泸型酒酒醅中梭菌群落的研究

正泸型酒(又称浓香型白酒)的生产以高粱为主要原料,以大曲为糖化发酵剂,采用泥窖进行多菌种混合循环固态发酵,窖池中存在的微生物主要包括酵母、霉菌、细菌、古菌等,这些独特而复杂的窖内微生物群落是泸型酒独特风味形成的关键~([1])。梭菌对于泸型酒中己酸乙酯、丁酸乙酯等典型风味物质的形成具有重要作用,虽然已对窖泥进行了群落结构和演替规律的研究,但对酒醅中的这类微生物的变化及其功能则研究甚少。本期刊登了马     

天然风味低度果蔬酒研制

天然风味低度果蔬酒系采用新鲜的果实，蔬菜，如草莓，苹果，芹菜，番茄等经微生物多步发酵酿制而成。该产品保持了原有果实、蔬菜的天然色泽，自然香味及低度果蔬酒的醇香。此外尚富有蛋白质，维生素及钙、铁、磷等元素，与大量胡萝卜素、龙克酸、核黄素、抗坏血酸等维生素类，从而具有良好的医用保健价值，有着广泛的应用前景。     

22株中国优良酒酒球菌代谢生物胺的检测

葡萄酒苹果酸-乳酸菌在葡萄酒苹果酸-乳酸发酵中对氨基酸进行脱羧反应产生具有毒性作用的生物胺.利用PCR技术及HPLC检测方法对22株中国优良酒酒球菌的生物胺代谢安全性进行研究.结果表明,PCR检测结果与HPLC测定结果一致,从我国葡萄产区筛选的优良酒酒球菌均不产生组胺、酪胺和腐胺,从生物胺角度.我国筛选的22株优良酒酒球菌具有较高的生物胺代谢安全性.     

酒酒球菌液氮超低温保存

【目地】为安全、长期的保藏酒酒球菌,本文研究了菌体生长时间、冷冻方法、解冻温度、菌密度以及保护剂等对酒酒球菌细胞冷冻存活率的影响,找到最优液氮超低温保存方法。【方法】采用平板计数法测定冷冻存活率。【结果】实验结果表明酒酒球菌的最佳保存方法为:首先在稳定期前期离心收集菌体;其次加入保护剂(20 g/L酵母浸提物,40V/V甘油,20 g/L蔗糖,30 g/L谷氨酸钠)稀释菌体,使菌密度为109CFU/mL;然后直接投入液氮冷冻;最后在37℃温水浴中迅速解冻。保存6个月后,其中21株酒酒球菌的冷冻存活率达到99%以上。【结论】初步研究表明酵母浸提物,甘油,蔗糖,谷氨酸钠复合保护剂对酒酒球菌的保护效果较好,液氮超低温保存可用于酒酒球菌的长期保存。     

益寿蛇酒的保健防衰作用及其机理的初步探讨

健康、长寿,自古以来为人们所神往.但自进入二十世纪八十年代以来,世界各国普遍面临着人口老龄化速度增快的问题.因此,延缓老化、防老抗衰,增进老年人健康的问题,日益受到国内外专家的关注.近年来,尤其是针对影响健康、长寿的最基本因素——饮食,越来越引起有关方面的瞩目,在围绕食品、饮料的营养成份分析,切实可行的应用方法,以及饮食与健康、长寿、抗衰老等关系方面进行了大量的实验研究,取得了大量可喜的科研成果。本文仅就益寿蛇酒在增进健康和抗衰老等方面的作用,进行了实验观察,并对其机理作了初步探讨。实验方法实验动物小白鼠,体重21.1—22.3g,雌雄不限,随机分组,对照组(n=10)无限量饮用自来     

酒酒球菌苹果酸-乳酸酶基因的测序及分析

苹果酸乳酸酶是乳酸菌进行苹果酸乳酸发酵(MLF)的关键酶。以携带酒酒球菌(Oenococcusoeni)优良菌系OenococcusoeniSD2a的苹果酸乳酸酶基因mleA的重组质粒pLmleA作为测序质粒,进行测序分析。测序结果表明,克隆到的mleA基因序列与已报道的序列同源性为99%。mleA基因序列中有2个碱基与报道不同,其中1614碱基的改变导致错意突变,编码的氨基酸由报道的Asp变为Glu,这一改变使得原有的BamHI位点不再存在。     

泸型酒酒醅细菌群落的发酵演替规律

【目的】考察泸型酒发酵过程中酒醅细菌群落的演替规律,探讨菌群演替与环境因素变化的相关性。【方法】采用高通量测序技术分析泸型酒酒醅细菌群落的演替规律,并运用Mantel test分析不同发酵阶段的细菌群落演替与环境因素变化的相关性。【结果】酒醅发酵过程中有397个属的微生物,其中Lactobacillus、Bacillus、Weissella、Dysgonomonas、Comamonas以及Ruminococcaceae为优势属(相对丰度1.0%)。通过聚类分析可将酒醅发酵过程划分为3个阶段:阶段I (0–5 d),阶段II (6–17 d)和阶段III(18–40d),且3个阶段的酒醅菌群结构差异显著(P0.05)。Metastats分析结果表明,与阶段I相比,阶段II酒醅细菌群落中Lactobacillus和unclassifiedLactobacillaceae相对丰度显著升高(P0.05),而unclassifiedBacillaceae、 Staphylococcus、 Bacillus、 unclassified Enterobacteriaceae、 Lactococcus、Pseudomonas、Thermoactinomyces、Leuconostoc、Staphylococcus相对丰度显著降低(P0.05)。与阶段II相比,阶段III酒醅细菌群落中Lactobacillus相对丰度显著增长(P0.05),Comamonas、Acetobacter、unclassified Bacilli、Clostridium、Bacillus、Ruminococcus、unclassified Porphyromonadaceae和unclassified Streptophyta相对丰度显著下降(P0.05)。结果表明,阶段I的细菌菌群演替与酒醅温度、水分和乙醇浓度变化线性相关(P0.05);阶段II和阶段III的细菌菌群演替与酒醅温度、水分、酸度、乙醇浓度均没有相关性(P0.05)。【结论】泸型酒酒醅中细菌群落在不同发酵阶段结构差异显著,且温度、水分以及乙醇浓度对酒醅发酵前期(0–5 d)细菌群落演替具有重要作用。     

饮用携带沙门氏菌活蛇鲜血和胆汁致病可能性初探

为探讨携带沙门氏菌活蛇可能引起对人群的危害,我们把南宁市防疫站提供从蛇分离出的丙型副伤寒及亚利桑那沙门氏菌,分别与蛇血、蛇胆汁混合后再与不同浓度酒作用一定时间,观察酒对沙门氏菌的抑菌效果;同时取定量沙门氏菌加入各种水源水,了解其在水中存活时间。实验结果表明２５度以下的酒与蛇胆１５∶１、酒与蛇血５∶１混合,作用５ｍｉｎ～２０ｍｉｎ均无抑菌作用;蛇血与酒１∶１混合,即使是３９度的酒作用２０ｍｉｎ也无抑菌作用。两种菌在各种水源水中存活时间在３０ｄ以上。     

乙醇胁迫处理对酒酒球菌SD-2a生理特性的影响

为制备高效的葡萄酒乳酸菌发酵剂,以酒酒球菌SD-2a为试验材料,研究了5%、10%不同浓度的乙醇胁迫处理对菌体生长、细胞内MLE活性、冻干存活率及细胞膜脂肪酸组分的影响。试验结果表明乙醇胁迫处理明显降低了菌体的生长速率和生物产量。与对照相比,5%乙醇胁迫处理降低了菌体的冻干存活率,而10%乙醇处理却显著增加了菌体的冻干存活率。细胞膜脂肪酸组分的测定结果表明,前者细胞膜U/S比值为1.12,比对照降低了26.3%,而后者细胞膜U/S比值为2.29,比对照增加了50.6%。故认为酒酒球菌SD-2a为适应不同浓度的乙醇胁迫环境,在细胞膜脂肪酸水平上所采用的机制不同,且菌体的冻干存活率与其细胞膜脂肪酸组分密切相关。     

不同培养基对酒酒球菌SD-2a存活率及膜脂肪酸组分的影响

[目的] 为获得高效的葡萄酒乳酸菌发酵剂,本文研究了3种具有不同pH缓冲能力的培养基对酒酒球菌接种存活率、冻干存活率及细胞膜脂肪酸组分的影响.[方法]采用平板计数法测定菌体的接种存活率、冻干存活率;并采用GC/MS色谱方法测定收获菌体细胞膜脂肪酸组分.[结果]实验结果表明,没有添加苹果酸的ATB培养基,其pH缓冲能力弱.分别与FMATB和MATB培养基相比,ATB培养基培养获得的菌体,其接种模拟酒培养基后的存活率提高了20.3%和40.2%,其冷冻干燥存活率提高了48.5%和68.3%,其细胞膜中C19cyc11的相对含量提高了10.0%和36.8%,其细胞膜U/S值提高了20.4%和45.2%.[结论]本文推测ATB培养基培养所得菌体,由于自我酸胁迫反应,增强了其对葡萄酒胁迫因素及冷冻干燥的抗性,而该反应与菌体细胞膜脂肪酸组分的变化密切相关.故ATB培养基更适合于酒酒球菌SD-2a发酵剂的制备.     

银环蛇酒治疗风湿痛痹100例疗效观察

1997年 2月至 2 0 0 0年 1 0月 ,我院以自制银环蛇酒治疗风湿痛痹 1 0 0例 ,效果满意 ,现报告如下。1　临床资料1 .1　一般资料　本组 1 0 0例患者中 ,男 57例 ,女43例 ,年龄 1 7～ 68岁 ,病程 1年以内 2 4例 ,1年以上 5年以内 45例 ,5年以上 31例。病例选择主要根据患者关节疼痛 ,遇寒痛增 ,得热痛减 ,每遇阴雨天及气候变化时疼痛诱发或加剧 ,关节无肿胀 ,局部皮色不红 ,血沉、抗“O”一般正常 ,病情缠绵 ,呈慢性经过。1 .2　方法　 ( 1 )银环蛇酒制法 :取鲜活银环蛇 ,不论大小均置于铁丝笼中 1周 ,使其腹中食物消化干净 ,然后清水冲洗干…     

雪莲蚁王酒的医疗作用与保健价值

蚂蚁是一种天然药物,当前已成为世界上具有开发价值的药物和食品。中国蛇协沈阳生物资源医用研究所利用长白山黑多刺蚂蚁及天山雪莲为主料,伍用蝮蛇、桂元肉等中药,以低度白酒浸泡,经科学加工研制的雪莲蚁王酒,具有散寒祛湿、强筋壮阳、补肝益肾及抗衰老等作用,临床...     

益寿蛇酒治疗老年性腰腿痛2例报告

益寿蛇酒治疗老年性腰腿痛２例报告马建章解放军第１８７医院５７０２００老年性腰腿痛是一种常见的老年病。笔者采用益寿蛇酒治疗该病症,疗效满意。例一：符××,男性,７０岁,琼山市郊农民,年青时曾患过风湿性关节炎,已治愈。近十年来,常于劳累后以膝关节与小腿酸...     

泸型酒酒醅中梭菌群落的发酵演替规律和功能预测

【目的】研究泸型酒酒醅中梭菌(Clostridia)群落的演替规律,探讨梭菌群落在酒醅发酵过程中的潜在功能。【方法】利用实时荧光定量PCR技术结合高通量测序技术研究不同发酵时间泸型酒酒醅中梭菌丰度变化;通过梭菌16S r RNA基因序列高通量测序数据分析揭示梭菌群落演替规律,并运用LEf Se分析找出标志性OTU;通过PICRUSt分析对梭菌功能组成进行预测。【结果】泸型酒发酵过程酒醅中梭菌的生物量在发酵14 d上升至最高(3.46×10~7 copies/g),梭菌占总细菌的相对丰度在发酵20 d达到最高(6.67%);对梭菌群落结构的聚类分析结果表明,发酵7 d的酒醅梭菌群落结构显著区别于其他发酵时间,主要体现为存在17个标志性OTU,其中大部分分类学地位尚不明确;PICRUSt分析显示梭菌主要参与氨糖与核糖代谢、磷酸戊糖途径,其次是果糖和甘露糖代谢、TCA循环、糖酵解途径、丙酸及丁酸代谢。【结论】泸型酒酒醅中梭菌的生物量和占细菌的相对丰度在发酵开始后的2-3周内逐渐达到最高,而梭菌群落的结构则在发酵1周内便发生了显著改变,并在发酵2-3周内趋于稳定。在发酵2-3周时有较多与丙酸、丁酸等风味物质代谢相关的基因在酒醅梭菌中被预测到。     

Oenococcusoeni苹果酸-乳酸酶基因克隆及其在酿酒酵母中的表达

苹果酸-乳酸酶是苹果酸-乳酸发酵过程中负责苹果酸转化为乳酸的功能酶。在进行酒酒球菌SD2a的苹果酸-乳酸酶基因(mleA)克隆测序基础上,以PGK1强启动子和ADH1终止子为调控元件,以大肠杆菌-酵母菌穿梭质粒YEp352为载体,构建了重组表达质粒并转化酿酒酵母YS58。酵母转化子用SD/Ura平板筛选鉴定。斑点杂交检测表明目的基因mleA转化到受体菌中,SDSPAGE检测表明获得的转化子表达了约60kDa的目标蛋白。获得的转化子在添加了L苹果酸的培养基中培养4d;取培养液上清用HPLC检测L苹果酸及L乳酸含量,采用t检验进行差异显著性分析,结果表明mleA基因进行了功能性的表达,将L苹果酸转化成L乳酸,L苹果酸和L乳酸含量分别与对照差异极显著和显著,苹果酸的相对降低率平均为20.95%。在有选择压力条件下,重组质粒相对稳定,而在无选择压力条件下,传代培养10d后大约有65%的重组质粒丢失。