂｉ－ｔｏｒｙＦａｃｔｏｒ,１９９１,Ｙｏｋ。Ｕｃｈｉ...     

斜纹夜蛾多角体病毒包埋型病毒受体的鉴定

蔗糖密度梯度离心法提纯斜纹夜蛾核多角体病毒（＄Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ　ｌｉｔｕｒａ　　ｍｕｌｔｉｎｕｃｌｅｏｃａｐｓｉｄ　ｎｕｃｌｅｏｐｏｌｙｈｄｒｏｖｉｒｕｓ,　ＳｐｌｔＭＮＰＶ）包埋型病毒粒子（ｐｏｌｙｈｅｄｒａ－ｄｅｒｉｖｅｄ　ｖｉｒｕｓ,ＰＤＶ）,以此病毒粒子作抗原,免疫家兔获得抗血清;用ＳＤＳ裂解缓冲液提取斜纹夜蛾幼虫中肠组织细胞总蛋白。采用病毒铺覆蛋白印迹技术（ＶＯＰＢＡ）,利用抗ＰＶＤ抗血清对病毒受体进行检测,结果表明斜纹夜蛾中肠细胞总蛋白中４０ｋＤ、７３ｋＤ、８５ｋＤ的三种蛋白能够结合ＰＤＶ。     

粘虫颗粒体病毒增效因子的分离纯化及其生化性质

粘虫颗粒体病毒经０．０２ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ碱溶,先用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００凝胶过滤层析柱从病毒蛋白粗提中分离增效因子,然后选用ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ离子交换层析柱进一步纯化增效因子,得到少量电泳纯的增效因子蛋白样品。     

因子分析法研究黄淮海平原自然村自然生态社会系统评价因子

因子分析法研究黄淮海平原自然村自然生态社会系统评价因子刘金龙（中国林业科学院林业研究所，北京１０００９１）ＳｅｌｅｃｔｉｏｎｏｆＥｖａｌｕａｔｉｏｎＦａｃｔｏｒｓｆｏｒＮａｔｕｒａｌＶｉｌａｇｅｓｂｙｔｈｅＦａｃｔｏｒｙＡｎａｌｙｓｉｓＭｅｔｈｏｄｉ...     

棉铃虫单粒包埋核型侈角体病毒在细胞系中持续感染的建立和特性

棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒（Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａ ａｒｍｉｇｅｒａ ｓｉｎｇｌｅ ｍｕｃｌｅｏｃａｐｓｉｃｄ ｎｕｃｌｅｏｐｏｌｙｈｅｄｒｏｖｉｒｕｄ,ＨａＳＮＰＶ）能够在棉铃虫肾卵巢细胞素ＳＦＥ－ＨＡ－８２１２中有效复制,引起细胞解体死亡。通过培养ＨａＳＮＰＶ感染后残存的细胞,建立了一株持续感染的细胞。该细胞在传代培养的６个月时间内（约２５次传代）,持续地释放有感染力的病毒粒子,培养液中病毒     

寄主防卫过程中病毒的维管积集与传播

长期以来 ,对病毒侵染的研究 ,在病毒复制及病毒的细胞间转移方面相对要深入一些[1] ,但对病毒的组装、依赖于维管系统的长距离运输等的认识非常有限[2 ] 。对寄主防卫系统及其机制的认识则主要限于一些抗性因子的证实 ,如抗ＴＭＶ的烟草上分离的Ｎ基因 ,抗ＰＶＡ的马铃薯上分离的Ｒ基因 ,以及一些病程相关蛋白因子 ,如几丁质酶Ａ(ＣｈｔＡ)和ＰＲ 1 0ａ等[2～4 ] 。借助于一些标记蛋白 ,如β ｇｌｕｃｕｒｏｎｉｄａｓｅ(Ｇｕｓ)、Ｌｉｃｉｆｅｒａｓｅ(Ｌｉｃｉ)和ｇｒｅｅｎｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｐｒｏｔｅｉｎ(ＧＦＰ)等 ,通过跟踪嵌…     

熊猫等动物犬瘟热病毒附着蛋白基因的遗传多样性

为了研究犬瘟热病毒（ｃａｎｉｎｅ ｄｉｓｔｅｍｐｅｒ ｖｉｒｕｓ,ＣＤＶ）大熊猫株、小熊猫株和长春犬株附着蛋白（Ｈ）基因的遗传这异,对Ｈ基因进行了序列测定。上述３个ＣＤＶ毒株的Ｈ基因全长均为１９４６ｂｐ,开放阅读框架（ＯＲＦ）始于２１－２３位的ＡＴＧ,终止于１８４２－１８４４位的ＴＧＡ,编码６０７个氨基酸。与ＧｅｎＢａｎｋ中１５个ＣＤＶ株推导的Ｈ蛋白氨基酸序列比较发现,１６个野毒株潜在的Ｈ－联糖基