从国内现有菌株制备磷酸转乙酰酶

磷酸转乙酰酶(PTA),最早由Stadtman用克氏梭状孢子杆菌制备,但菌体培养烦难。1967年和1970年,Abiko报道了由大肠杆菌B制备PTA,并用以测定辅酶A。我们在Abiko工作的基础上,用大肠杆菌1.505制备PTA,获得较好的结果。大肠杆菌1.505菌种,是由中国科学院微生物研究所提供的。菌体培养条件如下:斜面培养基的成分是:1％蛋白胨,0.5％氯化钠,2％琼脂加蒸馏水至1,000毫升,趁热用绢布或纱布过滤分装,121℃,15磅灭菌30分钟,在无菌操作下将大肠杆菌1.505-环接种到斜面培养基上,37℃培养15小时。种子培养基的成分是1％葡     

泥炭固体发酵生产单细胞蛋白研究

对以泥炭为唯一碳源,固体发酵生产单细胞蛋白(SCP)进行了一系列的研究。选用酵母菌和黑曲霉进行混合发酵培养,考察影响单细胞蛋白生产的各个因素,如菌种接种量,培养基含水量,发酵时间,发酵温度,培养基外加氮源等。通过正交实验设计确定了优化的培养条件。即:菌种接种量为10%,培养基含水量为300%,28℃培养72 h,以蛋白胨为氮源。     

蓖麻蚕蛹蛹虫草人工培养研究

用蛹虫草菌种通过人工接种蓖麻蚕蛹,控制培养环境条件,经过40－60天培养,可长出子实体,最高达8．5厘米,经两年来探索研究,栽培种内已可达到100％出草率。     

人工培养蛹虫草

用柞蚕的活蛹 ,大米米饭培养基培养蛹虫草菌 ,控制好环境条件 ,严格操作环节 ,可培养出与天然蛹虫草形态相同的蛹虫草子座。用棉籽壳、玉米芯、葵花盘粉碎物培养蛹虫草菌 ,可以得到抑菌杀菌物质 ,成本低廉 ,可利用此法提取广谱抗菌物质。     

病原性丝状真菌的菌种保藏方法

目的 探讨常见病原性丝状真菌的菌种保藏方法.方法将73株病原性丝状真菌经过纯化后,接种于马铃薯葡萄糖琼脂斜面分别在4℃和-80℃冷冻管保存,均用10％ (v/v)的丙三醇作为保护剂.结果经过1 a左右的保存,将菌株复活,发现4℃斜面保藏法菌株的存活率为100％,-80℃冷冻管保藏法菌株的存活率为98.6％,有些毛癣菌属...     

面包酵母的子囊孢子形态观察

面包酵母是最常见的酵母菌之一,利用市售鲜酵母或干酵母来分离面包酵母菌,并进行纯化得到纯种面包酵母.将分离得到的面包酵母菌在YPD培养基斜面培养后接种葡萄糖-醋酸盐培养基斜面,28℃培养1～2周后产生子囊孢子,在显微镜下观察,可以清楚的看到面包酵母子囊孢子的典型结构.用此法观察子囊孢子方便易行,不需要对菌种进行保藏.     

冬虫夏草与韩芝液体发酵混合培养特性研究

平板培养基上比较了冬虫夏草、韩芝及树舌的菌丝生长速度和对淀粉的利用情况,结果显示三者的生长速度分别达到1.28、0.64和0.55 cm/d,且韩芝与树舌对淀粉的利用均优于冬虫夏草;混合培养结果得出菌种的最佳菌龄比为虫草:韩芝=3 d:5 d,最佳的接种比例为2:3;正交试验混合发酵最佳的培养基配方(%):葡萄糖1.0、淀粉2.0、黄豆粉2.0、酵母粉0.5,在此条件下,菌丝生物量达到最大值1.97 g/100 mL。     

糖类和植物生长调节剂对冬虫夏草子实体人工培养的影响

为提高人工培养冬虫夏草子实体的产量,需要优化其培养参数。本实验测定培养基中糖类和植物生长调节剂对冬虫夏草子实体产量的影响。于大米小麦作为主要组分的培养基中接入冬虫夏草菌,在9~13℃下培养60 d,转入4℃培养。葡萄糖培养基中,冬虫夏草子实体干重是麦芽糖培养基中的7.6倍,出现菌丝和收获子实体的时间也比麦芽糖培养基中至少快2个月;蔗糖培养基中未获得子实体。不同种类和浓度植物生长调节剂对冬虫夏草子实体产量影响显著。于菌液中加入环磷腺苷、三十烷醇和玉米素的培养瓶均未发现菌丝生长。加入100μg/mL 6-苄氨基腺嘌呤的培养瓶可见菌丝生长,但未见原基分化。转入4℃下6个月后,与对照相比,加入100μg/mL吲哚乙酸、1μg/mL和100μg/mL吲哚丁酸、10μg/mL赤霉素、1μg/mL和10μg/mL乙烯利,以及1μg/mL 2,4-D的培养瓶中子实体干重均显著提高,其中加入1μg/mL吲哚丁酸和1μg/mL 2,4-D的培养瓶的子实体干重是对照的15倍。实验结果为优化冬虫夏草子实体人工培育提供了支撑。     

七种微生物菌株的保藏结果

我们试用5种方法保藏了7种微生物菌株,现将保藏结果简报如下: 一、保藏方法1.斜面转接低温保藏:将菌种接种在适宜的斜面培养基上,在适温下培养至生长良好     

冬虫夏草菌丝状菌源增殖培养的研究

冬虫夏草菌是珍稀濒危名贵中药材冬虫夏草的无性型菌种,是侵染蝠蛾幼虫的唯一菌种,其侵染后形成名贵中药材冬虫夏草。冬虫夏草菌在不同营养及条件下生长形态不同,主要有丝状体和菌球体两种生长形态。冬虫夏草菌丝状菌体能够侵染蝠蛾幼虫,有可能作为一种新的接种体被广泛应用;但丝状菌体对营养要求苛刻、生长缓慢、菌丝体得率低的特点,阻碍了冬虫夏草菌丝状菌体作为侵染蝠蛾幼虫的接种体的开发及应用,从而阻碍了冬虫夏草人工培殖产业化的进程。为了提高冬虫夏草菌丝状菌体的生物表达量,本文对营养及培养条件进行了优化研究,得出了最佳条件为:葡萄糖质量浓度40 g/L、酵母粉质量浓度65 g/L、培养温度17℃、MgSO_4质量浓度3 g/L、KH_2PO_4质量浓度1.5 g/L、培养时间12 d,按最优培养条件,冬虫夏草菌丝状菌体干重得率15.67 g/L,为下一步新的接种体的制备提供菌源保障。     

瓶栽灵芝管理的几点经验

(一)为了防止瓶栽灵芝的杂菌污染(从接种后到菌丝铺满之前,是污染率最高的时期),可采取以下办法: 1.抢温接种,即灭菌后的培养料温度降至25—30℃时,及时接种。 2.活化菌种,即接种前,把二级菌种放入温箱中1—2天。 (二)瓶栽灵芝的培养基,在高压灭菌后常出现表面干燥现象,致使接种后的菌丝生长缓慢,大大增加了污染的机会。解决的办法是: 1.封瓶口时,在牛皮纸外面再包一层塑料薄膜(为降低成本,可不用纱布或棉塞封口)。 2.先用无菌水湿润培养基表层后再接种。     

局限青霉生淀粉水解酶的产生条件及酶一般性质的研究

生淀粉水解酶产生菌局限青霉(Penicillium restrictum)127-2是由土壤中分解得到的,具有较强的降解生淀粉能力,水解1g生淀粉需8.0国际单位酶量.Sasaki等曾报道草酸青霉1-9、变幻青霉的培养液能分解生淀粉,但未报道酶的形成条件;Takao等研究了罗尔伏革菌生淀粉酶的形成条件和酶的一般性质.本文介绍局限青霉127-2生淀粉水解酶的形成条件和酶的一般性质.1 材料和方法1.1 菌种培养1.1.1 斜面培养:用查氏琼脂斜面培养基在28—30℃培养5—7天.1.1.2 三角瓶振荡培养:于250ml三角瓶中加40ml发酵培养基,经1kg/cm~2 30分钟灭菌,冷却后接种,置于28—30℃的摇床(200r/min)振荡培养4—5天.1.2 酶活力测定     

黑节草的组织培养

植物名称:黑节草(Dendrobum candicum) 材料类别:种子在培养基上形成无菌苗后,将无菌苗的幼茎切成0.2—0.5cm的茎段作培养材料。培养条件:培养种子无菌苗是用RM的大量元素为基本培养基,每升附加BA0.2mg,NAA2mg,蔗糖3％,琼脂适量。培养室温度为20—25℃,光强 10001ux,每天光照8小时。生长与分化情况:黑节草的蒴果按常规作表面灭菌后,将蒴果内的种子播种在培养基上,待形成种子无菌苗后,再将无菌苗的幼茎茎段接种在分化     

小金海棠子叶培养和植株再生

植物名称:小金海棠(molus xiaojinensis)材料类别:小金海棠的种子,用冷水浸泡吸胀,经0.1％升汞消毒15分钟后,无菌水冲洗干净,接种子琼脂培养基上,2～3周后发芽(发芽率只有20～30％左右),然后切取子叶进行离体培养。培养条件:每升MS基本培养基,附加6-BAI～2mg/L(单位下同),NAA0.1～0.2,LH100,肌醇100,蔗糖3％,琼脂粉0.5％,培养温度26±2℃,每天光照8～10小时,光照强度2000 lx。生长与分化情况:子叶接种子培养基上4～5周后,子叶长大变厚呈绿色,近轴面诱导出绿色芽点,逐渐分化成丛生芽,每片子叶可得3～10个绿色     

聚合草花药愈伤组织的诱导和植株再生

植物名称:聚合草(Symphytum officinale)。材料类别:花粉发育时期为单核靠边期的花药。培养条件:诱导愈伤组织培养基以N_6、MS为基本培养基。分别附加 2,4-D0.5、2、4mg/l。蔗糖浓度为5％,pH5.8,将聚合草花药分别接种在以上培养基上,然后置于25℃的培养室内进行暗培     

冬虫夏草不同部位来源的菌株及多次传代固体发酵特性

从西藏新鲜冬虫夏草不同部位分离菌株,并进行固体培养,比较菌丝生长、分生孢子产生情况及不同传代次数菌株的固体培养特性,以获得产生分生孢子数量最多的菌株用于蝙蝠蛾幼虫的侵染。结果表明：单子囊孢子、双子囊孢子和多子囊孢子菌株在斜面上出草能力较好,固体发酵时菌丝生长旺盛,分生孢子产生较多,显著高于组织分离菌株;组织分离菌株中,子座来源的菌株在谷壳和泥炭土培养基中,其产孢能力高于虫体来源的菌株;多次传代（5次传代）菌株在固体斜面上有较明显的退化现象,但在液体及固体发酵方面有着较好的生长以及分生孢子产量。     

冬虫夏草培植技术研究进展

本文对近年来冬虫夏草的培植,包括菌种分离培养、寄主饲养、侵染机理、接种方法及子实体发育条件等研究进展进行了综述。本研究组成功实现了冬虫夏草培植产业化,所培植的冬虫夏草与野生冬虫夏草在虫种、菌种、外观形态、显微结构和化学成分等方面一致。最后分析了冬虫夏草培植技术现阶段存在的问题,并对未来进行了展望。     

长穗冰草的组织培养及植株再生

植物名称:长穗冰草(Agropyron elongatum)。材料类别:无菌萌动的种子。培养条件:以MS为基本培养基,附加3％蔗糖,0.6％琼脂,pH调至6.0左右。按需要分别添加不同激素。(1)诱导愈伤组织培养基:MS+2,4-D2mg/L(单位下同)+NAA2;(2)芽分化培养基:MS+2.4-D0.5+KT0.2或MS+BA2+NAA2;(3)生根培养基:1/2MS+NAA0.5培养室温室26±2℃,每天用40W日光灯辅助照明10～12小时,光照度1500 Ix左右。生长与分化情况:无菌种子接种到培养基(1)中一周左右,开始出现白色疏松的愈伤组织,一个月后愈伤组织增大到2cm左右,继代一次后转入     

二色补血草的组织培养

植物名称:二色补血草(Limonium bicolor)。材料类别:带侧芽的嫩花柄。培养条件:基本培养基为LS。诱导分化及增殖培养基均采用LS+BA 0.6 mg/L(单位下同)+蔗糖3％。生根培养基采用1/2LS+NAA 0.5+蔗糖1.5％。培养温度为20～26℃。光照12小时,光照度为2500±500lx。琼脂0.7％。pH为5.7。     

高产纤维素酶热纤梭菌选育及酶活力最适表达条件研究

1材料与方法1.1材料热纤梭菌:法国Institut Pasteur赠送;稻草粉的制备:取无霉变的新稻草粉碎,过标准筛;酶活力基础培养基(质量分数,%):稻草粉、麦麸、MgSO40.05,K2HPO40.4,KH2PO40.4,MgCl2·6H2O0.05,(NH4)2SO40.5,CaCl2·2H2O0.01,FeSO4·7H2O0.01;纤维素平板培养基:CMC培养基;斜面诱导培养基:稻草粉加适量无机盐组成;培养条件:50℃厌氧缸(N2∶CO2∶H2为90∶5∶5)培养3~4d。1.2方法菌株复壮和UV诱变:将菌株接种在平板培养基上培养,挑选生长好的菌落,在斜面诱导培养基上连续传代数次,接种液体酶活力基础培养基,测定酶活力。…