过硫酸铵-N,N,N′,N′-四甲基乙二胺体系产生的氧自由基及其清除的研究

应用ESR和自旋捕集相结合的技术直接测定了过硫酸铵—N,N,N′,N′-四甲基乙二胺(AP-TEMED)体系产生的氧自由基,经计算机波谱模拟和计算波谱参数证实该体系产生的氧自由基是O_2~-和·OH。并用维生素C、茶多酚、超氧化物歧化酶等氧自由基清除剂,从聚丙烯酰胺凝胶法、化学发光法和脂质过氧化法不同角度研究了AP-TEMED体系在自由基研究方面的应用意义。     

过硫酸铵-N,N,N′,N′-四甲基乙二胺体系产生的氧自由基及其清除的研究

应用ESR和自旋捕集相结合的技术直接测定了过硫酸铵—N,N,N′,N′-四甲基乙二胺(AP-TEMED)体系产生的氧自由基,经计算机波谱模拟和计算波谱参数证实该体系产生的氧自由基是O_2~-和·OH。并用维生素C、茶多酚、超氧化物歧化酶等氧自由基清除剂,从聚丙烯酰胺凝胶法、化学发光法和脂质过氧化法不同角度研究了AP-TEMED体系在自由基研究方面的应用意义。     

用ESR自旋捕集技术研究正常人和病人血清中的SOD活力

本文探讨了用ESR自旋捕集技术测定SOD活力的有关实验条件,并研究了正常人,疾病和恶性肿瘤病人血清中SOD活力的变化,发现恶性肿瘤病人血清SOD活力明显升高,某些疾病患者亦有升高,各组间有显著统计学差异.与化学发光法测定结果比较表明,ESR法测定SOD活力的特异性优于化学发光法.     

血清锰和铜锌超氧化物歧化酶活力测定

超氧化物歧化酶(SOD)是催化超氧自由基歧化反应的一类金属酶。人体内存在Mn-SOD和Cu,Zn-SOD。目前测定SOD活力方法有化学比色法和化学发光法等。化学发光法测定Cu,Zn-SOD灵敏度最高,但应用于Mn-SOD活力测定,灵敏度很低,且需昂贵试剂和仪器。比色法灵敏度低,尚不能准确测定血清SOD活力。我们采用核黄素光照产生的超氧自由基与羟胺反应,建立了测定SOD活力新方法。该法灵敏度高,重复性好,能检测血清Mn-SOD和Cu,Zn-SOD活力,现将方法报告如下。     

自制显示系统检测免疫印迹中的目的蛋白

目前蛋白免疫印迹显示系统有显色法和化学发光法,因化学发光法具有灵敏、快速、准确等特点而倍受科研工作者的青睐,但一般商品化的化学发光试剂盒价格颇为昂贵,为此,在参考文献的基础上作了一些改进,将Tris Cl的pH值从7.5提高到11.0,同时提高了对碘苯酚的浓度（从1mmol/L提高到2mmol/L）,得到了自制的化学发光试剂。首先用其检测了大肠杆菌中表达的2种不同分子量的蛋白（gam,13kDa;bet,30kDa）,发现当蛋白上样量为2~20ng时,各蛋白条带均清晰显示。随后的斑点免疫印迹实验表明：自制及进口化学发光试剂在检测酶标二抗效价方面有着同样高的敏感性。     

超氧化物歧化酶活性测定——Pyrogallol-NBT比色法与化学发光法的比较

取17份健康人外周血SOD粗提液,用Pyrogallol-NBT法和化学发光法进行测定。结果前者均数为85.7±7.5(μg/ml全血),而后者用LKBWallac-1250型发光仪测得均数为87.8±10.8(μg/ml全血),两者非常相近。 Pyrogallol-NBT比色法可以达到化学发光法的效果,且具有设备简单和操作方便之优点。     

化学发光法在梅毒实验诊断中的应用价值

目的:探讨化学发光法在梅毒实验诊断中的应用价值。方法:采用化学发光法、RPR法、TPPA法分别检测150例梅毒患者及125例非梅毒患者血清。结果:化学发光法、RPR法、TPPA法对150例梅毒血清标本和125例非梅毒血清标本对照组的敏感性分别为98.0%、75.3%和97.3%,特异性分别为98.3%、81.6%和97.5%。化学发光法、TPPA法敏感性和特异性明显高于RPR法,差异有统计学意义(P<0.05);化学发光法和TPPA法相比,敏感性和特异性差别不大,差异没有统计学意义(P>0.05);联合3种方法检测,梅毒诊断阳性率可提高到100%。结论:梅毒的化学发光检测法具有极高的敏感性和特异性,是一种自动化、定量检测方法,能够用于梅毒的准确诊断和疗效观察,与传统方法联检可防止误诊、漏诊,具有较大的临床应用价值。     

FCLA-PPIX光触发式静态化学发光体系检测人血清白蛋白

本文对基于FCLA-PPIX触发式化学发光的人血清白蛋白检测体系进行了研究。该触发式化学发光体系利用光敏剂和活性氧探针FCLA组成了一个基本的光触发式化学发光检测体系,将待检测样品和体系充分混合后,通过脉冲光触发和延迟发光检测技术测定人血清白蛋白含量。脉冲触发式静态检测体系克服了其他化学发光体系操作复杂、试剂和样品消耗量大以及信号不稳定的缺点,灵敏度高,检测稳定。本文考察了该体系激发光强度、试剂浓度及温度等对人血清白蛋白检测结果的影响。在优化的实验条件下,测定人血清白蛋白的线性范围为2.5×10-9~6.4×10-7mol/L;方法的检出限为1.6×10-10mol/L;本法对5×10-8mol/L的标准样品平行重复测定11次相对标准偏差为4%。     

基于DIG -化学发光法的Southern blot方法优化

目前,基于DIG-化学发光法的Southern blot技术已在生物实验室广泛应用,但在试验过程中经常会遇到背景黑、目的信号弱等问题,以致不能获得理想结果.在棉花线拉体基因组RFLP分析过程中结合前人经验对基于DIG -化学发光法的Southern blot技术在探针标记、探针浓度、探针剥高等方面进行了优化.优化后的方...     

山羊精子超弱化学发光的研究

最近几年来 ,由于光子计数的发展 ,在弱光通量测定方面有了新的突破 ,动植物有机体在正常的生理状态下 (暗反应 ) ,它们的细胞、细胞器以及动物的肝脏、血液均有光子释放 ,同时由于光通量极弱 ,所以通常称为“超弱化学发光” ,它可以反映有机体基质代谢的综合活动 ,提供活体细胞物理化学反应或更复杂反应的信息 ,是生物体的化学发光 ,即有机物氧化过程中产生的激态分子 ,变到较低状态时 ,以光子形式释放能量。本文研究表明 ,奶山羊的精子存在有超弱化学发光现象 ,精子的超弱化学发光与活力呈强正相关 ,相关系数为 0 .932 5(Ｐ <0 .0 5) ,与…     

光激化学发光法与电化学发光免疫法检测甲胎蛋白的一致性

目的:参照美国国家实验室标准委员会(NCCLS)的EP9-A2文件,对测定血清中甲胎蛋白(AFP)含量的电化学发光免疫法和光激化学发光法进行方法学比对试验,比较二者结果的一致性。方法:收集40例患者血清标本,以罗氏Cobas601电化学发光免疫分析仪为比较仪器(x),博阳LICA光激化学发光免疫分析仪为实验仪器(y),同时检测血清中AFP的含量;分析2种生化仪测定结果之间的相关性和2种方法检测结果的一致性。结果:2种仪器测定的结果相关性良好(r=0.9925),预期偏倚可以接受。结论:在严格按操作规程进行检测的前提下,2种方法测定结果基本一致,其偏差可为临床所接受。当同一实验室同一检验项目存在2种以上检测方法时,应进行方法比对,判断其临床可接受性,以保证检验结果的可比性。     

泥鳅多糖清除活性氧和保护DNA链的作用

采用化学发光法和分光光度法在多种化学模拟体系中研究了泥鳅多糖清除活性氧的作用 ,并用化学发光法观察了泥鳅多糖对·OH导致DNA链损伤的抑制作用。结果表明 ,泥鳅多糖能够有效地清除O·-2 、·OH、H2 O2 等活性氧 ,对DNA链具有良好的保护作用     

锰——超氧化物歧化酶活力测定的五种方法比较研究

 本文分别以CN~-抑制和SDS处理区分Mn-SOD与CuZn-SOD,对五种SOD活力测定方法进行了比较研究。结果表明:(1)化学发光法和光化学扩增法不适用于Mn-SOD活力测定,CN~-和SDS对这两种方法有明显的干扰作用。(2)NBT还原、Cyt c还原和亚硝酸盐形成法都能用于Mn-SOD活力测定,用这三种方法测得Mn-SOD每活力单位相当于酶的含量分别为2.93μg、0.11μg和0.028μg。说明NBT还原法灵敏度最低,其次是Cyt c还原法。亚硝酸盐形成法灵敏度高,专一性强,为五种测定方法之首。     

化学发光法测定葡萄糖

葡萄糖在葡萄糖氧化酶作用下氧化生成葡萄糖酸和过氧化氢,用化学发光法可以测定生成的过氧化氢,从而知道葡萄糖的含量。本法所需样品量少,快速方便,灵敏度较比色法高,适用于大量样品的分析,如血糖,也可用于测定葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、过氧化氢以及金属离子等。测定方法包括葡萄糖的氧化和发光强度的测量两个步骤。     

邻苯三酚-碳酸盐缓冲液化学发光体系的研究

用化学发光法研究了邻苯三酚碱性自氧化产生O₂^-_·的发光行为.通过对测定条件的研究, 得出最佳测定方案.改进后的方法不需使用发光剂Luminol, 所用试剂价廉易得, 且方法稳定, 重现性好.此法灵敏度远高于邻苯三酚自氧化的其他文献报道法.     

一种测定SOD活力的新方法——碱性二甲基亚砜-鲁米诺化学发光法

本文介绍一种测定SOD(超氧化物歧化酶)活力的新的碱性二甲基亚砜——鲁米诺化学发光法。用碱性二甲基亚砜作为产生O₂^-_·体系,用鲁米诺作为指示O₂^-_·的化学发光剂,观察了不同浓度的NaOH、鲁米诺、pH、碱性二甲基亚砜加入量、测定时间及心绿染料对此法的影响。测定了山羊烟雾吸入伤后SOD活力和肺淋巴SOD清除量的变化。结果证明,本法灵敏度高、特异性强、操作简便、方法稳定,可快速、重复测定粗提取生物样品的SOD活力。     

鲁米诺化学发光法在医学中的一些应用简介

近年来,化学发光法已成为医学研究中的得力工具,其中鲁米诺化学发光法尤为重要.鲁米诺(luminol)是一易被氧化的化合物,在水溶液或非水溶液中都能被氧化并常伴有化学发光:     

黄芩甙、茜草素、茶多酚和Trolox抗氧化能力的增强化学发光研究

应用辣根过氧化物－鲁米诺－过硼酸钠－对碘酚增强化学发光体系测量了四种抗氧化剂清除苯氧自由基的能力,并与其清除超氧阴离子和抗鼠肝微粒体脂质过氧化的能力相比较,结果表明,这四种抗氧化剂在不同系统中都有明显的抗氧化能力,抗氧化剂清除苯氧自由基比清除超氧阴离子的能力更接近于抗鼠肝微粒体脂质过氧化的能力,从而提示增强化学发光法在测定抗氧化剂的抗氧化能力上有良好的应用前景。     

MicroLumatPlus——生物化学发光仪

本文介绍一种新的生物及化学发光测定仪器——美国ＥＧ＆Ｇ公司的ＭｉｃｒｏＬｕｍａｔＰｌｕｓ（生物化学发光测定仪）,该仪器在临床检验、分子生物学和细胞生物学方面有着广泛的应用前景。本文就其基本原理以及其在生物医学方面的主要应用做一简单介绍。１ＭｉｃｒｏＬ...     

6个不同产地的太子参对超氧自由基清除作用的研究

采用邻苯三酚自氧化一化学发光体系,应用智能化学发光法对６个不同产地的太子参物的超氧自由基清除能力进行测定。研究结果表明６个不同产地的太子参均具清除超氧自由基的作用,其中以安徽广德产地的太子参抑制自由基能力最强,其半数抑制率达０．５０４６４ｇ／ｍｌ。研究表明,各产地太子参均具稳定的非酶类清除超氧自由基的ＳＯＤ样作用物质。本文对快速检测不同产地的同种药用植物抑制超氧自由基的能力并筛选其优质资源提供了研