外泌体及其miRNA在神经系统常见疾病诊断和治疗中的研究进展

外泌体(exosome)主要来源于细胞内的多囊泡内体,通过多囊泡内体外膜与细胞膜融合分泌到胞外间隙,直径为30～100 nm,可作为潜在的生物标志物以及细胞间传递生物信息的载体。近年来的研究表明,外泌体有助于神经系统疾病的早期诊断。在细胞实验和动物模型中,外泌体能够促进神经再生、抑制神经细胞凋亡。本文对外泌体的分离、鉴定及其在缺血性脑卒中、阿尔茨海默病和帕金森病这3种神经系统常见疾病的诊断和治疗中的应用进行综述。     

外泌体microRNAs在阿尔茨海默病中的潜在诊断价值

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)作为一类复杂的神经退行性疾病,其临床潜伏期长发病治愈率低等特点使得该病的早期诊断具有重要意义。脑脊液和外周血理化分析等手段可以对具有指示神经功能受损情况作用的生物标记物进行评估以用于AD的早期临床诊断。神经细胞分泌的外泌体中含有与其细胞功能改变密切相关的蛋白质和核酸,在疾病的早期临床诊断中具有潜在价值。本文总结了AD患者脑内外泌体microRNAs的研究进展,探讨外泌体microRNAs是否可作为AD早期生物诊断标志物。     

MSC来源的外泌体在OA中潜在的免疫调节及抗炎作用

骨性关节炎(osteoarthritis, OA)是一种整体的"器官"疾病,伴随着复杂的病理改变。大量研究表明, OA中存在一种慢性、轻度的炎症,伴随相关免疫反应,并作为中心环节贯穿其病理变化过程。间充质干细胞(mesenchymal stem cell, MSC)因其抗炎免疫调节的能力而备受关注。间充质干细胞经旁分泌途径分泌外泌体(exosomes),是其发挥抗炎及免疫调节作用的主要机制之一。MSC来源的外泌体介导传递具有抗炎及免疫活性的分子,尤其是miRNA,协调炎症微环境并促进组织修复重建。该文就MSC来源外泌体在OA中潜在的免疫调节、抗炎作用及其可塑性进行探讨,以期为OA的治疗提供新思路。     

一种快速提取组织外泌体的分离富集方法

本文提供一种快速提取组织外泌体的分离富集方法。通过将目标组织用机械法切碎,加入组织消化酶进行组织解离和过滤,将获得的组织细胞悬液依次进行差速离心、超离、尺寸排阻和超滤,实现组织高质量外泌体的富集纯化。组织解离方法比较试验中,采用组织消化酶解离组织得到的蛋白质含量更高,获得的外泌体组织来源的蛋白质污染小。富集小鼠心组织、小鼠肝组织、小鼠肾组织、人结肠癌组织、人乳腺癌组织和动脉粥样硬化组织的外泌体,并对其进行纳米粒径追踪和透射电镜观察。结果显示,外泌体的粒径均在30~150 nm内,结构清晰明确。对小鼠肝组织富集的外泌体进行蛋白质印迹分析。结果显示,阳性蛋白质标志物CD9、ALIX和CD63的表达,TSG101弱表达,阴性蛋白质标志物Calnexin无表达。本方法集合多种分离措施,能够达到分离纯化外泌体的作用,同时简化了分离组织外泌体的步骤,相对于其他方法,全程只需要4~5 h,节省了富集时间,所富集的外泌体纯度高、可溶性杂蛋白质污染小,实用性更加广泛。使用微量组织样本富集的外泌体即可满足后续纳米粒径追踪、蛋白质印迹、透射电镜和转录物组等分析。     

外泌体——癌症的“双刃剑”

正外泌体定义外泌体(exosome)是细胞对外分泌的小囊泡,常为30~120纳米大小的膜包裹结构,可特异性地包裹一些蛋白质、脂质或核酸等物质,具有生物活性,能够被受体细胞吸收,实现细胞间的物质运输和信息传递。20世纪80年代初研究人员在体外培养的正常细胞或者肿瘤细胞内发现细胞外泌现象,细胞向其培养基中分泌带有细胞膜特征的囊泡结构。1983年Rose M.Johnstone等发现体外培养的绵羊网格红细胞在成熟过程中会向外分泌     

外泌体microRNAs在阿尔茨海默病中的潜在诊断价值北大核心CSCD

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)作为一类复杂的神经退行性疾病,其临床潜伏期长发病治愈率低等特点使得该病的早期诊断具有重要意义。脑脊液和外周血理化分析等手段可以对具有指示神经功能受损情况作用的生物标记物进行评估以用于AD的早期临床诊断。神经细胞分泌的外泌体中含有与其细胞功能改变密切相关的蛋白质和核酸,在疾病的早期临床诊断中具有潜在价值。本文总结了AD患者脑内外泌体microRNAs的研究进展,探讨外泌体microRNAs是否可作为AD早期生物诊断标志物。     

自噬与外泌体

在真核生物中,细胞可以通过自噬(autophagy)和外泌体(exosome)的分泌两种方式来对外界刺激做出应答从而维持细胞内稳态。自噬是溶酶体依赖性细胞组分降解的过程,其能被氧化应激、饥饿或蛋白质聚集等因素诱导发生。除了自噬途径,细胞还可以通过分泌外泌体来调节细胞的生命活动,新的研究表明自噬与外泌体发生有同样的分子机理。本文综述了自噬与外泌体发生的过程以及两者之间的联系。     

凝胶电泳微流控芯片提取外泌体及对人血浆外泌体中miRNA-21的测定

为了开发一种用于人体血浆中外泌体的高效快速提取和分离的新型微流控芯片,文中收集健康人体外周血液样本,自主设计并制备基于纳米多孔薄膜和琼脂糖凝胶电泳的微流芯片.提取的外泌体使用透射电镜、Nanosight和Western blotting等技术进行表征,鉴定并分析其形态、浓度和粒径分布.同时将超速离心法和微流芯片所提取的...     

外泌体功能的相关研究进展

外泌体是由不同细胞分泌的膜性囊泡,它从细胞内的释放受到多种因素的影响,可以通过其独特的分子特征被鉴别。随着对外泌体逐渐深入的研究,科学家们发现,外泌体不仅能够对宿主免疫系统产生影响,而且在病毒感染宿主的过程中扮演了重要角色。外泌体与肿瘤的发生发展密切相关,但是具体作用机制不甚清楚,值得进一步的研究。     

外泌体对骨关节炎的影响

骨关节炎(osteoarthritis,OA)的发病主要与关节内生物力学改变、关节软骨磨损以及合成分解代谢紊乱有关。关节内代谢平衡主要依靠一系列细胞内分子(激酶级联、自噬、转录因子和表观遗传机制等)和细胞外刺激(细胞因子、激素和机械应力等)的调节。外泌体作为一种分泌到细胞外发挥作用的囊泡状物质,广泛参与细胞间信息交流。外泌体能够通过内部含有的m RNA、miRNA和蛋白质等生物活性分子对骨关节炎病程发展产生一定的影响,且不同干细胞来源的外泌体对OA的作用存在一定的差异。该文通过综述近年来有关外泌体对骨关节炎疗效研究的文献报道,为后续进一步探究外泌体对OA作用机制及其相关研究提供理论参考和依据。     

工程化外泌体介导巨噬细胞清除肿瘤外泌体*

目的:通过膜表面修饰改造技术构建工程化外泌体(engineered exosomes,enExos),并以此介导巨噬细胞特异性清除膜表面富含表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的肿瘤外泌体。方法:利用表面展示技术获得膜表面展示趋化因子(chemokine 8,CXCL8)的外泌体,同时在其磷脂双分子层上修饰EGFR核酸适配体制备工程化外泌体;纳米颗粒跟踪和纳米粒度电位分析enExos的尺寸、电位;CCK-8试剂盒检测细胞活力;透射电子显微镜观察enExos与高表达EGFR的肿瘤外泌体的特异性结合;荧光成像技术及流式细胞术分析探究enExos靶向趋化巨噬细胞吞噬高表达EGFR的肿瘤外泌体。结果:成功构建膜表面展示EGFR与CXCL8的工程化外泌体,enExos可以特异性识别并捕获高表达EGFR的肿瘤外泌体,同时利用其趋化因子CXCL8特异性靶向巨噬细胞膜表面趋化因子受体CXCR1/CXCR2,刺激巨噬细胞对肿瘤外泌体的捕获及清除。结论:工程化外泌体促进了特定肿瘤外泌体的清除,为后续深入研究工程化外泌体抑制癌症转移的作用奠定基础,并期望为癌症转移治疗提供新的研究方向。     

外泌体与自噬体相互关系研究进展

真核细胞内膜系统由细胞内相互联系的膜状细胞器组成,包括外泌体的生成和自噬过程,对应激反应和维持细胞内稳态起着重要作用。外泌体是含有蛋白质与核酸内容物的多泡体分泌到体外形成的胞外囊泡,而自噬是溶酶体依赖性的降解和循环再利用的过程。研究发现,外泌体的生成和自噬之间有着共同的分子机制,二者存在实质性的交互通信。对外泌体的生成和自噬的过程,包括二者与溶酶体之间的关系进行综述。     

肿瘤微环境中的外泌体:新的治疗途径

肿瘤微环境参与了癌症的发生、发展和对治疗的反应,近年来研究发现外泌体在肿瘤微环境中发挥重要作用。外泌体(exosomes)是一类直径30~100nm的囊泡小体,包含蛋白质,脂类和功能性RNA分子等。肿瘤来源的外泌体(cancer cell derived exosomes,CCEs)是肿瘤微环境中的重要成员,可以促使成纤维细胞和间质细胞向肌成纤维细胞分化,重塑细胞外基质,诱导上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT),帮助肿瘤细胞免疫逃逸,引发血管生成,从而促进肿瘤的生长和转移。因此,基于肿瘤微环境中外泌体的疗法为肿瘤治疗开辟了新的途径,如干预外泌体的合成或分泌抑制肿瘤转移,作为药物载体转运各种抗癌药物(mi RNAs和si RNAs等)以及在免疫治疗中避免被免疫系统识别和清除等。     

外泌体糖基化在疾病诊断及治疗中的应用

外泌体由脂质双分子层构成,内含多种生物分子,如蛋白质、核酸、糖类等,具有调节生命活动的作用,其蛋白质组分也可反映分泌细胞状态。糖基化是一种常见的蛋白质翻译后修饰形式,糖基化蛋白对于维持细胞稳态、细胞间互作等生理功能具有重要作用。近年来,有关于外泌体的研究大多关注外泌体核酸成分如miRNA、mRNA、lncRNA等的功能。外泌体膜蛋白也含有丰富的糖链,且具有重要的病理生理意义。本文着重介绍外泌体糖基化的结构、研究方法、在肿瘤等疾病中的分子功能以及在疾病诊断、治疗中的临床应用和前景。外泌体糖基化研究将随着技术的革新不断深入,有望成为多种疾病临床诊疗的重要手段。     

外泌体载体治疗在中枢神经系统疾病中的研究进展

中枢神经系统疾病包括脑血管疾病、神经退行性疾病和脑肿瘤等.血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)阻碍了大多数通过血液循环系统输送到大脑来治疗和预防中枢神经系统疾病的药物.外泌体在细胞间物质运输和信号交流中发挥重要作用,由于其具有较小的体积、高递送效率、低免疫原性和良好的生物相容性等特点,可以通过正常...     

外泌体及其抗肿瘤作用机制

外泌体是由细胞分泌到胞外的囊泡状小体,体内多种细胞可以分泌外泌体,来源于树突状细胞（DC）和肿瘤细胞的外泌体表面表达MHC分子和抗原肽,体内外实验证明其具有抗肿瘤的作用,因此外泌体作为抗肿瘤疫苗被广泛研究。该文介绍外泌体的发现、蛋白质组成、体内抗肿瘤的机制,以及DC与肿瘤来源的外泌体的基础及临床研究。     

外泌体在病毒感染中的研究进展

外泌体(exosome)是细胞向胞外分泌的一种囊泡,直径约40~100 nm。外泌体与免疫、肿瘤以及病毒类疾病的发生发展有着密切的联系,已成为上述领域内的研究热点。文章就外泌体在病毒感染中的研究进展作一综述。     

外泌体在瘢痕中的作用

创面愈合后期瘢痕增生较为常见,而传统的治疗方式存在些许弊端.外泌体作为旁分泌因子参与细胞间的信号传导,并促进血管生成和细胞增殖.外泌体作为无细胞衍生物的研究热点之一,在创面修复领域备受关注.多种干细胞来源的外泌体可通过多种途径抑制瘢痕增生,甚至可成为促进创面无瘢痕修复的治疗工具.未来,外泌体联合生物支架、增强靶向能力、...