蛋白激酶C研究进展

蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)是丝氨酸/苏氨酸激酶与蛋白激酶A和蛋白激酶G共同组成AGC家族。PKC广泛存在于哺乳动物组织和细胞当中,是信号转导途径的主要介质,同时也是细胞的增殖、分化、凋亡、转换等生理过程的关键调节因子。机体的许多疾病如糖尿病、心力衰竭、神经退行性疾病和癌症等都与PKC相关。本文主要从蛋白激酶C的结构、功能与分布及相关疾病的研究进展作一综述。     

钙、环核苷酸及其受体蛋白与增殖

细胞的增殖及其控制是生命科学中一个基本理论问题,也是癌变研究中急待解决的问题。目前尚未搞清楚,但是由于许多生理调节因子的发现和研究,已有了较大的进展。增殖作为一个高度复杂的有序过程,所涉及的调节因子和相互关系必然是十分复杂的。这里仅就Ca~( )、环核苷酸及其相关受体—钙调节蛋白(Calmodculin)和蛋白激酶参与增殖调节的研究结果作一概述。     

外周血T细胞亚群在小鼠结核感染中的意义

目的探讨外周血T细胞亚群在小鼠结核感染中的意义,并与加用免疫调节剂组对比研究。方法60只小鼠随机分为3组,每组20只。结核感染组:小鼠经血管注射结核分枝杆菌(H37RV)0.05 ml,建立小鼠结核模型。生理盐水组:用0.05 ml生理盐水替代H37RV处理。母牛分枝杆菌菌苗组:按结核感染组同样剂量和方法复制小鼠结核模型,H37RV感染后第3、10、17天分别肌注22.5μg母牛分枝杆菌菌苗。感染4周后,取外周血用流式细胞仪检测T细胞亚群。结果感染组外周血T细胞亚群比率显著降低,母牛分枝杆菌菌苗组小鼠外周血T细胞亚群比率显著高于感染组。结论外周血T细胞亚群数量与结核感染的病情密切相关,调节小鼠结核模型的T细胞亚群免疫功能可使结核感染的病情发展得到一定程度的的控制。     

钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ在卵母细胞减数分裂和受精中的作用

钙调蛋白依赖的蛋白激酶 (CaMK)是一类分布广泛的丝 /苏氨酸蛋白激酶家族 ,在钙离子和钙调蛋白存在的条件下发生自磷酸化而被激活 ,在细胞内对于钙信号的传递具有重要的介导作用 .近年来的研究表明CaMKⅡ是参与调节卵母细胞减数分裂的重要分子 ,在卵母细胞成熟、极体排放、受精和活化等过程中发挥作用 .CaMKⅡ作为Ca2 的下游信号分子 ,在受精后促进成熟促进因子 (MPF)和细胞静止因子 (CSF)的失活 ,并调节纺锤体微管的组装和中心体的复制过程 .虽然CaMKⅡ在减数分裂中的作用广泛而关键 ,但目前的研究主要集中于低等动物和小鼠 ,今后有待进一步阐明该蛋白激酶在其他哺乳动物中的作用和调节机制     

分枝杆菌丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶PknK的功能研究

【目的】丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶K(Serine/Threonine protein kinases K)是分枝杆菌类似真核样的蛋白激酶,预测在分枝杆菌的生长和新陈代谢等生理过程中起着重要的作用,解析PknK的生物功能及作用机制,将为结核病的防治提供一定的理论基础。【方法】通过基因敲除等遗传方法获得结核分枝杆菌疫苗株BCG的pknK敲除菌株△pknK、回补菌株pMV361-pknK/△pknK和过表达菌株pMV261-pknK/BCG;对获得的菌株进行生长曲线测定和抗药性分析;通过pulldown-MS方法及生物信息学方法鉴定了PknK相互作用蛋白。【结果】监测各种分枝杆菌△pknK、pMV361-pknK/△pknK和pMV261-pknK/BCG生长,确定PknK负调控BCG生长;抗药性分析显示PknK降低BCG的耐药性;pulldown-MS方法显示PknK与丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶PknA和双组分系统中的反应调节因子MtrA、TrcR、MoxR等蛋白相互作用。【结论】研究发现PknK调控分枝杆菌的生长和耐药性,我们的研究为深入研究PknK在结核分枝杆菌中的功能奠定了基础。     

肿瘤抑制基因DAPK:一个新的药物治疗靶点

死亡相关蛋白激酶(DAPK)是一种新的钙调蛋白(CaM)调节的丝/苏氨酸激酶,是凋亡的正性调节因子。细胞凋亡被认为是控制和治疗肿瘤的最有效方法之一,它与肿瘤的发生、发展和转移有着密切的联系。而DAPK参与多条途径诱导的细胞凋亡,被公认为是一种肿瘤抑制基因。在此我们将重点讨论DAPK促进细胞凋亡的机制,为靶向治疗肿瘤提供方向和理论依据。     

柴胡提取物诱导人类白血病细胞HL-60的细胞凋亡及其机理研究

柴胡提取物诱导人类白血病细胞HL-60的细胞凋亡从而抑制其细胞生长.为了研究该过程的作用机理,我们研究了丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs),包括胞外信号调节激酶(ERK1/2),c-jun氨基末端蛋白激酶(JNK)和p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK),在该过程中的磷酸化特征与动态变化.结果表明,柴胡提取物显著的增加了p38丝裂原活化蛋白激酶和胞外信号调节激酶(ERK1/2)的磷酸化作用,其增加值在测试范围内与测试剂量和作用时间成正相关,但在柴胡提取物诱导人类白血病细胞HL-60的细胞凋亡过程中,没有发现对氨基末端蛋白激酶(JNK)表现出磷酸化活性.柴胡提取物诱导白血病HL-60的细胞凋亡部分归结于对p38丝裂原活化蛋白激酶的上调节作用,这种上调节作用能够受到p38 MAPK特异性的抑制剂SB203580的部分逆转,而MEK的抑制剂U0126则对柴胡提取物诱导HL-60细胞凋亡过程中的胞外信号调节激酶(ERK1/2)的磷酸化具有显著的协同效应.这是首次报道柴胡提取物在诱导人白血病细胞HL-60细胞凋亡过程中参与p38丝裂原活化蛋白激酶的磷酸化,同时柴胡提取物作为胞外信号调节激酶(ERK1/2)抑制剂的协同作用物具有相应的药物学功能.     

ASK1激活的分子机制与相关疾病

凋亡信号调节激酶1(Apoptosis signal-regulating kinase 1,ASK1)是细胞丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶(mitogen-activated protein kinase kinase kinase,MAP3Ks)家族成员之一,在调节细胞凋亡过程中起到非常重要的作用.在正常细胞中,ASK1的活化受到严格的控制,如苏氨酸/丝氨酸磷酸化和去磷酸化、蛋白-蛋白相互作用等.多种应激和促炎因子能激活ASK1,因此在多种生理和病理过程中都有活化的ASK1的参与.     

蛋白激酶在卵母细胞减数分裂和受精中的作用

脊椎动物卵母细胞的减数分裂和受精过程受到多种蛋白激酶的调节。近年来对于卵母细胞成熟、活化和受精的分子机制研究取得了长足进步 ,发现促成熟因子 (MPF)和促分裂原活化蛋白激酶 (MAPK)是调节卵母细胞细胞周期的关键分子 ,二者的激活和失活导致了减数分裂的恢复、阻滞和完成。许多蛋白激酶通过调节MPF和MAPK活性来影响减数分裂。Polo like激酶活化MPF ,Mos激活MAPK而启动成熟分裂并维持中期阻滞。CaMKII通过泛素途径灭活MPF使卵突破MII期阻滞。另外 ,p90 rsk作为MAPK的下游分子参与减数分裂调节 ,蛋白激酶C(PKC)诱导皮质颗粒排放并抑制MAPK激活 ,酪氨酸蛋白激酶家族成员介导受精诱发的Ca2 释放。这些蛋白激酶的协同作用推动了卵母细胞正常的成熟与受精