基因治疗中的基因调控研究进展

基因治疗的目的是将导入的外源基因能够得到时序上、水平上的正确表达,其产物发挥治疗作用。目的基因表达的调控是影响基因治疗效果的一个重要因素。本文系统介绍了基因靶技术在基因治疗中的地位,提高逆转录病毒载体滴度的方法,逆转录病毒载体与目的基因序列的影响,反式激活提高目的基因应用以及对基因治疗中目的基因表达调控的展望。     

VHL基因的研究进展及其在肾癌基因治疗中的应用

VHL基因是抑癌基因,定位于染色体3p25-26,其产物pVHL与Wnt-β-catenin信号通路、缺氧诱导因子、氧化磷酸化的调控有关。VHL基因的失活会导致VHL蛋白不能正常合成,这与散发性肾透明细胞癌的发生、发展有着密切的关系。VHL基因的失活机制主要包括基因突变,杂合性缺失和甲基化。通过对VHL基因失活机制的研究有助于筛选用于肾透明细胞癌早期诊断与预后的新分子标志物。目前利用VHL基因开展了肾癌基因治疗的试验探索。     

基因治疗在临床应用中的研究进展

20世纪60年代,科学家首次提出利用基因治疗治愈遗传疾病的概念。这一全新的概念性策略旨在通过将外源性遗传物质引入患者体内来获得长期的治疗效果。五十年的风雨沉浮,21世纪取得的里程碑式突破为基因治疗开启了新的篇章。文中回顾和总结了基因治疗的发展历程和重大突破,包括一些重要的临床试验和已批准上市的基因疗法,以及新兴的基因编辑技术。相对于传统疗法的独特优势,基因疗法将会成为治疗遗传疾病的重要手段,必将造福全人类。     

自杀基因在肿瘤基因治疗中的应用

自杀基因治疗肿瘤近年来在国内外研究较多并已取得了明显的疗效。目前发现的自杀基因包括：单纯疱疹病毒胸苷激酶基因、胞嘧啶脱氨酶基因、水痘带状疱疹病毒胸苷激酶基因、硝基还原酶基因、大肠杆菌GPT基因和DEO基因等。     

带HSV-tk基因的重组腺病毒基因治疗小鼠B16黑色素瘤的实验研究

我们成功开展了携带单纯疱疹Ⅰ型病毒胸腺嘧啶激酶基因(Herpes simplex virus thy-midine kinase,HSV-tk)的复制缺陷型重组腺病毒Ad(HSV-tk)结合使用GCV治疗C 57 BL/6小鼠B 16黑色素瘤的离体及动物试验。导入了HSV-tk基因的B16细胞对GCV的杀伤作用高度敏感,IC_(50)约为0.1μg/ml;感染与未感染Ad(HSV-tk)的B 16细胞混合后,可观察到显著的细胞毒杀伤作用——“旁观者效应”。Ad(HSV-tk)直接注入C57BL/6小鼠已建成的B16黑色素瘤内,结合连续6 d腹腔给予GCV,肿瘤结节出现萎缩坏死现象,大小仅为对照组的1/25。灵敏的RT-PCR检测结果表明:瘤内注射Ad(HSV-tk)后,腺病毒的扩散范围是有限的,HSV-tk基因的表达局限于肿瘤组织内。因此,Ad(HSV-tk)/GCV疗法可能为黑色素瘤等恶性实体瘤的治疗提供了一种较为有效、安全的选择方案。     

基因治疗中基因转移技术研究进展

自1990年9月美国首次成功地进行ADA缺乏症的基因治疗以来,基因治疗已成为当前生物医学领域中进展最快的领域之一。迄今为止,已有70余项人体基因治疗计划获美国FDA和重组DNA咨询委员会(RAC)的批准,进入临床试验。基因治疗研究的范围也由最初的遗传病迅速扩展到肿瘤、心血管疾病、感染     

基因治疗的应用研究进展

基因治疗 (ｇｅｎｅｔｈｅｒａｐｙ)是向靶细胞引入正常有功能的基因 ,以纠正或补偿致病基因所产生的缺陷 ,从而达到治疗疾病的目的 ,通常包括基因置换、基因修正、基因修饰、基因失活等。 80年代初 ,Ａｎｄｅｒｓｏｎ首先阐述了基因治疗的概况 ;1990年美国国立卫生研究院的Ｂｌｅａｓｅ等[1] 成功地进行了世界上首例临床基因治疗 ,即腺苷脱氨酶 (ａｄｅｎｏｓｉｎｅｄｅａｍｉｎａｓｅ ,ＡＤＡ)缺陷病的人体基因治疗 ;1991年我国首例基因治疗Ｂ型血友病也获得成功。近年来 ,这一领域的研究取得了重大进展 ,基因治疗作为一种全新的疾病治疗…     

AAV在基因治疗中的靶向修饰研究进展

安全、有效、具有靶向性的病毒载体是基因治疗药物在临床上得以应用的关键。AAV是微小病毒科的一种,它能以其低的免疫原性及广泛的宿主性对人及灵长类进行感染,并且经过改造后的AAV病毒能更有效的靶向性特定组织及肿瘤细胞。重点对AAV病毒载体的衣壳蛋白基因工程修饰、转录调控修饰和转录后microRNA干扰表达修饰及衣壳蛋白化学修饰靶向机理,以及改造方法进行介绍。修饰后的AAV能改善其感染引起的性免疫反应、转染效率和肿瘤靶向性。     

miRNAs在肝细胞肝癌基因治疗中的研究进展

肝癌是严重威胁人类健康的主要恶性肿瘤之一,其中70%~85%是肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)。目前,HCC的各种治疗方法的效果均具局限性。HCC发生发展中的各种生物大分子的变化及其机制是探索新的有效治疗方法的基础。近二十年来发现的微小RNA(micro RNA或mi RNA)在基因表达、蛋白质翻译过程中发挥着重要的调控作用,其异常表达与肿瘤的发生发展密切相关。与此同时,基因治疗作为一种新兴的生物治疗手段,也是目前的研究热点之一。因此,mi RNA正被应用于肿瘤的基因治疗研究之中。该文就mi RNA的作用机制、mi RNA与HCC的关系和mi RNA在HCC基因治疗中的应用研究作一综述。     

细胞因子在肝纤维化基因治疗中的研究进展

肝纤维化是慢性肝损伤的修复反应过程,其形成机制较为复杂,各种细胞因子彼此相互作用,形成细胞因子网络,共同调控肝纤维化的发生、发展.因此,肝纤维化的治疗也应采取综合措施.本文就几种重要的细胞因子,如转化生长因子β、肝细胞生长因子、γ-干扰素、白细胞介素-10、基质金属蛋白酶及其抑制剂和肝再生增强因子等治疗肝纤维化的研究进展作一简要概述.     

M1RNA在基因治疗中的研究进展

E.coli RNase P复合体的M1RNA亚单位是一类具有催化活性的核酶,它切割tRNA前体分子（pre-tRNA）的5′端前导序列,产生成熟的tRNA分子。M1RNA主要通过结构特异性识别底物,不需要底物有特定的序列,从而可设计修饰过的核酶为抑制靶基因的表达,在消除染色体易位产生的肿瘤相关畸形染色体上,M1RNA是一种理想的工具,研究表明M1RNA作为一种新型核酶有着广阔的应用前景和极大的临床价值。     

Rib9ozyme在基因治疗中的研究进展

８０年代嫁妆 ，由美国科学家Ｃｅｃｈ和Ａｌｔｍａｎ发现了Ｒｉｂｏｚｙｍｅ（核酶），随着人类基因工程研究的深入，部分临床实验室工作者和基础科学研究人员开始注意到Ｒｉｂｏｚｙｍｅ在基因治疗中的应用潜力。近几年来，人们利用Ｒｉｂｏｚｙｍｅ可以特异性地切靶ＲＮＡ序列的特点，设计适合的Ｒｉｂｏｚｙｍｅ阻断特定基因的表达，相继对艾滋病、肿瘤、生殖系统疾病、肝炎、白血病、移植排斥反应等疾病进行了大量研究。试验结     

基因编辑猴模型及其在基因治疗研究中的应用前景

基因编辑技术的开创性进展使得利用CRISPR技术建立猴模型并开展病变基因校正成为目前基因治疗研究领域的热点。非人灵长类与人类在进化关系上最为接近,在模型构建、疾病机制研究以及药物研发方面优势突出。随着基因修饰技术在非人灵长类上的逐步应用,目前已经构建出多种与临床患者病症高度吻合的疾病模型,为开展遗传疾病的基因治疗打下了坚实基础。然而,目前基因递送和基因修复系统面临巨大挑战,能否安全、高效、精确地修复致病基因是基因治疗临床转化的关键问题,现将综述基于猴模型开展基因治疗研究的前景及挑战。     

皮肤细胞在基因治疗中的应用

自1990年美国国立卫生研究院首次批准基因治疗方案以来,该领域发展迅速,研究涉及的范围由单基因缺陷的遗传病扩展到了肿瘤、心血管病,爱滋病及结统组织病等。基因治疗是将目的基因转入病人体内并使其有效地表达,在DNA水平上纠正缺陷。目前广泛采用的方法是将正常基因转入病变细胞或其它靶细胞,使其随机整合到细胞基因组的非特异部位并表达,虽未消除病变基因但能够代偿该基因的功能。     

UlsnRNA及其在基因治疗中的应用

U1snRNA是一种富含尿苷酸的具有酶活性的小分子量RNA,其主要特点是剪接核内非均一性RNA成为成熟RNA,只存在于真核细胞核质中,具有在核内定位的特性,有人利用这些特性对UlsnRNA进行人工点突变来纠正某些基因缺陷病,或是构建UlsnRNA-核酶及U1snRNA-反义核酸的嵌合体来进行基因治疗研究并获得了一定成绩。     

反义RNA在基因治疗中的应用

由于反义RNA作为封闭基因表达的有效手段具有特异性强、安全性高、操作简单、靶基因范围广等特点,已被广泛应用于基因治疗肿瘤和病毒相关疾病的研究,反义RNA治疗肿瘤可以通过抑制癌基因的表达、封闭融合癌基因、抑制肿瘤细胞的耐药性、调节细胞因子的表达量等途径;反义RNA治疗病毒相关疾病多集中在艾滋病上,其手段主要是反义封闭TAR。反义RNA作为基因治疗的新途径具有良好的前景,但在设计上和应用上还存在一些急待解决的问题。     

RNA干涉在基因治疗中的应用

RNA干涉(RNA interference,RNAi)是一种可以在细胞内抑制特定基因表达的现象.它由双链RNA产生,可以特异性地降解具有相同或者相似序列的RNA（包括mRNA）.它是一种比反义技术更为有效的方法,具有更高的特异性,逐渐成为研究者关注的焦点.人们已经开始探讨使RNA干涉成为一种比反义药物更为有效药物的可能性及其具体的实施方案, 但是也发现它在成为一种安全有效治疗手段之前还有很长的一段路要走.将从RNA干涉的基本理论入手,分析目前这项技术在治疗研究中的应用以及可能遇到的一些问题.