转基因烟草中Bt毒蛋白基因的表达行为

构建了高效植物表达载体ｐＢｉｎＭｏＢｃ,该载体携带超强表达复合启动子ＯＭ及Ω因子控制下的ＣｒｙＩＡ（ｃ）基因。采用根癌土壤杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ（Ｓｍｉｔｈ ｅｔ Ｔｏｗｎｓｅｎｄ）Ｃｏｎｎ）介导的方法转化烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ Ｌ．）,ＥＬＩＳＡ检测表明,大多数转基因烟草中ＣｒｙＩＡ（ｃ）基因表达量均超过０．１％,最高可达０．２５５％;转基因烟草     

金属硫蛋白突变体的植物高效表达载体的构建及其在烟草中的表达

金属硫蛋白有α、β两个结构域（ｄｏｍ ａｉｎ）,其中α结构域优先结合Ｃｄ２＋ 和Ｈｇ２＋ ．小鼠αα突变体在大肠杆菌中已经构建并得到表达,其转基因植株已得到,可在Ｃｄ３００（３００ μｍ ｏｌ／Ｌ）中生长．为了进一步提高外源基因在烟草中的表达量,首先用ＰＣＲ 的方法设计引物,在基因翻译起始密码子ＡＴＧ 附近加入植物偏爱的碱基组合ＡＡＣＡＡＴＧ．另外,将该突变体基因插入具有双３５ Ｓ（ＣａＭＶ３５Ｓ）强启动子的植物双元表达载体ｐＧＰＴＶｄ３５Ｓ－ＢＡＲ中,获得了带有αα突变体的植物双元表达载体．通过农杆菌介导的叶盘转化法转化烟草ＮＣ８９,获得了抗除草剂的转基因植株．经ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 和蛋白Ｄｏｔ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ 检测,证明了αα突变体在烟草中的嵌合与表达．抗重金属实验证明转基因烟草可以在Ｃｄ４００（４００ μｍ ｏｌ／Ｌ）中生长．     

《植物维生素：农学、生理学和营养学领域》

《植物维生素：农学、生理学和营养学领域》（植物维＆素：农＊、＆理学和营养学领域）（ＰｌａｎｔＶｉｔａｍｉｎｓ：ａｇｒｏｎｏｎｌｉｃ,Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｇｌｉａｌｉｕｔｒｉ－ｉｏｎａｌ。ｐｏｅｔｓ）由Ａ．Ｍｏｚａｆａｒ著,１９９４年ＣＲＣ出版社...     

氮磷钾肥施用对蔬菜中硝酸盐积累的数学模型

氮磷钾肥施用对蔬菜中硝酸盐积累的数学模型段咏新付庭治（徐州师范学院生物系,２２１００９）（南京大学生物系,２１０００８）ＭａｔｈｅｍａｔｉｃａｌＭｏｄｅｌｏｎＮｉｔｒａｔｅＡｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｉｎＶｅｇｅｔａｂｌｅａｆｔｅｒＡｐｐｌｙｉｎｇＮ,ＰａｎｄＫＦｅｒｔｉｌｉｚｅｒｓ￥ＤｕａｎＹｏｎｇｘｉｎ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢｉｏｌｏｇｙ,ＸｕｚｈｏｕＴｅａｃｈｅｒ＇ｓＣｏｌｌｅｇｅ,２２１００９）,ＦｕＴｉｎｇｚｈｉ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢｉｏｌｏｇｙ,ＮａｎｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ,２１０００８）．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｃｏｌｏｇｙ,１９９３,１２（６）：３４－３６．ＩｎＴｈｉｓｐａｐｅｒ,ａｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎｗｏｄｅｌｏｎｎｉｔｒａｔｅａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｉｎｓｐｉｒａｃｈｉｓｅｓｔａｂｌｉｓｅｄ,ｗｈｉｃｈｃａｎｐｒｅｄｉｃｔｔｈｅａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎａｍｏｕｎｔｏｆｎｉｔｒａｔｅｕｎｄｅｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｒａｔｅｓｏｆＮ,ＰａｎｄＫｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒｓ。Ｕｓｉｎｇｔｈｉｓｍｏｄｅｌ,ｔｈｅｎｉｔｒａｔｅｃｏｎｔｅｎｔｉｎｓｐｉｒａｃｈｃａ     

竹节花黄斑驳病毒启动了在棉花维管组织中是一个强启动子

用竹节花黄斑驳病毒（Ｃｏｍｍｅｌｉｎａ Ｙｅｌｌｏｗ Ｍｏｔｔｌｅ Ｖｉｒｕｓ,ＣｏＹＭＶ）启动子－ｇｕｓ嵌合基因和ＣａＭＶ３５Ｓ－ｇｕｓ嵌合基因通过根癌土壤杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ（Ｓｍｉｔｈ ｅｔ Ｔｏｗｎｓｅｎｄ）Ｃｏｎｎ）ＬＢＡ４４０４介导分别转入棉花（Ｇｏｓｓｙｐｉｕｍ ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｌ．ｃｖ．Ｊｉｎｇｍｉａｎ７,Ｊ７Ｇ）,诱导再生了棉花转基因植株。Ｇ     

植物对环境污染的适应与植物的微进化

植物对环境污染的适应与植物的微进化段昌群（云南大学生物系昆明６５００９１）ＰｌａｎｔＡｄａｐｔａｔｉｏｎｔｏＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＰｏｌｌｕｔｉｏｎａｎｄＩｔｓＭｉｃｒｏ－ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ￥,ＤｕａｎＣｈａｎｇｑｕｎ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢ...     

云南葡萄科植物新分类群

云南葡萄科植物新分类群＊⒇李朝銮（中国科学院成都生物研究所，成都６１００４１）ＮＥＷＴＡＸＡＯＦＶＩＴＡＣＥＡＥＦＲＯＭＹＵＮＮＡＮＬｉＣｈａｏｌｕａｎ（ＣｈｅｎｇｄｕＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｉｏｌｏｇｙ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃ...     

用全息观点看农业生态经济系统

用全息观点看农业生态经济系统曹志平（北京农业大学生物学院,１０００９４）ＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＡｇｒｏ－ＥｃｏｌｏｍｉｃＳｙｓｔｅｍＦｒｏｍｔｈｅＶｉｅｗｐｏｉｎｔｓｏｆＨｏｌｏｇｒａｐｂｙ．￥ＣａｏＺｈｉｐｉｎｇ（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢｉｏｌｏｇｙ,Ｂ...     

表达马铃薯Y病毒外壳蛋白的转基因烟草的抗病性研究

将马铃薯Ｙ病毒中国分离物（ＰＶＴ－Ｃ）的外壳蛋白（ＣＰ）基因,在土壤农杆菌ＬＢＡ４４０４的介导下,转化烟草生产品种ＮＣ８９,获得了６个烟草株系。通过抗性分析发现,６个株系中有一个株系在２００μｇ／ｍｌＰＶＹ－Ｃ的攻毒下,仍未发病,分子检测发现,转基因植物中抗性产生的程度并不是同ＰＶＹ－Ｃ外壳蛋白的表达水平成正相关。     

International Young Life Scientist Programme

Ａｔｔｈｅ１８ｔｈＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＣｏｎｇｒｅｓｓｏｆＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ,Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ,ＥｎｇｌａｎｄＴｈｅＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＵｎｉｏｎｏｆＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ（ＩＵＢＭＢ）,ｔｈｅＦｅｄｅｒａｔｉｏｎｏｆＥｕｒｏｐｅａｎＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌＳｏｃｉｅｔｉｅｓ（ＦＥＢＳ）,ａｎｄｔｈｅＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌＳｏｃｉｅｔｙａｎｎｏｕｎｃｅｔｈｅｓｐｏｎｓｏｒｓｈｉｐｏｆａＳｙｍｐｏｓ…     

双抗（抗病毒及抗虫）植物表达载体的构建及番茄的化鉴定

将抗病毒的ＣＭＶ－ｃｐ基因和抗虫的Ｂｔ－ｔｏｘｉｎ基因依次插入到植物表达载体ＰＥ３的ＨｉｎｄⅢ和ＫｐｎⅠ位点,通过菌落原位杂交筛选和酶切鉴定,然后以土壤农杆菌ＧＶ３１１－ＳＥ介导转化番茄,胭脂碱检测,染色体ＤＮＡ的点杂交及ＰＣＲ扩增证明ＣＭＶ－ｃｐ基因和Ｂｔ－ｔｏｘｉｎ基因已同时导入转化再生的番茄植株。ＲＮＡ点杂交证明ＣＭＶ－ｃｐ基因和Ｂｔ－ｔｏｘｉｎ基因已在转基因番茄植株中同时获得表达。     

双抗(抗病毒及抗虫)植物表达载体的构建及番茄的转化鉴定

将抗病毒的ＣＭＶ－ｃｐ 基因和抗虫的Ｂｔ－ｔｏｘｉｎ 基因依次插入到植物表达载体ｐＥ３ 的ＨｉｎｄⅢ和ＫｐｎⅠ位点,通过菌落原位杂交筛选和酶切鉴定,然后以土壤农杆菌ＧＶ３１１－ＳＥ介导转化番茄,胭脂碱检测,染色体ＤＮＡ 的点杂交及ＰＣＲ扩增证明ＣＭＶ－ｃｐ 基因和Ｂｔ－ｔｏｘｉｎ 基因已同时导入转化再生的番茄植株。ＲＮＡ 点杂交证明ＣＭＶ－ｃｐ 基因和Ｂｔ－ｔｏｘｉｎ 基因已在转基因番茄植株中同时获得表达。     

利用基因组相减杂交法从鼻咽癌中分离部分缺失的新序列

利用基因组相减杂交法从鼻咽癌中分离部分缺失的新序列曹亚ＧｌｅｎｎＨｅｇａｍｙｅｒ,ＬｅｏＭ．Ｌｅｅ,ＮａｎｃｙＨ．Ｃｏｌｂｕｒｎ,ＹＩＳｕｎ湖南医科大学肿瘤研究所,长沙４１００７８;（ＣｅｌｌＢｉｏｌｏｇｙＳｅｃｔｉｏｎ,ＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＶｉ...     

关于灌木生物量建模方法的改进

关于灌木生物量建模方法的改进张峰,上官铁梁李素珍（山西大学生物系,太原０３０００６）（太原治金工业学校,０３０００２）ＩｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｏｎｔｈｅＭｏｄｅｌｌｉｎｇＭｅｔｈｏｄｏｆＢｉｏｌｍａｓｓｏｆＢｒｕｓｈ￥ＺｈａｎｇＦｅｎｇ;ＳｈａｎｇｇｕａｎＴｉｅｌｉａｎｇ（Ｄｅｐａｒｔ－ｍｅｎｔｏｆＢｉｏｌｏｇｙ,ＳｈａｎｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ,Ｔａｉｙｕａｎ０３０００６）,ＬｉＳｕｚｈｅｎ（ＴａｉｙｉｉａｎＭｅｔａｌｌｉｔｒｇｉｃａｌＳｃｈｏｏｌ,Ｔａｉｙｕａｎ０３０００２）．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＶＥｃｏｌｏｇｙ,１９９３,１２（６）：６７－６９．ＤｕｒｉｎｇｍａｋｉｎｇｒｅｓｅａｒｃｈｏｎｔｈｅｂｉｏｍａｓｓｏｆＥｌａｅａｇｎｕｓｍｏｌｌｉｓ,ｔｈｅｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎｍｏｄｅｌｏｆｔｈｅｂｉｏｍａｓｓｉｓｂｕｉｌｔｂｙｒｅｐｌａｃｉｎｇＤ￣２ＨｗｉｔｈＣＨ,Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｈｏｗｓｔｈａｔｎｏｔｏｎｌｙｉｔｉｓｃｏｎｖｉｎｉｅｎｔｉｎｔｈｅｆｉｅｌｄｗｏｒｋ,ｂｕｔａｌｓｏｔｈｅｆｏｒｅｃａｓｔｍｏｄｅｌｈａｓｍｏｒｅＤｒｅｃｉｓｉｏｎｗｈｅｎＣＨｉｓｕｓｅｄａｓｔｈｅｉｎｄｅｐｅｎｄ     

利用TMV—U1作为载体表达鼠肝炎病毒S糖蛋白片段

为了验证转基因烟草中表达的外壳蛋白（ＣＰ）能够重新包被侵入的烟草花叶病毒（ＴＭＶ）的假设,利用抗原表位标记的方法观察ＣＰ亚单位在病毒５′端的交换。通过ＰＣＲ 方法将来源于鼠肝炎病毒（ＭＨＶ） Ｓ蛋白的两个小肽段（１１ ａ．ａ．和１５ ａ．ａ．）的ＤＮＡ序列分别插入ＴＭＶ－Ｕ１ ＣＰ基因邻近３′端的两个位点,并构建了带有外源序列的ＴＭＶ 侵染克隆Ｖ９ （１１ ａ．ａ．）和Ｅ１５ （１５ ａ．ａ．）。通过体外转录反应,得到Ｖ９ ＲＮＡ 及Ｅ１５ ＲＮＡ。突变病毒ＲＮＡ 侵染烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ ）后表现不同特性。Ｖ９ 和Ｅ１５ 侵染ＸａｎｔｈｉＮＮ烟草后同野生型ＴＭＶ一样产生枯斑。但是,当它们侵染Ｘａｎｔｈｉｎｎ 烟草时,Ｖ９ 产生同侵染ＸａｎｔｈｉＮＮ 烟草相同的枯斑,而Ｅ１５的特性同ＴＭＶ－Ｕ１几乎完全相同,能对Ｘａｎｔｈｉｎｎ 烟草进行系统侵染并在叶片中聚集大量的带有外源片段的外壳蛋白,而且病毒的结构极其稳定。Ｖ９ 和Ｅ１５ 特性的差异可能是由于外源片段在外壳蛋白中存在位置的不同影响了外壳蛋白的结构所致     

太岳山丘陵地带中国林蛙成体的肥满度和某些器官系数的季节变化

太岳山丘陵地带中国林蛙成体的肥满度和某些器官系数的季节变化卢欣（山西省生物研究所,太原０３０００６）ＳｅａｓｏｎａｌＶａｒｉａｔｉｏｎｓｏｆＡｄｕｌｔ’ｓＣｏｒｐｕｌｅｎｃｅＤｅｇｒｅｅａｎｄＯｔｈｃｒＯｒｇａｎｓ’ＩｎｄｉｃｅｓｏｆＣｏｍｍｏｎＦｒｏｇｓｉｎＴａｉｙｕｃＭｏｕｎｔａｉｎＩＩｉｌｌｙＬａｎｄｓ￥．ＬｕＸｉｎ（ＳｈａｎｘｉＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｉｏｌｏｇｙ,Ｔａｉｙｕａｎ０３０００６）．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｃｏｌｏ－ｇｙ,１９９３,１２（４）：３３－３５．ＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｓｗｅｒｅｃａｒｒｉｅｄｏｕｔｆｒｏｒｎＦｅｂｒｕａｒｙ１９８９ｔｏＡｐｒｉｌ１９９０ｉｎＴａｉｙｕｅｍｏｕｎｔａｉｎｏｆＳｈａｎｘｉｐｒｏｖｉｎｃｅ．Ｔｈｅａｄｕｌｔ＇ｓｃｏｒｐｕｌｅｎｃｅｄｅｇｒｅｅｏｆｃｏｍｍｏｎｆｒｏｇｓｉｓｈｉｇｈｅｒｄｕｒｉｎｇｈｉｂｅｒｎａｔｉｏｎａｉｄｌｏｗｅｓｔｉｎＭａｙａｎｄＪｕｎｅ,ａｎｄｔｈａｔｏｆｍａｌｅｓｉｓｓｉｇｎｌｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｆｅｍａｌｅｓ’（ｅｘｃｅｐｔｉｎＡｕｇｕｓｔ）．ＤｕｒｉｎｇＡｐｒｉｌ－Ａｕｇｕｓｔ,ｔｈｅｃｏｅｆ－     

马铃薯Y病毒NIb复制酶基因在转录水平介导的相对广谱抗病性

在大肠杆菌中表达了马铃薯Ｙ病毒中国分离物（ＰＶＹ－Ｃ）复制酶ＮＩｂ基因,并制备了其抗血清。利用ＰＣＲ定点突变方法使ＮＩｂ基因移码－１位,构建了移码－１位ＮＩｂ基因（ＵＮ）的植物表达载体。通过土壤农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ ＬＢＡ４４０４）介导转化烟草ＮＣ８９,获得５１株再生植株。对再生植株的分子检测结果表明,转基因烟草中检测到ＵＮ基因相应的ＲＮＡ转录产物,３推测该基     

Epstein—Barr病毒膜抗原基因免疫的研究

将Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ病毒（ＥＢＶ）膜抗原（ＭＡ）ＢＬＬＦ１基因,插入含有ＣＭＶ启动子的真核表达载体ｐｃＤＮＡ３下游ＢａｍＨＩ位点,构建成真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３－ＭＡ。将纯化的ＤＮＡ注射Ｂａｌｂ／ｃ小鼠股四头肌。经免疫的动物产生抗ＥＢ病毒ＭＡ特异性的抗体和中和抗体,依赖抗体细胞介导的细胞毒作用（ＡＤＣＣ）,特异性Ｔ淋巴细胞增生性反应及细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）杀伤作用。基因免疫与基因－蛋白     

高产稳产聚羟基烷酸的重组大肠杆菌的构建

重组大肠杆菌Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉＨＭＳ１７４（ｐＴＺ１８ＵＰＨＢ） 含有携带聚羟基烷酸（ＰＨＡ） 合成基因（ ｐｈａＣＡＢ）＊＊ 的质粒ｐＴＺ１８ＵＰＨＢ,是很有潜力的ＰＨＡ 生产菌,但存在着质粒不稳定和不能合成３羟基丁酸（３ＨＢ） 与３羟基戊酸（３ＨＶ） 共聚物［Ｐ（３ＨＢｃｏ３ＨＶ）］ 的缺陷。将ＲＫ２ 质粒上的ｐａｒ ＤＥ 基因引入ｐＴＺ１８ＵＰＨＢ 构成质粒ｐＪＭＣ２ ,该质粒可以在宿主Ｅ．ＣｏｌｉＨＭＳ１７４ 中稳定遗传。将培养基中的磷酸盐浓度降至１８ ｍ ｍｏｌ／Ｌ,发现Ｅ．Ｃｏｌｉ ＨＭＳ１７４（ｐＪＭＣ２） 能够以丙酸为前体合成Ｐ（３ＨＢｃｏ３ＨＶ） ,其中３ＨＶ 在共聚物中的含量为５ ％ ～８ ％ 。在５Ｌ自动发酵罐中分批补料培养Ｅ．Ｃｏｌｉ ＨＭＳ１７４（ｐＪＭＣ２） ,培养基初始磷酸盐浓度为１５ ｍ ｍｏｌ／Ｌ,３０ ｈ 后每升培养液中干菌体可达４２－５ ｇ,Ｐ（３ＨＢｃｏ３ＨＶ） 占干重的７０ ％ ,其中３ＨＶ 在共聚物中的含量为４－９ ％ 。     

黄瓜花叶病毒（CMV）运动蛋白基因介导的抗病性

利用Ｆｎｙ＿ＣＭＶ株系ＲＮＡ３ｃＤＮＡ克隆,构建了含有全长和编码区缺失５０１个核苷酸的运动蛋白（ＭＰ）基因植物表达载体ｐＢＭＰＲ和ｐＢＭＰＫ。在土壤农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ（ＳｍｉｔｈｅｔＴｏｗｎｓｅｎｄ）Ｃｏｎｎ）ＬＢＡ４４０４介导下转化烟草（ＮｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍＬ．）品种“ＮＣ８９”,分别经Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ、ＲＴ＿ＰＣＲ或Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ分析,外源基因已整合到再生植株中并得到表达。抗病性分析表明,含有缺失型ＭＰ基因的Ｒ０代转基因植株抗性较好,接种５０ｄ后,１０株转化植株中仍有５株不表现症状。在自然发病条件下,这５个含有缺失型ＭＰ基因转基因株系在Ｒ１代都表现了一定的抗病性。抗性主要表现为症状出现推迟,严重度减轻。利用ＰＣＲ筛选、种子卡那霉素抗性试验和温室抗病性测定等方法,初步认为Ｒ２代转基因烟草Ｋ＿６＿５株系为转基因抗病纯合系。而含有全长ＭＰ基因的Ｒ０代转化植株,前期没有表现明显的抗病性,但在接种４０ｄ后部分发病植株有恢复健康的趋势。