磷脂酶A2的生理机能新说

磷脂酶Ａ２的生理机能新说杜晓燕周元聪（中国科学院上海生物化学研究所,上海２０００３１）关键词磷脂酶Ａ２生理机能磷脂酶Ａ２（ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＡ２,ＥＣ３．１．１．４）,简称ＰＬＡ２。它能水解甘油磷脂的第二位酯酰键,生成溶血磷脂和脂肪酸,如下式...     

信息库

１．在气升式生物反应器中用米根霉重复分批培养生产Ｌ（＋）┐乳酸米根霉（Ｒｈｉｚｏｐｕｓｏｒｙｚａｅ）以玉米淀粉为原料在气升式生物反应器中可以生产出旋光纯度高和生产成本低的Ｌ（＋）－乳酸（参见“工业微生物”,１９９８,２８（１）：信息库１）。但是在一般...     

脓毒血症大鼠心肌II型磷脂酶A_2活性变化及其调控

观察了脓毒血症大鼠心肌ＩＩ型ＰＬＡ２ 活性、蛋白质含量及其ｍ ＲＮＡ 的变化。结果发现, 脓毒血症早期与晚期心肌ＩＩ型ＰＬＡ２ 活性较对照组分别降低２５ ．０ ％ （Ｐ ＜ ０ ．０５）及增高４７．６ ％ （Ｐ ＜ ０ ．０１）,ＩＩ型ＰＬＡ２ 蛋白质含量分别降低２７．０％ 及增高４８ ．０ ％（ 均Ｐ ＜ ０ ．０１）; 心肌ＩＩ型ＰＬＡ２ ｍ ＲＮＡ合成率与含量呈现类似的双相变化, 在脓毒血症早、晚期ｍＲＮＡ 合成率分别降低４５．０％ 和升高７０．０ ％ （均Ｐ ＜ ０ ．０１）,ｍＲＮＡ含量分别降低３４．１ ％ 和增加１５７ ．０％ （均Ｐ＜ ０ ．０１） 。脓毒血症早、晚期心脏ＩＩ型ＰＬＡ２ ｍ ＲＮＡ半衰期无显著变化（Ｐ ＞ ０．０５） 。实验结果表明大鼠脓毒血症发生过程中心肌ＩＩ型ＰＬＡ２ 活性呈现出先下降后升高的变化, 这一变化受其ｍＲＮＡ 转录水平的调节。     

尖吻蝮蛇毒磷脂酶A2基因的克隆与序列分析

从尖吻蝮蛇毒腺中抽提总ＲＮＡ,经ＲＴＰＣＲ扩增磷脂酶Ａ２的基因,以江浙蝮蛇的酸性磷脂酶Ａ２基因为探针杂交筛选克隆,分离得到４种磷脂酶Ａ２基因。经双向测序测定了这些磷脂酶Ａ２同功酶基因的全序列,并由此推导出编码的氨基酸序列。运用计算机软件推算了它们的等电点,按照等电点和结构特征将它们分别命名为尖吻蝮蛇毒酸性磷脂酶Ａ２Ｉ（Ａ．ａＡＰＬＡ２Ｉ）、尖吻蝮蛇毒酸性磷脂酶Ａ２ＩＩ（Ａ．ａＡＰＬＡ２ＩＩ）、尖吻蝮蛇毒碱性磷脂酶Ａ２（Ａ．ａＢＰＬＡ２）和尖吻蝮蛇毒Ｌｙｓ４９磷脂酶Ａ２（Ａ．ａＬｙｓ４９ＰＬＡ２）。其中Ａ．ａＡＰＬＡ２Ｉ的１～１０位氨基酸残基序列同以前分离得到的尖吻蝮蛇酸性磷脂酶Ａ２已测定的１～１０位氨基酸残基序列完全一致。Ａ．ａＬｙｓ４９ＰＬＡ２基因则由于其推导出的４９位氨基酸残基由Ｌｙｓ代替了Ａｓｐ而区别于以前克隆到的磷脂酶Ａ２基因。最后运用计算机软件比较了它们的同源性。这一组磷脂酶Ａ２基因的克隆,将为进一步研究磷脂酶Ａ２的结构与功能的关系提供更多的信息。     

尖吻蝮蛇毒酸性磷脂酶A2泊表达及其生化特征

将尖吻蝮蛇毒酸性磷脂酶Ａ２Ｉ（Ａ．ａＡＰＬＡ２Ｉ）的基因克隆至表达载体ｐＢＬＭＶＬ２,在大肠杆菌ＲＲ１中成功表达,表达产物Ａ．ａＡＰＬＡ２Ｉ约占细菌蛋白质总量的３０％,以包含体的形式存在。纯化包含体后,将产物变性,复性,然后用ＦＰＬＣ Ｓｕｐｅｒｏｓｅ ＾ＴＭ１２纯化,产物经过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测只有单一条带。     

磷脂酶A2对中性粒细胞趋化和粘附的影响

胰源性１４×１０￣３ｕ磷脂酶Ａ＿２（ＰＬＡ＿２）在体外同大鼠中性粒细胞（ＰＭＮ）培养６０ｍｉｎ后,细胞对ＴＮＦ趋化增强,培养１０ｍｉｎ后上清液中血栓素（ＴＸＢ＿２）含量比正常增高（Ｐ＜０．０１）。前列环素（ＰＧＩ＿２）含量不变。ＰＬＡ＿２激动剂Ａ２３１８７也能显著加强中性粒细胞对ＴＮＦ的趋化,并伴有ＴＸＢ＿２释放增多（Ｐ＜０．０１）。此外,ＰＬＡ＿２和Ａ２３１８７还显著增强ＰＭＮ对玻璃珠的粘附活性。使用ＰＬＡ＿２抑制剂二溴苯乙酮（ＰＢＰＢ）和ＰＬＡ＿２多克隆抗体可抑制外源性ＰＬＡ＿２对ＰＭＮ趋化和粘附的增强作用,但对Ａ２３１８７的调节作用无效。以上结果表明ＰＬＡ＿２激活及其代谢产物可能介导ＰＭＮ趋化和粘附作用。     

脓毒血症大鼠心肌Ⅱ型磷脂酶A2活性变化及其调控

观察了脓毒血症大鼠心肌ＩＩ型ＰＬＡ２活性,蛋白质含量及其ｍＲＮＡ的变化,结果发现,脓毒血症早期为晚期心肌ＩＩ型ＰＬＡ２活性较对照组分别降低２５．０％（Ｐ〈０．０５）及增高４７．６％（Ｐ〈０．０１）,ＩＩ型ＰＬＡ２蛋白质含量分别降低了２７．０％及增高４８．０％（均Ｐ〈０．０１）,心肌ＩＩ型ＰＬＡ２ｍＲＮＡ合成率与含量呈现类似的双相变化,在脓毒血症早,晚期ｍＲＮＡ合成率分别降低４５．０％和升高７０．０     

类胀泡结构是合成核糖核酸多聚酶Ⅱ转录产物的核内结构

采用可定位研究新生ＲＮＡ多聚酶Ⅱ（ＲＰⅡ）转录产物的溴尿嘧啶核苷三磷酸（ＢｒＵＴＰ）标记技术，对洋葱（ＡｌｉｕｍｃｅｐａＬ．）根端分生组织细胞核中的类胀泡结构（ＰＬＳ）进行了研究。经ＢｒＵＴＰ和抗ＢｒｄＵ抗体标记后，在电镜下观察到ＰＬＳ中存在大量的金颗粒，说明该结构中进行着旺盛的ＲＰⅡ转录产物的合成；经α鹅膏蕈碱（αＡ，１０μｇ／Ｌ，２ｈ）处理后，ＰＬＳ中金颗粒的减少极其显著，其金颗粒密度从６６．６５个／μｍ２降至１．７７个／μｍ２，进一步确认该结构上的金颗粒代表ＲＰⅡ转录产物。并且进一步证明该结构是合成ＲＰⅡ转录产物的核内结构。     

叶绿体DNA及其在植物系统学研究中的应用

叶绿体ＤＮＡ及其在植物系统学研究中的应用黄瑶,李朝銮,马诚,吴乃虎（中国科学院成都生物研究所,成都,６１００４１）（中国科学院发育生物学研究所,北京,１０００８０）ＣＨＬＯＨＯＰＬＡＳＴＤＮＡＡＮＤＩＴＳＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＴＯＰＬＡＮＴＳＹＳＴＥ...     

磷脂酶A2活性对中性粒细胞凋亡的影响

细胞凋亡（Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）是一种机体保持内环境稳定的特殊方式。正常情况下,中性粒细胞（ＰＭＮ）绝大部分通过凋亡而被清除,避免因坏死而造成组织损伤。我们在研究磷脂酶２（ＰＬＡ２）激活介导创伤和感染的机理时,发现其活性介导ＴＮＦ对ＰＭＮ的激发作用。其它证据也显示ＰＬＡ２及其代谢产物在细胞凋亡过程中发挥作用,我们推测ＰＬＡ２活性对ＰＭＮ凋亡或坏死的影响,可能是控制炎症反应的主要途径。这方面的工作尚少见,本文初步报告如下。１　材料和方法（１）材料和主要试剂　雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠由本院动物中心提供。Ｐ…     

类卟啉稀土配合物对于小鼠腹水肝癌细胞光敏损伤的研究

研究了类卟啉稀土配合物（以下简称ＰＬＭ—Ｇｄ—Ａ）对小鼠腹水肝癌细胞（ＡＨ）的光敏作用及ＡＨ细胞对ＰＬＭ一Ｇｄ—Ａ的摄取表明：ＰＬＭ－Ｇｄ－Ａ被ＡＨ细胞摄取的速度快（大约１０ｍｉｎ可达到平衡）,用ＭＴＴ方法测定了细胞光敏存活曲线,杀伤细胞的能力与光照时间和光照强度以及ＰＬＭ—Ｇｄ的浓度密切相关,用ＦＡＤＵ方法和电镜观察结果证明：该光敏损伤细胞的靶主要是在细胞核;对于不同稀土离子配合物光敏能力比较表明：Ｇｄ＞Ｅｕ＞Ｓｍ;造成细胞死亡的原因包括１Ｏ２、在内的活性氧。     

长时间失血性休克大鼠肝胞液糖皮质激素受体与磷酯酶A2变化的研究

长时间失血性休克大鼠肝胞液糖皮质激素受体与磷酯酶Ａ２变化的研究许金廉刘志民１曲莉２贾宁阳１（第二军医大学生理学教研室,上海２００４３３;１第二军医大学长征医院,２解放军１４５医院）长时间失血性休克可致多器官功能衰竭。磷酯酶Ａ２（ＰＬＡ２）作为糖皮质激...     

植物细胞质膜氧化还原系统

植物细胞质膜氧化还原系统陈珈（北京农业大学生物学院。北京１０００９４）ＲＥＤＯＸＳＹＳＴＥＭＩＮＴＨＥＰＬＡＳＭＡＭＥＭＢＲＡＮＥＯＦＰＬＡＮＴＣＥＬＬ￥ＣｈｅｎＪｉａ（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａ！Ｓｃｉｅｎｃｅｓ,ＢｅｉｊｉｎｇＡｇｒｉｃ...     

牛磺酸调节缺氧性肺、脑血管反应的机理研究

本实验从磷脂酶Ａ＿２（ＰＬＡ＿２）、前列腺素（ＰＧｓ）、白三烯（ＬＴｓ）和过氧化脂质（ＬＰＯ）方面探讨了牛磺酸调节肺、脑血管对急、慢性缺氧反应的机制。急性缺氧时狗出肺与出脑血中ＬＰＯ增加,ＰＬＡ,活性有升高趋势,但出脑与出肺（入脑）血相比无显著性差异。出肺与出脑血中ＬＴＣ＿４、ＴＸＢ＿２、６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１ａ）及ＴＸＢ＿２／６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１ａ）比值均升高。慢性缺氧大鼠肺、脑组织中ＰＬＡ＿２活性均升高。牛磺酸增加缺氧时６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１ａ）,减弱其它变化。提示牛磺酸对缺氧性肺缩血管反应的调节作用可能与降低缺氧时ＰＬＡ＿２活性,抑制脂质过氧化和ＬＴＣ＿４、ＴＸＡ＿２生成,降低ＴＸＡ＿２／ＰＧＩ＿２比值有关;而牛磺酸减弱缺氧性脑舒血管反应不是直接通过上述变化起作用的。     

几株乳酸菌的分离鉴定

通过厌氧分离技术,从鸡肠道和西红柿花面分离得到五株产乳酸细菌,根据《伯杰细菌鉴定手册》（第八版）［１］鉴定ＳＢ１、ＳＢ２４５１、ＳＢ３１５１均为干酪乳杆菌（Ｌ．ｃａｓｅｉ）,Ａ、ＳＡ则可能是乳酸菌的一个新种。五株菌均为同型发酵,乳酸产量均达到９６％以上．对抗生素等药物及低ｐＨ有一定耐受性,是益生素饲料添加剂的优良菌种［２］。     

磷脂酶A2阻断剂对失血性休克再灌注损伤的保护作用

磷脂酶Ａ２阻断剂对失血性休克再灌注损伤的保护作用颜光涛郝秀华王录焕江潮光１田亚平２王成彬２李振甲（解放军总医院临床医学研究所,１科训处,２生化科,北京１００８５３）磷脂酶Ａ２（ＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＡ２,ＰＬＡ２）激活后水解释放花生四烯酸代谢产物...     

江浙蝮蛇磷脂酶A2基因的多样性研究

我们利用简并引物从江浙蝮蛇腺总ＲＮＡ经ＲＰ－ＰＣＲ扩增磷脂酶Ａ２（简称ＰＬＡ２）基因,并以碱性ＰＬＡ２（Ｂ－ＰＬＡ２）基因为探针,分离出了酸性ＰＬＡ２（Ａ－ＰＬＡ２）和两个未见报道的特征结构类同的基因,分别命名为Ａｓｎ＾４８－ＰＡＬ２和ＢＡ－ＰＡＬ２。双向测序测定了这组ＰＬＡ２同工酶（除信号肽外）基因的全序列,并由此推导编码的氨基酸序列。其中Ａ－ＰＬＡ２基因编码的氨基酸序列与较早报道的由蛇毒中分离     

对1993年香港中学高级程度会考生物试卷的浅析（续）

对１９９３年香港中学高级程度会考生物试卷的浅析（续）试卷二三小时完卷（下午二时至五时）说明：１．选答５题;其中甲部分２题,乙部分２题和两部分１题。２．甲部分答案必须写在ＡＬ（Ｃ）１答题簿内,乙部分答案必须写在ＡＬ（Ｃ）２答题簿内,两部分答案必须写在Ａ...     

酵母K.fragilis甘油醛—3—磷酸脱氢酶基因的克隆

根据已克隆的马克斯克鲁维酵母（Ｋ．ｍａｒｘｉａｕｓ）,乳酸克鲁维酵母（Ｋ．ｌａｃｔｉｓ）与酿酒酵母（Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｅｉａｅ）甘油醛－３－磷酸脱氢酶（ＧＡＰ）基因的核苷酸序列同源性分析设计ＧＡＰ探针,以该探针与脆壁克鲁维酵母（Ｋ．ｆｒａｇｉｌｉｓ）ＣＢＳ３９７基因文库进行原位杂交,得到一阳性克隆ｐＧ１并通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交实验得以证实。该克隆所携带的ＧＡＰ１基因的部分序列也已被测定。利用     

影响血清中GPI-PLD活性检测的因素

采用在碱性条件下正丁醇抽提的人胎盘膜上的碱性磷酸酶（ＡＬＰ）作底物, 检测血清中糖基磷脂酰肌醇－ 特异性的磷脂酶Ｄ （ＧＰＩ－ＰＬＤ） 的活性水平． 这种ＡＬＰ 含疏水的ＧＰＩ锚定膜结构（ａｎｃｈｏｒ）, 与血清保温后能被其中的ＧＰＩ－ＰＬＤ降解成亲水的不含ＧＰＩ－锚定的ＡＬＰ． 采用Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１１４ 二相分离法和梯度凝胶电泳法来分离含ＧＰＩ的ＡＬＰ和不含ＧＰＩ的ＡＬＰ, 计算出转化率（％ ）, 用来表示ＧＰＩ－ＰＬＤ酶活性． 对这两种方法进行比较后, 表明在一般实验室条件下, 二相分离法更为简便, 并对其影响因素进行了全面探讨．